專利名稱：一種從桑葉中提取總黃酮的方法
技術領域：
本發明涉及一種天然植物有效活性成分提取方法，具體涉及到一種從桑葉中提取總黃酮的方法。
背景技術：
桑葉又名“鐵扇子”，為桑屬alba Z )植物的葉片，是常用的中草藥之一。桑葉總黃酮是桑葉中的主要活性成分。桑葉黃酮類成分主要包括蘆丁、槲皮素、異槲皮素和二氫山萘等。桑葉(干重)中含總黃酮類化合物約為2. 53%左右，是所有植物莖葉黃酮類化合物含量較高的一種。現代藥理學研究證明，桑葉黃酮具有降血糖、抗炎、抗氧化和降血脂等功效。目前桑葉總黃酮的提取主要是以酒精溶液為溶劑，提取法有超聲輔助法、熱回 流提取法、浸提法和超臨界CO2提取法等。這些方法不同程度地存在提取時間長、效率低等問題，無法滿足人們對現代化大生產的需求。微波輔助提取(Microwave-AssistedExtraction, MAE)是利用微波加熱來加速溶劑對固體樣品中目標萃取物的萃取過程。其作用機理是微波射線能夠使植物細胞內溫度突然升高，使其內部壓力超過細胞壁膨脹能力而導致細胞破裂，使細胞內物質傳遞到周圍溶劑中被溶解而使提取率大大提高。水是吸收微波最好的介質，水作為一種極性溶劑，可以有效吸收微波能，促進細胞壁的溶脹破裂，提高植物有效成分的提取效率。而現有技術中并沒有以水作為提取溶劑結合微波輔助提取的方法。
發明內容
為了解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明目的在于縮短桑葉總黃酮的提取時間，減少環境污染和生產成本，提供了一種更為高效、環保的從桑葉中提取總黃酮的方法。為了達到上述目的，本發明采用的技術方案如下
一種從桑葉中提取總黃酮的方法，包括如下步驟
(1)將新鮮桑葉洗凈、干燥、粉碎后過160目得桑葉粉；
(2)在桑葉粉中加入一定量的純凈水，混合均勻、密封后放入微波萃取儀中進行微波輔助提取，提取一次；
(3)提取完成后，將提取液過濾，測定總黃酮提取率。進一步的,步驟(I)中桑葉洗凈后于50°C烘箱干燥,使干燥后的桑葉含水量在5%以下。進一步的，步驟(2)中微波功率為500W，提取時間2 6min，提取溫度為90 100。。。進一步的，步驟(2)中桑葉粉和純凈水的比例在1:25 l:30g/mL。采用本發明的方法得到的桑葉提取液，用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”測定總黃酮的含量達到2. 22%左右。本發明具有的優點體現在
本發明以水作為提取溶劑結合微波輔助提取桑葉總黃酮與其它方法相比具有快速、高效、省溶劑、選擇性強、環境友好等優點。本發明以水作為提取溶劑，不僅環保，而且大大降低了提取桑葉總黃酮的生產成本；在微波的作用下，桑葉的細胞壁破裂，導致黃酮類成分充分溶出擴散到溶劑中，從而提高了提取率；同時微波能夠破壞葉綠素的結構，避免葉綠素顏色在測定吸光值時的影響。本發明提供上述桑葉中總黃酮的提取方法，可以在制備食品、藥品中應用，達到充分利用桑葉資源的目的。
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圖I為采用不同提取方法的總黃酮提取率的柱狀圖。
具體實施例方式實施例I
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目(篩子)得到桑葉粉。取0.2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為95°C，提取時間為4min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到1.703% (相對于桑葉粉的重量)。實施例2
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為95°C，提取時間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到2. 018%。實施例3
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時間為4min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到1.902%。實施例4
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為90°C，提取時間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到I. 828%。實施例5 將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到2. 141%。實施例6
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時間為2min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計算桑葉總黃酮的提取率達到2. 189%。為了驗證本發明提取方法的提取效果，以下幾種提取方法進行了對比試驗
I)熱回流提取取Ig桑葉粉，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，100°C條件下提取80min，提取液過濾，定容于50mL容量瓶，測定吸光值，計算總黃酮提取率。2)超聲輔助提取取O. 2g桑葉粉，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，于60°C條件下提取80min，提取液過濾、定容于IOmL容量瓶，測定吸光值，計算總黃酮提取率。3 )浸泡提取取O. 2g桑葉粉，按照1:29g/mL的比例加入純凈水，于室溫條件下浸泡24h，提取液過濾、定容于IOmL容量瓶，測定吸光值，計算總黃酮提取率。如圖I所示，上述三種方法總黃酮提取率和本發明的總黃酮提取率相比，本發明的總黃酮提取率明顯高于現有技術中的其他三種方法。以上所述及圖中所示的僅是本發明的優選實施方式。應當指出，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明的原理的前提下，還可以作出若干變型和改進，這些也應視為屬于本發明的保護范圍。
權利要求
1.一種從桑葉中提取總黃酮的方法，包括如下步驟 (1)將新鮮桑葉洗凈、干燥、粉碎后過160目得桑葉粉； (2)在桑葉粉中加入一定量的純凈水，混合均勻、密封后放入微波萃取儀中進行微波輔助提取，提取一次； (3)提取完成后，將提取液過濾，測定總黃酮提取率。
2.根據權利要求I所述的從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(I)中桑葉洗凈后于50°C烘箱干燥，使干燥后的桑葉含水量在5%以下。
3.根據權利要求I所述從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(2)中微波功率為500W，提取時間2 6min，提取溫度為90 100°C。
4.根據權利要求1-3任一所述從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(2)中桑葉粉和純凈水的比例在1:25 l:30g/mL。
全文摘要
本發明公開了一種從桑葉中提取總黃酮的提取方法，包括如下步驟將新鮮桑葉洗凈，干燥，粉碎，過160目得桑葉粉；然后將桑葉粉與純凈水按照一定比例混合均勻，放入微波萃取設備里進行萃取，萃取一段時間后過濾，定容，測定桑葉總黃酮的含量。本發明首次以水作為溶劑，結合微波輔助法提取桑葉總黃酮。本發明具有快速高效、提取率高和環境友好的優點。而且減少了有機溶劑提取導致葉綠素等雜質對測定結果的影響，更有利于后續的分離純化工作。
文檔編號A61K36/605GK102872201SQ20121033592
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月12日 優先權日2012年9月12日
發明者賀偉強 申請人:嘉興職業技術學院