專利名稱：應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法
技術領域：
本發明涉及食品科學技術領域，具體涉及應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法。
背景技術：
血栓性疾病是一類嚴重危害人類健康和生命的疾病，可累及全身各個器官及系統，具有很高的發病率、致殘率和死亡率。每年全球因血栓引起的心臟病和猝死死亡的人數，居致死原因首位。隨著市場上各類溶栓降脂類藥物的出現，血栓疾病卻只得到了小范圍的控制，溶栓和降脂兩者不能被同時治療，長時間服用還會引起人體耐藥性，副作用明顯。因此市場需要一類能夠同時具有溶栓和降脂功能、安全無副作用、經濟有效的藥食同源保健功能食品的出現。旨在開發上述保健功能食品，研究解決血栓疾病的新途徑，我們以木豆為原料，采用固定化技術，制備出具有溶栓降脂功能的發酵型產品。固定化技術是指利用化學或物理的手段將微生物自然固定或定位于限定的空間區域內，保持其固有的催化活性，并能反復使用。目前，這項技術在啤酒、葡萄酒、果酒等領域的文獻報道已經較為多見，在污泥、廢水的處理方面應用較多，其特點是固定化后的細胞能夠保持細胞原有的識別、結合和催化活性，同時易于分離、可重復使用及穩定性高。以海藻酸鈉作為載體基質的固定化細胞不但具有價廉易得、安全無毒、操作簡單、反應條件溫和等優點，還具有較高的傳質性能與生物活性，是目前研究應用最廣的固定化細胞之一。在此基礎上，選擇木豆種子作為發酵基質，木豆種子中含有豐富的淀粉和蛋白質，油脂少，且含木豆芪酸及黃酮類化合物，營養豐富，適于作為發酵產品進行開發和應用。目前，黃豆經由納豆菌發酵后的溶栓降脂功能已被世界范圍認可和接受，通過固定化納豆菌高密度快速液體發酵木豆種子，制備成的納豆激酶和木豆種子發酵體系也在我們之前的研究`中被證實含有更豐富的激酶和菌代謝物，溶栓活力更強。制備出的具有溶血栓功效的體系通過加工后可以制備成多種類型產品。隨著人們生活習慣和飲食結構的改變和提高，目前市場上的食品和藥品通常被制成多種劑型，以滿足廣大人們對食品、藥物多樣化的需求。其中，按物質形態分類劑型包括:液體制劑(注射齊 、合劑、溶液劑、芳香水劑、酊劑、酏劑、膠體溶液劑、膠漿劑、混懸劑和乳濁劑等)、氣體制齊U(如氣霧劑、噴霧劑等)、固體制劑(如散劑、丸劑、膠囊劑、片劑、膜劑)和半固體制劑(如軟膏劑、糊劑等)。制作以上劑型前通常需要加入一些配料，食品中常用的添加劑有:食用調味香精、安賽蜜、食用鹽、山梨醇、麥芽糊精、木糖醇、阿斯巴甜、硬脂酸鎂、檸檬酸、蘋果酸、α-環糊精、β-環糊精、山梨酸鉀等。通過不同配料和賦形劑的加入制備成不同的產品劑型，使食品不但具有多樣性和豐富性，而且味道鮮美，口感良好，更易被人們所接受和喜愛，具有十分廣闊的開發和應用前景。綜上所述，采用固定化技術包埋納豆菌高密度液體發酵木豆種子，分別制備出溶栓活性良好的液體制劑和固體制劑，可以有效地將固定化技術與功能保健性食品開發和生產相結合，為木豆的深加工利用提供了新的途徑，為有效治療人們的血栓疾病給予了新的方式，可實現安全無毒、環保節能的可持續工業化生產。
發明內容
本發明的目的在于提供應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法。本發明采用海藻酸鈉-氯化鈣凝膠微球固定化納豆菌，高密度快速液體發酵木豆種子，制備成納豆激酶和木豆種子發酵體系，具體的操作步驟為:將木豆種子粉碎按照料液比10:1 15:1加入蒸懼水浸泡一夜,調pH6.5 7.5,高溫高壓滅菌后按接菌量0.5 1.0%(v/v)接入固定化菌球，37 40° (:恒溫搖床培養48 5011，轉速125 1301'/1^11，制備成納豆激酶和木豆種子發酵體系。本發明將培養后的發酵體系抽濾，分離得到富含納豆激酶的發酵液和發酵木豆種子固體，低溫烘干固體，并利用超微超細粉碎技術將其碎成粉末，得到液體和固體兩種初產
品O本發明對得到的富含納豆激酶的發酵液和發酵豆粉進行調味，發酵液中加入的配料及比例為:食用香精(ν/ν)0.0010 0.0025%、安賽蜜0.10 0.25g/L、木糖醇0.85
