一種藥物組合物及其有效部位、活性成分的制備方法

專利名稱：一種藥物組合物及其有效部位、活性成分的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物及其有效部位、活性成分的制備方法，特別涉及一種抗血管性癡呆的藥物組合物及其有效部位、活性成分的制備方法。
背景技術：
血管性癡呆(VD)是發生在腦血管病基礎上的以記憶、認知功能缺損為主，或伴有語言、視空間能力及情感、人格障礙的獲得性智能持續性損害，其主要表現為腦血管病后患者出現記憶力、定向力、計算力、理解力等智能減退，可伴有語言能力下降、情感及性格改變等，影響了患者的生活和社會活動。它的發病率不斷升高，已成為影響中老年人健康和生活質量的常見病和多發病。隨著我國人口老齡化的發展，已給社會和家庭帶來沉重的負擔。據調查，65歲以上癡呆的發病率為5％。美國統計，60歲以上缺血性腦血管病存活患者中26.3％會發生癡呆。目前，西醫對VD的治療，一是預防和治療腦血管病，二是改善腦功能，減輕癡呆癥狀。中醫藥學則認為“濁毒損傷腦絡”是VD的主要病機，腎精氣虛、痰瘀互結，阻滯絡脈是VD發生的基礎，痰瘀蘊積、釀生濁毒，敗壞腦絡腦髓，是導致VD發生發展的關鍵。實踐證明，中醫藥在延緩病情、改善全身癥狀、一定程度上改善智能方面存在優勢，對改善記憶力、定向力有一定作用，尤其是對改善患者神情呆滯、自覺癥狀以及主動性和改善提高生存質量方面有突出作用。但目前從純中藥制劑中分離出具有抗血管性癡呆活性的藥物有效部位及活性成分的方法及相關制劑還未曾見有報道。

發明內容
本發明的目的在于提供一種藥物組合物；本發明的另一個目的在于提供一種抗血管性癡呆的藥物組合物；本發明的第三個目的在于提供該藥物組合物有效部位、活性成分的制備方法；本發明的第四個目的在于提供該藥物組合物及其有效部位的制藥新用途。
本發明的目的是通過如下技術方案實現的
本發明藥物組合物的原料組成為人參3～18重量份、葛根3～18重量份、赤芍3～18重量份。
本發明藥物組合物的原料組成優選為人參10重量份、葛根10重量份、赤芍10重量份。
本發明藥物組合物的原料組成優選為人參3重量份、葛根18重量份、赤芍9重量份。
本發明藥物組合物的原料組成優選為人參18重量份、葛根3重量份、赤芍12重量份。
上述原料藥，加入常規輔料，按照常規工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于膠囊劑、丸劑、片劑、顆粒劑、口服液體制劑或注射劑。
本發明藥物組合物有效部位的制備方法任選如下一種A、按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；B、稱取人參，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1～20∶1～20∶1～20比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位。
本發明藥物組合物有效部位的制備方法優選如下一種A、按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；B、稱取人參，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1∶1∶1，1∶20∶1，1∶1∶20，1∶10∶10或3∶4∶3比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位；本發明藥物組合物有效部位為淡棕色粉末，具有一定的吸濕性，易溶于水和稀乙醇，難溶于氯仿、石油醚等親脂性有機溶劑；三氯化鐵反應陽性，三氯化鋁反應陽性，鹽酸-鎂粉反應陰性，醋酐-濃硫酸反應陽性，α-萘酚-濃硫酸反應陽性；主要含有異黃酮類、單萜苷和皂苷類成分，其中葛根素含量為15.0～25.0％，大豆苷、3′-甲氧基葛根素和芹糖基葛根素的總含量為12.0～18.0％，芍藥苷含量為7.0～15.0％，人參總皂苷的含量為17.0～25.0％。
本發明藥物組合物有效部位，加入常規輔料，按照常規工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于膠囊劑、丸劑、片劑、顆粒劑、口服液體制劑或注射劑。
本發明藥物組合物活性成分的制備方法為
赤芍中有效成分的分離取赤芍3-18重量份，用6-10倍體積份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400-600重量份，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～60∶1洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.01-0.03重量份；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.004-0.006重量份和β-谷甾醇0.01-0.03重量份；
部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用2-4∶1比例的石油醚-丙酮→5-10∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，4-6∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.006-0.01重量份；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2-3∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每20-40體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.02-0.04重量份，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，20-40∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.03-0.05重量份；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，20-40∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.025-0.045重量份；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，20-40∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.03-0.05重量份；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑6-9∶6洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.004-0.008重量份；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.005-0.015重量份；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，6-10∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.015-0.035重量份；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑5-7∶1洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，6-10∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，6-10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β′-D-葡萄糖苷0.02-0.04重量份；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.02-0.04重量份；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.035-0.055重量份；葛根中有效成分的分離取葛根3-18重量份，用6-10倍重量份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏300-500重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，6-10∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.005-0.015重量份，流份5得到花生酸0.01-0.015重量份；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.004-0.008重量份；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.01-0.03重量份；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，10-30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.02-0.04重量份；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.025-0.045重量份；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.01-0.03重量份；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.015-0.035重量份；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.035-0.055重量份；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏20-40重量份；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50-150體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025重量份；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，25-35∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，12-18∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.015-0.035重量份，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.005-0.015重量份，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，25-35∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.01-0.015重量份；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.035-0.055重量份；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑5-10∶1比例洗脫，得到葛根素0.045-0.065重量份；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑3-8∶0.5-2∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.04-0.06重量份；人參中有效成分的分離取人參3-18重量份，用6-10倍重量份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400-800重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每50-150體積份收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑15-35∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每15-35體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.035-0.055重量份；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.005-0.025重量份；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.02-0.04重量份；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.005-0.015重量份；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.06-0.10重量份和20(S)-人參皂苷Rg20.02-0.04重量份；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.04-0.06重量份，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.03-0.05重量份；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.04-0.08重量份。
