一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品及其制備方法，由以下成分按重量百分比組成：深海魚皮膠原肽40％-70％，人參提取物2％-12％，蛹蟲草提取物2％-12％，填充劑15％-40％。本發明的優點在于：制備的增強免疫功能的組合物將海洋多肽與傳統中藥材提取多糖結合，各組分相輔相成，突出增強免疫力功效，并且產品溶解性和穩定性好，口感佳，服用方便。
【專利說明】一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及保健品及其制備方法【技術領域】，特別涉及一種增強免疫功能的魚皮膠 原肽復方制品及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 目前普通及功能食品市場上開發出的多肽系列產品越來越多，而以人參提取物及 蛹蟲草提取物為原料的產品多為保健食品或藥品。將海洋魚皮膠原肽與人參提取多糖及蛹 蟲草提取多糖結合應用開發為功能食品的產品尚未見到報道。
[0003] 本發明主要原料來源特點為：膠原肽提取自深海魚皮，綠色無污染；人參作為藥 食同源的傳統中藥，功能性明確，適用人群廣；蛹蟲草作為傳統名貴中藥材料，同時又是食 品新原料，越來越多的應用于各種食品和保健食品中。
[0004] 由于未提取和加工的人參和蛹蟲草，直接食用，其有效成分不能充分被人體吸收 及轉化，因此，將蛹蟲草及人參經深加工獲得提取物，結合具有人體高吸收率的低分子膠原 肽，開發出一種能被人體有效吸收其有益成分、方便服用并獲得較理想增強免疫力效果的 功能食品具有廣闊的市場前景。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種以深海魚皮膠原肽、人參提取物、蛹蟲草提取物為主 要成分的用于增強免疫功能的復方制品及其制備方法。
[0006] 本發明采用的技術方案是：
[0007] -種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，由以下成分按重量百分比組成： 深海魚皮膠原肽40 % -70%，人參提取物2 % -12%，蛹蟲草提取物2 % -12%，填充劑 15% -40%。
[0008] 在上述方案的基礎上，一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，由以下成分按 重量百分比組成：深海魚皮膠原肽55 %，人參提取物5 %，蛹蟲草提取物7 %，填充劑33 %。
[0009] 在上述方案的基礎上，所述填充劑為木糖醇、棉子糖、麥芽糊精、海藻糖、β-環糊 精和甘露醇中的一種或幾種。
[0010] 本發明的優點在于：
[0011] 深海魚膠原肽的制備方法，采用超聲波震蕩對魚皮原料進行預處理，熱力提取，復 合蛋白酶水解，生物傳感器監控，一方面提高了膠原蛋白的抽提率，另一方面可獲得特定功 能的肽段產品；人參多糖和蛹蟲草多糖的制備，采用真空低溫提取，微波干燥和熱泵干燥技 術精制多糖提取物粉末，不僅節能省時，提高產品質量，還有效保護了多糖結構及其功能性 的完整性。
[0012] 采用特定工藝方法獲得品質較高和功能明確的食品原料，采用本發明方法制備獲 得的深海魚膠原肽精制粉，溶解性較好，透明無色或微黃色，嗅覺上具有淡淡的海水魚味， 味覺上接近無味，有效肽段含量達90%以上，分子量小，純度高，動物及人體對其利用吸收 率較高，增強動物免疫力功能較突出；采用本發明方法制備獲得人參根提取多糖粉末，復水 溶解性較好，可速溶，溶液呈透明棕黃色，其中，多糖含量可達50%以上，此工藝可提供較高 功能活性的人參多糖；采用此方法提取獲得的蛹蟲草多糖提取物中，多糖含量可達30%以 上，粉末提取物復水溶解性較好，可速溶，溶液呈透明淺棕黃色；本發明制備的增強免疫功 能的組合物將海洋多肽與傳統中藥材提取多糖結合，各組分相輔相成，突出增強免疫力功 效，并且產品溶解性和穩定性好，口感佳，服用方便。
【具體實施方式】
[0013] 實施例1
[0014] 一種深海魚皮膠原肽的制備方法，具體步驟如下：
