采用高劑量硫酸軟骨素的膀胱炎療法的制作方法

專利名稱：采用高劑量硫酸軟骨素的膀胱炎療法的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于治療膀胱炎，包括間質性膀胱炎和有關的膀胱病癥的治療劑和方法。
背景技術：
間質性膀胱炎是一種與泌尿刺激物引起的不適和疼痛有關的膀胱病癥，導致排尿緊急和次數增多。由于其病因還不清楚，對有效療法的開發是遵循大量經驗獲得的途徑。這些途徑無法比少數治療劑和治療方法獲得的更多。Sant和La Rock在Interstitial Cystitis，Vol.21(1)，2月1994的第73頁中指出，現有療法包括藥物療法，而膀胱內使用二甲基亞砜是FDA唯一批準的療法。然而，多種其他藥物用于治療間質性膀胱炎的癥狀，這些藥物單獨使用或者與DMSO聯合使用。此類藥物包括氧氯苯磺酸鈉(Clorpactin)、肝素、透明質酸、甾族化合物、碳酸氫鈉、硝酸銀、戊聚糖多硫酸鈉、色甘酸鈉、利多卡因和阿霉素。這些藥物中的許多可以口服給藥，但通過滴注法給藥或者作為單一療法、聯合療法或順序療法時在urethelium的GAG表面層上最為有效。這些藥物和療法以膀胱粘膜襯層為靶向，并且使疼痛、尿頻和尿急得到癥狀性緩解。然而，在這些療法中，很少能夠在持續時間內產生緩解作用。
最近，我們已經公開了硫酸軟骨素作為滴注制劑在間質性膀胱炎和有關膀胱病癥的治療中的應用(參見授權給Stellar InternationalInc.的US6,083,933和CA2269260)。在這些專利的內容中，含有80mg，并且至多200mg硫酸軟骨素的制劑作為40mL的滴注劑，該滴注劑對被診斷為膀胱炎的患者中包括尿頻、疼痛和尿急在內的至少一種癥狀產生緩解作用。此外，還公開了一種診斷方法，該方法用于鑒定硫酸軟骨素療法或采用其他膀胱炎治療的療法的效應器。在這種途徑中，患者候選者首先接受滴注劑量的刺激物例如氯化鉀，此后根據患者在滴注硫酸軟骨素或其他治療劑后從刺激物引發的癥狀緩解經歷來確定效應器。對于在此類療法中的應用，倫敦，Ontario，加拿大的Stellar International Inc.上市產品Uracyst-STM，它是一種含有在49mL水載體中含80mg硫酸軟骨素(0.2％)的治療藥盒，并且產品Uracyst-STM-濃縮物提供一種在10mL載體中含200mg軟骨素(2.0％)的瓶裝劑。使用UracystTM-S的研究結構由Steinhoff等人報告在Can.J.Urol.，2002Feb 9(1)1454-58中。
在成本有效的基礎上，始終需要提供有效治療膀胱炎，包括間質性膀胱炎和有關由侵蝕粘膜襯層導致的膀胱和尿道病癥的藥物和療法。所以本發明的目的在于提供這樣的療法。
發明概述現在發現患有膀胱炎以及膀胱和尿道有關病癥的患者在硫酸軟骨素的滴注劑量升高至200mg以上時能夠對硫酸軟骨素的治療更快速反應。已經推定接近200mg的劑量足以飽和膀胱襯層并由此沉積或吸附足夠的硫酸軟骨素以保護膀胱襯層侵蝕的所有可利用位置。然而，已經令人驚奇地發現，當硫酸軟骨素的滴注劑量升高至超過200mg時可以實現膀胱炎癥狀的更加快速的緩解。此外，業已發現，施用較高劑量的硫酸軟骨素能夠使那些其膀胱炎極其嚴重以至于事實上其他常規形式的膀胱炎療法難以治療的患者得到緩解。