本發明藥物組合物活性成分的制備方法優選為赤芍中有效成分的分離取赤芍6重量份，用8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏500重量份，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～60∶1洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.02重量份；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.005重量份和β-谷甾醇0.02重量份；部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用3∶1比例的石油醚-丙酮→7.5∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，5∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.008重量份；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2.5∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.03重量份，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.04重量份；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.035重量份；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.04重量份；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑7.5∶6洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.006重量份；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.01重量份；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.025重量份；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑6∶1洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷0.03重量份；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.03重量份；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.045重量份；葛根中有效成分的分離取葛根6重量份，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏400重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，8∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.01重量份，流份5得到花生酸0.012重量份；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.006重量份；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.02重量份；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，20∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.03重量份；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.035重量份；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.02重量份；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.025重量份；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.045重量份；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏30重量份；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每100體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025重量份；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，15∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.025重量份，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.01重量份，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.012重量份；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.045重量份；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑7.5∶1比例洗脫，得到葛根素0.055重量份；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑5.5∶1.25∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.05重量份；人參中有效成分的分離取人參6重量份，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏600重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每100體積份收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑25∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每25體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.045重量份；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.015重量份；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用SephadexLH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.03重量份；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.01重量份；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.08重量份和20(S)-人參皂苷Rg20.03重量份；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.05重量份，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.04重量份；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.06重量份。
本發明藥物組合物活性成分的結構均經理化常數測定及波譜學方法，如紫外光譜、紅外光譜、氫核磁共振光譜、碳核磁共振光譜和質譜等予以鑒定。其中葛根新苷A為首次發現的新化合物，乙基芍藥新苷為新的天然產物。4-乙基芍藥苷、(1S，2S，4R)-反式-2-羥基-1，8-桉葉素、(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷、鄰苯三酚、二氫芹菜素、4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮、花生酸和棕櫚酸，為首次從本發明各單味藥中分離得到的已知化合物；采用高效液相色譜法，確認本發明藥物組合物中含有4-乙基芍藥苷、乙基芍藥新苷A、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷、羥基芍藥苷、(1S，2S，4R)-反式-2-羥基-1，8-桉葉素、(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷、(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷、鄰苯三酚、苯甲酸、沒食子酸、沒食子酸乙酯、二氫芹菜素、葛根新苷A、4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮、葛根素、3′-甲氧基葛根素、3′-羥基葛根素、染料木苷、芒柄花苷、大豆素、大豆苷、4′-甲氧基大豆苷、芹糖基葛根素、二十四烷酸甘油酯、棕櫚酸、花生酸、羽扇豆醇、β-谷甾醇、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、20(S)-人參皂苷Rg2、人參皂苷Rd、20(S)-人參皂苷Rg3、20(R)-人參皂苷Rh1、20(S)-人參皂苷Rh1、20(S)-原人參三醇等成分。
本發明藥物組合物及其有效部位或活性成分均可按常規工藝，加入常規輔料，制成臨床接受的劑型，包括但不限于濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
本發明所述的重量份與體積份的比例為克/毫升。
下述實驗和實施例用于進一步說明但不限于本發明。
實驗例1 對D-半乳糖誘導的腦功能衰退小鼠的保護作用(一)實驗材料1動物ICR小鼠，雄性，體重18～20g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。合格證號SCXK(京)2002-0003。
2藥品與試劑受試藥本發明藥物組合物有效部位，實驗前用蒸餾水配制成溶液，4℃冰箱保存。
陽性對照藥喜得鎮片，瑞士山德士藥廠、國營天津華津制藥廠合作生產產品。
試藥D-半乳糖，由北京化學試劑公司提供。蛋白定量(考馬思亮蘭)、SOD、MDA、GSH試劑盒，由南京建成生物工程研究所提供。
3儀器與器材水迷宮測試儀由中國醫學科學院藥物研究所電子儀器室研制。HZQ-C空氣浴振蕩器，哈爾濱市東明醫療儀器廠生產。400R低溫離心機，德國Heraeus產品。722型可見分光光度計，上海分析儀器公司產品。
(二)實驗方法與結果1分組及給藥實驗動物隨機分為6組，即空白對照組、模型對照組、本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組、喜得鎮片組，給藥46天。模型對照組和空白對照組灌服等容積的蒸餾水。
2造模方法除空白對照組每日皮下注射等容積生理鹽水外，其余各組動物均每日皮下注射D-半乳糖120mg/kg，共計46天。
3測定方法(1)分辨學習能力測定于造模第43、44、45天，采用水迷宮測試儀，測定小鼠的分辨學習能力。在第43天開始訓練，條件為室溫(22±2)℃，水溫為(25±1)℃，水深10cm。整個實驗分三天進行，第一天先訓練A點一次，B點三次；第二天測定B點，訓練C點三次；第三天測定C點。A、B點訓練時間限制在2min內，C點限制在4min內。超時者分別按2min和4min計。每只小鼠每次訓練和測試均記錄到達終點的時間(到達時間)和進入盲端的次數(錯誤次數)。以訓練期B、C二點到達時間和錯誤次數的均值作為學習成績，以測試期B、C二點到達時間和錯誤次數作為記憶成績。以上測試均各組間平行進行，在給藥后1小時后測定。結果分別見表1和表2。
