本發明屬于飼料添加劑領域，具體涉及一種有效調節雞腸道健康的飼料添加劑及其制備方法。
背景技術：
微生物及其復雜的微生物群落在其生存環境的大部分生物轉化中承擔著巨大的責任，雞的胃腸道中寄居著復雜的微生物，這些微生物與雞的健康和疾病有著重要的關聯。雞腸道微生物菌群與飼糧存在著密切的相關性，蛋雞腸道上皮等黏膜必須保持結構與功能的完整才能組織大批量的病原體從腸腔侵入體內。蛋雞的健康往往與腸道疾病相關，病院微生物引起的腸道極小的損傷，就能使蛋雞生產性能顯著下降，為微生物感染造成的腸道嚴重損害可使雞群爆發疾病，提高蛋雞的病死率。因此蛋雞必須具有結構完整且具有良好免疫功能的健康消化道，才能最大程度的提高對養分的消化和吸收。在現代蛋雞生產系統中，在蛋雞基礎飼料中添加相應的飼料添加劑，以提高蛋雞腸道微生物平衡，這對保持良好的飼養效率和較佳的生長速度和經濟效益是極為重要的。
針對上述技術問題，目前，在生產中，通常采用添加飼用抗生素的方法來提高蛋雞腸道的免疫力，但抗生素的使用導致了諸多問題，如藥物殘留、耐藥性、二重感染和降低機體免疫力等，其應用已受到很大限制。
現已出現一種通過在基礎飼料中加入腸道益生菌來提高蛋雞腸道有益菌群，從而達到提高腸道免疫力的手段。如中國專利申請cn103931954a公開了一種用于調控修復蛋雞腸道的飼料添加劑及其制備方法，含有丁酸鈉、丁酸酯、丁酸梭菌等組分，能夠實現蛋雞的腸道調節和修復。但是通過從外攝入微生態制劑雖然能一定程度上提高腸道的免疫力，但是無法使攝入的腸道有益菌在蛋雞腸道內增殖，即也無法實現真正意義上的修復蛋雞腸道的功能，一般需要長期的攝入，才能保證腸道有益菌在有效的濃度。
因此，有必要提供一種能有效誘導腸道有益菌在腸道內的增殖，修復蛋雞腸道菌群功能，增強腸道免疫力的飼料添加劑。
技術實現要素：
為了解決現有技術中存在的技術問題，本發明的目的在于提供一種有效調節雞腸道健康的飼料添加劑及其制備方法，本發明提供的飼料添加劑能有效誘導腸道有益菌在腸道內的增殖，修復蛋雞腸道的菌群功能，增強腸道免疫力。
本發明提供了一種有效調節雞腸道健康的飼料添加劑，由以下重量份數的原料制備而成：中藥組合物22～50份、氨基酸12～30份、沸石粉10～30份、維生素20～40份、抗氧化劑2～6份、菊苣菊糖水解物5～20份、復合菌劑10～25份和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉1～10份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比制成。
優選地，所述飼料添加劑由以下重量份數的原料制備而成：中藥組合物32份、氨基酸25份、沸石粉20份、維生素30份、抗氧化劑4份、菊苣菊糖水解物16份、復合菌劑15份和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉5份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.25:0.3:0.6的重量比制成。
優選地，所述氨基酸選自精氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸、亮氨酸、甘氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸和異亮氨酸中的一種或幾種。更優選地，所述氨基酸由賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和甘氨酸按1:1:1:1的重量比組成。
優選地，所述維生素選自維生素b1、維生素b2、維生素b3、維生素b5和維生素b6中的一種或幾種。更優選地，所述維生素由b1、維生素b2和維生素b3按1:1:1的重量比組成。
優選地，所述菊苣菊糖水解物由以下步驟制得：
稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量1～3倍的純化水，60～90℃浸提1～3次，每次1～3h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.15-1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，即得。
優選地，所述中藥組合物由以下步驟制得：
按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量6～10倍量體積分數為65～80％的乙醇，再加入藥材總量0.8％～1.0％的纖維素酶，在38～45℃下浸提1～2小時，然后在80～90℃回流提取3～6小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.10～1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，即得。
優選地，所述革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉由以下步驟制得：
