一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，該工藝生產的脂肪經過物理固化保護的同時還進行了酶學修飾，在物理固化加強脂肪酶穩定性和抗酸性的同時采用對應的酶學修飾進一步提高其抗酸性和穩定性，酶學修飾尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，達到快速分解飼料中油脂的目的。
【專利說明】
一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝
技術領域
[0001]本發明涉及微生物次級代謝產物中脂肪酶用于加工飼料添加劑的技術領域，尤指一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝。
【背景技術】
[0002]在飼料中添加油脂能夠提高飼料的適口性、營養性和降低飼料在生產中產生的粉塵度等，但添加的大部分油脂難于被胃腸道吸收，過多的油脂一方面造成物料浪費，另一方面還會導致家畜腹瀉或消化不良等，現有技術針對油脂存在的不足提出在飼料中添加脂肪酶來促進飼料中油脂的消化，這一技術存在著飼料再造粒的時候會受到很大的機械擠壓，從而產生大量的機械摩擦熱，導致脂肪酶失活，若不進行造粒，飼料的適口性會下降的同時也存在油脂與飼料結塊等問題，綜上所述在飼料生產中直接添加脂肪酶的工藝在現有技術下不可取。
[0003]技術人員轉而在飼料添加劑中加入脂肪酶，在飼喂時與飼料混合從而消除以上不足，但單純的脂肪酶難于適應胃腸道的酸性環境，經家畜食用后經胃液后還未達到腸道所在的作用點就幾乎已經失活，哪怕有部分未失活再經腸液和膽汁的消化，最終未失活的脂肪酶幾乎為零，難于實現家畜食用脂肪酶后幫助消化飼料中油脂的目的。
【發明內容】
[0004]為解決上述問題，本發明提供了一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，該工藝生產的脂肪經過物理固化保護的同時還進行了酶學修飾，在物理固化加強脂肪酶穩定性和抗酸性的同時采用對應的酶學修飾進一步提高其抗酸性和穩定性，酶學修飾尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，達到快速分解飼料中油脂的目的。
[0005]為達到上述目的，本發明采用以下技術實現，一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，具體步驟如下，
a.胰蛋白酶修飾:脂肪酶經胰蛋白酶修飾后獲得修飾脂肪酶；
b.粗纖維膨脹處理:將干燥的粗纖維放置于水中浸泡0.5-3h，取出后自然濾干至表面沒有水分為止，將處理后的粗纖維放入真空桶內自然膨脹處理，獲得大孔隙粗纖維，將大孔隙粗纖維切割為2_5cm長的粗纖維片段；
c.粗纖維固化:將修飾脂肪酶溶于水后將粗纖維片段浸泡于修飾脂肪酶溶液中0.5-5h后將粗纖維片段取出進行冷凍干燥后獲得固化脂肪酶，修飾脂肪酶溶液中修飾脂肪酶與水的質量比為1:1-50;
d.成品加工:將固化脂肪酶、膨潤土和修飾脂肪酶按質量比5:3:1的比例加水混合獲得粘稠液，將粘稠液低速攪拌混合0.3-2h后進行低溫凍結獲得固體混合物，將固體混合物粉碎后進行冷凍干燥獲得成品。
[0006]作為本發明的進一步改進，所述干燥的粗纖維為將甘薯稍尖按10-20cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5-24h，將浸泡后的甘薯稍晾曬0.5-6h后棄除甘薯稍上的甘薯葉，將棄除甘薯葉后的甘薯稍用揉絲機進行揉絲處理，揉絲后經干燥處理的甘薯稍絲即為干燥的粗纖維。
