納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法
【專利摘要】本發明涉及一種納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，取脫油核桃殘渣打漿后，經過多肽化處理和納豆菌發酵，最后冷凍干燥制得營養核桃粉。本發明將納豆菌發酵、多肽化聯合應用于核桃深加工，產品富含納豆激酶、多肽、納豆活菌等功能因子，營養豐富、口感好，適合多種亞健康人群食用，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護肝損傷等方面具有明顯效果，有效提高了核桃的營養價值。
【專利說明】納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于食品加工領域，涉及一種納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法。
【背景技術】
[0002]核桃具有很高的營養價值和藥用價值，是開發高級保健食品的良好原料。核桃仁含油脂65%，蛋白質15.4%以上，脫油后核桃殘渣含有30%以上的蛋白質，其中多為必須氨基酸，而多數廠家將其低價當做飼料原料出售，因此有必要對核桃及其副產品進行深加工，從而提高對核桃資源的綜合利用率。
[0003]納豆菌發酵可以產生維生素K、納豆激酶等多種功能性成分，另外納豆菌本身是耐酸、耐熱特性的有益菌，在胃酸下四小時存活率為100%，同時具有強力的病原菌抑制能力，是各種益菌當中對環境耐受能力最好可以直達小腸的菌種之一，口服后可改變人體腸道菌群生態，幫助消化道機能正常化，以使排便順暢，增強細胞免疫效果。
[0004]因此本發明選用脫油核桃殘渣作為原料，制得產品營養核桃粉富含納豆激酶、多肽、納豆活菌等營養因子，使核桃的附加值大幅度提高，具有顯著的社會意義和經濟意義。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，解決脫油后核桃殘渣利用率低的問題。
[0006]本發明通過以下技術方案來實現:納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)磨漿:取脫油核桃殘渣，加入物料重量3-5倍的水，利用膠體磨打漿；
(2)多肽化:加入去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至6.0-8.0,加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解0.5-6h得酶解液；
(3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養1_5天；此步驟中土豆液體培養基指的是PDA液體培養基，為現有技術，不做其他嚴格限制；
(4)冷凍干燥:發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0007]本發明的工藝方法，步驟(I)中加入物料重量4倍的水。
[0008]本發明的工藝方法，步驟(2)中pH調整至6.5-7.5。
[0009]本發明的工藝方法，步驟(2)中pH調整至7.0。
[0010]本發明的工藝方法，步驟(2)中酶解溫度為35_40°C。
[0011]本發明的工藝方法，步驟(2)中酶解溫度為38°C。
[0012]本發明的工藝方法，步驟(2)中酶解時間為l_5h。
[0013]本發明的工藝方法，步驟(2)中酶解時間為3h。
[0014]本發明的工藝方法，步驟(3)中培養時間為2-4天。
[0015]作為本發明的最佳實施方式，納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)磨漿:取脫油核桃殘渣，加入物料重量4倍的水，利用膠體磨打漿；
(2)多肽化:加入去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至7.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h得酶解液；
(3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天；
(4)冷凍干燥:發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0016]采用上述技術方案的積極效果:本發明將納豆菌發酵、多肽化聯合應用于核桃深加工，前期多肽化處理產生大量的核桃多肽，后期納豆菌發酵產生大量納豆激酶、聚谷氨酸、等成分，產品富含納豆激酶、多肽、納豆活菌等功能因子，營養豐富、口感好，適合多種亞健康人群食用，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護肝損傷等方面具有明顯效果，有效提高了核桃的營養價值。
【具體實施方式】
[0017]下面結合實施例對本發明的技術方案做進一步的說明，但不應理解為對本發明的限制:
本發明中生物材料的來源:
1、納豆菌CICC N0.10459購于中國工業微生物菌種保藏中心。
[0018]實施例1
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量3倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至8.0，，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解2h ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0019]實施例2
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量5倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至8.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解0.5h ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養5天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0020]實施例3
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量3倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至7.5，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為40°C條件下，酶解Ih ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養4天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0021]實施例4
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量4倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至7.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0022]實施例5
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量4倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至6.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為30°C條件下，酶解6h ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養I天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0023]實施例6
取一定量的脫油核桃殘渣，加入物料重量3倍的水，利用膠體磨打漿；加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至6.5，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為35°C條件下，酶解5h ;納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養2天；發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
[0024]對比例
中國專利CN101228918制備核桃多肽粉，其方法為采用榨完油核桃殘渣為原料，提取核桃蛋白，酶解、干燥提取制備而成，多肽含量為60-80%。此方法提取后固體殘渣浪費。
[0025]實施例1-6中，制得核桃多肽營養粉，采用雙縮脲法檢測營養粉中多肽的含量，多肽的轉化率為87.2%。 [0026]轉化率的檢測方法:游離氨基酸采用甲醛滴定法；蛋白質采用凱氏定氮法。多肽采用雙縮脲法檢測。
[0027]多肽轉化率計算公式:轉化率=(T2-T1) / (P1-P2)。
[0028]式中:T2為酶解后多肽含量；T1為酶解前多肽含量；P1為酶解前總蛋白含量；P2為酶解前酸溶性蛋白含量。
[0029]實施例1-6中生產得到的營養多肽粉的技術指標如表1:
表1核桃多肽營養粉技術指標
【權利要求】
1.一種納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)磨漿:取脫油核桃殘渣，加入物料重量3-5倍的水，利用膠體磨打漿； (2)多肽化:加入去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至6.0-8.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解0.5-6h得酶解液； (3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養1_5天； (4)冷凍干燥:發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
2.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(I)中加入物料重量4倍的水。
3.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中pH 調整至 6.5-7.5。
4.根據權利要求3所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中pH調整至7.0。
5.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中酶解溫度為35-40°C。
6.根據權利要求5所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中酶解溫度為38°C。
7.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中酶解時間為l_5h。
8.根據權利要求7所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中酶解時間為3h。
9.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:步驟(3)中培養時間為2-4天。
10.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備核桃仁多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)磨漿:取脫油核桃殘渣，加入物料重量4倍的水，利用膠體磨打漿； (2)多肽化:加入去離子水，使發酵液中料液比不超過1:10，調整pH至7.0，加入木瓜蛋白酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h得酶解液； (3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至酶解液，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天； (4)冷凍干燥:發酵液冷凍干燥后得到產品營養核桃粉。
【文檔編號】A23L1/29GK103478784SQ201310405864
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月9日 優先權日:2013年9月9日
【發明者】莊義慶, 吳琴燕, 楊敬輝 申請人:江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所