使用ph值7.0～8.0的mrs培養基培養革蘭氏陽性細菌24h，測定其od600值達到1.0以上，滅活，濃縮，加入凍干賦形劑和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉。
優選地，所述革蘭氏陽性細菌由雙歧桿菌和乳酸桿菌按1:(0.2～1)的重量比組成。
優選地，所述凍干賦形劑為甘露醇、葡萄糖或蔗糖中的一種，優選為蔗糖。
需要指出的是，經上述方法制備得到的革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉含有多種活性物質：革蘭氏陽性細菌細胞碎片(優選為雙歧桿菌細胞碎片和乳酸桿菌細胞碎片)、細胞代謝物、mrs培養基成分等。其能誘導攝入的復合菌劑在蛋雞腸道內增殖，對蛋雞腸道具有全面調節、修復的功效，增強蛋雞腸道免疫力。
優選地，所述抗氧化劑選自維生素e、維生素c和茶多酚中的一種。更優選地，選擇茶多酚。
優選地，所述復合菌劑包括由干酪乳桿菌菌粉、德氏乳桿菌菌粉、黑曲霉菌粉和短小芽孢桿菌菌粉按重量比1:(1～3):(2～3):(1～2)混合而成；其中，干酪乳桿菌活菌數為1.4×106個/g，德氏乳桿菌活菌數為2.8×107個/g，黑曲霉活菌數為2.5×105個/g，短小芽孢桿菌活菌數為5.5×105個/g。
相應地，本發明還提供了一種制備上述的飼料添加劑的方法，包括以下步驟：
a)中藥組合物的制備：按1:(0.15～0.3):(0.2～0.5):(0.35～0.8)的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量6～10倍量體積分數為65～80％的乙醇，再加入藥材總量0.8％～1.0％的纖維素酶，在38～45℃下浸提1～2小時，然后在80～90℃回流提取3～6小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.10～1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，得到中藥組合物；
b)菊苣菊糖水解物的制備：稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量1～3倍的純化水，60～90℃浸提1～3次，每次1～3h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.15-1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，得到菊苣菊糖水解物；
c)革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉的制備：使用ph值7.0～8.0的mrs培養基培養革蘭氏陽性細菌24h，滅活，濃縮，加入凍干賦形劑和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉；
d)將上述中藥組合物、菊苣菊糖水解物和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉混合，攪拌均勻，加入氨基酸、沸石粉、維生素、抗氧化劑和復合菌劑，攪拌均勻，分裝，得到飼料添加劑。
與現有技術相比，本發明蛋雞飼料添加劑具有以下優勢：
1)本發明所述蛋雞飼料添加劑能夠誘導腸道有益菌群在蛋雞腸道內的增殖，從而在真正意義上實現對蛋雞腸道的調節和修復，增強蛋雞腸道的免疫力，降低蛋雞腸道疾病的發生，提高蛋雞成活率、飼料消化率和養雞效益，具有巨大的經濟效益，值得推廣應用。
2)本發明革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉能誘導復合菌劑在蛋雞腸道內的增殖，結合中藥組合物、菊苣菊糖水解物和其他成分為蛋雞的生長提高了全面充足的養分，通過試驗證明，本發明飼料添加劑能夠提高蛋雞的體重，降低料肉比，提高蛋雞的存活率。
具體實施方式：
以下通過具體實施方式的描述對本發明作進一步說明，但這并非是對本發明的限制，本領域技術人員根據本發明的基本思想，可以做出各種修改或改進，但是只要不脫離本發明的基本思想，均在本發明的范圍之內。
實施例1、一種飼料添加劑
本發明實施例1所述飼料添加劑由以下重量份數的原料制成：中藥組合物32份、氨基酸25份、沸石粉20份、維生素30份、抗氧化劑4份、菊苣菊糖水解物16份、復合菌劑15份和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉5份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.25:0.3:0.6的重量比制成。
本發明制備方法：
a)中藥組合物的制備：按1:0.32:0.3:0.5的重量比稱取敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉，將敗醬草、大薊和沙柳葉洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉總重量8倍量體積分數為75％的乙醇，再加入藥材總量0.8％的纖維素酶，在40℃下浸提2小時，然后在85℃回流提取4小時，過濾，濾液減壓濃縮至60℃下相對密度為1.20的浸膏，粉碎，噴霧干燥，加入橙皮苷，混合，得到中藥組合物；
