專利名稱：黑柄炭角菌仿生態工業化培養菌絲體工藝和培養基配方的制作方法
技術領域：
黑柄炭角菌的菌種和菌種中文名稱是中國科學院微生物研究所檢測鑒定，鑒定號〔2003〕微檢字第003號，并編錄到中國出版的《中國大型菌種》。菌株編號22X-2001，菌株由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏三十年，保藏中心登記入冊編號CGMCC No.1038。于2003年11月21日開始館藏。〔館藏中心地址北京市海淀區中關村北一條13號，電話010 62542758 傳真010 62537796〕黑柄炭角菌屬于子囊菌亞門、炭角菌目Xylariales，炭角菌科Xylariaceae，炭角菌屬Xylaria的黑柄炭角菌〔我國民間稱雞樅蛋、雞茯苓、烏靈參〕(Xylaria nigripes)。黑柄炭角菌分子痤及菌核兩部分。上部子痤單根和分枝，高3-15cm，長棒狀或近圓柱狀，內部實，近白色，外部暗色，灰褐色至黑褐色，頂端純圓，長1.5-12cm，粗0.2-0.5cm，粗糙。柄長1.3-6cm，粗0.2-0.3cm，有縱皺，基部延伸呈根狀。子囊殼突起，半埋生，呈長方橢圓形，680-780×310-400μm，孔口疣狀，暗黑色。子囊呈圓筒狀。孢子近橢圓形，不等邊或半扁球形，褐色，4-5.2×3.6-3μm，菌株菌絲呈白色毛狀、細長。
菌核與假根下端相連，卵圓形，表面粗糙，褐色至黑色，外部有一層黑褐色皮部，內部白色，直徑5-7.5cm×3-6cm2黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)的技術背景黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一種生長在地下1M-20M黑翅土白蟻廢巢中，天然黑柄炭角菌菌核人工很難采集，而且天然的菌絲體在不同外界條件下，會產生菌絲體的自溶，很難保存和實際應用，我們的辦法是通過生物技術復制黑柄炭角菌菌絲體，得到實際應用。
3黑柄炭角菌仿生態工業化培養菌絲體工藝必須得到的相關技術支持內容a黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌種及純化分離技術。
b黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌種復壯與保藏技術。
c黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)斜面培養技術。
d防止黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)變異退化技術。
4黑柄炭角菌仿生態工業化培養菌絲體工藝技術A固體栽培黑柄炭角菌菌核〔從菌核中分離新鮮的菌絲體〕拿到菌絲體“原種”經過移管純化技術，獲得菌株〔菌株號22X-2001〕放置在保藏室專用冰箱中備用。
B斜面母種在攝氏20度到26度環境下培養3至5天，然后將母種在500毫升三角瓶中培養3至5天，環境溫度保持在攝氏20度到26度左右。
C將500毫升中的培養液和菌絲移入5000毫升的三角瓶中繼續培養3至5天，環境溫度保持在攝氏20度到26度左右。
D將5000毫升三角瓶中培養液和菌絲體移入一級種子培養罐中培養3至5天，溫度控制在攝氏29度以下。
E通過傳送管將一級種子培養罐中的菌絲體移到工業化培養罐中培養2至3天，溫度控制在攝氏29度以下，通過鏡檢菌絲形態最后決定中止培養的時間。
F經工業化培養罐中培養成熟的菌絲體通過噴霧干燥工藝取得純化的菌絲體。
G菌絲體通過滅菌處理和包裝成為合格的產品。
權利要求
1黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一種可應用于人服用的食品、保健食品、藥品生產的珍稀菌種，同時適用于寵物的飼料產品生產，該技術通過采集天然的黑柄炭角菌菌核進行菌種純化分離、培養，得到純化的天然菌絲體并采用特別的仿生態液體發酵技術生產黑柄炭角菌菌絲體，干燥處理后的菌絲體是一種特定的生物制品，為土黃色或淡土黃色粉末，氣味有一種特別的菌香味。鑒定黑柄炭角菌菌絲體的主要特征是黑柄炭角菌菌絲體經薄層層析能顯示三個亮藍色熒光斑點。
2黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌種及純化分離、提取、復壯技術是生產黑柄炭角菌菌絲體產品一個不可分割的技術，要求保護的相關配方如下菌種復壯采用固體培養技術，配方如下〔黃豆粉10-30克、葡萄糖20-40克、含水量60％、pH6-7、天然黑翅土白蟻活態時菌圃10-30克、甘薯粉200-300克〕500毫升三角瓶中分裝450毫升，120度滅菌40分鐘，待完全冷卻后接入菌種，然后放置在專用恒溫箱中〔23度〕培養，60天后可獲得〔三角瓶內復壯的菌絲體〕。斜面培養技術，防止黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)變異退化技術。冰箱中保存的菌種，30分鐘復蘇后，在無菌室中用接種刀切成2毫米方塊，接入新鮮的斜面培養基上，〔斜面培養基配方馬鈴薯200-300克、葡萄糖20-30克、蛋白胨4克、瓊脂20克、凈水1000毫升、pH5-6〕在25度溫度下靜止暗培養4-6天，等到菌絲長滿斜面后入冰箱保存，溫度保持3-6度。
3黑柄炭角菌工業化培養培養基配方及保護范圍黃豆粉20g-30g/公斤玉米粉20g-30g/公萬葡萄糖10g-15g/公斤蔗糖3g-5g/公斤水1000毫升/公斤pH5-6左右硫酸鎂0.2克-1克/公斤磷酸二氫鉀0.5-1.5克/公斤氯化鈣0.1克-0.5克/公斤硫酸亞鐵0.001克-0.008克/公斤
全文摘要
黑柄炭角菌是中國科學院微生物研究所鑒定，并編錄到中國出版的《中國大型菌種》。菌株編號22X－2001，菌株由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏三十年，保藏中心登記入冊編號CGMCC No.1038。黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一種可應用于人服用的食品、保健食品、藥品生產的珍稀菌種，同時適用于寵物的飼料產品生產，該技術通過采集天然的黑柄炭角菌菌核進行菌種純化分離、培養，得到純化的天然菌絲體并采用特別的仿生態液體發酵技術生產黑柄炭角菌菌絲體，干燥處理后的菌絲體是一種特定的生物制品，為土黃色或淡土黃色粉末，氣味有一種特別的菌香味。鑒定黑柄炭角菌菌絲體的主要特征是黑柄炭角菌菌絲體經薄層層析能顯示三個亮藍色熒光斑點。
文檔編號C12N1/14GK1669388SQ200410030328
公開日2005年9月21日 申請日期2004年3月15日 優先權日2004年3月15日
發明者朱志熊 申請人:朱志熊