加強靜脈內雌莫司汀磷酸鹽作用的方法

專利名稱：加強靜脈內雌莫司汀磷酸鹽作用的方法
技術領域：
本發明涉及雌莫司汀磷酸鹽作為大劑量輸液的用途，雌莫司汀磷酸鹽是一種雌二醇-17b-磷酸鹽的非氮芥氨基甲酸酯衍生物。本發明進一步涉及靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽作用的方法和通過雌莫司汀磷酸鹽靜脈內給藥來治療癌癥的方法。
背景技術：
已經證明細胞毒作用是由完整的雌莫司汀分子所引起的(Hartley-Asp，1982)。組織培養研究顯示，雌莫司汀(EM)是一種抗有絲分裂劑，具有阻滯分裂中期的腫瘤細胞分化，這種阻滯作用視劑量而定(Hartley-Asp，1984)。中期停止已知是由藥物對微管結構的干擾作用所引起的，該微管結構形成有絲分裂紡錘體。借助于免疫組織化學研究表明，對分裂間期微管與劑量有關的障礙作用發生在培養的人前列腺細胞中(Mareel 1988，Dahllof 1993)。體外EM處理抑制了僅由微管蛋白組成的微管形成，這就證明EM直接干擾微管蛋白(Dahllof，1993)。另外，已經證實了它與微管有關的蛋白質(MAPs)的干擾作用(Stearns，1988)。MAPs是大分子蛋白質，據信對穩定微管有重要作用。體內已經確認，EM表現出抗有絲分裂劑的作用機制(Eklv，1992)。
因此，雌莫司汀磷酸鹽是一種抗有絲分裂劑，目前用于治療嚴重前列腺癌。作為單一的試劑，它對激素不應的前列腺癌的活性比得上由國家前列腺癌項目在一系列多機構、隨機化試驗中所研究的其他幾種細胞毒試劑(Murphy，1983)。該藥物通常是以10-15mg/kg/天的劑量口服給藥的，也有若干國家批準了靜脈內給藥。不過，雌莫司汀磷酸鹽在靜脈內給藥時，是按照平行于口服給藥劑量的預定方案進行的，也就是說建議劑量為每天靜脈內給以300-600mg，通常在連續幾天內反復給藥。然后再口服給藥。
在公開的資料中，可以找到先用靜脈內制劑治療、然后再進行口服治療的大約500例患者的詳細情況。在這些研究中典型的情況是，先每天使用300-600mg，靜脈內給藥7-21天，然后每天口服給藥。給藥時通過緩慢的靜脈內注射或大丸劑的方式，劑量為300mg/天，外周靜脈內注射部位的血栓靜脈炎和局部刺激作用被認為是要求在多數患者中確立中樞靜脈給藥或治療停止的給藥方法的主要局限。在450mg/天的劑量水平下，Nagel和Klln(1977)說該劑量水平導致如此“嚴重的胃腸道問題，因此采用300mg/天作為每天靜脈內給藥的最大劑量”。在由Andersson等編輯的一部著作中，在245例接受300-600mg/天給藥21天、然后是相同劑量每周一次或兩次給藥2個月的患者中，20％患者表現血栓靜脈炎，17％表現胃腸道問題，9％表現肝功能障礙。由該反復性給藥方案導致的毒性作用通常要求停止給藥(Lundgren，1995)。Maier(1990)報道，以900mg/天靜脈內給藥7-10天、然后進行口服治療的患者中，有11至18例(61％)雖沒有靜脈炎，但出現嚴重的肝問題，并且有一例由于毒性肝功能衰竭死亡。
因此，現有技術的典型情況是利用雌莫司汀磷酸鹽的靜脈內制劑作為單一試劑，繼之以長期口服雌莫司汀的療法。而且，由于毒性，一般認為大劑量雌莫司汀磷酸鹽的靜脈內給藥是應當禁止的。對現有技術來說，雌莫司汀磷酸鹽以可行的靜脈內方式單次量、大劑量給藥，既不是已知的，也不是顯而易見的。盡管口服給藥劑量曾高達1200mg/m2(Keren-Rosenberg，1997)，不過藥物代謝和生物利用度上的差異不允許對大劑量的靜脈內制劑進行推斷，因為口服給藥后的氧化雌莫司汀(estromustine)的相對生物利用度僅為44％(Gunnarsson，1984)，還因為與靜脈內制劑相反，口服制劑中的磷酸鹽部分發生脫磷酸作用。而且，現有技術并不知道靜脈內雌莫司汀磷酸鹽能夠用在聯合的化療方案中，包括大劑量靜脈內雌莫司汀磷酸鹽的使用。而且，現有技術也不知道，靜脈內雌莫司汀磷酸鹽除了前列腺癌適應癥以外，還對許多癌癥具有臨床效用。
在前人的工作中，本發明的共同發明人Beryl Hartley-Asp博士第一個認識到雌莫司汀磷酸鹽與其他細胞毒試劑的協同作用(Mareel，1988)。若干實驗證明，長時間接受雌莫司汀是實現提高功效所必需的。因此，每日給藥被視為是必需的，使得按以前靜脈(IV)制劑資料使用口服制劑，暗示用IV給藥在臨床上不會達到恒定的較高水平。
雌莫司汀和其他很多細胞毒試劑已顯示出體外對細胞的附加的且可能是協同的抗微管作用(Mareel 1988，Speicher 1992，Pienta 1993，Batra 1996)。因此，對人使用雌莫司汀磷酸鹽口服制劑完成了雌莫司汀磷酸鹽和其他藥物的組合。聯合使用雌莫司汀磷酸鹽與長春花堿已經進行了激素不應的前列腺癌的II期試驗(Seidman 1992，Hudes 1992，Pienta 1994，Hudes 1996)。在這些試驗中，88例患者證實前列腺特異性抗原減少了50-75％。最常見的毒性也緩和成為中度惡心。特別值得注意的是，顯著的心血管毒性的發生率為10.5％(4/37)，包括一例深度靜脈血栓形成(DVT)，一例心肌梗塞，一例充血性心衰發作，和一例可逆的神經病，這些患者需要停止治療，這些毒性作用是由雌莫司汀磷酸鹽引起的。在由Pienta等(1994)進行的另一個II期試驗中，雌莫司汀磷酸鹽(口服)與依托泊甙聯合使用。評價了五十二例患者包括20例軟組織疾病患者，其中觀察到3例完全反應(CR)(15％)，6例部分反應(PR)(30％)。32例骨轉移腫瘤患者中，8例改善(25％)，12例穩定(38％)。共有13例男性(25％)的前列腺特異性抗原減少了75％，28例男性(54％)減少了50％。對十七例激素不應的前列腺癌患者進行了紫杉酚(Hudes，1992)與雌莫司汀磷酸鹽的I-II期研究。六例患者的減少水平是可測量的，其中3例的PR為2+、6和8個月。前列腺特異性抗原(PSA)減少≥50％的占58.8％。反應的中位持續時間為7個月。2例患者發生3-4級粒性白細胞減少和粘膜炎，70.5％發生1-2級惡心，一例患者為3級。8例患者(47％)見到水腫，6例患者(35.2％)發生1-3級一過性肝臟酶水平升高。
