膠原蛋白肽的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種膠原蛋白肽的制備方法，所述膠原蛋白肽的制備方法包括以下步驟：(1)將魚皮與水按質量比為1：(2?6)混合，在92?98℃下提取1?3小時，得到提取液，并調節pH至5?10；(2)將胰蛋白酶和酶保活劑加入到48?72℃的提取液中水解1.5?4.5小時，滅酶活，得到酶解液；(3)將酶解液用活性炭進行脫腥、脫色，過濾，得到脫色液；(4)將脫色液與抗氧劑按按質量比為(95?105)：(0.05?0.5)混合均勻得到混合液；(5)將混合液超濾、凍干。本發明膠原蛋白肽的制備方法，產品得率高，抑菌性能好，工序合理，操作性強，生產周期短，生產過程無污染，適合工業化生產。
【專利說明】
膠原蛋白化的制備方法
技術領域
[0001] 本發明設及保健食品技術領域，具體設及一種膠原蛋白膚的制備方法。
【背景技術】
[0002] 膠原蛋白是一種廣泛分布于動物的皮、毛、骨骼及血管中的纖維性蛋白質，能夠對 機體起到支撐、修復、保護的作用。膠原蛋白是由氨基酸構成的，在一定條件下會水解產生 膠原蛋白膚和氨基酸。膠原蛋白膚，膠原蛋白的酶解產物，是一種天然的生物產品，具有膠 原蛋白諸多的生理活性和膠原蛋白所不具有的特性，因其顯著的生理活性廣泛應用于功能 性食品、保健食品、化妝品和藥品。
[0003] 與膠原蛋白相比，膠原蛋白膚由于分子量較小，極性基團增加進而溶解性增強。將 膠原蛋白降解為膠原蛋白膚后，由于大量親水基團外漏，膠原蛋白膚的吸水性和持水性明 顯高于膠原蛋白，將其用于化妝品中可W保持皮膚水分，提高了皮膚的保濕效果。膠原蛋白 膚的乳化性和起泡性也使其可W作為食品添加劑改善食品的質量，使產品不但口感好，而 且營養豐富。膠原蛋白膚除了具有蛋白質的一般功能特性外還具有很多生物活性，如抗氧 化活性、抑制血管緊張素轉化酶活性、抑制血小板凝結活性、抗腫瘤活性等。
[0004] 本發明提供了一種膠原蛋白膚的制備方法，易于吸收，并且蛋白的活性高。
【發明內容】
[0005] 針對現有技術的不足，本發明所要解決的技術問題是提供一種膠原蛋白膚的制備 方法。
[0006] 為實現上述目的，本發明所采用的技術解決方案是：
[0007] -種膠原蛋白膚的制備方法，包括W下步驟：
[000引（1)將魚皮與水按質量比為1: (2-6)混合，在92-98°C下提取1-3小時，得到提取液， 并調節抑至6-9;
[0009] (2)將膜蛋白酶和酶保活劑加入到48-72 °C的提取液中水解1.5-4.5小時，滅酶活， 得到酶解液；
[0010] (3)將酶解液用活性炭進行脫腥、脫色，過濾，得到脫色液；
[0011] (4)將脫色液與抗氧劑按質量比為(95-105): (0.05-0.5)混合均勻得到混合液；
[0012] (5)將混合液超濾、凍干。
[OOU]所述的步驟(1)中調節抑值可W采用NaOH溶液、肥1溶液等。
[0014] 優選地，所述步驟(2)中膜蛋白酶的加入量為魚皮質量的1-10%，酶保活劑的加入 量為魚皮質量的0.2-2%。
[0015] 優選地，所述步驟(2)中的酶保活劑由丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖混合而成，所述丙 Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖的質量比為(1-3) :(1-3): (1-3)。
[0016] 優選地，所述步驟(4)中的抗氧劑由澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素混合而成，所述澄皮 素、銀杏黃酬、姜黃素的質量比為(1-3): (1-3): (1-3)。
[0017] 優選地，所述步驟(3)中的活性炭與酶解液的固液比(0.01-0. l)g/ml。
[0018] 優選地，所述步驟(3)中的過濾為板框過濾機過濾，采用150-200目的濾布。
[0019] 優選地，所述步驟(5)中的超濾為用截留分子量50-150kD的超濾膜超濾。
[0020] 本發明膠原蛋白膚的制備方法，產品得率高，抑菌性能好，工序合理，操作性強，生 產周期短，生產過程無污染，適合工業化生產。
【具體實施方式】
[0021] 實施例中各原料介紹：
[0022] 魚皮采用轄魚魚皮，具體采用大西洋轄魚的魚皮。
[0023] 丙 Ξ醇，CAS 號：56-81-5。
[0024] 殼 Ξ 糖，CAS 號：41708-93-4。
[0025] 薦果四糖，CAS 號：13133-07-8。
[0026] 澄皮素 ，CAS 號：520-33-2。
