專利名稱：含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品的制作方法
技術領域：
本發明涉及含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品。
背景技術：
硫酸皮膚素是被稱為硫酸軟骨素B的分子量為2-40萬的葡糖胺聚糖的一種。一般來說，硫酸皮膚素是以下述結構式1(化1)所示的L-艾杜糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸構成的二糖單元的重復成為主體，但是存在下列情況糖醛酸的一部分為L-艾杜糖醛酸硫酸或者D-葡糖醛酸的情況、或者當N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸的一部分沒有被硫酸化的情況，或者4，6-二硫酸化的情況。可以認為如果口服攝取硫酸皮膚素，硫酸皮膚素能夠被體內吸收。
化1
透明質酸是具有下述結構式2(化2)所示的O-β-D-葡糖醛酰基(1→3)-N-乙酰基-β-D-葡糖胺基(1→4)單元的二糖重復結構的葡糖胺聚糖的一種，主要存在于動物的滑液或眼球玻璃體液、臍帶、真皮表層等結締組織等中。由于分子量在數十萬～200萬以上，因此，可以認為通過口服攝取，也不會被體內吸收。
化2
在生物體內，硫酸皮膚素與硫酸軟骨素A及C一起與透明質酸結合。由于這些被稱為葡糖胺聚糖的硫酸皮膚素、硫酸軟骨素A以及C、透明質酸是陰離子性分子，因此當上述分子互相結合而形成高分子結構時，可以含有大量的水分子。因此，可以指出這些高分子化合物可以保持皮膚的水分，一旦口服攝取硫酸皮膚素或硫酸軟骨素，它們就被體內吸收，并與體內的透明質酸結合，從而提高保持皮膚水分的效果。關于含有透明質酸的保健食品，已提出一些方案(專利文獻1、2)，但是關于同時含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品，還沒有相關申請。
專利文獻1特開2002-360292號公報專利文獻2特開平9-98739號公報發明內容當口服攝取透明質酸時，只有低分子量(分子量5萬-10萬以下)的透明質酸才能在體內被吸收，但是，可以認為口服的透明質酸能吸引多種多樣的分子，這些分子對促進小腸內的吸收起了一定作用。特別是在體內，能夠加速與透明質酸結合的硫酸皮膚素或硫酸軟骨素A及C在體內的吸收。
本發明人根據上述考察，制造至少含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品，并對其效果進行檢驗，發現在皮膚的水份保持、皮膚的柔軟性、肌質、健康的改善方面具有優異的效果，從而完成本發明。
本發明的課題是提供含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品。
技術方案1所述的發明涉及一種保健食品，其至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
技術方案2所述的發明涉及美化肌膚和便秘癥改善劑，其至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
技術方案3所述的發明涉及技術方案2所述的美化肌膚和便秘癥改善劑，其中，上述透明質酸和上述硫酸皮膚素的混合比例為1∶0.001～200。
技術方案4所述的發明涉及美化肌膚和脫發抑制劑，其至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
技術方案5所述的發明涉及技術方案4所述的美化肌膚和脫發抑制劑，其中，上述透明質酸和上述硫酸皮膚素的混合比例為1∶0.001～200。
技術方案6所述的發明涉及保健食品，其含有技術方案2或3所述的美化肌膚和便秘癥改善劑。
技術方案7所述的發明涉及保健食品，其含有技術方案4或5所述的美化肌膚和脫發抑制劑。
技術方案8所述的發明涉及技術方案1、6或7中任一項所述的保健食品，其含有硫酸軟骨素A和/或硫酸軟骨素C。
技術方案9所述的發明涉及技術方案1、6～8中任一項所述的保健食品，其含有肽。
含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品可以同時食用透明質酸和硫酸皮膚素。此外，在含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品中所含的透明質酸，可以加速在小腸中硫酸皮膚素的吸收，能夠提高吸收效率。此外，還具有下列效果使皮膚年齡變年輕的效果、提高皮膚柔軟性的效果、提高皮膚保濕性的效果、提高皮膚新陳代謝的效果、降低紫外線對皮膚損傷的效果、消除皮膚的暗淡、減少臉上的斑點的效果、改良化妝品的附著性的效果、減少細小皺紋的效果、在眼睛周圍展現神采的效果、消除疹的效果、展現全身潤澤的效果、改善指甲顏色的效果、治療干燥肌膚的效果、治療嘴唇破裂的效果、改善紅色臉的效果、改善肩酸的效果、減少產生宿醉的次數，即使產生宿醉，也可以提早恢復的效果、治療怕冷癥的效果、使傷口提前愈合的效果、使指甲堅硬的效果、改善腰痛的效果、減少健忘的效果、改善朦朧眼的效果、改善關節疼痛的效果、改善生殖器官衰老癥的效果、改善生理疼痛的效果、使腳跟角蛋白柔軟的效果、疲勞恢復的效果、恢復青春的效果、治療便秘的效果、減少脫發的效果。
