專利名稱：精子活力快速檢測試劑盒及其制備和使用方法
技術領域：
本發明涉及一種體外診斷類醫療器械，具體是一種適用于男性精子活力的快速檢測試劑盒。
背景技術：
生育專家報道，世界上大約15％的夫婦在一年內(無避孕措施)不能懷孕，這些病例中的40％是由于男性因素引起。還有男性科專家報道，男性不育的發病率大約為6-12％。上述報道，說明男性不育的人群是相當大的一個人群。
目前診斷男性不育的主要方法是精液的顯微鏡下診斷，即精子形態學檢測，這也是男性不育診斷的金標準。但是這個方法存在許多缺點，比如由于中國人的傳統觀念，不好意思去醫院診治男性不育方面的疾病，因而延誤了治療。即使去了醫院，由于取精子的條件有限，受到環境、方法、時間的限制，不易取得樣品。去醫院看病比較繁瑣，必須經過掛號、開處方等一系列的程序，還有一種是檢測精子活力的試劑盒，只能檢測所有精子的數量，即有活力和沒有活力的精子的總數，不能檢測出活的精子的數量，對診斷結果具有的參考意義有限。
發明內容
本發明的目的是為了克服現有技術的缺點，提供一種可以在家里即可操作、快速、使用方便、價格便宜，并且能診斷出有活力的精子的數量的精子活力快速檢測試劑盒。
本發明的第二個目的是提供一種精子活力快速檢測試劑盒的制備和使用方法。
為達到上述目的，本發明包括精液收集盒、曲拉通X100溶液、碘化丙啶溶液、標準色卡和試驗板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼、基板，外殼和基板是長方形的PVC塑料制成，外殼中央有兩個試驗孔，所述基板上有吸水紙、過濾膜，吸水紙和過濾膜位于基板上方，外殼的兩個試驗孔下方；吸水紙位于過濾膜下方；標準色卡的顏色為經顯微鏡計數確認的不同活力精子樣品分別加入活力為0.05-0.2％的曲拉通溶液和活力為0.01-0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。
本發明的原理是只有沒有活力的精子才會被碘化丙啶溶液染色，所以在試驗孔一被染色的精子全部為沒有活力的精子，而試驗孔二的精子經過細胞表面活性劑曲拉通X-100溶液破壞后，全部變成沒有活力的精子，所以在試驗孔二被染色的精子為精子的總數量，把試驗孔一和試驗孔二的試驗結果分別與比色卡對比，得出沒有活力的精子的數量和精子的總數量，用精子的總數量減去沒有活力的精子的數量，即可得出有活力的精子的數量。
一種精子活力快速檢測試劑盒的制備方法，包括如下步驟制備濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液把曲拉通加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫保存；制備濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液把碘化丙啶加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫避光保存；制備標準色卡用經過顯微鏡計數確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、5000萬、6000萬、7000萬、8000萬、9000萬、10000萬個/毫升精子樣品分別加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液，根據試驗結果的顏色，制備出標準色卡；將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。
本發明的優點能夠快速準確地檢測出精子的活力，即有活力的精子的數量，從而診斷出男性是否能夠生育后代，比以往傳統的診斷方法節省很多時間，使用簡單，在藥店購買、家庭使用即可，不用去醫院就診，使使用者沒有羞澀感，使夫妻可以提前知道自己的潛在的生育問題，使用本試劑盒還可以對男子絕育手術后效果進行檢測，也可用于精子庫對精子質量進行篩選。
下面結合附圖對本發明做進一步詳細的說明。
圖1是本發明試驗板的結構示意圖。
圖中1.基板 2.外殼 3.試驗孔一 4.試驗孔二 5.過濾膜 6.吸水紙具體實施方式
本發明的試驗板包括精液收集盒、曲拉通X-100溶液、碘化丙啶溶液、標準色卡和試驗板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼2、基板1，外殼2和基板1是長方形的PVC塑料制成，外殼2中央有兩個試驗孔，所述基板上有吸水紙6、過濾膜5，吸水紙6和過濾膜5位于基板1上方，外殼2的兩個試驗孔下方；吸水紙3位于過濾膜5下方；標準色卡的顏色為經顯微鏡計數確認的不同濃度精子樣品分別加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。所述的過濾膜為玻璃纖維膜，孔徑范圍1-30微米，大小尺寸為約10毫米×10毫米；所述的吸水紙大小尺寸和過濾膜一致。所述的精液液化劑可以是酶制劑如菠蘿蛋白酶，鏈霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制劑如二硫蘇糖醇，使用濃度均為1-5mg/ml。所述的標準色卡上分為由深至淺的11個區域，每個區域中央都具有1個判讀孔，每個區域代表濃度分別為500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、5000萬、6000萬、7000萬、8000萬、9000萬、10000萬個/毫升的精子樣品加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。
一種制備精子活力快速檢測試劑盒的方法制備濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液把曲拉通加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫保存；制備濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液把碘化丙啶加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫避光保存；制備標準色卡用經過顯微鏡計數確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、5000萬、6000萬、7000萬、8000萬、9000萬、10000萬個/毫升精子樣品分別加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液，根據試驗結果的顏色，制備出標準色卡；將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。
