專利名稱：眼科手術專用有色灌注液的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種眼科手術專用有色灌注液。
技術背景隨著現代顯微手術器械的發展，眼科手術普遍使用顯微器械，內 眼手術技術已日趨完善和成熟。在各級醫院白內障摘除術已經普遍開 展，玻璃體視網膜手術也開始在大中型醫院逐步開展，其數量逐年增 加，挽救了許多失明或者接近失明的眼睛。眼科手術中灌注液直接和 眼內的角膜內皮、晶狀體囊膜以及視網膜等組織接觸，從而對于手術 用灌注液有嚴格的要求，包括灌注液的成份和酸堿度等，使其盡量減 少其對眼組織的損傷，特別是手術時間較長的手術。眼用平衡鹽溶液 是眼科常用的內眼手術灌注液，無色透明，含有多種鹽離子，其成份、 濃度、酸堿度和眼內的前房水接近，可以用于較長時間的手術，是目 前公認的手術用溶液，實踐證明眼用平衡鹽無毒、副作用少。但平衡 鹽溶液是無色透明的，在手術時很難和眼內透明組織如角膜內皮、晶 狀體囊膜以及視網膜內界膜等形成明顯的界面，手術醫生空間感覺不 強，容易造成誤傷。現代內眼手術，尤其是超聲乳化手術和玻璃體切除手術，在一個 狹小的空間里進行著復雜的操作，超聲能量、玻璃體切割頭以及其他 手術器械均可損傷眼內組織，引起醫源性的并發癥，導致術后視力不 佳，甚至眼球萎縮。產生手術并發癥的原因一是醫生的手術技巧和手術知識、以及經驗的不足，二是眼球組織固有的特點所致。眼球的許 多組織是透明的，如角膜、晶狀體和視網膜等，這些組織又均為手術 密切接觸的組織。在常規的手術顯微鏡下，醫生的立體感覺特別是深 度感覺不明顯，對于有一定顏色的組織可以避免直接接觸，但是對于 透明組織，損傷常無法避免。例如，在白內障手術中即使有良好的眼 底紅光反射，也不能清楚地辨認角膜內皮層；玻璃體視網膜手術多數 沒有良好的背景，即使非常有經驗的醫生也常常會判斷失誤、操作不 到位，或者器械直接損傷眼組織的現象，從而導致手術時間延長、并 發癥增加、甚至手術失敗，這也是造成這兩大常規手術并發癥較多， 并且難以在基層醫院普及的原因之一。為了減少眼組織的損傷，辨別某些眼內組織，做到準確操作，眼 科手術中常常使用一定的染色劑對眼內組織進行局部染色，方法是在 手術特定的部位注入染色劑，暫時使用后迅速去除，可以增加組織的 辨認程度，提高手術效率。但是，這樣使用也有其缺點，局部高濃度 的藥物對眼內組織特別是神經組織造成一定的損傷，有的藥物的副作 用甚至持續半年以上。染色劑在眼科的應用可以追溯到上世紀40年 代前后，到60年代，白內障內眼手術開始使用染色劑，主要用于晶 狀體前囊膜和皮質的染色，有利于去除有計劃的去除囊膜和晶狀體皮 質。1969年，Kutscher向玻璃體腔注射專利蘭，使視網膜著色，協助 尋找視網膜裂孔。染色劑在現代內眼手術中的研究和應用是近10年 前后開始報道，目前可用于內眼手術的染色劑有吲哚氰綠、臺盼蘭、 次氰綠、專利蘭和熒光素鈉等，研究的目的是觀察染色劑在手術中的 作用的有效性和安全性。1993年Hoffer首次提出將熒光素鈉注入晶 狀體囊膜下使成熟白內障囊膜可見的設想，研究人員通過靜脈注釋熒 光素來觀察前房內熒光素的代謝時間，其后Freitz將熒光素鈉應用于 臨床。以后又有引哚氰綠、胎盤蘭等染色劑應用于白內障手術，主要 應用于晶狀體前囊膜的撕囊。2004年國際上首次提出染色玻璃體切 除術，現已成為玻璃體視網膜手術的重要技巧之一。目前的研究證實， 染色劑可以使晶狀體囊膜、晶狀體皮質、玻璃體組織、視網膜前膜、 視網膜內界膜和新生血管膜等不容易辨認的靶組織清晰可見，手術變 得容易，切除部位更準確，大大縮短手術時間，減少了并發癥。可用 于各種原因的黃斑裂孔、黃斑前膜、糖尿病視網膜病變、玻璃體黃斑 牽拉綜合征、黃斑囊樣水腫等病例，或識別嵌頓于鞏膜切口的玻璃體。 在常用的染色劑中，對吲哚氰綠、熒光素、臺盼蘭和曲安奈德的研究 和報道較多且深入。研究發現引哚氰綠、胎盤蘭對眼內組織特別是視 網膜有毒性作用，與接觸時間和濃度相關，同時有其它的副作用。曲 安奈德在眼內存留可以造成眼壓升高、晶狀體混濁和眼內感染等并發 癥。目前發現熒光素的副作用較少，研究認為熒光素鈉與玻璃體組織 親和力高，但臨床報道較少，未見毒性報道。熒光素于1871年，由德國化學家AdolfBaeryer初次合成。Maclean 和Maumenee ( 1955)最先利用生物顯微鏡和鈷藍濾光片，并向人體內 靜脈注射10%熒光素5 ml,對脈絡膜血管瘤和脈絡膜黑色素瘤作鑒別 診斷。1960年，.Novotny和Alvis發展了熒光素血管造影法；這種方法 目前被廣泛應用于脈絡膜視網膜疾病的研究和治療方面。熒光素的分