最近的一項研究中，Petrylak等(1997)用逐步增加劑量的docetaxel與雌莫司汀磷酸鹽口服給藥證明，總的前列腺特異性抗原反應率為62％。在二維可測量的疾病患者中，3例(43％)實現了淋巴結的部分反應，1例實現了坐骨群的較小反應。這證明，與口服雌莫司汀的聯合治療是有效的。不過，聯合靜脈內雌莫司汀磷酸鹽與這些細胞毒試劑是本領域所未知的。雌莫司汀磷酸鹽的口服與靜脈內制劑在代謝上的差異，特別是關于磷酸鹽部分，使與靜脈內制劑的聯合療法是非顯而易見的。
與其他抗有絲分裂劑不同的是，雌莫司汀磷酸鹽的作用似乎依賴于雌莫司汀結合蛋白(EMBP)的存在(Eklv，1996)。這一點僅是在正常條件下的前列腺中發現的(Forsgren 1979，Flucher 1989)。不過，在很多癌性組織，以及前列腺腫瘤，例如肺、乳腺神經膠質瘤、結腸、胰腺中也鑒別出了類似的蛋白質(Bjrk 1991，Bergh 1988，Eklv 1996，Edgren 1996，Von Schoultz 1994，Bergenheim 1993)。這種蛋白質與雌莫司汀及氧化雌莫司汀(EaM及EoM)結合的親和力非常高，被認為是負責將EoM選擇性保留在前列腺腫瘤中，其中在分別用雌莫司汀磷酸鹽口服和靜脈內給藥治療的前列腺癌患者中發現，血漿/腫瘤之比為1∶6至1∶11(Norlen 1988，Walz 1988)。最近，我們已經證實了在雌莫司汀磷酸鹽一次性靜脈內對患者給藥后，在徹底的前列腺切除術之前的人前列腺腫瘤中EMBP水平與EaM及EoM水平之間的相互關系，說明EMBP可能是藥物保留的原因(Walz，1996)。
作為參考文獻，本發明除全文引用1998年3月27日申請的美國臨時申請60/079542號外，還引用下列參考文獻1.Andersson SB，Lundgren R，Svensson L氣相色譜測量血漿中四種雌莫司汀磷酸鹽的代謝物(Gas chromatographic determination of fourmetabolites of estramustine phosphate on plasma)，Acta Pharm.Suec191-10，1982；2.Batra S，Karlsson R，Witt L雌莫司汀增強長春花堿和阿霉素在前列腺腫瘤細胞中的細胞毒作用(Potentiation by estramustine of the cytotoxic effect ofvinblastine and doxorubicin in prostatic tumor cells)，Int J Cancer 681-6，199；3.Bergenheim AT，Gunnarsson PO，Edman K，von Schoultz E，Hariz MIHenriksson R在人體惡性腦腫瘤中雌莫司汀的吸收與保留以及雌莫司汀結合蛋白的存在(Uptake and retention of estramustine and the presence ofestramustine binding protein in malignant brain tumors in humans)，Br J Cancer67358-361，1993；4.Bergh J，Bjrk P，Westlin J-E，Nilsson S雌莫司汀結合有關蛋白在人肺癌細胞株內的表達(Expression of an Estramustine-binding associated protein inhuman lung cancer cell lines)，Cancer Res 484615-4619，1988；5.Bjrk P，Borg A，Fem M，Nilsson S雌莫司汀結合蛋白(EMBP)在人乳腺癌和惡性黑素瘤中的表達與部分特性記述(expression and partialcharacterization of estramustine-binding protein(EMBP)in human breast cancerand malignant melanoma)，Anticancer Res 11(3)1173-1182，1991；6.bjrk P，Jonsson U，Andrén-Sandberg □雌莫司汀磷酸鹽(Estracyt⑧)在鼠和不同于胰腺雌激素結合蛋白的人胰腺中的細胞毒代謝物的結合位點(Binding sites for the cytotoxic metabolites of Estramustine phosphate(Estracyt⑧)in rat and human pancreas that are distinct from pancreaticEstrogen-binding protein)，Pancreas 6177-89，1991；7.Dahllf B，Hartley-Asp B，Billstrm A，Cabral F雌莫司汀通過與微管蛋白結合解聚微管(Estramustine depolymerizes microtubules by binding totuulin)，Cancer Res 534573-4581，1993；8.Edgren M，Westlin JE，Letocha et al在腎細胞瘤免疫組織化學法、免疫閃爍照相法中的雌莫司汀結合蛋白(EMBP)以及體外雌莫司汀的有效作用(Estramustine-binding protein(EMBP)in renal cell carcinomaimmunohistochemistry，immunoscintigraphy and in vitro estramustine effects)，Acta Oncol 35(4)483-488，1996；9.Eklv S et al.