所以，根據本發明的一個方面，提供一種治療患有膀胱炎或膀胱或尿道有關病癥的患者的方法，該方法包括給患者滴注含有單位劑量為至少250mg，優選至少300mg，更優選至少350mg和最優選至少400mg的硫酸軟骨素的藥物組合物的給藥步驟。同樣地，本發明提供硫酸軟骨素在制備含有至少250mg硫酸軟骨素的用于治療膀胱炎和膀胱和尿道有關病癥的藥物中的應用。
在本發明的其它方面中，提供一種適合通過滴注向患者給藥的藥物組合物，該組合物含有單位劑量至少為250mg的硫酸軟骨素以及含水載體。在本發明的實施方式中，有效治療膀胱炎的組合物包括滅菌、含水組合物，該組合物含有(1)至少250mg例如在250mg-飽和度范圍內的單位劑量的高純級硫酸軟骨素，和(2)藥物可接受含水載體，其體積為患者可耐受的且足以與被治療膀胱表面區域接觸。
在本發明的一個具體實施方式
中，提供一種適合滴注的藥物組合物，該組合物含有單位劑量為250-1200mg的硫酸軟骨素和10-100mL含水載體。
在更特定的實施方式中，所述的組合物在20mL含水載體，優選磷酸鹽緩沖鹽水中含有400mg硫酸軟骨素。在非常特定的實施方式中，提供一種適合滴注的滅菌硫酸軟骨素溶液，該溶液基本上是由，并且優選只由400mg硫酸軟骨素和20mL含水緩沖液，優選磷酸鹽緩沖鹽水組成。
本發明的其他方面及其實施方式在下文中詳細描述，參考所附的附圖，其中附圖簡述

圖1利用Oleary Sant指標，對比了從接受高劑量硫酸軟骨素的膀胱炎患者獲得的結果，與從接受80mg劑量的硫酸軟骨素的患者獲得的結果。
詳述和優選實施方式本發明的組合物和方法適用于治療和評估不同形式的膀胱炎，所述的膀胱炎尤其在膀胱中出現，但也出現在尿道中，包括尿道和其他粘膜表面，它們通過囊滴注給藥途徑暴露于治療下。通過這種途徑，將滅菌導管經尿道置于膀胱內，并且將治療溶液通入導管。該溶液隨后在膀胱內滯留至少30分鐘或更長時間，隨后排出。可被治療的膀胱炎的形式包括特定間質性膀胱炎和那些其他形式的對粘膜完整性和屏障功能的增強有反應的膀胱炎和有關膀胱病癥，這被確信是采用現有硫酸軟骨素治療的結果。這些包括輻射引起的膀胱炎，化學物質引起的膀胱炎，例如化療導致的膀胱炎和出血性膀胱炎，并且，更一般地，膀胱炎的GAG缺乏形式和慢性尿道感染導致的GAG-缺乏。
利用建成的鉀試驗揭示膀胱炎相關病癥，該試驗中將3.0％KCl溶液滴注到候選患者的膀胱內。對該鉀溶液的反應以及膀胱炎的癥狀特征顯示膀胱襯層中的GAG缺乏，提示了患者存在膀胱炎或者GAG-缺乏有關的病癥，并且確定該患者作為硫酸軟骨素療法的候選者。
為了用于治療間質性膀胱炎和這些相關病癥，本發明采用硫酸軟骨素，它是酸性粘多糖并且是糖胺聚糖(GAG)之一。其重復二糖單元是由葡糖醛酸和在B(1-3′)鍵帶有一個硫酸根的半乳糖胺，即N-乙酰基半乳糖胺硫酸鹽組成。這種二糖單元在B(1-4′)鍵聚合。
硫酸軟骨素(CS)可以多種一硫酸化形式使用，根據常與提取來源有關的具體化學組成、常與處理技術有關的鏈長、硫酸化的程度等而變化。在本發明的應用中，希望CS是無熱原形式并且是高純的，由此通過不同控制環節得到″可注射級″的具有人體使用所需的質量的原料。這樣的原料款得自多種市售來源，并且現有文獻充分說明了適合制備這樣的原料的方法。在本發明的實施方式中，所述的CS的分子量范圍為約1,000道爾頓-約75,000道爾頓，例如約10,000道爾頓-約40,000道爾頓。在此大小范圍內的CS的適當天然來源是軟結締組織，例如軟骨。在一具體實施方式