[0015] (1)原料預處理：將冷凍深海鱈魚解凍，取其魚皮，切成lcm*lcm片段，用水沖洗干 凈，加入10倍量（w/w) 6 % NaCl浸泡8h，再用水清洗2次，加入10倍量（w/w) 0. 6 % NaOH浸 泡12h，用水清洗3次，去除殘留蛋白等非魚皮雜質；
[0016] (2)勻漿超聲：將上述處理后小片段魚皮，加入10倍量（w/w)0. 1% NaOH水溶 液，經打碎制成勻漿液，然后經超聲波細胞破碎儀超聲處理，使組織細胞充分破碎，然后用 0. 1 % HC1調整PH值至6. 5 ;超聲波細胞破碎儀的工作功率500W，工作10s間隔25s，工作 80次；震蕩勻漿在10°C以下低溫冰水浴進行。此過程即可保持魚皮蛋白活性物質生物特 性，又能很好的使魚皮蛋白組織松弛，肽鏈展開。
[0017] (3)熱力提取：將上述勻漿液加熱到90°C，并不斷攪拌保溫抽提8h，離心過濾，殘 渣再加入5倍體積水溶液，90°C保溫抽提5h，離心過濾，合并兩次加熱抽提濾液；
[0018] (4)酶解：將上述溶液用0. 1 % NaOH調整PH值至6. 8,加熱抽提水解液溫度降至 37°C利用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶進行復合保溫酶解20h，其中胰蛋白酶用量為鱈魚皮重量 的2. 5%，木瓜蛋白酶的用量為鱈魚皮重量的1. 5% ;
[0019] (5)滅酶超濾：酶解結束后,升溫至90°C,保溫5min滅酶,待酶解液冷卻至室溫，利 用超濾技術收集肽段分子量小于3000Da的濾液；
[0020] (6)干燥：將上述收集的濾液脫鹽、濃縮至質量分數40%，噴霧干燥，制得低分子 量膠原蛋白肽精制粉。
[0021] 本發明原料鱈魚魚皮來源于北大西洋寒冷深海水域野生鱈魚，經青島水產市場獲 得，采用此方法制備獲得的深海魚膠原蛋白肽精制粉，溶解性較好，透明無色或微黃色，嗅 覺上具有淡淡的海水魚味，味覺上接近無味，有效肽段蛋白含量達95%，分子量小，純度高， 動物及人體對其利用吸收率較高，增強動物免疫力功能較突出。
[0022] 實施例2
[0023] -種人參根多糖提取物的制備方法，具體步驟為：
[0024] (1)原料預處理：取人參根須，清洗去泥及其它雜質，自然晾干后打碎過50目篩， 得人參粗粉；
[0025] (2)低溫浸泡：將上述人參粗粉，加入15倍量（w/w)水0_4°C浸泡14h ;
[0026] (3)真空低溫浸提2次：將上述低溫浸泡物料，第一次真空浸提10h，收集濾液，再 向藥渣中加入10倍量（w/w)水，第二次真空提取5h，收集濾液，合并兩次真空浸提濾液，真 空環境為140mmHg，浸提溫度30°C，浸提攪拌轉速為90rpm ;
[0027] (4)過濾：將上述兩次真空浸提濾液通過板框壓濾，過200目濾布得濾液，濾液靜 置2h無沉淀物；
[0028] (5)濃縮：在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至相對密度為1. 2 ;
[0029] (6)醇沉：濃縮液冷卻至室溫，在向濃縮液中緩慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入 乙醇時要充分攪拌，物料混合液中乙醇終濃度為75 %，靜置10h，離心，收集靜置后醇不溶 沉淀得人參多糖提取物；
[0030] (7)復溶脫醇精制：將上述醇不溶沉淀加等體積50°C熱水溶解，攪拌，并在酒精回 收裝置中蒸餾脫乙醇；
[0031] (8)再濃縮：將上述復溶脫醇溶液在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至含水量為 30%，得勻漿液；
[0032] (9)微波干燥：將上述濃縮勻漿液進行微波干燥，微波加熱功率為0. 2w/g ;
[0033] (10)粉碎過篩：微波干燥后得塊狀固體提取物，經物理粉碎后粉末過80目篩，得 人參多糖提取物棕褐色粉末。
[0034] 本發明原料人參根須來源于吉林集安山參，采用此方法制備獲得人參根提取多糖 粉末，復水溶解性較好，可速溶，溶液呈透明棕黃色，其中，多糖含量可達50%，此工藝可提 供較高功能活性的人參多糖。實施例3