，雌莫司汀體內對人前列腺瘤細胞的非雌激素抑制細胞作用的根據(Evidence for a non-estrogenic cytostatic effect of estramustine onhuman prostatic carcinoma cells in vivo)，The Prostate 2043-50；1992；10.Eklv S，Mahdy E，Wester K et al.在四種不同細胞株內雌莫司汀結合蛋白(EMBP)的含量及其與雌莫司汀誘發的中期停滯的相關性(Estramustine-binding protein(EMBP)content in four different cell lines and itscorrelation to estramustine induced metaphase arrest)，Anticancer Res 16(4A)1819-1822，1996；11.Flüchter S，Nelde HJ， Bjrk P et al.治療對雌莫司汀結合蛋白(EMBP)在前列腺癌癥患者中表達的影響免疫組織化學法的研究(Effect oftreatment on the expression of estramustine-binding protein(EMBP)in prostaticcancer patientsAn immunohistochemical study)，The Prostate 1427-43，1989；12.Forsgten B，Bjrk P，Carlstrm K，Gustafsson J□，Pusette A，HogbergB在鼠前列腺中與雌莫司汀、雌二醇-17β的氮芥衍生物結合的主要蛋白的提純與分布(Purification and distribution of a major protein in rat prostate that bindsestramustine，a nitrogen mustard derivative of estradiol-17β)，Proc.Natl.Acad.Sci USA763149-3153，1979；13.Gunnarsson PO，Andersson S-B，Johansson S-A et al.雌莫司汀磷酸鹽(Estracyt⑧)在前列腺癌癥患者中的藥物代謝動力學(Pharmacokinetics ofestramustine phosphate(Estracyt⑧)in prostatic cancer patients)，EurJ.Clin.Pharmacol，26113-119，1984；14.Gunnarsson PO，Plym Forshell G，Fritjofsson A，Norlén BJ在以不同劑量的雌莫司汀磷酸鹽((Estracyt⑧)治療的前列腺瘤患者中雌莫司汀磷酸鹽及其主要代謝物的血漿濃度(Plasma concentration of Estramustinephosphate and its major metabolites in patients with prostatic carcinoma treatedwith different doses of Estramustine phosphate(Esstracyt⑧))，Scand J.UrolNephrol 15201-206，1981；15.Hartley-Asp B在兩例人前列腺瘤細胞株DU 145和PC-3內雌莫司汀誘發的有絲分裂停滯(Estramustine induced mitotic arrest in two humanprostatic carcinoma cell lines DU 145 and PC-3)，The Prostate 593-100，1984；16.Hartley-Asp B，Gunnarsson PO用雌莫司汀、nor-nitrogen mustard、雌二醇和人前列腺癌細胞株(DU 145)的睪酮處理后的生長與存活細胞(Growth and cell survival following treatment with estramustine，nor-nitrogenmustard，estradiol and testosterone of a human prostatic cancer cell line (DU145))，J Urology 127818-822，1982；17.hudes G，Obasaju C，Chapman A，Gallo J，McAleer C，Greenberg RPaclitaxel和雌莫司汀的I期研究在激素不應前列腺癌中的初步活性(PhaseI study of Paclitaxel and EstramustinePreliminary activity in hormonerefractory prostate cancer)，Sem Oncol，vol.223，Suppl 66-11，1995；