圖1是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加1.4mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的表皮細胞的顯微鏡照片。
圖2是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加0.8mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖3是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加0.5mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖4是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加0.25mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖5是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加0.125mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖6是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，添加0.0625mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖7是顯示實驗例2的結果的顯微鏡照片，完全不添加含有透明質酸和硫酸皮膚酸的物質的表層細胞的顯微鏡照片。
圖8是紫外線曝光表皮的剖面照片。
圖9是紫外線曝光表皮的剖面照片。
圖10是表皮的剖面照片。
具體實施例方式
含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品作為必需成分包含透明質酸和硫酸皮膚素。
硫酸皮膚素是被稱為硫酸軟骨素B的分子量為2-40萬的葡糖胺聚糖的一種。一般來說，硫酸皮膚素是以下述結構式3(化3)所示的L-艾杜糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸構成的二糖單元的重復成為主體，但存在下列情況糖醛酸的一部分為L-艾杜糖醛酸硫酸或者D-葡糖醛酸的情況、或者N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸的一部分沒有被硫酸化的情況、或者4，6-二硫酸化的情況。可知如果口服攝取硫酸皮膚素，則能夠被體內吸收。
化3
透明質酸是具有下述結構式4(化4)所示的O-β-D-葡糖醛酰基(1→3)-N-乙酰基-β-D-葡糖胺基(1→4)單元的二糖重復結構的葡糖胺聚糖的一種，主要存在于動物的滑液或者眼球玻璃體液、臍帶、真皮表層等結締組織等中。由于分子量在數十萬～200萬以上，因此可知通過口服攝取，也不會被體內吸收。
化4
本發明中所使用的透明質酸和硫酸皮膚素可以是合成品，或者也可以是半合成品，還可以是從鳥類、魚類、哺乳類等提取的天然物質提取物。而且，所謂合成品，是指通過化學合成而制造的物質，所謂半合成品是指對化學合成品或者天然物質提取物進行進一步合成而獲得的物質。當透明質酸和硫酸皮膚素為天然物質提取物時，對于提取源沒有特別限制，但優選與人類相同的哺乳類，在哺乳類中，更優選源于被認為與人類的組織相容性高的豬(Sus類)的動物。而且，作為豬的品種，可以列舉杜洛克種(Duroc)、巴克夏種(Berkshire)、漢普夏種(Hampshire)、蘭德瑞斯類(Landrace)、大約克夏種(LargeYorkshire，Large White)、中約克夏種(Middle Yorkshire，Middle White)等以及上述這些的雜交種類等。
透明質酸和硫酸皮膚素的混合比例沒有特別限制，以重量比計，相對1份透明質酸，硫酸皮膚素優選為0.001-200，更優選為0.005-100。需要上述范圍內的混合比例的原因，可以認為是，如果透明質酸和硫酸皮膚素的混合比例差別太大，硫酸皮膚素就不會被有效地吸收。此外，根據不同的人，會發生過敏反應，在皮膚上會出現疹。
除了作為必需成分的透明質酸和硫酸皮膚素以外，還可以向含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品中添加硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素C、肽。通過添加硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素C，含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品所有的皮膚的水分保持、皮膚的柔軟性、肌質、健康改善的效果得到成倍提高。此外，通過添加肽，可以成倍地提高皮膚組織恢復青春的效果。
