專利名稱：丹酚酸b在制備治療腫瘤藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥領域，尤其涉及丹酚酸B的應用，特別是丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用。
丹參是我國的傳統中藥，具有活血化瘀、通經活絡的功效。丹酚酸B是丹參的水溶性有效成分之一，其化學結構如下 其中，F為金屬陽離子，這些年的研究發現，水溶性成份是丹參中重要有效成份，由于丹參酚酸難于獲得純品，而丹參素和原兒茶醛較易分離和合成，所以大多數制藥廠把丹參素和原兒茶醛作為丹參注射劑的質量控制指標，也有部分制藥廠將丹酚酸B鹽用于預防心腦血管疾病、預防老年性癡呆，治療腎衰竭，改善尿毒癥狀、抗氧化、抗血栓、抗心腦缺血、保護肝臟及調節血脂等藥物中。
其中，橫坐標表示丹酚酸B溶液的濃度，單位為umol/L；縱坐標表示吸光度值(A)。1為SK-Hep1細胞株，2為Huh-7細胞株，3為SMMU-7721細胞株，4為H22細胞株，5為Hela細胞株。
圖2為丹酚酸B對移植性肝癌小鼠存活時間的影響。
其中，橫坐標表示時間(天數)，縱坐標表示存活小鼠的只數，■為不給藥組，▲為給藥組。
圖3為丹酚酸B對化學誘癌大鼠肝癌的治療作用圖。
其中，■為腫瘤組，□治療組， 為正常組。
實施例2丹酚酸B抑制腫瘤細胞生長的劑量效應關系圖選擇人肝癌細胞株SK-Hepl，Huh7，SMMU-7721，小鼠肝癌細胞株H22，人子宮頸癌細胞株Hela進行實驗(除Hela細胞株購自中科院上海細胞生物學研究所細胞庫外，以上細胞株皆由瑞德肝臟疾病研究所饋贈)。用含10％小牛血清的RPMI-1640(購自Sigma)培養液分別培養上述細胞，以0.25％胰酶(購自Sigma)消化單層細胞，制備細胞懸液，并將細胞濃度調至1×105/ml。取96孔培養板，每孔加入100ul細胞懸液，培養過夜，使細胞貼壁。吸去培養液，加入含丹酚酸B的培養液，丹酚酸B終濃度分別為0.27、2.7、27、270umol/L，48小時后用四氮唑鹽(MTT)(購自Sigma)還原法觀察其對腫瘤細胞的作用。
圖1顯示各濃度的丹酚酸B對腫瘤細胞都有抑制作用，并具有劑量效應關系。
實施例3丹酚酸B對動物接種性腫瘤的治療作用取20只C57小鼠(雌雄兼用，體重18-22g，購自上海實驗動物中心)，每只小鼠皆皮下接種濃度為1×107/ml的Hep1-6肝癌細胞；16天后小鼠體內長出直徑為1-2cm的腫瘤。此時將小鼠分為兩組，即對照組和治療組，每組10只。從第17天起治療組小鼠腹腔注射丹酚酸B溶液，每天一次，劑量為100mg/kg(丹酚酸B溶液的濃度為5mg/ml，用生理鹽水配制)；對照組小鼠每天腹腔注射等容積生理鹽水一次作為對照。如圖2所示，結果表明，治療組小鼠的生存時間延長。
實施例4丹醋酸B對動物化學誘導性腫瘤的治療作用將36只Wistar大鼠(雌雄兼用，體重180-220g，購自上海實驗動物中心)分為三組，即正常對照組、模型對照組和丹酚酸B治療組，每組12只。正式實驗開始前，先給予模型對照組和丹酚酸B治療組大鼠飲用0.01％二乙基亞硝胺溶液3個月，以達到誘發體內產生腫瘤的目的；而正常組大鼠在此期間仍給予正常的飲食。造模成功后，依下列方法對各組大鼠進行處理1.正常對照組腹腔注射生理鹽水2.腫瘤對照組腹腔注射生理鹽水；3、丹酚酸B治療組腹腔注射濃度為5mg/ml的丹酚酸B溶液，每天一次，劑量為50mg/kg(丹酚酸B溶液采用生理鹽水配制)。治療30天后將各組大鼠處死取血，檢測血中血清白蛋白(albumin，ALB)、谷丙轉氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、γ一谷氨酰轉肽酶(γ-glutamyltransferase，γ-GT)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)的含量。如圖3所示，結果表明丹酚酸B治療組的化驗指標較腫瘤對照組明顯好轉。
權利要求
1，丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用。
2，如權利要求1所述的丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的丹酚酸B的鹽類中，其陽離子為鐵離子、鈉離子、鉀離子鈣離子、或鎂離子。
3，如權利要求1或2所述的丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的丹酚酸B的鹽類中，其陽離子為鎂離子。
4，如權利要求1所述的丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的制備治療腫瘤的藥物的劑型為任何一種藥劑學上所述的劑型。
5，如權利要求1所述的丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用，其特征在于所述的制備治療腫瘤的藥物的劑型為口服液型、針劑型、片劑型或膠囊型。
全文摘要
本發明提供了一種丹酚酸B的新的用途，即丹酚酸B在制備治療腫瘤藥物中的應用。體外研究表明丹酚酸B對腫瘤細胞有殺傷作用，動物體內實驗證明其具有抗腫瘤療效。在本發明中所述的丹酚酸B鹽類中的陽離子可以為鐵離子、鈉離子、鉀離子，鈣離子、鎂離子，優選的為鎂離子。本發明所述的制備治療腫瘤的藥物的劑型可以為任何一種藥劑學上所述的劑型，可以為口服液型，針劑型、片劑型或膠囊型。
文檔編號A61P35/00GK1408353SQ02136970
公開日2003年4月9日 申請日期2002年9月13日 優先權日2002年9月13日
發明者謝天培, 顧心彬, 季紅光 申請人:上海天甲生物醫藥有限公司