18.Hudes GR，GreenbergR，Krigel RL，Fox S，et al.雌莫司汀和長春花堿，兩種微管抑制劑，在激素不應前列腺癌中的II期研究(Phase II study ofestramustine and vinblastine，two microtubule inhibitors，in hormone-refractoryprostate cancer)，J Clin Oncol 101754-1761，1992；19.Keren-Rosenberg，S.Muggia，FM雌莫司汀磷酸鹽和紫杉醇在嚴重乳腺癌患者體內的反應I期研究(Response to estramustine phosphate andpaclitaxelin patients with advanced breast cancerA Phase I Study)，Seminarsin Oncology 245 S3-26-S3-29，1997；20.Lindberg B用Estracyt使前列腺瘤快速好轉的治療(Treatment ofrapidly of progressing prostatic carcinoma with Estracyt)，Journal of Urol108303-305，1972；21.Maier U，Hienert G，Simak R雌莫司汀磷酸鹽在前列腺繼發性抗激素的腫瘤中(Estramustine phosphate in secondaty hormone-resistant carcinomaofthe prostate)，Eur Urol 17216-218，1990；22.Mareel MM，Storme GA，Dragonetti CH，De Bruyne GK，Hartley-Asp B，Segers JL，Rabaey ML，雌莫司汀對惡性MO4鼠細胞和體外對DU 145人前列腺腫瘤細胞的抗侵害活性(Antiinvasive activity of estramstine on malignantMO4mouse cells and DU 145 human prostate carcinoma cells in vitro)，CancerRes.，481842-1849，1988；23.Murphy GP，Slack NH，Mittleman A使用雌莫司汀磷酸鹽(Estracyt，Emcyt)的經驗(Experiences with Estramustine Phosphate(Estracyt，Emcyt)in prostate cancer)，Seminars in oncology 10(3)Suppl 3，34-42，1983；24.Nagel R，Klln C-P用雌莫司汀磷酸鹽治療嚴重的前列腺腫瘤(Treatment of advanced carcinoma of the prostate with estramustine phosphate)，British Journal of Urol 4973--79，1977；25.Norlén，B.J.，Andersson S.B.，Bjrk P.，Gunnarsson PO.，Fritjofsson □，雌莫司汀磷酸鹽(Estracyt)代謝物在前列腺癌中的吸收(Uptake of Estramustinephosphate(Estracyt)metabolites in prostate cancer)，Journal of Urology1401058-1062，1988；
26.Petrylak DP，Shelton GB，Mac Arthur RB et al.Docetaxel-雌莫司汀在雄激素不敏感的前列腺癌中的I期試驗(Phase I trial of DocetaXel-Estramustinein androgen insensitive prostate cancer)，Cancer Investigation 16，Supp 162，1997；27.Pienta KJ，Lehr JE借助于雌莫司汀和依托泊甙抑制前列腺癌的生長在核基質下相互作用的依據(Inhibition of prostate cancer growth byestramustine and etoposideEvidence for interaction at the nuclear matrix)，Journal of Urol 1491622-1625，1993；28.Pienta KJ，Redman B，Hussain M，Cummings G et al.在激素不應前列腺癌中口服雌莫司汀和口服依托泊甙的II期評價(Phase II evaluation of oralestramustine and oral etoposide in hormone-refractory adenocarcinoma of theprostate)，J Clin Oncol 122005-2012，1994；29.Seidman AD，Scher HI，Petrylak D，Dershaw DD，Curley T雌莫司汀和長春花堿前列腺特異抗原作為激素不應前列腺癌的臨床試驗終點的用途(Estramustine and vinblastineUse ofprostate specific antigen as a clinical trialend point for hormone refractory prostatic cancer)，J Urol 147931-934，1992；30.Speicher LA，Barone L，Tew KD雌莫司汀和紫杉酚在人前列腺腫瘤細胞株中的復合抗微管活性(Combined antimicrotubule activity of estramustine andTaxol in human prostatic carcinoma cell lines)，Cancer Res 524433-4440，1992；31.Stearns M，Tew KD雌莫司汀與MAP-2結合以體外抑制微管形成(Estramustine binds MAP-2 to inhibit microtubule assembly in vitro)，J CellScience 89331-342，1988；32.von Schoultz E，Carlstrm K，Henriksson R et al.