[0035] -種蛹蟲草多糖提取物的制備方法，具體步驟為：
[0036] (1)原料預處理：將蛹蟲草去霉變，清洗去泥及其它雜質，自然晾干后打碎成40目 粗粉；
[0037] ⑵低溫浸泡：將上述蛹蟲草粗粉，加入15倍量（w/w)水0°C浸泡16h ;
[0038] (3)低溫真空浸提3次：將上述低溫浸泡物料，第一次真空浸提8h，收集濾液，向 藥渣中加入10倍量（w/w)水，第二次真空提取5h，收集濾液，再向藥渣中加入5倍量（w/w) 水，第三次真空提取3h，收集濾液，合并三次真空浸提濾液，真空環境為140mmHg，浸提溫度 30°C，浸提攪拌轉速為90rpm ;
[0039] (4)過濾：將上述三次真空浸提濾液通過板框壓濾，過200目濾布得濾液，濾液靜 置2h無沉淀物；
[0040] (5)濃縮：在70°C真空濃縮，濾液濃縮至相當于每ml含生藥0. 5g ;
[0041] (6)醇析：濃縮液冷卻至室溫，在向濃縮液中緩慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入 乙醇時要充分攪拌，物料混合液中乙醇終濃度為75 %，靜置12h，去掉上清乙醇溶液，收集 靜置后沉淀的浸膏；
[0042] (7)復溶脫醇精制：將上述沉淀的浸膏加等體積50°C熱水溶解，攪拌，并在酒精回 收裝置中蒸餾脫乙醇；
[0043] (8)再濃縮：將上述復溶脫醇溶液在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至含水量為 35%，得勻漿液；
[0044] (9)熱泵干燥：將上述濃縮勻漿液進行熱泵干燥，干燥溫度為60°C ;與采用噴霧干 燥方法獲得粉末提取物相比，采用此方法大大降低了能耗，節能省時，物料內外干燥去水均 勻，物理粉碎無黑點、焦頭等雜質，產品質量高。
[0045] (10)粉碎過篩：微波干燥后得塊狀固體提取物，經物理粉碎后粉末過100目篩，得 蛹蟲草多糖提取物棕黃色粉末。
[0046] 本發明原料蛹蟲草來源于甘肅甘南人工培育蛹蟲草，采用此方法提取獲得的蛹蟲 草多糖提取物中，多糖含量可達30%，粉末提取物復水溶解性較好，可速溶，溶液呈透明淺 棕黃色。
[0047] 實施例4
[0048] 一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復合物，由以下成分按重量百分比組成：深海魚 皮膠原肽55 %，人參提取物5 %，蛹蟲草提取物7 %，棉籽糖33 %。所述深海魚皮膠原肽、人 參提取物、蛹蟲草提取物分別為實施例1-3所制備的深海魚皮膠原肽、人參提取物和蛹蟲 草提取物。
[0049] 實施例5
[0050] -種增強免疫功能的魚皮膠原肽復合物，由以下成分按重量百分比組成：深海魚 皮膠原肽60 %，人參提取物8 %，蛹蟲草提取物6 %，木糖醇26 %。所述深海魚皮膠原肽、人 參提取物、蛹蟲草提取物分別為實施例1-3所制備的深海魚皮膠原肽、人參提取物和蛹蟲 草提取物。
[0051] 實施例6
[0052] -種增強免疫功能的魚皮膠原肽復合物，由以下成分按重量百分比組成：深海魚 皮膠原肽48%，人參提取物10%，蛹蟲草提取物3%，麥芽糊精39 %。所述深海魚皮膠原 肽、人參提取物、蛹蟲草提取物分別為實施例1-3所制備的深海魚皮膠原肽、人參提取物和 蛹蟲草提取物。
[0053] 實施例1-4制備的魚皮膠原肽復合物增強免疫力效果試驗評價如下：
[0054] 試驗動物：12-16g BALB/c幼鼠85只，隨機分為9組，8個試驗組每組10只，對照 組5只。
[0055] 試驗設計
[0056] 試驗組1 :市售蛋白含量90 %魚皮膠原蛋白肽（1. 65g溶解于200ml溫水）
[0057] 試驗組2 :市售含量為30 %人參提取多糖（0· 15g溶解于200ml溫水）；
[0058] 試驗組3 :市售含量30 %蛹蟲草提取多糖（0. 21g溶解于200ml溫水）；