[0007]作為本發明的進一步改進，所述胰蛋白酶修飾為將胰蛋白酶用Ph2.5-4.0的Hcl溶液配置為l_5mg/l的酶溶液，置于0-4°C冷藏備用獲得低溫酶溶液，將游離脂肪酶和低溫酶溶液加入到Ph為7-8的緩沖液中，在25-37°C的恒溫條件下處理20-60min后獲得修飾脂肪酶，其中游離脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白質質量比為1:1-5。
[0008]本發明與現有技術相比具有以下有益效果:
1、該工藝生產的脂肪經過物理固化保護的同時還進行了酶學修飾，在物理固化加強脂肪酶穩定性和抗酸性的同時采用對應的酶學修飾進一步提高其抗酸性和穩定性，酶學修飾尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，達到快速分解飼料中油脂的目的。
【具體實施方式】
[0009]實施例1
一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，具體步驟如下，
a.胰蛋白酶修飾:脂肪酶經胰蛋白酶修飾后獲得修飾脂肪酶；
b.粗纖維膨脹處理:將干燥的粗纖維放置于水中浸泡0.5h，取出后自然濾干至表面沒有水分為止，將處理后的粗纖維放入真空桶內自然膨脹處理，獲得大孔隙粗纖維，將大孔隙粗纖維切割為2cm長的粗纖維片段；
c.粗纖維固化:將修飾脂肪酶溶于水后將粗纖維片段浸泡于修飾脂肪酶溶液中0.5h后將粗纖維片段取出進行冷凍干燥后獲得固化脂肪酶，修飾脂肪酶溶液中修飾脂肪酶與水的質量比為1:1;
d.成品加工:將固化脂肪酶、膨潤土和修飾脂肪酶按質量比5:3:1的比例加水混合獲得粘稠液，將粘稠液低速攪拌混合0.3h后進行低溫凍結獲得固體混合物，將固體混合物粉碎后進行冷凍干燥獲得成品，所述干燥的粗纖維為將甘薯稍尖按1cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5h，將浸泡后的甘薯稍晾曬0.5h后棄除甘薯稍上的甘薯葉，將棄除甘薯葉后的甘薯稍用揉絲機進行揉絲處理，揉絲后經干燥處理的甘薯稍絲即為干燥的粗纖維，所述胰蛋白酶修飾為將胰蛋白酶用Ph2.5的He I溶液配置為lmg/1的酶溶液，置于O °C冷藏備用獲得低溫酶溶液，將游離脂肪酶和低溫酶溶液加入到Ph為7的緩沖液中，在25°C的恒溫條件下處理20min后獲得修飾脂肪酶，其中游離脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白質質量比為1:1。
[0010]實施例2
一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，具體步驟如下，
a.胰蛋白酶修飾:脂肪酶經胰蛋白酶修飾后獲得修飾脂肪酶；
b.粗纖維膨脹處理:將干燥的粗纖維放置于水中浸泡2h，取出后自然濾干至表面沒有水分為止，將處理后的粗纖維放入真空桶內自然膨脹處理，獲得大孔隙粗纖維，將大孔隙粗纖維切割為3cm長的粗纖維片段；
c.粗纖維固化:將修飾脂肪酶溶于水后將粗纖維片段浸泡于修飾脂肪酶溶液中0.5-5h后將粗纖維片段取出進行冷凍干燥后獲得固化脂肪酶，修飾脂肪酶溶液中修飾脂肪酶與水的質量比為1: 25;
d.成品加工:將固化脂肪酶、膨潤土和修飾脂肪酶按質量比5:3:1的比例加水混合獲得粘稠液，將粘稠液低速攪拌混合I.5h后進行低溫凍結獲得固體混合物，將固體混合物粉碎后進行冷凍干燥獲得成品，所述干燥的粗纖維為將甘薯稍尖按15cm—段采摘后放置于清水中浸泡llh，將浸泡后的甘薯稍晾曬3h后棄除甘薯稍上的甘薯葉，將棄除甘薯葉后的甘薯稍用揉絲機進行揉絲處理，揉絲后經干燥處理的甘薯稍絲即為干燥的粗纖維，所述胰蛋白酶修飾為將胰蛋白酶用Ph3.0的He I溶液配置為3mg/l的酶溶液，置于2 °C冷藏備用獲得低溫酶溶液，將游離脂肪酶和低溫酶溶液加入到Ph為7.5的緩沖液中，在30°C的恒溫條件下處理40min后獲得修飾脂肪酶，其中游離脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白質質量比為1:3。