初生腫瘤中的雌莫司汀結合蛋白和惡性黑素瘤的轉移酶(metastases)(Estramustine binding proteinin primary tumors and metastases of malignant melanoma)，Melanoma Res4(6)401-405，1994；33.Walz PH，Bjrk P，Edman K，Gunnarsson PO，Hartley-Asp B單次量輸注前列腺癌患者后雌莫司汀磷酸鹽代謝物雌莫司汀的吸收和分布(Uptakeand distribution of the estramustine-phosphate metabolite estrsmustine aftersingle-dose injection in patients with prostatic cancer)，Akt Urol 2792-93，1996；34.Lundgren.R，Estracyt intravenost for behandling avhormonreftraktarprostatacancerSvenska Lakaresallskapets Rikstamma，1995。
發明概述本發明描述了加強靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽的治療用途和功效的方法。該方法提供了劑量超過1300mg的雌莫司汀磷酸鹽的靜脈內給藥。它還提供了劑量超過950mg/m2(每平方米體表面積毫克數)的雌莫司汀磷酸鹽的靜脈內給藥。它進一步提供了雌莫司汀磷酸鹽的一次性、大劑量靜脈內給藥，而且給藥可以是每周或更長時間一次。本發明優化了藥代動力學，使治療效果達到最大，進一步使靜脈內雌莫司汀磷酸鹽與其他治療聯合使用成為可能，包括其他進一步提高治療效果的化療。本發明能夠使用靜脈內雌莫司汀磷酸鹽作為多種類型腫瘤，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、結腸直腸、黑素瘤、胰腺和腦癌的療法。
因此，本發明的一個應用是提供大劑量的雌莫司汀磷酸鹽靜脈內治療，其中劑量超過950mg/m2。
另一個應用是提供靜脈內給藥的方案，由此該方案能夠優化雌莫司汀磷酸鹽的藥代動力學及其代謝產物，使毒性最小，以及由此所述優選法進一步使聯合治療方案方便有效。
因此，本發明的一個應用是允許靜脈內雌莫司汀磷酸鹽與其他治療制度聯合使用，包括細胞毒化療。
本發明的另一個應用是提供一種方法，該方法提高了雌莫司汀磷酸鹽或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合蛋白樣蛋白質(EMBP)結合的飽和度，延長了結合的持續時間。
由此，本發明提供通過靜脈內給藥治療具有EMBP的癌癥的應用，包括但不限于前列腺、乳腺、肺、卵巢、結腸直腸、黑素瘤、胰腺和腦癌。
本發明的另一個應用是提供快速緩解癌癥繼發癥狀的方法，包括但不限于由癌癥引起的疼痛和尿路梗阻。
另外，本發明進一步使這些應用能夠適用于不受制劑支配的靜脈內雌莫司汀磷酸鹽。由此，本發明提供游離藥物、蛋白質結合藥物或脂質體內藥物形式的雌莫司汀磷酸鹽輸液。
由此，本發明描述了一種雌莫司汀磷酸鹽制劑，其中的雌莫司汀磷酸鹽和脂質體一起以靜脈內方式給藥。
因此，本發明的方法是極為出人意料的，該方法中，安全并且以有效方案給藥的劑量能夠達到900mg/m2以上(一般每劑大于1300mg)。
本發明給出了靜脈內雌莫司汀與其他化療劑聯合使用的優點。本發明進一步給出了大劑量靜脈內雌莫司汀與其他化療劑聯合使用的優點。
我們在本發明中給出，靜脈內雌莫司汀磷酸鹽可以用于治療具有高水平EMBP樣蛋白(這里簡稱為EMBP)的腫瘤。
根據比較雌莫司汀磷酸鹽口服給藥后的藥代動力學數據與大劑量雌莫司汀磷酸鹽靜脈內給藥后的藥代動力學數據，可以認識到本發明新穎的和非顯而易見的應用。有關大劑量靜脈內雌莫司汀磷酸鹽的藥代動力學和毒性數據是本技術領域未知的。雌莫司汀磷酸鹽口服給藥后在人體內的主要代謝步驟是，雌莫司汀磷酸鹽通過脫磷酸作用成為雌莫司汀(EM)，然后在17位氧化成為氧化雌莫司汀(EoM)，后者是EM的雌酮類似物。當雌莫司汀磷酸鹽按每日口服方案給藥時，血漿中找到的主要代謝產物是EoM。基于氧化雌莫司汀的相對生物利用度大約是44％(Gunnarsson，1984)。靜脈內給藥后，血漿中最初找到的是雌莫司汀磷酸鹽，但是它迅速水解為與口服給藥后所找到的相同代謝產物，主要代謝產物是氧化雌莫司汀。雌莫司汀和氧化雌莫司汀通過氨基甲酸酯分解分別產生大約15％雌二醇和雌酮而進一步代謝(Gunnarsson，1981，1984)。我們已經證實，大劑量靜脈內給藥后，主要代謝產物氧化雌莫司汀意外地長時間可供利用，這可以帶來意外的臨床上的有益效果。以前的用300mg單次量靜脈內給藥治療的患者數據證明，氧化雌莫司汀的消除半存留期為10-20小時。主要消除途徑是雌莫司汀磷酸鹽代謝為雌莫司汀、氧化雌莫司汀、雌二醇和雌酮。特別重要的雌莫司汀磷酸鹽功效數據是雌莫司汀磷酸鹽的半存留期(

圖1)和主要的細胞毒代謝產物氧化雌莫司汀(圖2)。通過應用本發明的方法，我們證實了這個新發現雌莫司汀磷酸鹽以1000mg/m2的大劑量一次性、靜脈內給藥后，氧化雌莫司汀的半存留期大約是100小時(圖2)。這項發現進一步使大劑量靜脈內雌莫司汀磷酸鹽的治療應用成為可能。
附圖的簡要說明參考下列詳細說明，并結合附圖，有助于更好地對本發明及其很多優點有一個完整的理解，其中圖1闡述在磷雌氮芥(Estracyt)一次性靜脈內給藥后，雌莫司汀磷酸鹽的濃度(平均±SEM，N＝4+4+3)，給藥劑量為1000mg(范圍980-1070mg)、1000mg/m2和1500mg/m2；圖2闡述在磷雌氮芥一次性靜脈內給藥后，氧化雌莫司汀的濃度(平均±SEM，N＝4+4+3)，給藥劑量為1000mg(范圍980-1070mg)、1000mg/m2和1500mg/m2。