1.25g/L、山梨醇0.40 0.50g/L和山梨酸鉀0.05 0.15g/L ;發酵豆粉中加入的配料及比例為:阿斯巴舌甘(m/m) 0.10 0.15%、木糖醇(m/m) 1.0 2.0%、食用鹽(m/m) 0.50 1.0%、蛋白糖(m/m) 0.08 0 .12%和麥芽糊精(m/m) 18 22%。本發明通過對調味后的發酵液和發酵豆粉加入不同的賦形劑，完成了各種產品劑型的制備，制備成的液體劑型有注射劑、合劑、溶液劑、芳香水劑、酊劑、酏劑、膠體溶液劑、膠漿劑、混懸劑和乳濁劑等劑型；制備成的固體劑型有片劑、沖劑、袋泡劑、口服液劑、膠囊齊U、滴丸劑和丸劑等劑型。基于上述的研究結果，本發明證實了采用固定化納豆菌發酵木豆種子后得到的富含納豆激酶的發酵液和發酵豆粉可以被制備成多種固體制劑和液體制劑，作為功能性保健食品被推廣。本發明的優點:1.本發明采用固定化技術高密度液體發酵木豆種子得到納豆激酶與木豆種子發酵體系，避免了人體直接攝入納豆菌，菌球易于分離且可以重復使用，提高了產品的營養價值，節約能源。2.本發明以木豆種子為原料，為木本食用作物木豆的深加工利用提供了新的途徑，有利于緩解資源緊缺問題，對保持水土、恢復地力、保護環境有重要意義。3.發明中制備的該保健性功能食品具有安全無毒、不產生耐藥性的特點，且在之前的研究中被證實具有很好的溶栓活性。4.通過該工藝過程制備出的固體制劑和液體制劑具有穩定性能良好、活性高、口感適中、味道鮮美的特點，容易被廣大消費者接受和喜愛。
具體實施方式
實例一發酵液和發酵豆粉的制備(I)木豆種子液體培養基的制備:將30g木豆種子適當粉碎，稱取裝入錐形瓶中，加入300mL蒸餾水浸泡一夜，調培養基pH6.5，121° C高溫高壓滅菌40min后，溫度恢復到
室溫備用；(2)固定化納豆菌發酵木豆種子:取納豆菌菌液3.0mL與6.0mL濃度為7.0%的海藻酸鈉溶液充分混合，用注射器量取混合液滴入濃度為3.0%的氯化鈣溶液當中，邊滴邊迅速攪拌，形成形狀完好的菌球后靜置2.0h，用蒸餾水沖洗干凈得到平均直徑為5.0_、平均重量為0.025g的菌球，裝入滅菌后的紗布袋中，投入到木豆種子液體培養基中進行發酵。(3)發酵液和發酵豆粉的制備:將固定化菌球分離，并對發酵好的納豆激酶和木豆種子體系進行抽濾，得到富含納豆激酶的發酵液168.2mL和發酵木豆種子膏體18.4g，將發酵的木豆種子膏體低溫烘干，采用超微超碎技術將其粉碎，得到發酵木豆種子粉末15.2g0實例二液體制劑——溶液劑的制備取發酵液95mL進行調味，加入的配料包括:食用香精2.5 μ L、安賽蜜25mg、木糖醇lOOmg、山梨醇20mg和山梨酸鉀15mg。再向調味后的發酵液中加入不同賦形劑，主要有:丙二醇(助溶劑)5.0mL、阿拉伯膠(乳化劑)4.0g和亞硫酸鈉(抗氧化劑)0.1g。加入賦形劑后充分攪拌均勻，即得到富含納豆激酶的口服溶液劑100mL。實例三固體制劑——沖劑的制備取發酵豆粉5.0g進行調味，加入的配料包括:阿斯巴甜7.0mg、木糖醇50mg、食用鹽25mg和蛋白糖4.0mg。再向調味后的發酵豆粉中加入賦形劑麥芽糊精(增稠劑)1.0g,充分攪拌均勻，即得到富含納豆激酶的代餐沖劑6.lg。
:圖1:納木豆沖劑圖2:納木豆口服液
權利要求
1.本發明涉及應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法，其特征在于制備出的發酵液和發酵豆粉加入不同的配料和賦形劑后可制成不同劑型。
2.按照權利要求1所述的應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法，其特征在于所述的配料包括食用調味香精、安賽蜜、食用鹽、山梨醇、麥芽糊精、木糖醇、阿斯巴甜和山梨酸鉀。
3.按照權利要求1所述的應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法，其特征在于所述的發酵液加入不同的賦形劑后可制成注射劑、合劑、溶液劑、芳香水劑、酊劑、酏劑、膠體溶液劑、膠漿劑、混懸劑和乳濁劑等劑型。
4.按照權利要求1所述的應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法，其特征在于所述的發酵豆粉加入不同的賦形劑后可制成片劑、沖劑、袋泡劑、口服液劑、膠囊劑、滴丸劑和丸劑等劑型。
全文摘要
本發明涉及應用固定化納豆菌發酵的木豆種子制備納木豆產品的制劑方法，并公開了其具體操作步驟，采用海藻酸鈣凝膠包埋法固定化納豆菌發酵木豆種子制備成富含納豆激酶的發酵液和發酵木豆種子粉末，分別加入不同的配料和賦形劑后制成不同劑型，液體劑型包括注射劑、合劑、溶液劑、芳香水劑、酊劑、酏劑、膠體溶液劑、膠漿劑、混懸劑和乳濁劑；固體劑型包括片劑、沖劑、袋泡劑、口服液劑、膠囊劑、滴丸劑和丸劑，即為相應的產品。本發明的生產工藝穩定、可行，環保節能，所提供的產品不但可調配成不同風味的系列溶液劑和速溶沖劑，而且具有較好的溶血栓、降脂減肥功效，口感良好，香甜適中，營養豐富，安全無污染，具有廣泛的市場前景和應用價值。
文檔編號A23L1/29GK103156189SQ20131006376
公開日2013年6月19日 申請日期2013年2月28日 優先權日2013年2月28日
發明者付玉杰, 羅猛, 金爽, 王微, 牟璠松, 魏作富, 顧成波, 管悅, 馬衛東, 王鵬 申請人:東北林業大學, 付玉杰