表1 本發明藥物組合物有效部位對D-半乳糖誘導的腦功能衰退小鼠分辨學習能力的影響(x±s)

注與模型對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01表2 本發明藥物組合物有效部位對D-半乳糖誘導的腦功能衰退小鼠分辨記憶能力的影響(x±s)

注與模型對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01(2)生化指標測定于造模第46天，給藥1h后，于雙耳后部位斷頭，在4℃冰盤上迅速取腦，去除嗅球、小腦及下位腦干，余下部分加9倍生理鹽水制成10％腦勻漿備用，以測定SOD活力、MDA含量、GSH含量。操作均按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明進行。結果見表3。
表3 本發明藥物組合物有效部位對D-半乳糖誘導的腦功能衰退小鼠生化指標的影響(x±s)

注與模型對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01(三)結論頸背部皮下注射D-半乳糖46天可以造成小鼠學習記憶功能障礙，表現為在水迷宮實驗例中，到達時間延長，錯誤次數增多。本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量均可不同程度改善這種學習記憶障礙。頸背部皮下注射D-半乳糖46天可以造成小鼠腦組織生化代謝紊亂，表現為超氧化物歧化酶(SOD)活力下降，谷胱甘肽(GSH)含量降低，丙二醛(MDA)含量升高。本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量可明顯改善這種生化代謝異常。
實驗例2 對擬氣虛血瘀模型小鼠8℃冰水游泳的保護作用(一)實驗例材料1動物ICR小鼠，共64只，雌雄各半，體重18-22克，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
2藥品受試藥本發明藥物組合物、本發明藥物組合物有效部位，用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
3器材電子秒表，水桶，溫度計等。
(二)實驗方法與結果1分組及給藥 實驗動物隨機分為五組，即本發明藥物組合物A1組、本發明藥物組合物A2組、本發明藥物組合物有效部位B1組、本發明藥物組合物有效部位B2組、模型組(0.5％CMC)。各組動物連續灌胃給藥4天。第4天給藥1小時后造模。
2造模方法 小鼠尾尖部2.5cm處系一10％體重的橡皮泥球，放入8℃±0.5℃的冰水中游泳，每桶一只，水深15cm，直至小鼠溺水死亡。五組間平行操作，記錄小鼠從入水到死亡的這一段時間，即游泳存活時間。
3統計方法 組間比較進行t檢驗，實驗結果以x±S表示。
4實驗例結果 見表4。
表4 本發明藥物組合物對擬氣虛血瘀模型小鼠游泳存活時間的影響(x±S)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01(三)結論本發明藥物組合物、本發明藥物組合物有效部位均有延長擬氣虛血瘀模型小鼠游泳存活時間的作用，并且以本發明藥物組合物有效部位的作用效果好。
實驗例3 對大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響(一)實驗例材料1動物SD大鼠，雄性，體重288±16g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，合格證號SCXK(京)2002-0003。
2藥品及試劑受試藥本發明藥物組合物有效部位，給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
陽性藥天保寧銀杏葉片，浙江康恩貝集團制藥有限公司產品，給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
3儀器AEG-220型電子分析天平，日本Shimadzu公司產品；DF-206型鼓風干燥箱，北京西城醫療器械廠產品。
(二)實驗方法與結果1分組及給藥大鼠按體重隨機分為5組，即模型對照組、天保寧24mg/kg組、本發明藥物組合物小、中、大劑量組。模型組給予等容積0.5％CMC。各組動物連續灌胃給藥四天，第四天給藥1小時后進行實驗。
2實驗方法大鼠腹腔注射10％水合氯醛溶液(3.5ml/kg)麻醉，仰位固定，分離右側頸總動脈和左側頸外靜脈，將三段聚乙烯管相連，一端插入右頸總動脈，另一端插入左頸外靜脈，中間段長10cm，放入一根長為8cm已稱重的7#手術線，管內注滿生理鹽水，連接右側頸總動脈和左頸外靜脈，開放血流20分鐘后中斷血流，取出絲線，置已稱重的硫酸紙上稱濕重，此時總濕重減去原絲線和硫酸紙重即為所形成血栓的濕重。再置于烘箱內60℃烘烤1小時至恒重，冷卻稱重，此時總干重減去原絲線和硫酸紙重即為所形成血栓的干重，比較組間差異。
3統計方法 組間比較進行t檢驗，實驗結果以x±S表示。
4實驗例結果 見表5。
表5 本發明藥物組合物對大鼠實驗性血栓形成的影響(x±S)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01(三)結論本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組均可減輕大鼠動靜脈旁路血栓的濕重及干重，與模型組相比具有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)，表明本發明藥物組合物有效部位具有抗血栓形成的作用。
實驗例4 對擬氣瘀血虛模型小鼠腦組織能量代謝的影響(一)實驗例材料1動物ICR小鼠，雌雄各半，體重20±1g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，合格證號SCXK(京)2002-0003。
2藥品及試劑受試藥本發明藥物組合物有效部位，給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
陽性藥天保寧銀杏葉片，浙江康恩貝集團制藥有限公司產品。給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
試藥乳酸試劑盒，蛋白定量(考馬斯亮蘭法)試劑盒，ATP酶試劑盒，NO試劑盒，NOS試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。
3儀器低溫離心機，德國Heraeus產品；HZQ-C空氣振蕩浴，哈爾濱市東明醫療儀器廠生產；722型分光光度計，上海第三儀器廠生產。
(二)方法與結果
1分組及給藥小鼠隨機分為6組，即模型組，空白對照組，陽性對照組(天保寧40mg/kg)，本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組。模型組和空白組給予等量0.5％CMC。各組動物連續灌胃給藥4天，第四天給藥1小時后造模。
2造模方法小鼠尾尖部約2.5cm處系一10％體重的橡皮泥，分別放入8℃±0.5℃的冰水中游泳，每桶一只，游泳5分鐘后取出。
3測定指標取出小鼠立即斷頭取腦，剔除腦干和嗅球，制備腦組織勻漿，測蛋白含量，LD含量、ATP酶活力、NO活力、NOS活力。
4組織勻漿的制備方法將斷頭后取出的大腦剔除腦干，嗅球，小腦，加9倍生理鹽水于4℃環境中勻漿，制備10％的組織勻漿液。
5蛋白測定方法將10％腦勻漿液4℃下1000轉離心10分鐘，取上清液，按考馬斯亮蘭蛋白試劑盒說明書用722型分光光度計測定蛋白含量。
6LD測定方法將10％腦勻漿液4℃下1000轉離心5分鐘，取上清液，按LD試劑盒說明書用722型分光光度計測定LD含量。
7ATP酶測定方法將10％腦勻漿液4℃下1000轉離心5分鐘，取上清液，按ATP酶試劑盒說明書用722型分光光度計測定ATP酶活力。
8NO及NOS測定方法將10％腦勻漿液4℃下1000轉離心5分鐘，取上清液，按NO及NOS試劑盒說明書用722型分光光度計測定NO及NOS活力。
9統計方法 組間比較進行t檢驗，實驗結果以x±S表示。
10實驗例結果 見表6、7。
表6 本發明藥物組合物對小鼠8℃冰水游泳后斷頭張口呼吸時間的影響(x±S)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01表7 本發明藥物組合物有效部位對小鼠8℃冰水游泳后腦組織LD、ATP酶活力的影響(x±S)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01(三)結論本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組，可明顯延長小鼠斷頭張口呼吸時間，與模型組相比具有顯著差異(P＜0.01，P＜0.05＝。
小鼠經8℃冰水游泳后，腦組織能量代謝出現異常，表現為腦組織乳酸含量增加，Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力下降，與空白對照組相比具有顯著差異。本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組均可明顯抑制冰水游泳致小鼠腦組織乳酸含量增加，Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力下降，與模型組相比具有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。說明本發明藥物組合物可對氣虛血瘀模型小鼠產生腦保護作用。
實驗例5 對雙側頸總動脈結扎大鼠學習記憶能力的影響(一)材料與方法
1動物SD大鼠，雄性，體重240-260g，由北京維通利華實驗通物中心提供，合格證號為SCXK(京)2002-0003。
2藥品與試劑受試藥本發明藥物組合物有效部位，給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
陽性藥喜得鎮，由瑞士山德士藥廠國營華津制藥廠合作生產。給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
試藥NO試劑盒，NOS試劑盒，Ache試劑盒，由南京建成生物工程研究所提供。
3儀器400R低溫離心機，德國產品；空氣浴振蕩器，哈爾濱市東明醫療儀器廠生產；722型分光光度計，上海第三分析儀器廠生產；大鼠水迷宮測試儀，由中國醫學科學院藥物研究所電子儀器室提供。
(二)方法與結果1分組及給藥大鼠隨機分為6組，即假手術組，模型對照組，陽性藥喜得鎮組，本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組。假手術組和模型對照組給予等量的0.5％CMC。各組動物連續給藥44天，第四天給藥1小時后造模。
2造模方法實驗大鼠以10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉，固定，消毒，無菌手術。分離雙側頸總動脈，用一號手術絲線進行永久性結扎，縫合肌肉皮膚，腹腔注射硫酸慶大霉素，0.4ml/只。假手術組除不結扎雙側頸總動脈外，余同模型組。術后每天灌胃給藥，連續40天，于給藥最后五天進行水迷宮行為測定。
3Morris水迷宮行為檢測水迷宮為一不銹鋼圓形水池，直徑120cm，高50cm，由池壁四個入水點將水池分為東南，西南，西北和東北四個象限，在西南象限正中距池壁22cm處放置一直徑9.5cm，高26.5cm的圓形透明平臺。實驗室溫度保持在26℃左右，于迷宮中加入奶粉兩袋(400g/袋)，用熱水沖開，再加水至高過平臺1cm，水溫保持在23℃±0.5℃，迷宮正上方懸掛有攝像機，廣角變焦鏡頭，并連接監視器，插有圖像采集卡及Morris水迷宮數據采集和分析軟件的計算機等記錄顯示系統。將實驗大鼠頭部用染發劑涂黑，晾干后即可進行訓練，訓練期間保持環境安靜，迷宮外參照物保持不變。訓練包括四天的定位航行實驗例和一天的空間搜索實驗例(1)定位航行實驗例用于測量大鼠對水迷宮學習和記憶的獲取能力。實驗歷時四天，受試動物每天分別從東北，西北兩個象限入水點依次進行訓練，將大鼠面向池壁放入水中，如果大鼠在60s內找到平臺，記錄其實際逃避潛伏期，如果在60s內未找到平臺，則逃避潛伏期記為60s。
(2)空間搜索實驗例用于測量大鼠學會尋找平臺后，對平臺空間位置記憶的保持能力。定位航行實驗例結束后，于第五天撤除平臺，由對側象限(即東北象限)中點將大鼠面向池壁放入水中，測其在60s內首次穿越平臺的時間，穿越原平臺相應位置的次數及在平臺所在象限的游泳距離占距離的百分比。
4生化指標測定在大鼠結束水迷宮行為測定后取血進行生化測定。
