專利名稱：一種黃芪總皂苷的制備方法
技術領域：
本發明屬于中藥提取物的制備方法，具體地說，涉及黃芪總皂苷的制備方法。
背景技術：
黃芪是豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.的干燥根，為常用的補益藥，味甘，性微溫，傳統醫學認為其具有補氣固表、利尿托毒、斂瘡生肌之功效，藥用歷史悠久。現代化學研究證明黃芪藥材中含有皂甙、多糖、黃酮、氨基酸、酚性化合物及微量元素等成分。黃芪皂甙具強心功能可用于治療心衰，對急性心梗后心功能的恢復及氧自由基的清除具明顯作用。尤其是近年來黃芪用于治療病毒性心肌炎的研究，發現黃芪可抑制柯薩奇病毒的復制，對病毒感染心肌細胞異常電活動有逆轉作用，經過比較研究了黃芪不同成分對病毒感染心肌細胞損傷的保護作用，證實了黃芪主要有效成分為黃芪總皂甙。但是黃芪皂甙含量較低，且根部含大量糖類物質，提取分離比較困難。目前，黃芪皂苷的制備方法主要有水提醇沉法，醇溶液用于分離皂苷，采用這種方法，黃芪皂苷損失極大，得率低，生產成本很高；也可以用醇類有機溶劑提取，濃縮后，過大孔吸附樹脂柱，以水和不同濃度的醇溶液梯度洗脫，采用這種方法，操作步驟復雜，雜質含量高，純度較低，因此，研究更加有效而高純度的黃芪皂苷的提取分離方法具有重要的意義。
發明內容
本發明的目的在于提供一種工藝更加合理、質量可控的黃芪總皂苷的制備方法。
本發明通過下述技術方案予以實施。
本發明的黃芪總皂苷的制備方法，按順序包括如下步驟(1)取黃芪藥材，加入溶劑，將溶液調至堿性后再進行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型堿性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得黃芪總皂苷。
步驟(1)所述溶劑為水或者含水乙醇；所述溶液調至堿性為調pH值9～14，可用NaOH或者KOH或者Na2CO3或者NaHCO3調節pH值。
步驟(1)所述提取液可進一步除雜，水提取液可用醇沉方法除雜，醇提取液可用水沉方法除雜。
步驟(2)所述大孔型堿性陰離子交換柱優選大孔型弱堿性陰離子D392、D380、D382、D371交換柱，或者大孔型強堿性陰離子D201交換柱；堿水可為1～3％NaOH或者KOH或者Na2CO3；所述含水乙醇為40～95％乙醇。
用本發明方法制備的黃芪總皂苷的總皂苷含量為85％～99％，黃芪甲苷含量為60％～80％，黃芪總皂苷含量測定參照文獻(西北藥學雜志，2001年8月，16(4)157)，黃芪甲苷含量測定參照文獻(中國藥典2005版一部，213頁黃芪甲苷含量測定)。所制備的黃芪總皂苷可以單獨，或者與黃芪多糖合用，或者與其他活性成分合用，與任何一種或一種以上藥劑學上輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、羥丙基-β-環糊精等混合制成的各種劑型，例如，可制成注射劑、片劑、緩釋片、滴丸、顆粒劑、粉針劑、膠囊劑、微粒劑。優選劑型為粉針劑、滴丸劑、膠囊劑。
與現有技術相比，本發明的黃芪總皂苷制備方法的提取分離效率高，黃芪總皂苷含量高，可保持更高的生理活性。
具體實施例方式
參考下列實施例將更易于理解本發明，給出實施例是為了闡明本發明，而不是為了限制本發明的范圍。
實施例一取黃芪藥材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸堿度，第一次為藥材量的6倍水量和0.7％藥材量的Na2CO3，第二次為藥材量的4倍水量和0.3％藥材量的Na2CO3，第三次為藥材量的4倍水量；側逆流循環提取，沸后分別保持1.5、1、1小時；藥液合并冷至室溫，過濾，濾液上已經處理好的大孔型弱堿性陰離子D392交換柱(南開大學化工廠)，用2倍樹脂床體積的2％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再3倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用7倍樹脂床體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式干燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量86.3％，黃芪甲苷69.2％)。
實施例二取黃芪藥材，粉碎，加水超聲提取四次并控制酸堿度，第一次為藥材量的5倍水量和0.9％藥材量的NaHCO3，第二次為藥材量的4倍水量和0.5％藥材量的NaHCO3，第三次和第四次為藥材量的3倍水量；藥液合并冷至室溫，過濾，藥液濾液上已經處理好的大孔型弱堿性陰離子D380交換柱(南開大學化工廠)，用1.5倍樹脂床體積的2.5％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再4倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用8倍樹脂床體積的65％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式干燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量87.5％，黃芪甲苷71.4％)。
實施例三取黃芪藥材，粉碎，加50％乙醇回流提取三次并控制酸堿度，第一次為藥材量的5倍50％乙醇量和1％藥材量的Na2CO3，第二次為藥材量的4倍50％乙醇量和0.5％藥材量的Na2CO3，第三次為藥材量的4倍50％乙醇量；側逆流循環回流提取，回流開始后分別保持1.5、1、1小時；藥液過濾并合并濾液，濾液70℃下減壓濃縮至無醇味后，濃縮液加水稀釋至藥材藥液比為1∶1.5，過濾，濾液上已經處理好的大孔型強堿性陰離子D201交換柱(南開大學化工廠)，用2倍樹脂床體積的2％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再3倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用7倍樹脂床體積的85％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式干燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量92.6％，黃芪甲苷74.2％)。
實施例四取黃芪藥材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸堿度，第一次為藥材量的6倍水量和0.7％藥材量的Na2CO3，第二次為藥材量的4倍水量和0.3％藥材量的Na2CO3，第三次為藥材量的4倍水量；側逆流循環提取，沸后分別保持1.5、1、1小時；藥液合并冷至室溫，濃縮藥液至藥材量2倍體積，加乙醇使含醇量達70％，靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，加水溶解，濾過；濾液上已經處理好的大孔型弱堿性陰離子D382交換柱(南開大學化工廠)，用2倍樹脂床體積的2％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再3倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用7倍樹脂床體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式干燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量93.6％，黃芪甲苷73.1％)。