[0059] 試驗組4 :本發明實施例1所制備的蛋白含量90%魚皮膠原蛋白肽（1. 65g溶解于 200ml溫水）
[0060] 試驗組5 :本發明實施例2所制備的含量為30%人參提取多糖（0. 15g溶解于 200ml 溫水）；
[0061] 試驗組6 :本發明實施例3所制備的含量30 %蛹蟲草提取多糖（0.21g溶解于 200ml 溫水）；
[0062] 試驗組7 :本發明實施例4提取深海魚膠原蛋白肽、蛹蟲草提取多糖和人參根提取 多糖等復合物（低劑量，1. 5g溶解于200ml溫水）；
[0063] 試驗組8 :本發明實施例4提取深海魚膠原蛋白肽、蛹蟲草提取多糖和人參根提取 多糖等復合物（3g溶解于200ml溫水）；
[0064] 試驗組9 :本發明實施例4提取深海魚膠原蛋白肽、蛹蟲草提取多糖和人參根提取 多糖等復合物（高劑量，30g溶解于200ml溫水）；
[0065] 對照組：等劑量生理鹽水灌服。
[〇〇66] 其中，試驗組1-3魚皮膠原肽、人參提取多糖、蟲草提取多糖的含量與本發明實施
【權利要求】
1. 一種增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于由以下成分按重量百分比組 成：深海魚皮膠原肽40 % -70%，人參提取物2 % -12%，蛹蟲草提取物2 % -12%，填充劑 15% -40%。
2. 根據權利要求1所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于由以下成 分按重量百分比組成：深海魚皮膠原肽55 %，人參提取物5 %，蛹蟲草提取物7 %，填充劑 33%。
3. 根據權利要求1或2所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于所述 填充劑為木糖醇、棉子糖、麥芽糊精、海藻糖、β-環糊精和甘露醇中的一種或幾種。
4. 根據權利要求3所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于所述深海 魚皮膠原肽由鱈魚魚皮制得；所述人參提取物為由人參根須提取的人參多糖提取物；所述 蛹蟲草提取物為蛹蟲草多糖提取物。
5. 根據權利要求4所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于具體的制 備方法如下： 將深海魚皮膠原肽、人參提取物和蛹蟲草提取物分別過80目篩，按照各自的重量配比 與填充劑混勻，制劑，即得該復方制品。
6. 根據權利要求1或2所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于所述 深海魚皮膠原肽的制備方法如下： (1) 原料預處理：將冷凍深海鱈魚解凍，取其魚皮，切成片段，用水沖洗干凈， 加入10倍量（w/w) 4% -8 % NaCl浸泡6-8h，再用水清洗2-3次，加入5-10倍量（w/w) 0. 6 % NaOH浸泡8-12h，用水清洗2-3次，去除殘留蛋白等非魚皮雜質； (2) 勻漿超聲：將上述處理后小片段魚皮，加入10-15倍量（w/w) 0. 1 % NaOH水溶液，經 打碎制成勻漿液，然后經超聲波細胞破碎儀超聲處理，使組織細胞充分破碎，然后用0. 1% HC1調整PH值至6. 5 ;超聲波細胞破碎儀工作功率300-500W，工作10s間隔25s，工作80次； 震蕩勻漿在l〇°C以下低溫水浴進行； (3) 熱力提取：將上述勻漿液加熱到80-90°C，并不斷攪拌保溫抽提5-10h，離心過濾， 殘渣再加入5倍體積水溶液，80-9(TC保溫抽提5h，離心過濾，合并兩次加熱抽提濾液； (4) 酶解：將上述濾液用0. 1 % NaOH調整PH值至6. 5-7. 0,加熱抽提水解液溫度降至 37-45°C，利用胰蛋白酶（鱈魚皮重量的2.5% )和木瓜蛋白酶（鱈魚皮重量的L5% )進 行復合保溫酶解16_20h ; (5) 滅酶超濾：酶解結束后，升溫至90°C，保溫5min滅酶，待酶解液冷卻至室溫，利用超 濾技術收集肽段分子量小于3000Da的濾液；（6)干燥：將上述收集的濾液脫鹽、濃縮至質量 分數35-40%，噴霧干燥，制得低分子量膠原蛋白肽精制粉。