(1)NO，NOS測定方法將大鼠全血4℃3000轉離心8分鐘，分別取血清按照試劑盒說明書用722型分光光度計測定含量。
(2)Ache測定方法將大鼠全血4℃3000轉離心8分鐘，取血清按照試劑盒說明書用722型分光光度計測定含量。
5統計方法組間比較進行t檢驗，實驗結果以x±S表示。
6實驗例結果見表8、9、10。
(1)對雙側頸總動脈結扎大鼠學習記憶能力的影響定位航行實驗例表8 本發明藥物組合物有效部位對雙側頸總動脈結扎大鼠四天定位航行實驗例中逃避潛伏期的影響(x±S)

注與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01空間搜索實驗例表9 本發明藥物組合物有效部位對雙側頸總動脈結扎大鼠空間搜索實驗例中第一次穿越平臺時間、穿越平臺次數、平臺所在象限游泳距離占總距離百分比的影響(x±S)

注與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01(2)對結扎雙側頸總動脈大鼠血清NO、NOS、Ache的影響表10 本發明藥物組合物有效部位對結扎雙側頸總動脈大鼠血清NO、NOS、Ache的影響(x±S)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01(三)結論采用雙側頸總動脈永久性結扎40天的方法可以使大鼠出現學習記憶障礙。行為學實驗結果表明，本發明藥物組合物有效部位在術后連續灌胃給藥44天，能使模型大鼠學習記憶障礙有所改善。生化指標測定結果顯示，本發明藥物組合物有效部位可以影響雙側頸總動脈永久性結扎大鼠血清中NO，NOS，AchE活力。
實驗例6 對8℃冰水游泳擬氣虛血瘀模型小鼠凝血時間的影響(一)材料與方法1動物ICR小鼠，雄性，體重17-19g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，合格證號SCXK(京)2002-0003。
2藥品受試藥本發明藥物組合物有效部位，給藥前用0.5％CMC溶解配成溶液，4℃冰箱保存。
陽性對照藥天保寧銀杏葉片，棕色片劑。浙江康恩貝制藥有限公司產品。實驗前用蒸餾水溶解配成溶液，4℃冰箱貯存。
(二)實驗方法與結果1分組及給藥實驗動物隨機分為五組，即模型對照組，天保寧組，本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組。各組動物連續灌胃給藥四天，第四天給藥1小時后造模，其中模型對照組給予等容積的蒸餾水。
2造模方法小鼠放入8℃±0.5℃冰水中游泳5分鐘，取出。室溫保持25℃。
3凝血時間的測定小鼠自冰水中取出后，立即用毛細管于小鼠眼內眥取血，記錄從取血開始至凝血的一段時間作為凝血時間。
4統計方法組間比較進行t檢驗，實驗結果以x±S表示。
5實驗例結果見表11。
表11 本發明藥物組合物有效部位對8℃冰水游泳擬氣虛血瘀模型小鼠凝血時間的影響(x±S)

注與模型對照組相比，**P＜0.01(三)結論本發明藥物組合物有效部位0.30～0.50g/kg可以明顯延長擬氣虛血瘀模型小鼠凝血時間，與模型組相比具有顯著差異，(P＜0.05，P＜0.01)。
實驗例7 對大腦中動脈血栓形成(MCAT)模型大鼠神經癥狀、腦梗塞范圍及水腫程度的影響實驗證明MCAT大鼠神經癥狀評分分值增加，腦梗塞范圍增大，腦水腫程度提高。本發明藥物組合物有效部位小、中、大劑量組均可改善MCAT大鼠神經癥狀，減少其腦梗塞范圍；明顯降低MCAT大鼠腦水腫程度。說明其具有拮抗腦缺血損傷的作用。
下述實施例均能實現上述實驗例的效果。
具體實施例方式
實施例1人參10Kg、葛根10Kg、赤芍10Kg上述原料藥加入常規輔料，按照常規工藝，制成膠囊劑。
實施例2人參3Kg、葛根18Kg、赤芍9Kg上述原料藥加入常規輔料，按照常規工藝，制成注射劑。
實施例3人參18Kg、葛根3Kg、赤芍12Kg上述原料藥加入常規輔料，按照常規工藝，制成口服液。
實施例4
人參6Kg、葛根15Kg、赤芍12Kg上述原料藥合并水煮，醇沉，過濾，濃縮，將所得混合物加入常規輔料，按照常規工藝，制成口服液。
實施例5人參15Kg、葛根6Kg、赤芍12Kg上述原料藥分別水煮，醇沉，過大孔樹脂柱吸附，分別過濾，分別濃縮得提取物，將所得提取物混合，加入常規輔料，按照常規工藝，制成注射液。
實施例6人參6Kg、葛根12Kg、赤芍15Kg上述原料藥分別水煮，醇沉，過濾，分別濃縮得提取物，將所得提取物混合，加入常規輔料，按照常規工藝，制成膠囊劑。
實施例7人參10kg、葛根10kg、赤芍10kg按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加8L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；該有效部位加入常規輔料、按照常規工藝，制成濃縮丸劑。
實施例8人參3kg、葛根18kg、赤芍9kg稱取人參，加7L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加9L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，減壓濃縮(請詳述濃縮的條件，并作濃縮至？ml或g的限定)，濃縮液通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加7L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1∶1∶1，1∶20∶1，1∶1∶20，1∶10∶10或3∶4∶3比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位；該有效部位加入常規輔料、按照常規工藝，制成凍干粉針劑。
實施例9人參18Kg、葛根3Kg、赤芍12Kg按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加8L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；該有效部位加入常規輔料、按照常規工藝，制成口服液。
實施例10人參18Kg、葛根3Kg、赤芍12Kg
稱取人參，加8L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，濃縮液通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加8L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，濃縮液通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加8L的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液，濃縮液通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1∶1∶1，1∶20∶1，1∶1∶20，1∶10∶10或3∶4∶3比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位；該有效部位加入常規輔料、按照常規工藝，制成注射劑。
實施例11人參6g、葛根6g、赤芍6g赤芍中有效成分的分離取赤芍6g，用8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏500g，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～60∶1洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.02g；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.005g和β-谷甾醇0.02g；部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用3∶1比例的石油醚-丙酮→7.5∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，5∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.008g；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2.5∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每30ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.03g，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.04g；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.035g；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.04g；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑7.5∶6洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.006g；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每30ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.01g；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.025g；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑6∶1洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷0.03g；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.03g；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.045g；葛根中有效成分的分離取葛根6g，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400g進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，8∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.01g，流份5得到花生酸0.012g；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.006g；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.02g；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，20∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.03g；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.035g；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.02g；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.025g；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.045g；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏30g；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每100ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025g；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，15∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.025g，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.01g，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.012g；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