中，CS起始原料得自豬或牛軟骨，此后通過確定的方法精制得到所需可注射等級和分子量分級的CS。或者，應理解CS可得自其他來源，包括合成途徑，或者混合并與合成和天然CS形式結合成為所需組合物。理想地，但不是必須的，所述的CS含有A型和C型的CS，呈3∶1-1∶3(以摩爾計)例如約1∶1的混合物形式。
應懂得CS通常是鹽形式，并且根據本發明的實施方式，是鈉鹽形式。
在使用時，所述的CS被配制為滅菌水溶液。希望該制劑適合單劑量給藥，雖然應理解多劑量制劑可以用來治療多個患者。
按照本發明，施用給患者的CS單位劑量是至少250mg。更優選，CS的單位劑量至少300mg。優選地，該單位劑量為至少350mg。更優選，單位劑量為至少400mg。在理論上，可接受單位劑量的上限僅僅由于給定類型的CS在所選含水載體中的溶解度，和療法中所用載體的體積而達到頂點。在室溫和滅菌蒸餾水中，CS的溶解度約為50％。所以，CS單位劑量的上限可以是500mg/mL載體。根據本發明，希望將單位劑量的CS配制在足夠使膀胱表面暴露在治療下的溶液體積內，并且至少是耐受的，更希望使患者感到舒適。所述體積的上限處于引起尿脹的體積以下，在某些患者中它是約250mL。對于成年患者，溶液體積適宜為約5mL或10mL至約100mL，例如最多為約75mL，和優選最多為約50mL。在本發明的具體實施方式
中，采用約40mL的溶液體積。所以，在上述體積下，可施用給患者的CS的單位劑量的上限可以為約20,000mg。
在本發明的實施方式中，施用給患者的CS的單位劑量適合處于250-1,200mg的范圍內，理想地在300-800mg的范圍內，優選在350-600mg的范圍內，并且更優選在375-500mg的范圍內。在一具體實施方式
中，CS被配制為400mg的單位劑量。
作為此類溶液的載體，可以使用滅菌水、鹽水或緩沖鹽水。鹽水載體特別適用，并且在本發明的實施方式中，載體為0.9％鹽水。或者，可以使用磷酸鹽緩沖的鹽水載體。在一具體實施方式
中，含水載體是簡單的注射用滅菌水。
CS在溶液中的濃度顯然應根據CS的配制用量和所用的溶液體積而變化。CS較易溶于水載體中，因此可以配制寬范圍的濃度。在本發明的實施方式中，CS濃度在0.1mg/mL-100mg/mL，優選1.0mg/mL-50mg/mL的范圍內。在本發明的一個具體實施方式
中，該制劑具有約15-25mg/mL，例如20mg/mL的CS濃度。在本發明的一個特定具體實施方式
中，該制劑達到這種濃度，提供在20mL體積的磷酸鹽緩沖鹽水中含有400mg CS的制劑。
在本發明的一個具體實施方式
中，滅菌硫酸軟骨素溶液由400mg硫酸軟骨素和20mL含水載體，例如滅菌水、鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水組成。
顯然，CS的配制應以制藥領域中確立的方式進行。單位或單一劑量可以通過簡單地在無菌填充條件下將單位劑量(即400mg)的CS計量加入到含20mL載體或稀釋劑的瓶中來制成。或者，通過合并商購制劑如Uracyst-S-濃縮物來制成，例如通過混合兩個200mg/10mL溶液。