實施例五取黃芪藥材，粉碎，加水超聲提取四次并控制酸堿度，第一次為藥材量的5倍水量和0.9％藥材量的NaHCO3，第二次為藥材量的4倍水量和0.5％藥材量的NaHCO3，第三次和第四次為藥材量的3倍水量；藥液合并冷至室溫，濃縮藥液至藥材量2倍體積，加乙醇使含醇量達80％，靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，加水溶解，濾過；濾液上已經處理好的大孔型強堿性陰離子D201交換柱(南開大學化工廠)，用1.5倍樹脂床體積的2.5％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再4倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用8倍樹脂床體積的85％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式于燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量94.3％，黃芪甲苷70.3％)。
實施例六取黃芪藥材，粉碎，加70％乙醇超聲提取三次并控制酸堿度，第一次為藥材量的5倍70％乙醇量和1％藥材量的Na2CO3，第二次為藥材量的4倍70％乙醇量和0.5％藥材量的Na2CO3，第三次為藥材量的4倍70％乙醇量；藥液合并冷至室溫，過濾，濾液70℃下減壓濃縮至無醇味后，濃縮液加水稀釋至藥材藥液比為1∶1.5，離心，上清液上已經處理好的大孔型弱堿性陰離子D371交換柱(南開大學化工廠)，用2倍樹脂床體積的2％NaOH溶液沖洗，沖洗液棄去；再3倍純水沖洗，水沖洗液棄去；用7倍樹脂床體積的75％乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏(50℃下相對密度為1.28～1.33)，用動態帶式干燥設備干燥，得黃芪總皂苷(總皂苷含量95.6％，黃芪甲苷78.1％)。
實施例七取實施例六的黃芪總皂苷110g，混合均勻，加入卵磷脂和甘露醇各170g，適量注射用水，加熱使溶解后，調pH值至6.5～7.0，加注射用水至總體積，攪拌10分鐘，冷至室溫后，無菌濾過；濾液灌裝于西林瓶中，冷凍干燥，壓塞、加蓋，即得。
實施例八取實施例三的黃芪總皂苷130g，與80g微晶纖維素混合均勻，加3％聚維酮乙醇溶液制軟材，過18目篩制顆粒，600℃干燥30～45分鐘，整粒，加入10g滑石粉，混勻，充于膠囊中，即得。
實施例九取實施例五的黃芪總皂苷120g，與700g聚乙二醇-6000混合均勻，熔融，滴入低溫液體石蠟中，選丸，除液體石蠟，即得。
權利要求
1.一種黃芪總皂苷的制備方法，按順序包括如下步驟(1)取黃芪藥材，加入溶劑，將溶液調至堿性后再進行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型堿性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得黃芪總皂苷。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的溶劑為水或者含水乙醇。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的將溶液調至堿性為調pH值9～14。
4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，用NaOH、KOH、Na2CO3或者NaHCO3調節溶液pH值。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)得到提取液后，進一步除雜，水提取液用醇沉方法除雜，或者醇提取液用水沉方法除雜。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中的大孔型堿性陰離子交換柱為大孔型弱堿性陰離子D392交換柱、大孔型弱堿性陰離子D380交換柱、大孔型弱堿性陰離子D382交換柱、大孔型弱堿性陰離子D371交換柱或者大孔型強堿性陰離子D201交換柱。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中的堿水為1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3。
8.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)和步驟(2)中的含水乙醇為40～95％乙醇；
9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，它按順序包括如下步驟(1)取黃芪藥材，加入水或40～95％乙醇，將溶液調至堿性為調pH值9～14，加熱或超聲提取2～4次，合并提取液，濾過；濾液進一步除雜，水提取液用醇沉方法除雜，醇提取液則用水沉方法除雜，得到除雜后的澄清液；(2)澄清液上大大孔型弱堿性陰離子D392交換柱、大孔型弱堿性陰離子D380交換柱、大孔型弱堿性陰離子D382交換柱、大孔型弱堿性陰離子D371交換柱或者大孔型強堿性陰離子D201交換柱，先用1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3沖洗，再用純水沖洗，沖洗液棄去，然后用40～95％乙醇洗脫，洗脫液濃縮，干燥，即得黃芪總皂苷。
10.一種黃芪總皂苷粉針劑的制備方法，包括如下步驟取權利要求1或9所述方法得到的黃芪總皂苷，加入卵磷脂和甘露醇以及適量注射用水，加熱使溶解后，調pH值至6.5～7.0，加注射用水至規定容積，攪拌，冷置，濾過，濾液冷凍干燥，即得。
全文摘要
本發明公開了一種黃芪總皂苷的制備方法，按順序包括如下步驟(1)取黃芪藥材，加入溶劑，將溶液調至堿性后再進行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型堿性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得黃芪總皂苷。本發明的黃芪總皂苷制備方法的提取分離效率高，黃芪總皂苷含量高，可保持更高的生理活性。
文檔編號A61P9/04GK101084982SQ20061001421
公開日2007年12月12日 申請日期2006年6月8日 優先權日2006年6月8日
發明者楊悅武, 葉正良, 鄭永鋒, 李旭 申請人:天津天士力之驕藥業有限公司