.045g；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑7.5∶1比例洗脫，得到葛根素0.055g；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑5.5∶1.25∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.05g；人參中有效成分的分離取人參6g，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏600g進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每100ml收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑25∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每25ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.045g；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.015g；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用SephadexLH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.03g；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.01g；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.08g和20(S)-人參皂苷Rg20.03g；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.05g，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.04g；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.06g；取上述各活性成分，混勻，加入常規輔料，按照常規工藝，制成膠囊劑。
實施例12人參3g、葛根18g、赤芍9g赤芍中有效成分的分離取赤芍9g，用8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏500g，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～60∶1洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.02g；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.005g和β-谷甾醇0.02g；部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用3∶1比例的石油醚-丙酮→7.5∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，5∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.008g；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2.5∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每30ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.03g，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.04g；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.035g；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.04g；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑7.5∶6洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.006g；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每30ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.01g；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.025g；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑6∶1洗脫，分份收集，每50ml收集-份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷0.03g；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.03g；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.045g；葛根中有效成分的分離取葛根18g，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400g進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，8∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.01g，流份5得到花生酸0.012g；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.006g；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.02g；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，20∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.03g；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.035g；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.02g；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.025g；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.045g；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏30g；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每100ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025g；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，15∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.025g，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.01g，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.012g；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.045g；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑7.5∶1比例洗脫，得到葛根素0.055g；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑5.5∶1.25∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.05g；人參中有效成分的分離取人參3g，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000ml后，用水稀釋至5000ml，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏600g進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每100ml收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑25∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每25ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.045g；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.015g；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用SephadexLH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.03g；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.01g；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.08g和20(S)-人參皂苷Rg20.03g；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.05g，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.04g；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.06g；上述活性成分，混合，加入常規輔料，按照常規工藝，制成口服液。
權利要求
1.一種抗血管性癡呆的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料組成為人參3～18重量份、葛根3～18重量份、赤芍3～18重量份。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料組成為人參10重量份、葛根10重量份、赤芍10重量份。
3.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料組成為人參3重量份、葛根18重量份、赤芍9重量份。
4.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料組成為人參18重量份、葛根3重量份、赤芍12重量份。
5.如權利要求1-4任一所述的藥物組合物有效部位的制備方法，其特征在于該方法任選如下一種A、按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；B、稱取人參，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加6～10倍體積份的30～80％乙醇提取1～4次，每次1～3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的1-3倍體積，60～65℃下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加2-6倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1～20∶1～20∶1～20比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位。