7. 根據權利要求1或2所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于所述 人參提取物的制備方法為： (1) 原料預處理：取人參根須，清洗去泥及其它雜質，自然晾干后打碎過40-50目篩，得 人參粗粉； (2) 低溫浸泡：將上述人參粗粉，加入10-15倍量（w/w)水0-4°C浸泡12-18h ; (3) 真空低溫浸提2次：將上述低溫浸泡物料，第一次真空浸提8-12h，收集濾液，再向 藥渣中加入5-10倍量（w/w)水，第二次真空提取4-6h，收集濾液，合并兩次真空浸提濾液， 真空環境為120-160mmHg，浸提溫度30-40°C，浸提攪拌轉速為60-100rpm ; (4) 過濾：將上述兩次真空浸提濾液通過板框壓濾，過200-300目濾布得濾液，濾液靜 置2h無沉淀物； (5) 濃縮：在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至相對密度為1. 2 ; (6) 醇沉：濃縮液冷卻至室溫，向濃縮液中緩慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入乙醇時 要充分攪拌，物料混合液中乙醇終濃度為75 %，靜置8-15h，離心，收集靜置后醇不溶沉淀 得人參多糖提取物； (7) 復溶脫醇精制：將上述醇不溶沉淀加等體積50°C熱水溶解，攪拌，并在酒精回收裝 置中蒸餾脫乙醇； (8) 再濃縮：將上述復溶脫醇溶液在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至含水量為 30% -40%，得勻漿液； (9) 微波干燥：將上述濃縮勻漿液進行微波干燥，微波加熱功率為0. 2w/g ; (10) 粉碎過篩：微波干燥后得塊狀固體提取物，經物理粉碎后粉末過80-100目篩，得 人參多糖提取物棕褐色粉末。
8.根據權利要求3所述的增強免疫功能的魚皮膠原肽復方制品，其特征在于所述蛹蟲 草提取物的制備方法為： (1) 原料預處理：將蛹蟲草去霉變，清洗去泥及其它雜質，自然晾干后打碎成30-50目 粗粉； (2) 低溫浸泡：將上述蛹蟲草粗粉，加入10-15倍量（w/w)水0-4°C浸泡12-18h ; (3) 低溫真空浸提3次：將上述低溫浸泡物料，第一次真空浸提8-10h，收集濾液，向 藥渣中加入5-10倍量（w/w)水，第二次真空提取5-8h，收集濾液，再向藥渣中加入3-5 倍量（w/w)水，第三次真空提取3-5h，收集濾液，合并三次真空浸提濾液，真空環境為 120-160mmHg，浸提溫度30-40°C，浸提攪拌轉速為60-100rpm ; (4) 過濾：將上述三次真空浸提濾液通過板框壓濾，過200-300目濾布得濾液，濾液靜 置2h無沉淀物； (5) 濃縮：在70°C真空濃縮，濾液濃縮至相當于每ml含生藥0. 5g ; (6) 醇析：濃縮液冷卻至室溫，向濃縮液中緩慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入乙醇時 要充分攪拌，物料混合液中乙醇終濃度為75%，靜置10-15h，去掉上清乙醇溶液，收集靜置 后沉淀的浸骨； (7) 復溶脫醇精制：將上述沉淀的浸膏加等體積50°C熱水溶解，攪拌，并在酒精回收裝 置中蒸餾脫乙醇； (8) 再濃縮：將上述復溶脫醇溶液在70°C以下真空濃縮，濾液濃縮至含水量為 30% -40%，得勻漿液； (9) 熱泵干燥：將上述濃縮勻漿液進行熱泵干燥，干燥溫度為60°C ; (10) 粉碎過篩：微波干燥后得塊狀固體提取物，經粉碎后粉末過80-100目篩，得蛹蟲 草多糖提取物棕黃色粉末。
【文檔編號】A23L1/305GK104041830SQ201410276999
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月19日 優先權日:2014年6月19日
【發明者】李麗杰, 李八方, 王尚龍 申請人:青島銀色世紀健康產業集團有限公司