鹿牛羊馬驢豬動物皮組織dna的pcr鑒定用引物體系的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種鹿牛羊馬驢豬動物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系，該引物體系可一次性檢測多達六個動物物種，達到對常見動物物種基本覆蓋的目的；且本發明引物均僅對各自物種目標片段進行特異性擴增，不會與其他物種起反應，因此也能適用于一次PCR反應中導入兩種及以上引物對的多重PCR反應，從而能有效縮短實驗時間；此外在進行PCR時，使用優化的特定PCR反應體系及反應程序，采用統一PCR檢測方法，簡化了檢測流程，建立了快速高效且特異性高的鑒定方式，從而有效地鑒定鹿皮/鹿皮膠制品的真偽及摻假情況，為鹿皮產品的質量控制提供了現代分子生物學的檢測手段；此外該引物體系還能配合相關試劑制成試劑盒，方便使用，同時為工業化生產及應用提供了可能，其應用前景極好。
【專利說明】鹿牛羊馬驢豬動物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系
【技術領域】
[0001]本發明涉及分子生物學領域，尤其涉及鹿、牛、羊、馬、驢和豬動物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系及PCR鑒定方法，以及相應的試劑盒，適用于上述六種動物皮組織及其制品的快速檢測及鑒定，尤其適用于鹿皮及鹿皮膠的快速防偽鑒定。
【背景技術】
[0002]鹿皮是我國的傳統中藥，藥用歷史悠久。早在《本草綱目》中就有鹿皮“補氣，澀精，斂瘡”功效的記載；《四川中藥志》中也記載了其“能補氣，澀虛滑，治婦女白帶，血崩不止，腎虛滑精，涂一切瘡”。以梅花鹿或馬鹿的皮為原料加工精制而成的鹿皮膠富含多種氨基酸與微量元素，具有補血止血、補腎壯陽等多種營養保健作用。《北京市中藥炮制規范》描述鹿皮膠味咸，性溫，歸肝，腎經，主治補氣，澀虛精，強筋健骨，可用于身體瘦弱，腰酸耳鳴，頭暈目眩，虛弱久咳，痰中帶血，虛喘氣短，婦女經血不調，崩漏帶下，性偏于溫，既能補陽，又可滋陰補血、止血。
[0003]利用現代技術測定鹿皮膠成分[張瀟予，徐厚平，劉代成，鹿皮膠的成分分析，山東師范大學學報，2010,25 (4)]，發現其中包括8種必需氨基酸，包括賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸，均為人類不能自身合成的必需氨基酸，對于身體發育、新陳代謝都具有重要作用。將鹿皮膠的氨基酸組成與阿膠(即驢皮膠)進行對t匕，結果顯示二者基本 一致。這些都說明鹿皮膠與阿膠一樣，具有很大的藥用保健價值及市場價值。然而對鹿皮產品完整的科學數據，特別是特型鑒定方面的數據尚無處可查，尤其是當鹿皮、驢皮等原材料制成皮膠產品后單單利用傳統目測及理化分析并不能很有效地判別這些性質十分相似的皮膠樣品。
[0004]在這種情況下，利用高科技的技術建立分子生物學鑒定手段，能夠為人們提供經現代科學技術鑒定的高質量鹿皮及鹿皮膠產品。現代分子生物學技術具有可靠、靈敏、快速的特點，尤其是對于干燥、加熱、蒸煮等處理過的樣品仍舊能保持檢測的準確性。利用聚合酶鏈式反應(PCR)技術可以從微量DNA樣品中靈敏地擴增出特定的DNA片段，并且通過引物序列的差異來有效保證反應的特異性。因此PCR技術被廣泛應用于物種鑒定、檢測等領域，在防止假冒、摻假、保證產品質量、維護消費者權益方面發揮了巨大的作用。
[0005]本公司
【發明者】黨平, 宋平, 王瑜, 杜雨威 申請人:蘇州市紅冠莊國藥飲片有限公司