6.如權利要求5所述的藥物組合物有效部位的制備方法，其特征在于該方法任選如下一種A、按上述比例稱取原料藥，混合均勻，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位；B、稱取人參，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃的條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃的條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得人參提取部位；稱取葛根，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃條件下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得葛根提取部位；稱取赤芍，加8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至藥材量的2倍體積，60～65℃下相對密度約為1.04～1.05的濃縮液；取濃縮液，加4倍藥材量的水攪拌均勻，通過AB-8型大孔吸附樹脂進行吸附，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，得赤芍提取部位；取上述人參提取部位、葛根提取部位和赤芍提取部位，按1∶1∶1，1∶20∶1，1∶1∶20，1∶10∶10或3∶4∶3比例混合均勻，即得本發明藥物組合物有效部位；本發明藥物組合物有效部位為淡棕色粉末，具有一定的吸濕性，易溶于水和稀乙醇，難溶于氯仿、石油醚等親脂性有機溶劑；三氯化鐵反應陽性，三氯化鋁反應陽性，鹽酸-鎂粉反應陰性，醋酐-濃硫酸反應陽性，α-萘酚-濃硫酸反應陽性；主要含有異黃酮類、單萜苷和皂苷類成分，其中葛根素含量為15.0～25.0％，大豆苷、3′-甲氧基葛根素和芹糖基葛根素的總含量為12.0～18.0％，芍藥苷含量為7.0～15.0％，人參總皂苷的含量為17.0～25.0％。
7.如權利要求1-4任一所述的藥物組合物活性成分的制備方法，其特征在于該方法為赤芍中有效成分的分離取赤芍3-18重量份，用6-10倍體積份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400-600重量份，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～60∶1洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.01-0.03重量份；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.004-0.006重量份和β-谷甾醇0.01-0.03重量份；部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用2-4∶1比例的石油醚-丙酮→5-10∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，4-6∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.006-0.01重量份；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2-3∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每20-40體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.02-0.04重量份，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，20-40∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.03-0.05重量份；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，20-40∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.025-0.045重量份；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，20-40∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.03-0.05重量份；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑6-9∶6洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.004-0.008重量份；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.005-0.015重量份；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，6-10∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.015-0.035重量份；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑5-7∶1洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，6-10∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，6-10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，4～7∶0.5～1.5∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷0.02-0.04重量份；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.02-0.04重量份；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，17～23∶1～3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.035-0.055重量份；葛根中有效成分的分離取葛根3-18重量份，用6-10倍重量份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏300-500重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，6-10∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.005-0.015重量份，流份5得到花生酸0.01-0.015重量份；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.004-0.008重量份；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.01-0.03重量份；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，10-30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.02-0.04重量份；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.025-0.045重量份；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.01-0.03重量份；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，5-15∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.015-0.035重量份；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.035-0.055重量份；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏20-40重量份；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50-150體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，17-23∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025重量份；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，25-35∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，12-18∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.015-0.035重量份，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.005-0.015重量份，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，25-35∶1-3∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.01-0.015重量份；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.035-0.055重量份；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑5-10∶1比例洗脫，得到葛根素0.045-0.065重量份；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑3-8∶0.5-2∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.04-0.06重量份；人參中有效成分的分離取人參3-18重量份，用6-10倍重量份的30～80％乙醇提取1-4次，每次1-3小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至1500-2500體積份后，用水稀釋至4000-6000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏400-800重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每50-150體積份收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑15-35∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每15-35體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.035-0.055重量份；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.005-0.025重量份；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.02-0.04重量份；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.005-0.015重量份；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.06-0.10重量份和20(S)-人參皂苷Rg20.02-0.04重量份；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑5-15∶1比例洗脫，分份收集，每40-60體積份收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每10-30體積份收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.04-0.06重量份，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.03-0.05重量份；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.04-0.08重量份。
