一種低頻細胞循環分選系統的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種低頻細胞循環分選系統，包括進樣室、緩沖液瓶、混合室、回流室、磁極平臺、回收樣品管和控制系統，其采用循環液流設計和雙通路分選設計，應用于免疫磁性分選，來提高低頻細胞分選能力和分選的樣品量，主要有以下優點：(1)可以直接應用于臨床大量樣品的制備，可分析血樣的樣品量為0.5ml至200ml；(2)可以同時分選兩個樣品或者對比樣品，也可以同時進行正選和負選；(3)可以進行多次循環分選，適用于低頻細胞分選。
【專利說明】一種低頻細胞循環分選系統
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種低頻細胞循環分選系統和分選方法。
【背景技術】
[0002]目前國內外的免疫磁性分選細胞技術主要有德國美天旎公司的分離柱分離，加拿大干細胞公司的磁極分離。這些細胞分選技術存在著分選低頻細胞(含量低的細胞)的能力差，分選樣品量不能滿足臨床的需求等問題。為了解決這些問題，本實用新型采用循環液流設計和雙通路分選設計，應用于免疫磁性分選，來提高低頻細胞分選能力和分選的樣品量。
【發明內容】
[0003]為了克服現有免疫磁性分選低頻細胞技術分選能力差，分選樣品量不能滿足臨床的需求等問題。本實用新型公開了一種低頻細胞循環分選系統，包括一個進樣室、一個緩沖液瓶、一個混合室、一個回流室、磁極平臺、回收樣品管和控制系統，進樣室通過管道與混合室連接，緩沖液瓶通過管道與混合室連接，磁極平臺的前部設有一個圓形分離區域，磁極平臺的圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，混合室下部的管道形穿過磁極平臺的圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至回流室和回收樣品管，回流室和混合室相鄰，進樣室和混合室、緩沖液瓶和混合室之間的管道及混合室下部穿過磁極平臺的圓形分離區域的管道上分別設有樣品泵、緩沖液泵和分離泵，三通件與回流室和回收樣品管間的管道上均設有電動閥，混合室和回流室之間設有管道和電動閥，樣品泵、緩沖液泵、分離泵、電動閥和所述電磁鐵與控制系統耦合連接。
[0004]本實用新型公開的上述實施例中的一種低頻細胞循環分選系統為單通路分選系統，可以分選的樣品量為0.51111至501111。
[0005]本實用新型公開的上述實施例中的一種低頻細胞循環分選系統的分選方法，步驟如下:
[0006]第一步:在控制系統設定好流速、磁場強度和分選次數；
[0007]第二步:臨床上采集的血樣與磁珠和抗體孵育完成后上樣至進樣室；
[0008]第三步:血樣通過樣品泵流至所述混合室，同時緩沖液通過緩沖液泵流至混合室，樣品與緩沖溶液以一定比例混合通過分離泵進入圓形分離區域；
[0009]第四步:樣品中與磁珠連接的靶細胞/非靶細胞被磁場吸引滯留在磁場內，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞從磁場中流出；
[0010]第五步:樣品經所述圓形分離區域后，控制系統開啟三通件與回流室之間的電動閥，使樣品流至回流室；
[0011]第六步:待混合室中樣品全部進入回流室，控制系統關閉三通件與回流室之間的電動閥，并開啟回流室與混合室之間的電動閥，使樣品流至混合室，重新經過所述圓形分離區域；
[0012]第七步:按上述不斷循環至完成設定好的分選次數；
[0013]第八步:控制系統開啟三通件與回收樣品管之間的電動閥，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞直接流入回收樣品管；
[0014]第九步:去掉磁場后，用洗脫液洗脫與磁珠連接的靶細胞丨非靶細胞，并收集至回收樣品管。
[0015]本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例中，進樣室、緩沖液瓶、混合室及回流室還可以為兩個，磁極平臺的前部設有兩個圓形分離區域，磁極平臺的每個圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，每個混合室下部的管道形穿過磁極平臺的其中一個圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至回流室和回收樣品管。
[0016]本實用新型公開的上述實施例中的一種低頻細胞循環分選系統為雙通路分選系統，可以分選的樣品量為0.51111至1001111。
[0017]本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例中，進樣室、緩沖液瓶、混合室及回流室還可以為兩個，磁極平臺的前部還可以設有四個圓形分離區域，磁極平臺的每個圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，每個混合室下部的管道形穿過磁極平臺的其中兩個圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至回流室和回收樣品管。