在使用中，CS組合物通過滴注或類似方法給藥，這樣使該組合物定向到達感染膀胱的腔(粘膜)表面或患有膀胱炎且特別是GAG缺乏性膀胱炎的癥狀的患者的有關表面，包括化學-和輻射-引起的膀胱炎，出血性膀胱炎，和根據本發明的優選實施方式，間質性膀胱炎。除IC患者以外，這種治療可用于“有關的膀胱病癥”，即，用于存在膀胱襯層或者尿道和輸尿管襯層侵蝕的患者，這種侵蝕在尿中存在化學刺激物時嚴重到足以引起疼痛或不適。此類有關的病癥包括慢性尿道感染導致的尿道GAG-缺乏。對于各種治療，所述的組合物是在排出殘余尿液后進行滴注，例如在20mL緩沖液體積中以20mg/mL劑量的CS進行滴注。此后患者在不少于30分鐘的所需時間內保留該溶液。在典型治療方案中，每周1次或兩周1次的治療進行約6周，并且隨后每月1次的治療進行直至癥狀減輕。一些患者可能在最大每周6次的滴注后受益，此后滴注每月1次或兩月1次，這取決于其癥狀的反應。維持性給藥可以采用減少到例如200mg的CS劑量來完成，如果患者癥狀這樣指示的話。
如實施例所示，以上述方式治療的患者反應良好，疼痛、尿急和/或尿頻的癥狀均已降低。采用″高劑量″硫酸軟骨素的成功是令人驚奇和顯著的結果，一方面，硫酸軟骨素是可商購和較低廉的藥物，另一方面，為IC嘗試的藥物很少發現能夠在患者中獲得快速效益。用高劑量硫酸軟骨素治療的患者對該治療反應非常迅速。此外，本發明提供的實施例中的成功已經在患有嚴重膀胱炎癥狀的患者取得，這些患者是采用其他現有療法難以治愈的。
應理解，本發明的高劑量CS療法可以用作單一療法或者與其他可利用膀胱炎治療聯合應用。已知的膀胱炎療法包括通過滴注例如DMSO，肝素，戊聚糖多磷酸酯和透明質酸來施用。如下所述，此類藥物應該以其中該藥物適于研究治療效果的測定量足夠浸浴膀胱襯層的體積給藥。
在應用本發明治療方法時，本發明進一步提供一種藥盒，該藥盒組合含有(1)含有單位劑量為至少250mg的硫酸軟骨素和含水載體的第一滅菌溶液；和(2)印刷的說明書，其中教導按照本發明的治療方法使用。
該藥盒采用盒子或其他包裝的形式，其中該滅菌溶液提供為具備上述濃度和單位劑量的備用溶液。印刷的說明書可向最終的使用者轉達本發明的方法。該方法舉例如下。
實施例下面描述臨床環境中間質性膀胱炎患者的治療。
在用于治療時，購買呈鈉鹽的硫酸軟骨素，其無熱原且是高純級別。CS得自牛軟骨以控制其純度和硫酸軟骨素的異構體A/C(60∶40)組成和羧基/O-硫酸的比例(約0.95)，同時其他說明如下所述外觀白色至淺米色高吸濕性固體粉末純度(無水基礎)＞98.0％在1％水中的pH5.5-7.5比旋度(4％水)-20至-30度氮(無水基礎)2.5-3.5％硫(無水基礎)5.0-7.0％硫酸灰(無水基礎)21-29％重金屬＜20ppm氯＜0.1％蛋白質(無水基礎)＜1.0％熱原無熱原平均分子量10,000-40,000道爾頓通過于下列組分混合，將這種CS配制為20.0mg/mL溶液

為了混合，取20mL的注射用水，USP，并且加入所需量(配方中上述量20倍量/mL以制備2％溶液)的氯化鈉和混合直至完全溶解(最少15分鐘)。加入所需量的磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉并混合直至完全溶解(最少15分鐘)。此后，加入所需量的硫酸軟骨素鈉，并混合直至完全溶解(水合在于最少4小時)。如果必要用在WFI，USP中的1N氫氧化鈉或在WFI，USP中的1N磷酸將pH調整至7.2±0.1。此后，加入足夠量注射用滅菌水，USP至終體積且徹底混合。應理解該方法還適合制備不同單位劑量的CS，只需通過改變緩沖液的體積和/和通過改變CS和其他所述組分的量即可。所以，利用這種方法，提供10-40mL的CS制劑，例如，20mL，該制劑含有250、300、350、400、600、800、1,000和1,200mg CS。
該制劑可以進一步含有防腐劑。在一具體實施方式