8.如權利要求7所述的藥物組合物活性成分的制備方法，其特征在于該方法為赤芍中有效成分的分離取赤芍6重量份，用8倍體積份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏500重量份，進行硅膠柱色譜分離(色譜分離I)，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到115～125個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離I得到的流份第4～6、7～16、17～31、32～41、42～74、75～99、100～121分別合并，得到CA、CB、CC、CD、CE、CF、CG七個不同部分；部分CA進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAI，用石油醚-丙酮混合溶劑2∶1→7∶5梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CAI得到的流份5～17合并，硅膠柱色譜分離，即色譜分離CAII，用石油醚-丙酮混合溶劑40～6∶1洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CAII得到的流份3～5合并，析出白色片狀結晶，用石油醚重結晶，得到苯甲酸0.02重量份；部分CB進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBI，用氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→50∶1→20∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBI得到的流份22～27合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CBII，用石油醚-丙酮混合溶劑(7∶2)洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到10～15個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CBII得到的流份9經Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-2-羥基-1，8-桉葉素0.005重量份和β-谷甾醇0.02重量份；部分CD進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDI，用3∶1比例的石油醚-丙酮→7.5∶5比例的石油醚-丙酮→甲醇梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到75～80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDI得到的流份41～70合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDII，2∶1比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDII得到的流份9～16合并，經硅膠柱色譜分離，5∶1比例的石油醚-丙酮洗脫，得到二氫芹菜素0.008重量份；色譜分離CDI得到的甲醇洗脫物用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDIII，2.5∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到25～30個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIII得到的流份9～18合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CDIV，丙酮洗脫，分份收集，每30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDIV得到的流份5～12合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDV，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到45～50個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDV得到的流份8～12合并，析出白色結晶，用丙酮重結晶得到芍藥新苷0.03重量份，流份13～30合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CDVI，氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVI得到的流份4～18合并，經硅膠制備色譜分離制備，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑展開，得到苯甲酰芍藥苷0.04重量份；流份25～36合并，經Sephadex LH-20柱色譜分離(色譜分離CDVII)，丙酮洗脫，分份收集，每20ml收集一份，共收集得到10～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CDVII得到的流份1～3合并，經硅膠柱色譜純化，30∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到4-乙基芍藥苷0.035重量份；色譜分離CDV得到的流份31～42合并，經硅膠柱層析純化，30∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到1S，2S，4R-反式-1，8-桉葉素-2-O-β-D-葡萄糖苷0.04重量份；部分CE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEI，石油醚-丙酮混合溶劑7.5∶6洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到28～33個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEI得到的流份19～30合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEII，氯仿-甲醇混合溶劑15∶1→12∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEII得到的組分1～6合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEIII，氯仿-甲醇混合溶劑50∶1→20∶1→8∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIII得到的流份22～28用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到鄰苯三酚0.006重量份；色譜分離CEII得到的組分11～12合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離CEIV，用水→30％甲醇→50％甲醇梯度洗脫，分份收集，每30體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEIV得到的組分9～14合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離CEV，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEV得到的流份3～4合并，用Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到沒食子酸乙酯0.01重量份；流份8～15合并，經聚酰胺柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，得到沒食子酸0.025重量份；色譜分離CEII得到的組分13～15合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVI，氯仿-甲醇混合溶劑6∶1洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份；色譜分離CEVI得到的流份14～20合并，硅膠柱層析色譜分離，即色譜分離CEVII，8∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVII得到的流份5～9合并，用反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIII，30％甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIII得到的流份4～7合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVIX，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVIX得到的流份10～13經反相硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVX，40％甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVX得到的流份14～19經硅膠柱色譜純化，8∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到乙基芍藥新苷A(25mg)；色譜分離CEVIX得到的流份14～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CEVXI，5.5∶1.0∶0.1比例的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CEVXI得到的流份14～17合并，經Sephadex LH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到(1S，2S，4R)-反式-1，8-桉葉素-2-O-(6-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷0.03重量份；部分CF經Toyopearl柱色譜分離，即色譜分離CFI，用水洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFI得到的流份5用硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水洗脫，得到芍藥苷0.03重量份；色譜分離CFI得到的流份6～7合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離CFIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離CFIII得到的流份15～23合并，經硅膠柱層析純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到羥基芍藥苷0.045重量份；葛根中有效成分的分離取葛根6重量份，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取方法制備的上述干浸膏400重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離II，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到80個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離II得到的流份第3～5、6～7、8～21、22～68、69～80分別合并，得到GA、GB、GC、GD、GE五個部分；部分GA經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAI，氯仿洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到10個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAI得到的流份2經Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離GAII，甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GAII得到的流份2～5合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GAIII，8∶1比例的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到8～12個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