[0011]實施例3
一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，具體步驟如下，
a.胰蛋白酶修飾:脂肪酶經胰蛋白酶修飾后獲得修飾脂肪酶；
b.粗纖維膨脹處理:將干燥的粗纖維放置于水中浸泡3h，取出后自然濾干至表面沒有水分為止，將處理后的粗纖維放入真空桶內自然膨脹處理，獲得大孔隙粗纖維，將大孔隙粗纖維切割為5cm長的粗纖維片段；
c.粗纖維固化:將修飾脂肪酶溶于水后將粗纖維片段浸泡于修飾脂肪酶溶液中5h后將粗纖維片段取出進行冷凍干燥后獲得固化脂肪酶，修飾脂肪酶溶液中修飾脂肪酶與水的質量比為1:50;
d.成品加工:將固化脂肪酶、膨潤土和修飾脂肪酶按質量比5:3:1的比例加水混合獲得粘稠液，將粘稠液低速攪拌混合2h后進行低溫凍結獲得固體混合物，將固體混合物粉碎后進行冷凍干燥獲得成品，所述干燥的粗纖維為將甘薯稍尖按20cm—段采摘后放置于清水中浸泡24h，將浸泡后的甘薯稍晾曬6h后棄除甘薯稍上的甘薯葉，將棄除甘薯葉后的甘薯稍用揉絲機進行揉絲處理，揉絲后經干燥處理的甘薯稍絲即為干燥的粗纖維，所述胰蛋白酶修飾為將胰蛋白酶用Ph4.0的Hcl溶液配置為5mg/l的酶溶液，置于4°C冷藏備用獲得低溫酶溶液，將游離脂肪酶和低溫酶溶液加入到Ph為8的緩沖液中，在37°C的恒溫條件下處理60min后獲得修飾脂肪酶，其中游離脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白質質量比為1: 5。
【主權項】
1.一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，包括胰蛋白酶修飾、粗纖維膨脹處理、粗纖維固化、成品加工，具體步驟如下， a.胰蛋白酶修飾:脂肪酶經胰蛋白酶修飾后獲得修飾脂肪酶； b.粗纖維膨脹處理:將干燥的粗纖維放置于水中浸泡0.5-3h，取出后自然濾干至表面沒有水分為止，將處理后的粗纖維放入真空桶內自然膨脹處理，獲得大孔隙粗纖維，將大孔隙粗纖維切割為2-5cm長的粗纖維片段； c.粗纖維固化:將修飾脂肪酶溶于水后將粗纖維片段浸泡于修飾脂肪酶溶液中0.5-5h后將粗纖維片段取出進行冷凍干燥后獲得固化脂肪酶，修飾脂肪酶溶液中修飾脂肪酶與水的質量比為1:1-50; d.成品加工:將固化脂肪酶、膨潤土和修飾脂肪酶按質量比5:3:1的比例加水混合獲得粘稠液，將粘稠液低速攪拌混合0.3-2h后進行低溫凍結獲得固體混合物，將固體混合物粉碎后進行冷凍干燥獲得成品。2.根據權利要求1所述一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，其特征在于:所述干燥的粗纖維為將甘薯稍尖按10-20cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5-24h，將浸泡后的甘薯稍晾曬0.5-6h后棄除甘薯稍上的甘薯葉，將棄除甘薯葉后的甘薯稍用揉絲機進行揉絲處理，揉絲后經干燥處理的甘薯稍絲即為干燥的粗纖維。3.根據權利要求1或2所述一種具有高穩定性高活性的飼料用脂肪酶生產工藝，其特征在于:所述胰蛋白酶修飾為將胰蛋白酶用Ph2.5-4.0的Hcl溶液配置為l-5mg/l的酶溶液，置于0-4 °C冷藏備用獲得低溫酶溶液，將游離脂肪酶和低溫酶溶液加入到Ph為7-8的緩沖液中，在25-37 °C的恒溫條件下處理20-60min后獲得修飾脂肪酶，其中游離脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白質質量比為1:1-5。
【文檔編號】C12N9/20GK105995037SQ201610351280
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月25日
【發明人】王春
【申請人】昆明諾本科技有限公司