[0018]本實用新型公開的上述實施例中的一種低頻細胞循環分選系統為雙通路分選系統，可以分選的樣品量為0.51111至2001111。
[0019]本實用新型公開的上述兩個實施例中的一種低頻細胞循環分選系統的分選方法，步驟如下:
[0020]第一步:在控制系統中設定好流速、磁場強度、分選次數和樣品個數；
[0021]第二步:臨床上采集的血樣與磁珠和抗體孵育完成后上樣至進樣室；
[0022]第三步:血樣通過樣品泵流至所述混合室，同時緩沖液通過緩沖液泵流至混合室，樣品與緩沖溶液以一定比例混合通過分離泵進入圓形分離區域；
[0023]第四步:樣品中與磁珠連接的靶細胞/非靶細胞被磁場吸引滯留在磁場內，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞從磁場中流出；
[0024]第五步:樣品經圓形分離區域后，控制系統開啟三通件與回流室之間的電動閥，使樣品流至回流室；
[0025]第六步:待混合室中樣品全部進入回流室，控制系統關閉三通件與回流室之間的電動閥，并開啟回流室與混合室之間的電動閥，使樣品流至混合室，重新經過圓形分離區域；
[0026]第七步:按上述不斷循環至完成設定好的分選次數；
[0027]第八步:控制系統開啟三通件與回收樣品管之間的電動閥，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞直接流入回收樣品管；
[0028]第九步:去掉磁場后，用洗脫液洗脫與磁珠連接的靶細胞丨非靶細胞，并收集至回收樣品管。
[0029]本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的實施例中，樣品泵、緩沖液泵和分離泵均為蠕動泵，管道為彈性管道。
[0030]本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的實施例中，可以同時分選兩個樣品，也可以同時進行正選或負選。
[0031]有益效果
[0032]本實用新型公開了一種低頻細胞循環分選系統和分選方法，采用循環液流設計和雙通路分選設計，應用于免疫磁性分選，來提高低頻細胞分選能力和分選的樣品量，主要有以下優點:
[0033](3)可以直接應用于臨床大量樣品的制備，可分析血樣的樣品量為0.5“至2001111 ；
[0034](4)可以同時分選兩個樣品或者對比樣品，也可以同時進行正選和負選；
[0035](3)可以進行多次循環分選，適用于低頻細胞分選。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0036]圖1是本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的一個實施例的結構示意圖。
[0037]圖2是本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例的結構示意圖。
[0038]圖3是本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例的結構示意圖。
【具體實施方式】
[0039]下面結合附圖和具體實施例對本實用新型作進一步詳細描述，但不作為對本實用新型的限定。
[0040]圖1為本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的一個實施例的結構示意圖，如圖所示，該低頻細胞循環分選系統包括一個進樣室(01^—個緩沖液瓶(02^—個混合室(03^—個回流室(07^磁極平臺(04)、回收樣品管(08)和控制系統(圖中未示出)，進樣室(01)通過管道與混合室(03)連接，緩沖液瓶(02)通過管道與混合室(03)連接，磁極平臺(04)的前部設有一個圓形分離區域(15),磁極平臺(04)的圓形分離區域(15)分布四個可調節的電磁場(05),四個可調節的電磁場(05)分為兩對，其中每對電磁鐵相對設置，混合室(03)下部的管道“I”形穿過磁極平臺(04)的圓形分離區域(15)后并通過一個三通件(06)分別連接至回流室(07)和回收樣品管(08),當管道“I”形穿過磁極平臺(04)的圓形分離區域(15)經過四個可調節的電磁場(05)時，管道從每對可調節的電磁場相對的位置穿過，回流室(07)和混合室(03)相鄰，進樣室(01)和混合室(03^緩沖液瓶(02)和混合室(03)之間的管道及混合室(03)下部穿過磁極平臺(04)的圓形分離區域(15)的管道上分別設有樣品泵(09^緩沖液泵(10)和分離泵(11),三通件(06)與回流室(07)和回收樣品管(08)間的管道上均設有電動閥(12和14),混合室(03)和回流室(07)之間設有管道和電動閥(13),并且管道可以通到回流室(07)的底部，樣品泵(09^緩沖液泵(10)、分離泵(11)、電動閥〈12、13和14)和電磁鐵(05)與控制系統耦合連接，控制系統可以控制樣品泵(09)、緩沖液泵(10)、分離泵(11)、電動閥〈12、13和14)和電磁鐵(05)的開啟和關閉，并可以控制電磁鐵(05)磁性的大小。