中，防腐劑是芐醇或對羥基苯甲酸酯類，例如，對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯及其混合物。例如，防腐劑可以是1.5％w/v的芐醇。在一優選實施方式中，該制劑采取單位劑量，并且因此防腐劑不是必需的。所以，在一具體實施方式
中，該制劑基本上無防腐劑和其他添加劑，并且由含水載體如20mL和硫酸軟骨素如400mg組成。
混合的溶液(2％或者其他)隨后在無菌條件下以10-40mL，例如20mL等份試樣填充到50mL模制的I型火石瓶內，該瓶預先在250℃下滅菌180分鐘，并且用20mm型的100％合成橡膠塞封閉。該瓶隨后被標記為滅菌硫酸軟骨素鈉溶液。下文中，400mg/20mL制劑，2.0％稱作“Uracyst-S-400”制劑。
另外，患者每次滴注接受兩個劑量的Uracyst-S-濃縮物(200mg/10mL，購自倫敦，Ontario，加拿大的Stellar InternationalInc.)，以施用存在于20mL緩沖液中的400mg CS。
在初步研究中利用6名被診斷患有間質性膀胱炎的患者來評估如此配制的CS(400mg/20mL[2.0％w/v]，Uracyst-S-400)。所有患者鉀試驗呈陽性，膀胱鏡檢查呈陰性和+8日間頻數和/或膀胱疼痛的癥狀。所有患者每周完成1次Oleary Sant調查。三名每周接受治療2次的患者也每周完成1次Oleary Sant調查。采用Stellar InternationalInc.，London，Ontario出售的產品“溶液K”，即按照供應商的說明方式滴注3.0％KCl溶液來進行鉀試驗。
#1患者是由另一尋找有關膽囊切除術的第二次意見的泌尿科醫生推薦的。她抱怨不間斷和嚴重的膀胱疼痛。已經發現她已無法用任何治療獲得成功。她接受膀胱內注射Uracyst-S-400的6周每周1次的治療。她的癥狀/問題評分沒有改進，并且她被指定回到泌尿科醫生接受膽囊切除術。
#2患者患有長期間質性膀胱炎(IC)并用在先治療取得一些成功。她加入本初步研究是因為其IC的長時間的和疼痛性突然發作。她在周一和周4接受Uracyst-S-400的膀胱內滴注共連續6周。其癥狀和問題評分每周在改進。在第6周疼痛消失。
#3患者也患有長期的IC。她抱怨頻繁、疼痛性的突然發作，這包括嚴重的尿頻和夜尿癥。該患者還被診斷為應激性腸道綜合征(IBS)。她用Uracyst-S-400每周治療2次(周一和周四)共7周。雖然錯過兩個給藥間隔，但該患者的問題和癥狀評分分別在治療的末期降低5點。該患者繼續Uracyst-S-200mg療法2周并且隨后以此劑量每月滴注1次。其癥狀持續得到改善。
#4患者由于存在IC的突然發作而加入。她已經口服治療達10年并經歷頻繁的突然發作。她每周用Uracyst-S-400治療2次共6周。其問題和疼痛評分分別降低/改進10點。該患者連續采用每月1次滴注Uracyst-S-200。
#5患者由于患有膀胱疼痛和尿頻而加入，并且還患有纖維肌痛和骨關節炎，處于這些病癥的藥療中。她采用每周滴注1次Uracyst-S400治療連續6周。癥狀評分改進5點且問題評分改進1點。該治療改善了她的膀胱疼痛，但沒有改進其尿頻，因此該問題評分未反應出改進作用。
#6患者患有長期的IC，纖維肌痛，情緒應激，骨盆疼痛，這些可有可無地由其IC上調。她處于許多藥療法中，包括用嗎啡治療疼痛。她首先自每周滴注1次開始且隨后在第一周之后轉換為每周2次。她每周接受2次的Uracyst-S400共6周，治療全程為7周。盡管癥狀和問題評分略為模棱兩可，這在很大程度上歸因于由其他病癥導致的應激，但可注意到某些改進。治療持續每2周1次使用Uracyst-S200，并且隨后減少為每月給藥1次。