硫酸軟骨素A是被稱為4-硫酸軟骨素的葡糖胺聚糖，是指大多在4位具有硫酸基的硫酸軟骨素。其分子量為數千～數萬，根據動物種類·齡期·組織的種類或部位，鏈的長度或細微結構存在各種變化。
硫酸軟骨素C是被稱為6-硫酸軟骨素的葡糖胺聚糖，是指大多在6位具有硫酸基的硫酸軟骨素。分子量與硫酸軟骨素B相同。
向含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健品中添加的硫酸軟骨素A和/或者C，沒有特別限制，其提取源優選是與人類相同的哺乳類，在哺乳中，更優選源于被認為與人類的組織相容性高的豬(Sus類)的動物。
硫酸軟骨素A和/或硫酸軟骨素C的混合量沒有特別限制，相對1重量份的透明質酸，優選添加0.001～100左右，更優選添加0.01～50左右，進一步優選添加0.05～20左右。其理由可以認為是如果透明質酸和硫酸軟骨素A和/或硫酸軟骨素C的混合比例差別太大，硫酸軟骨素A和/或硫酸軟骨素C就不會被有效地吸收。此外，根據不同的人，會發生過敏反應，在皮膚上會出現疹。
向含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品中添加的肽的種類，沒有特別限制，最好是氨基酸的鍵數為50000以下的肽，優選鍵數為5～5000的肽、更優選鍵數為5～500的肽，進一步優選鍵數5～50的肽。這是因為如果氨基酸的鍵數太多，唯恐不會被體內吸收，如果氨基酸的鍵數越少，就越容易被體內吸收。
對于肽的提取源沒有特別限制，優選為與人相同的哺乳動物，在哺乳動物中，更優選源于被認為與人類的組織相容性高的豬的動物。或者，通過化學合成，合成與人類的組織親和性高的肽，或者具有特別效果的肽，并含有該肽即可。
對于添加的肽的量沒有特別限制，相對1重量份的透明質酸，優選添加0.0001～200重量份左右，更優選添加0.001～100重量份左右，進一步優選添加0.01-50重量份左右。其理由可以認為是如果透明質酸和肽的混合比例差別太大，肽就不會被有效地吸收。此外，根據不同的人，會發生過敏反應，在皮膚上會出現疹。
向含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品中添加的透明質酸、硫酸皮膚素、硫酸軟骨素A以及C可以分別源自不同的生物，經過合成得到也可以，但是，優選源自相同的哺乳類，其中，更優選起源于被認為與人類的組織相容性高的豬(Sus類)的動物。其理由是因為源自相同生物的透明質酸、硫酸皮膚素、硫酸軟骨素A以及C的分子間的親和性高，借助于透明質酸的硫酸皮膚素、硫酸軟骨素A以及C的吸收率高。
向含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品中，除了添加作為必需成分的透明質酸和硫酸皮膚素或者作為追加成分的硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素C、胎之外，還可以添加通常在保健食品中加入的成分。作為可以添加的成分的粒子，可以列舉各種維生素類、膠原、蜂膠、蜂乳、纖維、糖類、檸檬酸、植物提取物、香料、食品防腐劑等。
含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健品的形式，沒有特別地限制，例如，可以列舉粉末、顆粒、膠囊、片劑、液體等。此外，還可以使上述保健成分包含在甜點、餅干、橡皮糖、糖果、面類、飲料等以增進健康為目的的食品中。
在含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品總量中所占的透明質酸、硫酸皮膚素以及其他添加物的比例，沒有特別的限制，但占保健食品總重量的0.0001～90重量％，優選為0.001～80重量％，更優選為0.01～70重量％。而且，在實際保健食品的總重量中所占的比例，根據食品的形式而不同，但如果含量低于0.0001重量％，不能獲得本發明的效果，如果大于90重量％，以上那些效果不理想，因此，不優選。
以下，根據實驗例，對含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品所具有的效果進行解釋。
含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品的有用性評價實驗在平成15年8月1日～平成15年10月1日的2個月期間(從夏天的濕潤期到秋天的干燥期)，以40-50周歲的40名女性為對象，進行含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品的服用實驗。接受試驗者不攝取其他保健食品，并以感覺到“肌膚發暗”、“出現小皺紋”、“皮膚干枯”、“腳后跟的角質層厚”等不適的人為對象。