優選實施方式的詳細說明本發明給出，雌莫司汀磷酸鹽能夠以950mg/m2以上(即大于1300mg)的劑量給藥。
如下實現本發明的方法。在優選的方法中，雌莫司汀磷酸鹽給藥的一次性輸液劑量超過950mg/m2。靜脈內給藥既可以通過中樞、也可以通過外周靜脈內途徑。在制備目標藥物的過程中，用于靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽包裝內含物是溶解形式，其中的包裝內含物可以由下列組成、但不限于雌莫司汀磷酸鹽的葡甲胺鹽在小瓶中的凍干粉末，或者是類似的冷凍干燥的雌莫司汀磷酸鹽，先將其溶于無菌水，例如每300mg雌莫司汀磷酸鹽溶于5ml無菌水，或溶于5％葡萄糖水溶液，用于靜脈內給藥。在優選的方法中，使用5％葡萄糖水溶液作為稀釋劑。在優選的方法中，在制備溶解形式藥物的過程中，不應當搖振、而應當緩慢顛倒進行混合。然后得到溶液，用作靜脈內輸液，具有優選的輸注持續時間，為30分鐘至3小時，由此輸液超過1-2小時是安全和方便的方法。鹽水溶液可導致藥物沉淀，因此不是輸液的優選。
當雌莫司汀磷酸鹽通過外周靜脈內途徑給藥時，優選利用更長的輸液持續時間和更大的總輸液體積，以使對血管的刺激作用最小。或然地，雌莫司汀磷酸鹽溶液可以與不等量、但優選為3-5％人白蛋白或其他血漿蛋白混合，包括合成血漿蛋白，以實現雌莫司汀磷酸鹽的蛋白質結合，從而減少任何可能的血管損傷。
使用雌莫司汀磷酸鹽的其他制劑或配方可以進一步實現本發明。一種特別有利的化療劑雌莫司汀磷酸鹽的制劑涉及將雌莫司汀磷酸鹽與脂質體結合輸液(這里稱之為脂質體包封的雌莫司汀磷酸鹽或脂質體雌莫司汀)，使雌莫司汀磷酸鹽能夠通過外周或中樞靜脈、以大劑量和低于1300mg的劑量輸液。在一種優選的制備脂質體雌莫司汀的方法中，先以上述方式制備雌莫司汀磷酸鹽溶液，然后注入小瓶，小瓶中含有可得到其凍干粉末形式的空脂質體。脂質體進行適當的水合作用后，對小瓶進行渦旋和聲波處理，然后輸入患者。
當雌莫司汀磷酸鹽通過中樞靜脈途徑給藥時，所述的給藥可以通過臨時性或永久性靜脈進入裝置進行，包括但不限制于三腔導管、Hickman導管、鎖骨下線、頸靜脈線或medi-port。所述的給藥可以伴隨抗凝血療法或附加不同量、但優選為3-5％人白蛋白或其他血漿蛋白或脂質體雌莫司汀進行，但不是必要的，以減少任何對給藥患者可能造成的血管損傷。
本發明中雌莫司汀磷酸鹽的劑量大于1300mg，不過優選以超過950mg/m2的劑量治療患者。因此，一種優選的方法是以1000mg/m2劑量一次性靜脈內給藥。另一種優選的方法是以1500mg/m2劑量一次性靜脈內給藥。而且，給藥劑量可以是2000mg/m2。不過，本發明包括950mg/m2以上的其他劑量，所優選的劑量并不意味限制。
本發明中最優選的雌莫司汀磷酸鹽給藥方案是一次性輸液，每周一次，最大劑量達4000mg或3500mg/m2。另一種優選的方案是一次性輸液給藥，每兩周一次。另一種優選的方案是一次性輸液給藥，每三周一次。另一種優選的方案是一次性輸液給藥，每四周一次。考慮到與其他伴隨療法的方案，一種方案可以優選于另一種。這些方案可以以連續或反復性方式重復。
這里描述的本發明方法能夠延長雌莫司汀磷酸鹽代謝產物的高血液和/或組織水平，代謝產物包括氧化雌莫司汀、雌莫司汀、雌酮和雌二醇。因此，能夠提高與其他療法的相互協同作用，其中這些其他療法包括但不限于化療、放療、單克隆抗體和生物療法。本發明通過延長雌莫司汀磷酸鹽及其代謝產物的高血液和組織水平，提供最大程度的治療效果。因此實現了最大程度的治療效果，其中雌莫司汀磷酸鹽以超過950mg/m2的劑量靜脈內給藥，它是與其他癌癥療法聯合給藥的，包括但不限于放療、化療、單克隆抗體和生物療法。
在優選的方法中，雌莫司汀磷酸鹽以超過950mg/m2的劑量一次性靜脈內給藥，加強了與其他細胞毒化療劑的治療效果。在優選的方法中，實現所述的聯合用藥的方法是在其他化療劑給藥3天內將雌莫司汀磷酸鹽靜脈內給藥，優選是在其他化療劑給藥的當天或給藥前一天。實現特別優選的方法是在其他化療劑是由抗有絲分裂劑或抗微管劑組成時，包括但不限于紫杉烷(taxanes)、包括紫杉酚和taxotere，和包括長春花堿、長春新堿、依托泊甙、navelbine、阿霉素、伊立替康(irinotecan)(CPT-11)在內的試劑，還有脂質體包封的化療劑，包括脂質體包封的紫杉烷，例如脂質體包封的紫杉醇(paclitaxel)。如果與單克隆療法聯合使用，則更為有益，該單克隆試劑包括放射性核苷酸或抗生長因子試劑。
當雌莫司汀磷酸鹽以一次性輸液方式靜脈內給藥、且劑量超過950mg/m2時，氧化雌莫司汀的血漿或血清水平得以進一步維持。輸液可以任選以連續或反復性方式重復進行，以保持較高的雌莫司汀磷酸鹽代謝產物的血液水平。持續的雌莫司汀磷酸鹽及其代謝產物水平由此能夠達到持續的治療效果。
本發明因此提供了一種方法，通過一次性輸液劑量超過950mg/m2的雌莫司汀磷酸鹽的靜脈內給藥，增加雌莫司汀或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白結合的飽和度。同樣地，通過以超過950mg/m2的靜脈內劑量給藥，延長雌莫司汀磷酸鹽或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合蛋白樣蛋白質(EMBP)的結合持續時間。因此，可以用靜脈內雌莫司汀磷酸鹽治療所有具有雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合樣蛋白質的癌癥。特別優選的是以這種方式治療前列腺癌。還優選以這種方式治療乳腺癌、黑素瘤、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥。特別優選的是將雌莫司汀磷酸鹽靜脈內給藥，其中一次性劑量超過950mg/m2，所治療的癌癥具有雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合蛋白樣蛋白質，包括但不限于一組癌癥，包括前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、黑素瘤、肺癌和腦部癌癥。
