專利名稱：殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物及制劑與制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切的說是利用殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的納米/微米復合物作為載體來增加細胞對低分子肝素的攝取，利用殼聚糖及其衍生物的生物黏附性和短暫打開細胞間的緊密連接的特性進一步增加低分子肝素透過生物膜的量，通過復合物的形成提高低分子肝素的穩定性，通過制成不同的制劑來提供臨床用藥的便利性。
背景技術：
低分子肝素(LMWH)是由肝素經降解得到的低分子量的肝素片段或經分級法得到的低分子量肝素組分，是由D-葡糖胺與糖醛酸的交替殘基鏈組成的多糖，相對分子質量范圍一般為3000～8000，臨床上主要用于預防和治療血栓栓塞性疾病如深靜脈血栓、肺栓塞等。和普通肝素相比，LMWH與蛋白的結合率降低，藥物的半衰期延長，因而產生相同的抗凝效果所需注射的藥物劑量減少了，引起出血并發癥的幾率大大降低，在臨床上應用前景廣泛，是一種極有前途的藥物。
然而，LMWH仍然由于其相對分子質量大、多氫鍵及荷負電荷的結構特點使其難以透過胃腸粘膜吸收，目前臨床上只能以靜脈或肌肉注射方式給藥，而且需頻繁給藥，患者的順應性差。病人出院后用藥也極為不便。因此，研究低分子肝素的口服制劑或長效注射劑具有極其重要的臨床意義。我們利用現代制劑技術，采用生物可降解、生物相容性的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素制備成低分子肝素的納米/微米復合物并制成相應的劑型，為臨床提供高效、穩定、安全的藥物制劑，造福百姓。
發明內容
本發明的目的是提供一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的納米/微米復合物及其制劑，它們具有吸收好，生物利用度高、療效高、副作用小的特點。并提供可工業化應用的制備方法。
本發明選擇不同分子量的殼聚糖、三甲基殼聚糖、聚乙二醇化的殼聚糖、聚乙二醇化的三甲基殼聚糖、巰基化的殼聚糖作為載體，與低分子肝素形成納米/微米復合物，必要時通過加入不同分子量的海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉或三磷酸五鈉調節低分子肝素的釋藥速度。
本發明中所述的低分子肝素的納米/微米復合物，殼聚糖及其衍生物與低分子肝素的重量比為0.1-100∶1中的任意一種。
本發明中所說的低分子肝素形成的納米/微米復合物的制備可采用乳化聚合法，乳化溶劑揮發法、包埋法、自組裝技術、冷凍干燥法、噴霧干燥法、超聲法的任意一種或幾種。
本發明所制成的低分子肝素形成的納米/微米復合物可制備成各種劑型，如口服制劑(包括片劑、顆粒劑、膠囊劑、干混懸劑、微丸等)，注射劑(包括凍干粉針、無菌粉針)，還可制成透皮吸收制劑、滴鼻劑、噴霧劑、氣霧劑、栓劑等。
本發明所說的口服或注射制劑可以為常規制劑，也可以為緩釋/控釋制劑。
本發明所述的“片劑”中，包括普通素片、包衣片、溶液片、舌下片、頰膜片，緩釋/控釋片等。
本發明所述的“膠囊劑”中，除含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物外，可以含有適當的賦形劑，制備成硬膠囊劑或軟膠囊劑。
本發明所述的“干混懸劑”主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物、適當的賦形劑，以干粉狀態存在，使用前用配套溶媒混懸后使用。
本發明中所說的“凍干粉針”主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物、適當支持劑/賦形劑，如“甘露醇”、“乳糖”、“蔗糖”、“山梨醇”、“右旋糖苷”等一種或幾種混合使用，通過冷凍干燥而得。
本發明中所說的“無菌粉針”主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物、適當支持劑/賦形劑，如“甘露醇”、“乳糖”、“蔗糖”、“山梨醇”、“右旋糖苷”等一種或幾種混合使用，通過冷凍干燥/噴霧干燥得到的粉末進行無菌分裝而得。
本發明解決了低分子肝素的口服不能吸收，需頻繁注射給藥的問題，而且低分子肝素的穩定性大大提高。本發明的低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物可用于制成各種制劑，所制成的制劑可以為常規/緩釋/控釋制劑，提高了療效，增加了用藥的便利性，減少了藥物的副作用。
具體實施例方式
實施例1低分子肝素與不同分子量殼聚糖納米/微米復合物的制備按上述比例稱取不同分子量的殼聚糖制成適當濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素制成適當濃度的溶液，在攪拌條件下加入到上述殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得。
實施例2低分子肝素與不同分子量三甲基殼聚糖納米/微米復合物的制備按上述比例稱取不同分子量的三甲基殼聚糖制成適當濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素制成適當濃度的溶液，在攪拌條件下加入到上述三甲基殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得。