實驗用的保健食品是片劑，使受驗者在每天睡覺之前服用3片300mg的片劑。而且，在300mg片劑中，分別包含5mg透明質酸內含物和5mg硫酸皮膚素內含物。
實驗例1皮膚水份量以及皮膚柔軟性評價使用株式會社タニタ生產的皮膚狀態檢查工具(商品名ピエラ)，測定受驗者的面頰和嘴邊緣部分的皮膚水份量。所謂皮膚水份量，通常是指表現出“潤澤”的角質層中的水份含量，所謂皮膚柔軟性，通常是指表現出“具有活力”的皮膚的柔韌度。
本實驗中使用的皮膚狀態檢查工具事先將性別、年齡、是否化妝等數據記憶在檢查工具內的存儲器中，根據由上述信息和檢查器具前端的觸覺傳感器獲得的信息，顯示出皮膚水份量、皮膚柔軟性以及皮脂量的曲線圖和肌膚年齡。而且，關于皮脂量，將其看作與本發明的保健食品無關的要素，從結果中將其排除。記錄結果時，讀取皮膚水份量和皮膚柔軟性曲線圖的高度和肌膚年齡，并記錄數值。測定是在攝取含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品前和開始攝取1個月后以及2個月后進行。
將攝取保健食品前的記錄數值和開始攝取1個月后的記錄數值進行比較，并將攝取保健食品前的記錄數值和開始攝取2個月后的記錄數值進行比較，關于肌膚年齡，將肌膚年齡比實際年齡年輕的人數作為“測定值得到改善的人數”、將大于實際年齡的人數作為“測定值變差的人數”、將與實際年齡相同的人作為“測定值沒有變化的人數”，并將面頰的測定結果示于表1，將嘴邊緣部位的測定結果示于表2。
關于皮膚柔軟性和皮膚水份量，將數值增加的人數作為“測定值得到改善的人數”、將數值降低的人數作為“測定值變差的人數”、降數值沒有變化的人數作為“測定值沒有變化的人數”，并將面頰的測定結果示于表1，將嘴邊緣部位的結果示于表2。
而且，當用于本實驗的皮膚狀態檢查工具顯示出皮膚水含量和/或皮膚柔軟性為異常值時，由于不能進行測定，因此，在攝取保健食品前的測定中，存在不能記錄測定值得情況。在攝取保健食品前的測定中不能進行測定，而在1個月后以及2個月后可以獲得測定值的情況，可以看作皮膚狀態得到了改善。
表1
表2
從表1以及表2所示的結果可以知道，關于面頰，在開始1個月后，在肌膚年齡、柔軟性、水份含量中的任一測定值上，改善的人數占一半以上。在開始2個月后，95％的受驗者的肌膚年齡的測定值得到改善，90％的受驗者的柔軟性測定值得到改善，97.5％的受驗者的水份含量測定值獲得改善。
同樣，關于嘴邊緣部位，在開始1個月后，在肌膚年齡、柔軟性、水份含量中的任一測定值上，改善的人數占一半以上。在開始2個月后，92.5％的受驗者的肌膚年齡的測定值得到改善，85％的受驗者的柔軟性測定值得到改善，97.5％的受驗者的水份含量測定值獲得改善。
像這樣，當使透明質酸和硫酸皮膚素組合時，可以使肌膚年齡變年輕，可以提高皮膚的柔軟性，可以提高皮膚的水份含量。此外，從這些數據可以知道，如果使透明質酸和硫酸皮膚素組合，還能發揮皮膚回春劑、皮膚組織柔軟化劑和皮膚保濕劑的作用。
實驗例2小鼠表皮細胞培養實驗切下約1cm2出生后1天左右的昆明種小鼠的表皮組織，用蛋白質分解酶使細胞分離。使用無菌滴管，吸取過濾后的組織液，以1,000rpm的速度進行10分鐘的離心分離。
除去上層清夜，收集沉淀物用MEM培養液(含有20％Fes)，使用1％胎盤液進行觀察。從表皮細胞生長率達到98％開始，進行以下實驗。
(實驗)向培養瓶中加入0.2ml的細胞液，添加10ml的MEM培養液后，在5％CO2、37℃的條件下開始進行培養。向該培養瓶中，分別添加含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質，并使該物質濃度為1.4mg/ml、0.8mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml、0mg/ml，在7天期間內，觀測細胞的生長狀況。結果示于表3。
另外，拍攝經過7天培養后的表皮細胞的顯微鏡照片。圖1表示添加1.4mg/ml含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的表皮細胞的顯微鏡照片，圖2表示添加0.8mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片、圖3表示添加0.5mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片、圖4表示添加0.25mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片、圖5表示添加0.125mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片、圖6表示添加0.0625mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片、圖7表示添加0mg/ml上述物質的表層細胞的顯微鏡照片。
表3