所述癌癥可以進一步用脂質體雌莫司汀治療，單用或與其他化療聯合使用。所述給藥方法優選按本發明方案以連續或反復性方式重復進行，聯合或不聯合其他治療。因此，所述方案可以包括靜脈內雌莫司汀磷酸鹽與其他化療劑療法聯合治療，給藥每周一次、每兩周一次、每三周一次或每四周一次，及其變化方案。
特別優選的是當用于治療前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥時，靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽與其他化療的細胞毒試劑聯合給藥。進一步特別優選的是當用于治療前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、腦部癌癥時，靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽與放射療法聯合給藥。進一步優選的是在治療具有雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合蛋白樣蛋白質的癌癥時，包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥，雌莫司汀磷酸鹽當與其他癌癥療法聯合使用時，可以超過950mg/m2的靜脈內劑量給藥。
本發明能夠達到客觀和主觀上的治療效果。有益效果涉及減小腫瘤尺寸、改善生命質量、減少腫瘤梗阻，例如尿路梗阻、緩解腫瘤引起的疼痛、提高生存率、減少腫瘤復發時間或者其他改善的跡象。特別是，通過雌莫司汀磷酸鹽以超過950mg/m2劑量靜脈內給藥，單用或優選與其他癌癥療法聯合使用，可以達到迅速的客觀或主觀上的治療效果。因此，本發明能夠迅速緩解由癌癥引起的尿路梗阻，迅速緩解由癌癥引起的疼痛。
通過對下列例證實施方式的說明，本發明的其他特征將是明顯的，這些實施方式僅供舉例說明本發明，并非用來限制本發明。
實施例通過實施例但非限制提供下列臨床病案。
實施例1兩例嚴重轉移性前列腺癌患者用雌莫司汀磷酸鹽通過中樞靜脈內給藥進行治療。患者接受雌莫司汀磷酸鹽的劑量為2500mg/m2。按照每周輸液一次的方案，雌莫司汀磷酸鹽以反復性方式給藥。每次輸液歷時90分鐘。輸液是充分耐受的，沒有嚴重毒性作用，兩例患者的前列腺特異性抗原(PSA)都證實有反應(減少)。
實施例2三例嚴重轉移性前列腺癌患者用雌莫司汀磷酸鹽通過中樞靜脈內給藥進行治療，劑量為1000mg/m2。按照每周輸液一次的方案，雌莫司汀磷酸鹽以反復性方式給藥。每次輸液歷時30分鐘。輸液是充分耐受的，有幾例患者證實有PSA反應。
實施例3三例嚴重轉移性前列腺癌患者用雌莫司汀磷酸鹽通過中樞靜脈內給藥進行治療，劑量為1500mg/m2。按照每周輸液一次的方案，雌莫司汀磷酸鹽以反復性方式給藥。每次輸液歷時30分鐘或1小時。輸液是充分耐受的，有一例患者證實有龐大腫瘤腺病反應。
實施例4三例嚴重轉移性前列腺癌患者用雌莫司汀磷酸鹽通過中樞靜脈內給藥進行治療。患者接受雌莫司汀磷酸鹽的劑量為2000mg/m2。按照每周輸液一次的方案，雌莫司汀磷酸鹽以反復性方式給藥。每次輸液歷時60分鐘。為了預防靜脈血栓形成，另外給以抗血栓形成劑。雌莫司汀磷酸鹽輸液是充分耐受的，沒有嚴重毒性，并有PSA反應跡象。
顯然，有鑒于上述教導，本發明大量的改進和變更都是可能的。因此應當這樣理解，在所附權利要求書的范圍內，除了這里具體描述的以外，也可以實施本發明。
權利要求
1.產生延長的高血漿水平雌莫司汀的方法，以促進雌莫司汀與第二種化療劑的相互協同作用，其中雌莫司汀以靜脈內制劑給藥；和雌莫司汀在所述第二種化療劑給藥當天或3天內給藥。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述第二種化療劑包含抗有絲分裂劑或抗微管劑。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述抗微管劑是紫杉烷。
4.根據權利要求1所述的方法，其中靜脈內制劑包含雌莫司汀磷酸鹽。
5.根據權利要求4所述的方法，其中雌莫司汀磷酸鹽一次性輸液劑量超過1300mg。
6.根據權利要求4所述的方法，其中雌莫司汀磷酸鹽一次性輸液劑量超過950mg/m2。
7.根據權利要求1所述的方法，以加強治療效果。
8.產生高血漿水平雌莫司汀代謝產物氧化雌莫司汀的方法，以促進氧化雌莫司汀與第二種化療劑的相互協同作用，其中雌莫司汀以靜脈內制劑給藥；和雌莫司汀在所述第二種化療劑給藥當天或3天內給藥。
9.根據權利要求8所述的方法，其中所述第二種化療劑包含抗有絲分裂劑或抗微管劑。
10.根據權利要求9所述的方法，其中所述抗微管劑是紫杉烷。
11.根據權利要求8所述的方法，其中靜脈內制劑包含雌莫司汀磷酸鹽。
12.根據權利要求11所述的方法，其中雌莫司汀磷酸鹽一次性輸液劑量超過1300mg。
13.根據權利要求11所述的方法，其中雌莫司汀磷酸鹽一次性輸液劑量超過950mg/m2。
14.根據權利要求8所述的方法，以加強治療效果。
15.維持雌莫司汀和氧化雌莫司汀血漿水平的方法，其中將雌莫司汀磷酸鹽以一次性輸液靜脈內給藥，劑量超過1300mg；可選地以連續方式重復輸液。