實施例3低分子肝素與不同分子量聚乙二醇化的殼聚糖納米/微米復合物的制備按上述比例稱取不同分子量的聚乙二醇化的殼聚糖制成適當濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素制成適當濃度的溶液，在攪拌條件下加入到上述聚乙二醇化的殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得。
實施例4低分子肝素與不同分子量聚乙二醇化的三甲基殼聚糖納米/微米復合物的制備按上述比例稱取不同分子量的聚乙二醇化的三甲基殼聚糖制成適當濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素制成適當濃度的溶液，在攪拌條件下加入到上述聚乙二醇化的三甲基殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得。
實施例5低分子肝素與不同分子量不同取代度的巰基化殼聚糖納米/微米復合物的制備按上述比例稱取不同分子量不同取代度的巰基化殼聚糖制成適當濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素制成適當濃度的溶液，在攪拌條件下加入到上述不同分子量不同取代度的巰基化殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得。
實施例6不同殼聚糖及其衍生物的低分子肝素納米/微米復合物的制備按上述比例取一定濃度的殼聚糖水溶液20ml置于燒杯中，磁力攪拌。另取20ml含海藻酸鈉的低分子肝素水溶液，勻速滴入殼聚糖溶液中，滴完后室溫孵化30分鐘，即得。
實施例7不同殼聚糖及其衍生物的低分子肝素納米/微米復合物的制備按上述比例取一定濃度的殼聚糖水溶液20ml置于燒杯中，磁力攪拌。另取20ml含羧甲基纖維素鈉的低分子肝素水溶液，勻速滴入殼聚糖溶液中，滴完后室溫孵化30分鐘，即得。
實施例8不同殼聚糖及其衍生物的低分子肝素納米/微米復合物的制備按上述比例取一定濃度的殼聚糖水溶液20ml置于燒杯中，磁力攪拌。另取20ml含三磷酸五鈉的低分子肝素水溶液，勻速滴入殼聚糖溶液中，滴完后室溫孵化30分鐘，即得。
實施例9不同殼聚糖及其衍生物的低分子肝素納米/微米復合物的制備取一定濃度的2ml海藻酸鈉和低分子肝素水溶液乳化于50mL含有1％司盤80的植物油中，10min后，加入50ml含有不同濃度殼聚糖的3％CaCl2水溶液。30min后，離心分離，丙酮、蒸餾水洗，真空干燥。
實施例10取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適量的輔料混勻制粒壓片，得各種低分子肝素片。選用不同的材料制粒后混勻壓片，可得緩釋/控釋片。
實施例11取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適量的輔料混勻，直接制粒/制成微丸后，裝膠囊，即得膠囊劑。將所制成的微丸以不同的包衣材料進行包衣后，混勻，裝膠囊，即得緩釋/控釋膠囊。
實施例12取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適宜的可溶性輔料混勻制粒，干燥，顆粒分裝于滴瓶中。臨用前用配套溶媒溶解后得滴鼻劑。
實施例13取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適當的賦形劑混勻制粒，干燥，顆粒分裝于小瓶中。使用前用配套溶媒混懸后制成混懸劑使用。
實施例14取適量在無菌狀態下制備的低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，加入適量的乳糖和注射用水，所得溶液分裝于西林瓶中，進行冷凍干燥，得凍干粉針。通過控制納米/微米復合物的大小和組成控制其釋藥速度。
實施例15取適量在無菌狀態下制備的低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，加入適量的甘露醇和注射用水，所得溶液分裝于西林瓶中，進行冷凍干燥，得凍干粉針。通過控制納米/微米復合物的大小和組成控制其釋藥速度。
權利要求
1.一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于殼聚糖及其衍生物與低分子肝素的重量比為0.1-100∶1，形成納米/微米復合物。
2.根據權利要求1所述的一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的低分子肝素為平均分子量小于10000Da的低分子肝素鈉，低分子肝素鈣，依諾肝素，替地肝素；所述的殼聚糖為不同分子量的殼聚糖、三甲基殼聚糖、聚乙二醇化的殼聚糖、聚乙二醇化的三甲基殼聚糖、巰基化的殼聚糖、其他人工修飾的殼聚糖的一種/多種。
3.根據權利要求2所述的一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的殼聚糖為不同分子量、不同脫乙酰度的殼聚糖，不同分子量、不同甲基和亞甲基取代度的三甲基殼聚糖，不同分子量、不同聚乙二醇取代度的殼聚糖和三甲基殼聚糖，不同分子量、不同巰基取代度的殼聚糖和三甲基殼聚糖。
4.根據權利要求1所述的一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的聚乙二醇化的殼聚糖、聚乙二醇化的三甲基殼聚糖為聚乙二醇550，1000，2000，5000，10000，12000，20000修飾的不同分子量、不同聚乙二醇取代度的殼聚糖和三甲基殼聚糖。