[0027] 銀杏黃酬，CAS 號:22910-60-7。
[002引姜黃素 ，CAS 號:458-37-7。
[0029] 膜蛋白酶，CAS號:9002-07-7，鄭州好兄弟化工產品有限公司提供，酶活200U/mg。
[0030] 活性炭，CAS號:64365-11-3,采用青島嘉德濾料有限公司生產的50目活性炭。
[0031] 實施例1
[0032] 膠原蛋白膚的制備方法，包括W下步驟：
[0033] (1)將魚皮與去離子水按質量比為1:4混合加入反應蓋內，加熱到95°C保溫提取2 小時，得到提取液，并用2mol/L的氨氧化鋼溶液調節抑至8.0;
[0034] (2)將膜蛋白酶和酶保活劑加入到50°C的提取液中攬拌混合均勻，其中膜蛋白酶 的加入量為魚皮質量的4.5%，酶保活劑的加入量為魚皮質量的0.6% (即每100克魚皮加入 膜蛋白酶4.5克、酶保活劑0.6克），保持溫度為60°C，水解2小時，得到水解后產物，然后將水 解后產物置于98°C水浴下10分鐘滅酶，得到酶解液；
[0035] (3)將活性炭與酶解液按固液比為0.02混合（即每100ml酶解液加入2克活性炭）， 得到混合液;將混合液300轉/分攬拌20分鐘進行脫腥、脫色，然后采用板框過濾機過濾，濾 布為180目，得到脫色液；
[0036] (4)將脫色液與抗氧劑按按質量比為100:0.3混合均勻得到混合液；
[0037] (5)取脫色液用截留分子量lOOkD的超濾膜超濾，收集濾液，在-30°C下凍干，得到 實施例1制備的膠原蛋白膚。
[0038] 所述步驟(2)中的酶保活劑由丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖按質量比為1:1:1攬拌混 合均勻得到。
[0039] 所述步驟(4)中的抗氧劑由澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素按質量比為1:1:1攬拌混合 均勻得到。
[0040] 實施例2
[0041] 與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的酶保活劑由丙Ξ醇、殼Ξ糖按質量比 為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例2的膠原蛋白膚。
[0042] 實施例3
[0043] 與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的酶保活劑由丙Ξ醇、薦果四糖按質量 比為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例3的膠原蛋白膚。
[0044] 實施例4
[0045] 與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的酶保活劑由殼Ξ糖、薦果四糖按質量 比為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例4的膠原蛋白膚。
[0046] 實施例5
[0047] 與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的抗氧劑由澄皮素、銀杏黃酬按質量比 為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例5的膠原蛋白膚。
[0048] 實施例6與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的抗氧劑由銀杏黃酬、姜黃素 按質量比為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例6的膠原蛋白膚。
[0049] 實施例7
[0050] 與實施例1基本相同，區別僅僅在于:所述的酶保活劑由澄皮素、姜黃素按質量比 為1:1攬拌混合均勻得到。即可制得實施例7的膠原蛋白膚。
[00引]測試例1
[0052] 對實施例1-7中步驟（1)的魚皮和步驟(5)制備的膠原蛋白膚進行稱重，計算產品 得率，產品得率（％)=膠原蛋白膚的質量/魚皮的質量X 100%，具體結果見表1。
[0053] 表1:產品得率測試表
[0化4]
[0化5]
[0056]比較實施例1與實施例2-4，實施例1 (丙；醇、殼；糖、薦果四糖復配)產品得率明 顯高于實施例2-4(丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖中任意兩種復配）。比較實施例1與實施例5-7， 實施例1(澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素)產品得率明顯高于實施例2-4(澄皮素、銀杏黃酬、姜黃 素中任意兩種復配）。