16.根據權利要求15所述的方法，其中治療效果得以持續。
17.維持雌莫司汀和氧化雌莫司汀血漿水平的方法，其中將雌莫司汀磷酸鹽以一次性輸液靜脈內給藥，劑量超過950mg/m2；可選地以連續方式重復輸液。
18.根據權利要求17所述的方法，其中治療效果得以持續。
19.提高雌莫司汀與雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質結合飽和度的方法，其中雌莫司汀以雌莫司汀磷酸鹽靜脈內制劑形式給藥，一次性輸液劑量超過1300mg；和由此提高雌莫司汀結合蛋白的結合飽和度。
20.根據權利要求19所述的方法，其中該方法用于治療具有雌莫司汀結合蛋白或雌莫司汀結合樣蛋白質的癌癥。
21.根據權利要求20所述的方法，其中所述癌癥選自由前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥組成的組。
22.提高雌莫司汀或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質結合飽和度的方法，其中雌莫司汀以雌莫司汀磷酸鹽靜脈內制劑形式給藥，一次性輸液劑量超過950mg/m2；和由此提高雌莫司汀結合蛋白的結合飽和度。
23.根據權利要求22所述的方法，其中該方法用于治療具有雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質的癌癥。
24.根據權利要求23所述的方法，其中所述癌癥選自由前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥組成的組。
25.延長雌莫司汀或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質結合持續時間的方法，其中雌莫司汀以雌莫司汀磷酸鹽靜脈內制劑形式給藥，一次性輸液劑量超過1300mg；和由此延長雌莫司汀結合蛋白的結合持續時間。
26.根據權利要求25所述的方法，其中該方法用于治療具有雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質的癌癥。
27.根據權利要求26所述的方法，其中所述癌癥選自由前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌和腦部癌癥組成的組。
28.延長雌莫司汀或其代謝產物與雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質結合持續時間的方法，其中雌莫司汀以雌莫司汀磷酸鹽靜脈內制劑形式給藥，一次性輸液劑量超過950mg/m2；和由此延長雌莫司汀結合蛋白的結合持續時間。
29.根據權利要求28所述的方法，其中該方法用于治療具有雌莫司汀結合蛋白或類似蛋白質的癌癥。
30.根據權利要求29所述的方法，其中所述癌癥選自由前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、黑素瘤和腦部癌癥組成的組。
31.雌莫司汀磷酸鹽制劑，其中雌莫司汀是包封在脂質體內的。
32.根據權利要求31所述的制劑，用于靜脈內給藥。
33.化療劑，由包封在脂質體內的雌莫司汀磷酸鹽組成。
34.產品，包含適用于靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽和一種或幾種化療劑，作為聯合制劑，同時、分別或連續用于抗癌療法。
35.根據權利要求34所述的產品，其中所述一種或幾種化療劑選自由CPT-11、阿霉素、依托泊甙、去甲長春花堿和紫杉烷衍生物組成的組。
36.根據權利要求34所述的產品，其中所述適用于靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽用作劑量超過1300mg的一次性輸液。
37.根據權利要求34所述的產品，其中所述適用于靜脈內給藥的雌莫司汀磷酸鹽用作劑量超過950mg/m2的一次性輸液。
38.根據權利要求34至37任意一項所述的產品，用于治療前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、肺癌、胰腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌或腦部癌癥。
39.靜脈內使用的制劑，包含雌莫司汀磷酸鹽與白蛋白的混合物。
40.根據權利要求39所述的制劑，其中活性成分一次性輸液的劑量超過1300mg。
41.根據權利要求39所述的制劑，其中活性成分一次性輸液的劑量超過950mg/m2。
42.根據權利要求39-41任意一項所述的制劑，其中白蛋白是人白蛋白。
43.產品，包含凍干形式的雌莫司汀磷酸鹽和含有白蛋白的胃腸外用生理溶液。
全文摘要
雌莫司汀磷酸鹽是一種抗有絲分裂的化療藥物，具有確定的抗癌療效。本發明描述了加強靜脈內雌莫司汀磷酸鹽的治療效果的方法。本發明提供了能以超過1300mg的大劑量一次性給藥的靜脈內雌莫司汀磷酸鹽。由此有效地改善了雌莫司汀磷酸鹽的藥代動力學。進一步提供的是，雌莫司汀磷酸鹽可以靜脈內給藥，用在與其他化療劑的聯合制度中。利用靜脈內雌莫司汀磷酸鹽制劑達到的治療上的優點可應用于多種癌癥的治療，包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌、結腸直腸癌、胰腺癌、卵巢癌、黑素瘤和其他癌癥。
文檔編號A61K31/7028GK1636598SQ200410086718
公開日2005年7月13日 申請日期1999年3月26日 優先權日1998年3月27日
發明者邁克爾·S.科普雷斯卡, 貝里爾·阿斯普, 博·弗雷德霍姆, 佩－奧爾弗·岡納森 申請人:法麥希亞－厄普約翰公司