專利名稱：硅膠膜處理方法
技術領域：
本發明涉及提取純化DNA的方法技術領域，特別是硅膠膜處理方法。
背景技術：
DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象，因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中的最重要、最基本的操作，如不能有效的完成DNA提取方面的工作，將會影響后續整個實驗的結果，甚至導致實驗失敗。
DNA提取的原則是
1、根據不同研究需要，保證結構的相應完整性；
2、盡量排除其它大分子成分的污染(蛋白質、多糖及RNA等)；
3、保證提取樣品中不含對酶有抑制作用的有機溶劑及高濃度的金屬離子。
硅膠膜技術是目前流行的DNA純化方法中的關鍵技術。如今分子、細胞生物學科研和商業應用對于DNA樣品的快速純化的需求越來越多，硅膠膜純化DNA技術能夠達到較高的純度，與簡化操作，因此具有很高的應用前景。
硅膠膜由硅膠顆粒和紙漿采用成膜技術壓制而成，可用于DNA，RNA的吸附，是制作DNA純化柱的推薦材料。硅膠膜柱純化DNA的原理為DNA或RNA在高鹽低PH的條件下， 能吸附到膜表面，在低鹽和高PH的條件下，DNA或RNA可以被洗脫下來。但是直接使用硅膠膜方法用于核酸分離存在硅膠膜不穩定、不均一及與核酸結合能力下降等缺點。發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的缺點，提供一種提高硅膠膜DNA吸附性能、降低產物雜質、提高提取效率的硅膠膜處理方法。
本發明的目的通過以下技術方案來實現硅膠膜處理方法，它包括以下步驟
S1、將硅膠膜與處理液接觸，使處理液完全浸透硅膠膜；
S2、將浸透完全的硅膠膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干硅膠膜上的水分，即得處理后的硅膠膜；
所述的處理液為Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的濃度為 5mM 飽和濃度。
所述的步驟SI的具體操作為將硅膠膜完全浸泡在處理液中；所述的步驟S2的具體操作為待娃膠膜完全浸泡后取出娃膠膜，將娃膠膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干娃膠膜上的水分。
所述的步驟SI的具體操作為將處理液滴加到裝填于純化柱中的硅膠膜上，直到純化柱內的硅膠膜完全浸透；所述的S2的具體操作為將處理好的純化柱放置于62 67V 烘箱中，完全烘干純化柱內硅膠膜上的水分。
本發明具有以下優點經處理后的硅膠膜對DNA高特異性吸附，核酸提取產量和回收得率均有較大程度的提高，且使 得硅膠膜具有良好的均一性和穩定性，提高了其生物利用度，更有效的發揮其核酸提取功能。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明做進一步的描述，本發明的保護范圍不局限于以下所述
實施例1:
硅膠膜處理方法，它包括以下步驟
首先配置處理液，分別配置濃度分別為5mM、IOmM和飽和濃度的Na2CO3溶液；
S1、將IOcmX IOcm的硅膠膜分別完全浸泡在上述三種濃度的Na2CO3溶液中；
S2、待完全浸泡后取出硅膠膜，置于65°C烘箱中完全烘干硅膠膜上的水分，即得三種經不同濃度Na2CO3溶液處理后的硅膠膜。
將上述三種處理后的硅膠膜分別以20層，7. 2mm直徑填裝在2. Oml核酸純化柱中， 搭配Foregene試劑盒檢測處理后對核酸提取得率的影響。
測試結果表明，在5mM和IOmM的Na2CO3溶液中處理過的硅膠膜，對于核酸提取的得率或回收率有5 10%左右的提高，飽和濃度的Na2CO3溶液處理的硅膠膜對于核酸提取的得率或回收率有15 20%的提高。而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1.80。
實施例2
硅膠膜處理方法，它包括以下步驟
首先配置處理液，分別配置濃度分別為5mM、IOmM和飽和濃度的NaHCO3溶液；
S1、將IOcmX IOcm的硅膠膜分別完全浸泡在上述三種濃度的NaHCO3溶液中；
S2、待完全浸泡后取出硅膠膜，置于62°C烘箱中完全烘干硅膠膜上的水分，即得三種經不同濃度NaHCO3溶液處理后的硅膠膜。
將上述三種處理后的硅膠膜分別以20層，7. 2mm直徑填裝在2. Oml核酸純化柱中， 搭配Foregene試劑盒檢測處理后對核酸提取得率的影響。