[0041]圖1中所不的一種低頻細胞循環分選系統可以分選的樣品量為0.51111至501111。
[0042]圖1中所示的一種低頻細胞循環分選系統的分選方法，步驟如下:
[0043]第一步:在控制系統設定好流速、磁場強度和分選次數；
[0044]第二步:臨床上采集的血樣與磁珠和抗體孵育完成后上樣至進樣室(01)；
[0045]第三步:血樣通過樣品泵(09)流至混合室(03)，同時緩沖液通過緩沖液泵(10)流至混合室(03),樣品與緩沖溶液以一定比例混合通過分離泵(11)進入圓形分離區域(15)；
[0046]第四步:樣品中與磁珠連接的靶細胞/非靶細胞被磁場吸引滯留在磁場內，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞從磁場中流出；
[0047]第五步:樣品經所述圓形分離區域(15)后，控制系統開啟三通件(06)與回流室(07)之間的電動閥(12),使樣品流至回流室(07)；
[0048]第六步:待混合室(03)中樣品全部進入回流室(07),控制系統關閉三通件(06)與回流室(07)之間的電動閥(12),并開啟回流室(07)與混合室(03)之間的電動閥(13),使樣品流至混合室(03),重新經過所述圓形分離區域(15)；
[0049]第七步:按上述不斷循環至完成設定好的分選次數；
[0050]第八步:控制系統開啟三通件(06)與回收樣品管(08)之間的電動閥(14),沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞直接流入回收樣品管(08)；
[0051]第九步:去掉磁場后，用洗脫液洗脫與磁珠連接的靶細胞丨非靶細胞，并收集至回收樣品管(08)，用標有“ + ”的回收樣品管收集靶細胞，用標有“-”的回收樣品管收集非靶細胞。
[0052]圖2為本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例的結構示意圖，如圖所示，進樣室(01^緩沖液瓶(02^混合室(03)及回流室(07)還可以為兩個，磁極平臺(04)的前部設有兩個圓形分離區域(15),磁極平臺(04)的每個圓形分離區域
(15)分布四個可調節的電磁場(05),并且四個可調節的電磁場(05)分為兩對，其中每對電磁鐵相對設置，每個混合室(03)下部的管道“I”形穿過磁極平臺(04)的其中一個圓形分離區域(15)后并通過一個三通件(06)分別連接至回流室(07)和回收樣品管(08),并當管道“I”形穿過磁極平臺(04)的其中一個圓形分離區域(15)經過四個可調節的電磁場(05)時，管道從每對可調節的電磁場相對的位置穿過。
[0053]圖2中所不的一種低頻細胞循環分選系統可以分選的樣品量為0.51111至1001111。
[0054]圖3為本實用新型公開的一種低頻細胞循環分選系統的另外一個實施例的結構示意圖，如圖所示，進樣室(01^緩沖液瓶(02^混合室(03)及回流室(07)還可以為兩個，磁極平臺(04)的前部還可以設有四個圓形分離區域(15),磁極平臺(04)的每個圓形分離區域(15)分布四個可調節的電磁場(05),并且四個可調節的電磁場(05)分為兩對，其中每對電磁鐵相對設置，每個混合室(03)下部的管道“『形穿過磁極平臺(04)的其中兩個圓形分離區域(15)后并通過一個三通件(06)分別連接至回流室(07)和回收樣品管(08),并當管道“I”形穿過磁極平臺(04)的其中兩個圓形分離區域(15)經過八個可調節的電磁場
(05)時，管道從每對可調節的電磁場相對的位置穿過。
[0055]圖3中所不的一種低頻細胞循環分選系統可以分選的樣品量為0.51111至2001111。
[0056]圖2和圖3中所示的兩個實施例中的一種低頻細胞循環分選系統的分選方法，步驟如下:
[0057]第一步:在控制系統中設定好流速、磁場強度、分選次數和樣品個數；
[0058]第二步:臨床上采集的血樣與磁珠和抗體孵育完成后上樣至進樣室(01)；
[0059]第三步:血樣通過樣品泵(09)流至混合室(03)，同時緩沖液通過緩沖液泵(10)流至混合室(03),樣品與緩沖溶液以一定比例混合通過分離泵(11)進入圓形分離區域
(15)；
[0060]第四步:樣品中與磁珠連接的靶細胞/非靶細胞被磁場吸引滯留在磁場內，沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞從磁場中流出；
[0061]第五步:樣品經所述圓形分離區域(15)后，控制系統開啟三通件(06)與回流室
(07)之間的電動閥(12),使樣品流至回流室(07)；
[0062]第六步:待混合室(03)中樣品全部進入回流室(07)，控制系統開關閉三通件(06)與回流室(07)之間的電動閥(12),并開啟回流室(07)與混合室(03)之間的電動閥(13),使樣品流至混合室(03),重新經過所述圓形分離區域(15)；
[0063]第七步:按上次不斷循環至完成設定好的分選次數；