b)菊苣菊糖水解物的制備：稱取菊苣根粗粉，加入粗粉重量2倍的純化水，80℃浸提2次，每次2h，過濾，合并浸提液，將浸提液減壓濃縮至60℃條件下測相對密度為1.25的浸膏，粉碎，噴霧干燥，得到菊苣菊糖水解物；
c)革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉的制備：使用ph值7.3的mrs培養基培養革蘭氏陽性細菌24h，滅活，濃縮，加入蔗糖和水，分裝，凍干，得到革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉，所述革蘭氏陽性細菌由雙歧桿菌和乳酸桿菌按1:1的重量比組成；
d)將上述中藥組合物、菊苣菊糖水解物和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉混合，攪拌均勻，加入氨基酸、沸石粉、維生素、抗氧化劑和復合菌劑，攪拌均勻，分裝，得到飼料添加劑。
其中，所述抗氧化劑為茶多酚；所述氨基酸由賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和甘氨酸按1:1:1:1的重量比組成；所述維生素由b1、維生素b2和維生素b3按1:1:1的重量比組成。
實施例2、一種飼料添加劑
本發明實施例2所述飼料添加劑由以下重量份數的原料制成：中藥組合物22份、氨基酸12份、沸石粉10份、維生素20份、抗氧化劑2份、菊苣菊糖水解物5份、復合菌劑10份和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉1份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.15:0.2:0.35的重量比制成。
制備方法參考實施例1所述制備方法。
實施例3、一種飼料添加劑
本發明實施例3所述飼料添加劑由以下重量份數的原料制成：中藥組合物50份、氨基酸30份、沸石粉30份、維生素40份、抗氧化劑6份、菊苣菊糖水解物20份、復合菌劑25份和革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉10份，其中，所述中藥組合物由敗醬草、大薊、橙皮苷和沙柳葉按1:0.3:0.5:0.8的重量比制成。
制備方法參考實施例1所述制備方法。
對比例1、一種飼料添加劑
對比例1與實施例1的區別在于，去掉革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉，其余參數及操作如實施例1。
對比例2：一種飼料添加劑
對比例2與實施例1的區別在于，用菊苣菊糖代替菊苣菊糖水解物，其余參數及操作如實施例1。
對比例3：一種飼料添加劑
對比例3與實施例1的區別在于，用雙歧桿菌細胞碎片和乳酸桿菌細胞碎片替代革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉，其余參數及操作如實施例1。
所述雙歧桿菌細胞碎片和乳酸桿菌細胞碎片的制備為：取雙歧桿菌細胞和乳酸桿菌細胞，滅活，高壓均漿，即得。
試驗例一、性能測試
取700只蛋雞分為7組，分為實施例1～3組和對比例1～3組樣品飼料(取實施例1～3以及對比例1～3制備得到的飼料添加劑，按1％的質量分數添加到基礎飼料中制備得到各組對應的樣品飼料)以及基礎飼料組，0-7日齡、7-14日齡、14-28日齡、28日齡-出欄，在這四個階段的養殖過程中，各組采用上述對應的樣品飼料喂養，統計各組蛋雞的耗料量、體重、料肉比和死亡數(見表1)。統計結束后，每組任選20只蛋雞處死，按以下方法測定腸道菌群：試驗雞脫頸處死，無菌采集十二指腸內容物置于實現稱重帶有玻璃珠的無菌三角瓶內，加入無菌生理鹽水稀釋，振蕩30min，取此稀釋液0.5ml于盛有4.5ml滅菌生理鹽水的離心管中，依次進行102～8倍遞進稀釋，用微量移液器分別取104、105、107、108倍稀釋液0.1ml，接種于麥康凱培養基、ss培養基、sl培養基，每個稀釋度3次重復，用玻璃棒涂勻，生化培養箱培養，計算菌落數并換算成每1g內容物所含菌落數，每1g腸內包含大腸桿菌、沙門氏菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌數的菌群數量以“cfu/g”表示，結果見表2。
表1各組生產性能指標統計表
表2蛋雞十二指腸內容物的測定結果(cfu/g)
由表1、2可知，本發明實施例1～3飼料添加劑能有效提高雙歧桿菌和乳酸桿菌在蛋雞腸道內的增殖，并且還能降低腸道有害菌的含量，這一點是發明人意想不到的。經對各組蛋雞的生產性能統計，證明，本發明飼料添加劑還能提高蛋雞的體重，降低料肉比，提高蛋雞的存活率。而從對比例1～3組試驗結果可以明顯看出，革蘭氏陽性細菌細胞提取物凍干粉具有誘導蛋雞腸道內有益菌的增殖作用，而明顯地，菊苣菊糖水解物更有利于提高蛋雞的質量。另外，通過對比例3可以看出，單獨使用雙歧桿菌細胞碎片和乳酸桿菌細胞碎片并不能誘導有益菌在蛋雞腸道內增殖。