一種精子活力快速檢測試劑盒的使用方法如下收集精液樣本于精液收集盒內；精液液化，讓精液在精液收集盒中液化，一般時間為15到30分鐘，測定在精液收集后12小時內完成；加樣，用小塑料吸管在試驗孔一和試驗孔二中分別加入一滴精液，要讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴生理鹽水，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一中加入曲拉通溶液兩滴，讓試驗孔內過濾膜充分侵濕1分鐘；用小塑料吸管在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴碘化丙啶溶液，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴生理鹽水，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份，要在4分鐘內讀取結果，超過4分鐘后讀取結果可能不準確；觀察試驗孔一和試驗孔二的顏色，并與標準色卡上的顏色對比，確定最接近的顏色，判讀結果，用試驗孔一的結果減去試驗孔二的結果，得出的數字為該樣本有活力的精子的數量。
第二次試驗每兩次試驗必須間隔一周以上。
兩次試驗結果有活力的精子均＜2000萬的被試驗者請到醫院進一步診斷治療。
權利要求
1.一種精子活力快速檢測試劑盒，其特征在于包括精液收集盒、曲拉通X-100溶液、碘化丙啶溶液、標準色卡和試驗板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼、基板、吸水紙和過濾膜，外殼中央有兩個試驗孔，標準色卡的顏色為經顯微鏡計數確認的不同濃度精子樣品分別加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。
2.根據權利要求1所述的一種精子活力快速檢測試劑盒，其特征在于所述試驗板的外殼和基板是長方形的PVC塑料制成，吸水紙和過濾膜位于基板上方，外殼的兩個試驗孔下方；吸水紙位于過濾膜下方。
3.根據權利要求1所述的一種精子活力快速檢測試劑盒，其特征在于所述的過濾膜為玻璃纖維膜，孔徑范圍1-30微米，大小尺寸為約10毫米×10毫米；所述的吸水紙大小尺寸和過濾膜一致。
4.根據權利要求1所述的一種精子活力快速檢測試劑盒，其特征在于所述的精液液化劑可以是酶制劑如菠蘿蛋白酶，鏈霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制劑如二硫蘇糖醇，使用濃度均為1-5mg/ml。
5.根據權利要求1所述的一種精子活力快速檢測試劑盒，其特征在于所述的標準色卡上分為由深至淺的11個區域，每個區域中央都具有1個判讀孔，每個區域代表濃度分別為500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、5000萬、6000萬、7000萬、8000萬、9000萬、10000萬個/毫升的精子樣品加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。
6.一種制備權利要求1-5任一項所述的精子活力快速檢測試劑盒的方法，其中包括如下步驟制備濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液把曲拉通加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫保存；制備濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液把碘化丙啶加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫避光保存；制備標準色卡用經過顯微鏡計數確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、5000萬、6000萬、7000萬、8000萬、9000萬、10000萬個/毫升精子樣品分別加入濃度為0.05-0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01-0.5％碘化丙啶溶液，根據試驗結果的顏色，制備出標準色卡；將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。
7.一種使用權利要求1-5任一項所述的精子活力快速檢測試劑盒的方法其中包括如下步驟收集精液樣本于精液收集盒內；精液液化，讓精液在精液收集盒中液化，一般時間為15到30分鐘，測定在精液收集后12小時內完成；加樣，用小塑料吸管在試驗孔一和試驗孔二中分別加入一滴精液，要讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴生理鹽水，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一中加入曲拉通溶液兩滴，讓試驗孔內過濾膜充分侵濕1分鐘；用小塑料吸管在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴碘化丙啶溶液，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；在試驗孔一和試驗孔二中分別加入兩滴生理鹽水，讓試驗孔內過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份，要在4分鐘內讀取結果，超過4分鐘后讀取結果可能不準確；觀察試驗孔一和試驗孔二的顏色，并與標準色卡上的顏色對比，確定最接近的顏色，判讀結果，用試驗孔一的結果減去試驗孔二的結果，得出的數字為該樣本有活力的精子的數量；第二次試驗每兩次試驗必須間隔一周以上；兩次試驗結果有活力的精子均＜2000萬的被試驗者請到醫院進一步診斷治療。
8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述的生理鹽水也可以是純凈水或含有低濃度醋酸等酸性物質的脫色液或含有有機物質的洗液。
全文摘要
本發明公開了一種精子活力快速檢測試劑盒及其制備和使用方法，本試劑盒包括精液收集盒、曲拉通X100溶液、碘化丙啶溶液、標準色卡和試驗板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼、基板，外殼中央有兩個試驗孔，所述基板上有吸水紙、過濾膜，標準色卡的顏色為經顯微鏡計數確認的不同濃度精子樣品分別加入濃度為0.05－0.2％的曲拉通溶液和濃度為0.01－0.5％碘化丙啶溶液試驗結果的顏色。本發明的優點能夠快速準確地檢測出有活力的精子的數量，從而診斷出男性是否能夠生育后代，比以往傳統的診斷方法節省很多時間，使用簡單，在藥店購買、家庭使用即可，使使用者沒有羞澀感。
文檔編號C12Q1/04GK101055270SQ20071009977
公開日2007年10月17日 申請日期2007年5月30日 優先權日2007年5月30日
發明者周明非, 趙永岐, 劉淑紅, 范明, 魏華, 周明東, 李婭 申請人:北京望升偉業科技發展有限公司