從表3以及圖1～7所示的結果可以知道，如果使透明質酸和硫酸皮膚素組合，存在細胞生長率提高的趨勢。含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的濃度越高，細胞生長率就越好。從這些結果可以知道，如果使透明質酸和硫酸皮膚素組合，可以提高皮膚的新陳代謝，如果使透明質酸和硫酸皮膚素組合，還可以起到新陳代謝促進劑的功能。
實驗例3紫外線照射實驗剃去4只昆明種小鼠(2只雄，2只雌)的背部的毛，形成紫外線曝露表皮。每天照射30W的紫外線，一天照射7～17個小時，將小鼠分成雄、雌1對2組，向1對小鼠，每日、每1kg體重投入1920mg的含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質。照射7天紫外線后，拍攝紫外線曝露表皮的剖面照片。結果示于圖8～10。
圖8是沒有投入含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的1對小鼠的紫外線曝露表皮的剖面照片。該對小鼠的表皮增生，可以發現由基本物質不足而引起角質層脫落，毛的新生能力喪失，皮膚干燥。
圖9是投入含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的1對小鼠的紫外線曝露表皮的剖面照片。投入了含有透明質酸和硫酸皮膚素的物質的1對小鼠，其真皮和皮下組織增加，基礎物質被供應至新生毛囊，與沒有照射紫外線的情況(圖10)相近。
如上所述，含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品，具有減輕紫外線對皮膚的損傷的效果。此外，可以知道，通過使透明質酸和硫酸皮膚素組合，還可以起到降低紫外線損害皮膚劑的作用。
關于含有透明質酸和硫酸皮膚素的健康食品的監控調查對20位男性、80名女性進行監控調查，結果匯總于表4。
表4
從表4可以知道，含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品具有下列效果消除皮膚暗淡的效果、減少臉上斑點的效果、改良化妝品的附著性的效果、減少細小皺紋的效果、在眼睛周圍展現神采的效果、消除疹的效果、展現全身潤澤的效果、改善指甲顏色的效果、治療干燥肌膚的效果、治療嘴唇破裂的效果、改善紅色臉龐的效果、改善肩酸的效果、減少產生宿醉的次數，即使產生宿醉，也可以提早恢復的效果、治療怕冷癥的效果、使傷口提前愈合的效果、使指甲堅硬的效果、改善腰痛的效果、減少健忘的效果、改善朦朧眼的效果、改善關節疼痛的效果、改善生殖器官衰老癥的效果、改善生理疼痛的效果、使腳跟角蛋白柔軟的效果、疲勞恢復的效果、恢復青春的效果、治療便秘的效果、減少脫發的效果。此外，從這些結果可以知道，當使透明質酸和硫酸皮膚素組合物時，還可以起到便秘癥改善劑或者脫發抑制劑的作用。
表5是對回答提問“是否具有美容效果”、“是否對健康有益”的人數進行匯總的表格。
表5
從表5可以知道，關于美容效果，76人對效果持肯定態度，作為用戶的真實感覺，表明含有透明質酸和硫酸皮膚素的本發明的保健食品具有優異效果。
權利要求
1.一種保健食品，其特征在于，至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
2.一種美化肌膚和便秘癥改善劑，其特征在于，至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
3.如權利要求2所述的美化肌膚和便秘癥改善劑，其特征在于，上述透明質酸和上述硫酸皮膚素的混合比例為1∶0.001～200。
4.一種美化肌膚和脫發抑制劑，其特征在于，至少含有透明質酸和硫酸皮膚素。
5.如權利要求4所述的美化肌膚和脫發抑制劑，其特征在于，上述透明質酸和上述硫酸皮膚素的混合比例為1∶0.001～200。
6.一種保健食品，其特征在于，含有權利要求2或3所述的美化肌膚和便秘癥改善劑。
7.一種保健食品，其特征在于，含有權利要求4或5所述的美化肌膚和脫發抑制劑。
8.如權利要求1、6或7中任意一項所述的保健食品，其特征在于，含有硫酸軟骨素A和/或硫酸軟骨素C。
9.如權利要求1、6至8中任意一項所述的保健食品，其特征在于，含有肽。
全文摘要
本發明的課題是提供含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品、提供可同時食用透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品。本發明所述保健食品，其含有透明質酸和硫酸皮膚素。在含有透明質酸和硫酸皮膚素的保健食品中所含的透明質酸可以加速硫酸皮膚素在小腸中的吸收，可以提高吸收效率。此外，具有使皮膚年齡變年輕的效果、提高皮膚柔軟性的效果、提高皮膚保濕性的效果、提高皮膚新陳代謝的效果、降低紫外線對皮膚的損傷的效果等。
文檔編號A61P25/28GK1608513SQ200410086930
公開日2005年4月27日 申請日期2004年10月20日 優先權日2003年10月20日
發明者新井義實 申請人:美萊絲株式會社