測試結果表明，在5mM和IOmM的NaHCO3溶液中處理過的硅膠膜，對于核酸提取的得率或回收率有10 15%左右的提高，飽和濃度的NaHCO3溶液處理的硅膠膜對于核酸提取的得率或回收率有20 30%的提高。而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1. 80。
結合實施例1和實施例2可知，Na2CO3溶液和NaHCO3溶液在5mM 飽和濃度的濃度范圍內均能較大程度上提升硅膠膜對核酸的吸附能力；相同條件下，NaHCO3溶液的處理效果比Na2CO3溶液更為明顯。
實施例3
硅膠膜處理方法，它包括以下步驟
首先配置處理液，分別配置濃度分別為5mM、IOmM和飽和濃度的NaHCO3溶液，以及濃度分別為5mM、IOmM和飽和濃度的NaHCO3溶液；然后準備6個裝填有20層，7. 2mm直徑的硅膠膜的純化柱。
S1、使用配制好的濃度為5mM、IOmM和飽和濃度的Na2CO3溶液和NaHCO3溶液分別滴加到純化柱的硅膠膜上，直到硅膠膜完全浸透為止；
S2、將處理好的純化柱放置于67°C烘箱中，直到完全烘干硅膠膜上的水分，即得六種經不同濃度的Na2CO3溶液和NaHCO3溶液處理后的硅膠膜。
將分別裝填有上述處理后的硅膠膜的純化柱搭配Foregene試劑盒檢測處理后對核酸提取得率的影響。
測試結果表明，經5mM和IOmM濃度的NaHCO3溶液處理的硅膠膜，對于核酸提取的得率或回收率有10 15%左右的提高，經飽和濃度的NaHCO3溶液處理的硅膠膜對于核酸提取的得率或回收率有20 30%的提高；而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1.80。經5mM和IOmM濃度的Na2CO3溶液處理過的硅膠膜，對于核酸提取的得率或回收率有 5 10%左右的提高，經飽和濃度的Na2CO3溶液處理的硅膠膜對于核酸提取的得率或回收率有15 20%的提高；而核酸的0D230/280更接近2. O ；0D260/280更接近1. 80。表明，核酸純化柱預先填裝好硅膠膜再用NaHCO3溶液或Na2CO3溶液進行處理，同樣能達到提高核酸產量和提升純化核酸質量的能力。
下面結合試驗對本發明作進一步描述
首先配制O. 1M、0. 2M、0. 4M、0. 8M、IM的NaHCO3溶液對制備好的核酸純化柱進行處理，其處理方式按下使用微量移液器取相應的NaHCO3溶液滴加到純化柱硅膠膜中間位置， 之后放置于65°C的烘箱進行干燥處理。
NaHCO3的用量及干燥時間見下表
權利要求
1.硅膠膜處理方法，其特征在于它包括以下步驟51、將硅膠膜與處理液接觸，使處理液完全浸透硅膠膜；52、將浸透完全的硅膠膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干硅膠膜上的水分，即得處理后的娃膠膜；所述的處理液為Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的濃度為 5mM 飽和濃度。
2.根據權利要求1所述的硅膠膜處理方法，其特征在于所述的步驟SI的具體操作為將硅膠膜完全浸泡在處理液中；所述的步驟S2的具體操作為待硅膠膜完全浸泡后取出硅膠膜，將娃膠膜置于62 67°C烘箱中，完全烘干娃膠膜上的水分。
3.根據權利要求1所述的硅膠膜處理方法，其特征在于所述的步驟SI的具體操作為將處理液滴加到裝填于純化柱中的硅膠膜上，直到純化柱內的硅膠膜完全浸透；所述的S2 的具體操作為將處理好的純化柱放置于62 67°C烘箱中，完全烘干純化柱內硅膠膜上的水分。
全文摘要
本發明公開了硅膠膜處理方法，它包括以下步驟S1、將硅膠膜與處理液接觸，使處理液完全浸透硅膠膜；S2、將浸透完全的硅膠膜置于62～67℃烘箱中，完全烘干硅膠膜上的水分，即得處理后的硅膠膜；所述的處理液為Na2CO3溶液或NaHCO3溶液，且Na2CO3溶液或NaHCO3溶液的濃度為5mM～飽和濃度。本發明的有益效果是經處理后的硅膠膜對DNA高特異性吸附，核酸提取產量和回收得率均有較大程度的提高，且使得硅膠膜具有良好的均一性和穩定性，提高了其生物利用度，更有效的發揮其核酸提取功能。
文檔編號C12N15/10GK102994494SQ20121047956
公開日2013年3月27日 申請日期2012年11月22日 優先權日2012年11月22日
發明者鄒利平, 趙梓亦 申請人:成都福際生物技術有限公司