自色譜分離GAIII得到的流份4得到棕櫚酸0.01重量份，流份5得到花生酸0.012重量份；流份6析出白色結晶，用丙酮重結晶，得到羽扇豆醇0.006重量份；流份8～9析出白色針狀結晶，用甲醇重結晶，得到β-谷甾醇0.02重量份；部分GB經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBI，氯仿洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBI得到的流份11～17合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GBII，20∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到18～24個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GBII得到的流份3析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到二十四烷酸甘油酯0.03重量份；流份4放置后析出白色結晶，用甲醇重結晶，得到大豆素0.035重量份；部分GC經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCI，用氯仿-甲醇混合溶劑20∶1→10∶1梯度洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到60～70個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCI得到的流份30～42合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCII得到的流份13～20合并，從中析出白色沉淀，甲醇反復洗滌后得到染料木苷0.02重量份；色譜分離GCI得到的流份43～61合并，經硅膠柱色譜分離，即色譜分離GCIII，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GCIII得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜純化，10∶1比例的氯仿-甲醇洗脫，得到4′，8-二甲氧基-7-葡萄糖基異黃酮0.025重量份；色譜分離GCIII得到的流份21～29放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到4′-甲氧基大豆苷0.045重量份；部分GD用適量水稀釋，通過AB-8大孔吸附樹脂，水洗脫至水洗液近無色后，用30～70％乙醇洗至洗脫液顏色較淺時止，合并乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，得到浸膏30重量份；取上述浸膏用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDI，氯仿-甲醇混合溶劑100∶0→10∶1→4∶1→2∶1梯度洗脫，分份收集，每100體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDI得到的流份11～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDII得到的流份2～6合并，用聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIII，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIII得到的流份2～5合并，經聚酰胺柱色譜純化，20∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到芒柄花苷0.025重量份；6～14合并，經聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDIV，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDIV得到的流份3～5合并，聚酰胺柱色譜分離，即色譜分離GDV，15∶1比例的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，聚酰胺薄層色譜檢識后合并相同流份，流份10放置后析出葛根新苷A0.025重量份，流份13～15放置后析出3′-羥基葛根素0.01重量份，流份17～20用聚酰胺柱色譜分離，30∶2∶1比例的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶劑洗脫，得到大豆苷0.012重量份；流份14～25合并后放置，析出結晶，用甲醇重結晶，得到3′-甲氧基葛根素0.045重量份；色譜分離GDIII得到的流份15～17合并，經聚酰胺柱色譜分離，氯仿-甲醇混合溶劑7.5∶1比例洗脫，得到葛根素0.055重量份；色譜分離GDI得到的流份28～36合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離GDVI，氯仿-甲醇-水混合溶劑5.5∶1.25∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離GDVI得到的流份13～18放置后析出結晶，用甲醇重結晶，得到芹糖基葛根素0.05重量份；人參中有效成分的分離取人參6重量份，用8倍重量份的30～80％乙醇提取3次，每次2小時，合并各次提取液，在真空度≥0.08Mpa，蒸汽壓力不超過0.1Mpa，溫度70～80℃條件下減壓濃縮至2000體積份后，用水稀釋至5000體積份，通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，待提取液全部通過樹脂柱后，用水繼續沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用30～80％乙醇對樹脂柱上吸附的物質進行洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，殘留物置真空干燥箱中50～70℃干燥，得到干浸膏；取上述方法制備的干浸膏600重量份進行硅膠柱色譜分離，即色譜分離III，氯仿-甲醇混合溶劑19∶1～0∶1梯度洗脫，分份收集，每100體積份收集一份，共收集得到100個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，將色譜分離III得到的流份第16～25、26～40、41～55、56～79、80～100分別合并，得到RA、RB、RC、RD、RE五個部分；部分RB用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RBI，氯仿-甲醇混合溶劑25∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到35～40個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBI得到的流份14～22合并，用Sephadex LH-20柱色譜分離，即色譜分離RBII，甲醇洗脫，分份收集，每25體積份收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RBII得到的流份13～18合并后析出20(S)-人參皂苷Rh10.045重量份；流份20～23合并后析出20(S)-原人參三醇0.015重量份；部分RC用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到28～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCI得到的流份13～19合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RCII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RCII得到的流份10～16合并，用SephadexLH-20柱色譜純化，甲醇洗脫，得到20(R)-人參皂苷Rh10.03重量份；部分RD用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50ml收集一份，共收集得到30～35個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDI得到的流份16～21合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離RDII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到20～25個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離RDII得到的流份13～15合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到15～20個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份13～16析出20(S)-人參皂苷Rg30.01重量份；部分RE用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REI，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到83～88個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REI得到的流份27～38合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rg10.08重量份和20(S)-人參皂苷Rg20.03重量份；流份42～59合并，用硅膠柱色譜分離，即色譜分離REII，氯仿-甲醇混合溶劑10∶1比例洗脫，分份收集，每50體積份收集一份，共收集得到48～56個流份，硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，色譜分離REII得到的流份18～30合并，經反相硅膠柱色譜分離，甲醇洗脫，分份收集，每20體積份收集一份，共收集得到40～45個流份，反相硅膠薄層色譜檢識后合并相同流份，自流份12～18得到人參皂苷Rd0.05重量份，自流份22～29份得到人參皂苷Re0.04重量份；色譜分離REII得到的流份32～45合并，經反相硅膠柱色譜純化，甲醇洗脫，得到人參皂苷Rb10.06重量份。
9.如權利要求1-4任一所述的藥物組合物，其特征在于按常規工藝，加入常規輔料，制成臨床接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
10.如權利要求5所述的藥物組合物有效部位，其特征在于按常規工藝，加入常規輔料，制成臨床接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
11.如權利要求7所述的藥物組合物活性成分，其特征在于按常規工藝，加入常規輔料，制成臨床接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
12.如權利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療抗血管性癡呆藥物中的應用。
13.如權利要求5所述的藥物組合物有效部位在制備治療抗血管性癡呆藥物中的應用。
14.如權利要求6所述的藥物組合物有效部位在制備治療抗血管性癡呆藥物中的應用。
15.如權利要求7所述的藥物組合物活性成分在制備治療抗血管性癡呆藥物中的應用。
16.如權利要求8所述的藥物組合物活性成分在制備治療抗血管性癡呆藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種藥物組合物及其有效部位、活性成分的制備方法。本發明藥物組合物由人參、葛根、赤芍組成，本發明藥物組合物有效部位的制備方法為稱取原料藥，混合均勻，加乙醇提取，合并各次提取液，減壓濃縮。取濃縮液，加水攪拌均勻，通過大孔吸附樹脂進行吸附，用水沖洗樹脂柱，至水洗液近無色止，然后再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得本發明藥物組合物有效部位。本發明藥物組合物及其有效部位或活性成分用于制備治療血管性癡呆的藥物。
文檔編號A61K9/48GK1943642SQ20061011383
公開日2007年4月11日 申請日期2006年10月18日 優先權日2006年10月18日
發明者石任兵, 王永炎, 劉斌, 徐秋萍, 王彥志 申請人:北京中醫藥大學