5.根據權利要求1所述的一種殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于可以通過在“納米/微米復合物”中加入不同分子量的海藻酸鈉或不同分子量的羧甲基纖維素鈉、三磷酸五鈉來調節低分子肝素的釋放度。
6.根據權利要求1所述的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所形成的納米/微米復合物，可以與適當的賦形劑制備成片劑、顆粒劑、膠囊劑、干混懸劑、微丸、緩釋/控釋制劑；也可以是凍干粉針、無菌粉針；滴鼻劑、噴霧劑、氣霧劑、透皮吸收制劑、栓劑。
7.根據權利要求6所述的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的片劑包括普通素片、包衣片、溶液片、舌下片、頰膜片、緩釋/控釋片；膠囊劑包括硬膠囊劑、軟膠囊劑。
8.根據權利要求6所述的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的干混懸劑主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物和適當的賦形劑制備而得，使用前用配套溶媒混懸后使用。
9.根據權利要求6所述的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物，其特征在于所述的凍干粉針主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物、適當支持劑/賦形劑，通過冷凍干燥而得；無菌粉針主要含有低分子肝素與殼聚糖及其衍生物形成的納米/微米復合物、適當支持劑/賦形劑，通過冷凍干燥/噴霧干燥得到的粉末進行無菌分裝而得。
10.一種如權利要求1所述的殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物的制備方法，其特征在于所述的低分子肝素的復合物的制備可采用乳化聚合法，乳化溶劑揮發法、包埋法、自組裝技術、冷凍干燥法、噴霧干燥法、超聲法的任意一種或幾種；按上述比例稱取不同分子量的殼聚糖制成一定濃度的溶液，按上述比例稱取低分子肝素的溶液，在攪拌條件下加入到上述殼聚糖溶液中，繼續攪拌10分鐘，停止攪拌，室溫孵化30分鐘，即得復合物；按上述比例取一定濃度的殼聚糖水溶液20ml置于燒杯中，磁力攪拌，另取20ml含海藻酸鈉的低分子肝素水溶液，勻速滴入殼聚糖溶液中，滴完后室溫孵化30分鐘，即得復合物；按上述比例取一定濃度的殼聚糖水溶液20ml置于燒杯中，磁力攪拌。另取20ml含三磷酸五鈉的低分子肝素水溶液，勻速滴入殼聚糖溶液中，滴完后室溫孵化30分鐘，即得復合物；不同殼聚糖及其衍生物的低分子肝素納米/微米復合物的制備取一定濃度的2ml海藻酸鈉和低分子肝素水溶液乳化于50mL含有1％司盤80的植物油中，10min后，加入50ml含有不同濃度殼聚糖的3％CaCl2水溶液。30min后，離心分離，丙酮、蒸餾水洗，真空干燥；取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適量的輔料混勻制粒壓片，得各種低分子肝素片，選用不同的材料制粒后混勻壓片，可得緩釋/控釋片；取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適量的輔料混勻，直接制粒/制成微丸后，裝膠囊，即得膠囊劑，將所制成的微丸以不同的包衣材料進行包衣后，混勻，裝膠囊，即得緩釋/控釋膠囊；取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適宜的可溶性輔料混勻制粒，干燥，顆粒分裝于滴瓶中，臨用前用配套溶媒溶解后得滴鼻劑，取適量低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，與適當的賦形劑混勻制粒，干燥，顆粒分裝于小瓶中，使用前用配套溶媒混懸后制成混懸劑使用；取適量在無菌狀態下制備的低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，加入適量的乳糖和注射用水，所得溶液分裝于西林瓶中，進行冷凍干燥，得凍干粉針。通過控制納米/微米復合物的大小和組成控制其釋藥速度；取適量在無菌狀態下制備的低分子肝素與殼聚糖及其衍生物的納米/微米復合物，加入適量的甘露醇和注射用水，所得溶液分裝于西林瓶中，進行冷凍干燥，得凍干粉針。通過控制納米/微米復合物的大小和組成控制其釋藥速度。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，公開了殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的復合物及其制劑與制備方法。利用殼聚糖及其衍生物與低分子肝素形成的納米/微米復合物作為載體來增加細胞對低分子肝素的攝取，利用殼聚糖及其衍生物的生物黏附性和短暫打開細胞間的緊密連接的特性進一步增加低分子肝素透過生物膜的量，通過復合物的形成提高低分子肝素的穩定性，從而提高用藥的生物利用度。該復合物可制備成各種制劑，如各種口服制劑、注射劑、滴鼻劑、噴霧劑、氣霧劑、透皮給藥制劑、栓劑等，所制成的制劑具有吸收好，療效高，穩定性好，副作用小的優點。
文檔編號A61K47/38GK101024086SQ200710010558
公開日2007年8月29日 申請日期2007年3月9日 優先權日2007年3月9日
發明者毛世瑞 申請人:沈陽藥科大學