所以，6名已知患有間質性膀胱炎的患者每周1次或每周2次膀胱內滴注Uracyst-S400(400mg在20mL磷酸鹽緩沖鹽水中)共6周。患者中的四人用其他形式的治療難以治愈，1名患者在使用Elmiront時突然發作，并且1人是新接受治療。4名頑固性患者中的三人每周用URACYST-S400mg滴注2次。
沒發現與所述溶液的滴注有關的副作用。1名患者抱怨在第一次滴注后感覺變糟，但在關閉自潤滑導管后不愿意停止治療；此后沒有抱怨感覺到變糟。1名患者聲稱在首先2次滴注時滴注后1小時出現10分鐘的全身潮紅，但在隨后的滴注中沒有出現。使用400mgUracyst-S時在更短時間達到改善，由此證實IC患者的問題和癥狀得到更迅速的緩解。3名頑固性患者出現從輕度到明顯的改善。2名非頑固性患者被證實在滴注6周時有所改善。
上述患者群中排泄和疼痛的改善在圖1中圖示，根據用為間質性膀胱炎建立的Oleary Sant評分體系記錄的評分。應注意，作為一種趨勢，該患者群總體上報告在治療的過程中癥狀得到顯著改善(″400癥狀，400問題″)。為了比較，圖1還圖示了患者群中癥狀評分的改進，它是用配制為80mg/40mL(″80癥狀，80問題″)的硫酸軟骨素治療的不同間質性膀胱炎患者群。如圖所示，400mg給藥療法在其中癥狀和問題比那些用80mg劑量治療的患者更加嚴重的患者中產生顯著的改進作用。例如，與80mg患者群中12或更低的評分相比，400mg患者群在兩類評估中評分均高于12。此外，使用400mg劑量改善癥狀的速度遠遠快于接受80mg劑量的患者。
所以應理解，高劑量硫酸軟骨素提供一種用于治療患有膀胱炎的患者的療法，并且特別適用于治療患有嚴重或長期間質性膀胱炎和有關形式的GAG-缺乏性膀胱炎的患者。
權利要求
1.一種適合滴注到患者膀胱的藥物組合物，該組合物含有含量為250mg-1200mg的硫酸軟骨素和體積為10mL-100mL的含水載體。
2.權利要求2的藥物組合物，其中該含水載體以10mL-40mL的體積存在。
3.權利要求3的藥物組合物，其中該硫酸軟骨素以350mg-600mg的量存在。
4.權利要求1的藥物組合物，其中所述組合物在20mL含水載體中含有400mg硫酸軟骨素。
5.一種滅菌硫酸軟骨素溶液形式的藥物組合物，所述組合物由400mg硫酸軟骨素和20mL含水載體組成。
6.權利要求1-5任一項的藥物組合物，其中該含水載體為磷酸鹽緩沖的鹽水。
7.硫酸軟骨素在制備權利要求1-6任一項的藥物組合物中的應用，所述藥物組合物是用于治療患有選自膀胱炎和有關病癥的膀胱或尿道病癥的患者，其中在患病患者中一種或多種膀胱炎癥狀是由氯化鉀溶液的滴注引起的。
8.硫酸軟骨素在制備權利要求1-6任一項的藥物組合物中的應用，所述藥物組合物是用于治療膀胱炎。
9.權利要求8的硫酸軟骨素的應用，所述藥物組合物是用于治療間質性膀胱炎。
全文摘要
通過滴注高劑量例如400mg/20mL硫酸軟骨素治療膀胱和尿道的間質性膀胱炎和有關GAG－缺乏性病癥。較高劑量的軟骨素有效快速減輕癥狀，特別是患有嚴重和頑固性膀胱炎的患者的癥狀。
文檔編號A61K9/08GK1758920SQ200480006467
公開日2006年4月12日 申請日期2004年2月18日 優先權日2003年2月19日
發明者P·R·里爾, S·S·哈恩 申請人:斯特拉國際有限公司