[0064]第八步:控制系統開啟三通件(06)與回收樣品管(08)之間的電動閥(14),沒有連接磁珠的非靶細胞/靶細胞直接流入回收樣品管(08)；
[0065]第九步:去掉磁場后，用洗脫液洗脫與磁珠連接的靶細胞丨非靶細胞，并收集至回收樣品管(08)，用標有“ + ”的回收樣品管收集靶細胞，用標有“-”的回收樣品管收集非靶細胞。
[0066]圖1、圖2和圖3中所示的一種低頻細胞循環分選系統的實施例中，樣品泵(09)、緩沖液泵(10)和分離泵(11)均為蠕動泵，管道為彈性管道，蠕動泵可以按照一定頻率擠壓管道，因此樣品可以在管道中流動，控制系統可以控制蠕動泵的開啟和關閉，并可以控制蠕動泵擠壓管道的頻率。
[0067]圖2和圖3中所示的一種低頻細胞循環分選系統的實施例中，可以同時分選兩個樣品，因為從圖2和圖3中可以得出采用了雙通路分選設計，因此也可以同時進行正選或負選，所謂正選是指在陽性的分離過程中，磁珠上包被能夠結合靶細胞表面抗原的特異性基團，靶細胞在與配套試劑混合的同時被磁珠標記，磁場作用與混合液，使靶細胞單獨被截留在兩個磁場中間的管道內，未被標記的細胞從系統中流出后，磁場磁力消失，靶細胞得到釋放，最終收集到容器中。所謂負選是指，在損耗大時可采用陰性分離，非靶細胞被磁珠標記，在磁場打開時，可使靶細胞流出并收集。
[0068]以上所述，僅是本實用新型較佳的實施方式，并非對本實用新型的技術方案做任何形式上的限制。凡是依據本實用新型的技術實質對以上實施例做任何簡單修改，形式變化和修飾，均落入本實用新型的保護范圍。
【權利要求】
1.一種低頻細胞循環分選系統，包括一個進樣室、一個緩沖液瓶、一個混合室、一個回流室、磁極平臺、回收樣品管和控制系統，所述進樣室通過管道與所述混合室連接，所述緩沖液瓶通過管道與所述混合室連接，所述磁極平臺的前部設有一個圓形分離區域，所述磁極平臺的圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，所述混合室下部的管道“U”形穿過所述磁極平臺的圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至所述回流室和所述回收樣品管，所述回流室和混合室相鄰，所述進樣室和混合室、緩沖液瓶和混合室之間的管道及混合室下部穿過所述磁極平臺的圓形分離區域的管道上分別設有樣品泵、緩沖液泵和分離泵，所述三通件與所述回流室和所述回收樣品管間的管道上均設有電動閥，所述混合室和回流室之間設有管道和電動閥，所述樣品泵、所述緩沖液泵、所述分離泵、所述電動閥和所述電磁鐵與所述控制系統耦合連接。
2.如權利要求1所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述進樣室、所述緩沖液瓶、所述混合室及所述回流室還可以為兩個，所述磁極平臺的前部設有兩個圓形分離區域，所述磁極平臺的每個圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，所述每個混合室下部的管道“U”形穿過所述磁極平臺的其中一個圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至所述回流室和所述回收樣品管。
3.如權利要求1所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述進樣室、所述緩沖液瓶、所述混合室及所述回流室還可以為兩個，所述磁極平臺的前部還可以設有四個圓形分離區域，所述磁極平臺的每個圓形分離區域分布四個可調節的電磁場，所述每個混合室下部的管道“U”形穿過所述磁極平臺的其中兩個圓形分離區域后并通過一個三通件分別連接至所述回流室和所述回收樣品管。
4.根據權利要求1-3中任一所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述樣品泵、所述緩沖液泵和所述分離泵均為蠕動泵，所述管道為彈性管道。
5.根據權利要求1所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述系統可以分選的樣品量為0.5ml至50ml。
6.根據權利要求2所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述系統可以分選的樣品量為0.5ml至100ml。
7.根據權利要求3所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述系統可以分選的樣品量為0.5ml至200ml。
8.根據權利要求1所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述系統為單通路分選系統。
9.根據權利要求2或3所述的一種低頻細胞循環分選系統，其特征在于:所述系統為雙通路分選系統。
【文檔編號】C12M1/36GK204162723SQ201420596510
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月16日 優先權日:2014年10月16日
【發明者】付琥 申請人:付琥