[0化7] 測試例2
[005引將實施例1-7制備的膠原蛋白膚的制備方法，置于25°C，相對濕度85%環境下保藏 半年，采用《GB/T 4789.2-2010食品衛生微生物學檢驗菌落總數測定》進行菌落總數測試。 具體測試結果見表2。
[0化9]表2:菌落總數測試表cfu/g
[0060]_
[0061] 發明人意外的發現，在添加酶和酶保活劑后，菌落總數明顯下降，產品的抑菌性能 明顯提高，保質期得W大幅延長。比較實施例1和實施例2-4,實施例1(丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果 四糖復配)抑菌性能明顯高于實施例2-4(丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖中任意兩種復配）。比較 實施例1與實施例5-7,實施例1(澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素復配)抑菌性能明顯高于實施例 2-4(澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素中任意兩種復配）。
[0062] 測試例3
[0063] 對實施例1-7進行養顏潤膚效果測試。
[0064] 每組對象:50名臨床觀察病例，癥狀表現為:皮膚松弛、油膩、顏色暗淡、出現雀斑、 紅痘，其中男性25名，女性25名(年齡20-60歲）。
[0065] 測試對象每日早上9點、下午5點兩次飲用，每組分別使用實施例1-4制備的膠原蛋 白膚的制備方法3克，取300mL溫度為45°C的水沖泡，連續一個月，進行測試。
[0066] 療效標準：
[0067] (1)顯效:皮膚更水潤，出油量明顯減少，白暫度提高30%;
[0068] (2)有效:皮膚水潤，出油量減少，白暫度提高10% ;
[0069] (3)無效:治療前后無明顯癥狀改善，或加重。
[0070] 具體測試數據見表3。
[0071 ]表3:治療效果測試結果表
[0072] ____
[0073] 實驗證明，本發明的膠原蛋白膚的制備方法茶能夠有效改善皮膚松弛、油膩、顏色 暗淡癥狀。比較實施例1與實施例2-4，實施例1 (丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖復配)治療效果明 顯優于實施例2-4(丙Ξ醇、殼Ξ糖、薦果四糖中任意兩種復配）。比較實施例1與實施例5-7， 實施例1(澄皮素、銀杏黃酬、姜黃素復配)治療效果明顯優于實施例2-4(澄皮素、銀杏黃酬、 姜黃素中任意兩種復配）。
【主權項】
1. 一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將魚皮與水按質量比為1: (2-6)混合，在92-98°C下提取1-3小時，得到提取液，并調 節pH至5-10; (2) 將胰蛋白酶和酶保活劑加入到48-72°C的提取液中水解1.5-4.5小時，滅酶活，得到 酶解液； (3) 將酶解液用活性炭進行脫腥、脫色，過濾，得到脫色液； (4) 將脫色液與抗氧劑按質量比為(95-105) :(0.05-0.5)混合均勻得到混合液； (5) 將混合液超濾、凍干； 所述的抗氧劑由橙皮素、銀杏黃酮、姜黃素混合而成，所述橙皮素、銀杏黃酮、姜黃素的 質量比為（1_3): (1-3): (1-3)。 所述的酶保活劑由丙三醇、殼三糖、蔗果四糖混合而成，所述丙三醇、殼三糖、蔗果四糖 的質量比為（1_3): (1-3): (1-3)。2. 如權利要求1所述的膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于:活性炭與酶解液的固液比 (0.01-0.l)g/ml〇3. 如權利要求1所述的膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于:所述的超濾為用截留分子 量50-150kD的超濾膜超濾。4. 如權利要求1所述的膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)中酶的加入 量為魚皮質量的1-10%，酶保活劑的加入量為魚皮質量的0.2-2%。
【文檔編號】C12P21/06GK106011209SQ201610564967
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月18日
【發明人】王斐芬
【申請人】王斐芬