子量376.28，目前主要應用其鈉鹽，pH7. 14時熒光最強，體內80% 和血清蛋白結合(主要是和白蛋白)。在細胞內外空間內快速擴散，在 24 36小時內使得皮膚與黏膜著染，自由彌散通過脈絡膜毛細血管、 Bruch' s膜、視神經和鞏膜，無法通過視網膜血管、視網膜色素上皮、 大的脈絡膜血管等，在24 36小時后通過肝、腎快速代謝排出。目前 熒光素鈉主要應用于眼底血光造影技術，還沒有在眼內灌注液中應用 的報道。綜上所述，目前的文獻檢索研究表明，為達到增加眼內組織可視 度目的國內外現有的文獻都是關于內眼手術中染色劑的研究而沒有 關于灌注液方面的研究。 發明內容針對現有技術存在的不足，本發明提供一種帶有一定顏色的灌注 液在眼科手術中使用，以達到增加眼內組織可視度的目的。本發明所述的眼科手術專用有色灌注液，包括常規的眼用平衡鹽 液，其特點是還含有0. 001-0. 1 mg/ml的熒光素鈉。按照人體注射用液體的配制要求，根據不同的使用目的、不同制 劑，在不同鹽離子成分的眼用平衡液中添加不同劑量的熒光素鈉即制 成眼科手術專用有色灌注液，也稱熒光素鈉有色灌注液。該灌注液可 以代替常規的眼內灌注液也即常規的眼用平衡鹽液，廣泛應用于晶狀 體手術、玻璃體視網膜手術、虹膜手術等，既可在手術中全程使用， 也可以階段性應用，在手術結束時置換常規的透明灌注液。本發明除了具有一般平衡鹽溶液的作用外，首次提出眼內有色灌 注液和有色手術的概念，其不同于常規的無色眼科手術用溶液的優點
是可充填于前房、玻璃體和晶狀體囊袋等腔隙，與眼內透明的、半 透膜的組織如角膜、晶狀體囊膜、玻璃體以及視網膜等形成反差，使 術者更易辨認這些結構，使不易辨別的組織變為可視，從而使手術 變得容易、操作準確、縮短時間、保護視網膜、晶狀體囊膜等主要結 構，減少手術并發癥，以達到更好的手術效果。可以大大提高手術可 視度、減少手術損傷、縮短手術時間，提高手術效率。新型灌注液改 變并克服了以往局部染色的方法中局部染色法費時、需要沖洗，手術 過程復雜、操作比較麻煩；無法對周圍的組織進行差異顯示，即范圍 太小等問題；另外以往的局部染色的方法染料還有組織毒性問題沒有 解決，本發明經過毒性檢測確認沒有毒性問題。在本發明通過視光學方法篩選最佳視覺濃度后，經細胞學毒性檢 測、動物實驗和初期的臨床試驗來觀察有色灌注液的安全性和有效 性，確認是一種可用于眼內手術術中染色的灌注液，達到了提高眼內 透明組織的可辨認度，縮短手術時間，簡化手術操作和減少眼內組織 損傷的目的，對玻璃體視網膜手術和白內障手術技術帶來新的技術進 步，同時產生顯著的社會與經濟效益。其中關于選取多少劑量的熒光素鈉加入眼用平衡鹽液中，是通過 檢測不同濃度的溶液的對比度和透光度，繪制吸光度和對比度曲線。 兼顧對比度和透光度，在可能的交叉點選擇一定濃度的有色灌注液， 進行活體動物眼內手術實驗，根據光學檢測和實驗結果來選擇最佳視 覺效果的濃度，0. 001-0. 1 mg/ml的熒光素鈉眼用平衡鹽溶液透光度 較良好，對比度較適中能使用于眼內顯微手術；更為理想的濃度范圍
是0. 004-0. 04 mg/ml ，該范圍內的熒光素鈉眼用平衡鹽溶液透光度 最為良好，對比度最為適中能使用于眼內顯微手術，當然稍偏離該濃 度范圍的熒光素鈉眼用平衡鹽溶液也是可以的。所述的常規的眼用平衡鹽液其成份、濃度和酸堿度和眼內的前房 水接近，在此基礎上本發明的優選的眼用平衡鹽液其成份為 氯化鈉6. 0mg/m1-6.6 mg/ml 氯化鉀0. 30nig/ml-0. 38mg/ml 氯化鈣0. 18mg/ml-0. 20mg/ml 硫酸鎂0. 25mg/ml- 0. 35mg/ml 碳酸氫鈉1. 7mg/ml-2. lrag/ml 余量蒸餾水這樣成份的眼用平衡鹽液更加適合本發明的眼科手術專用有色 灌注液即熒光素鈉眼用平衡鹽溶液的配制，需要說明的是其中部分的 成份也可以由同樣性質與特性的鹽代替，例如碳酸氫鈉就可以由乳酸 鈉代替等等。在此基礎上本發明的進一步設置是根據不同的手術方式和不同 的疾病進行選擇性添加其它組份，即本發明的眼科手術專用有色灌注 液還包括有葡萄糖1. 5-4. Omg/ml，特別適用于合并有糖尿病的患者 的玻璃體視網膜手術。本發明的另一方面OT^:還包括有腎上腺素0. 0002mg/ml-0. 0016 mg/ml ,腎上腺素的作用是維持瞳孔擴大狀態。在本發明的眼科手術專用有色灌注液中還包括有地塞米松0.004 mg/ml-0.008mg/ml，或用慶大霉素等代替地塞米松，地塞米松或慶大霉素等的加入是為了消除或減少炎癥。 實施方式實施例1:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.6mg/ml即 1650mg/250ml，氯化鉀0. 36mg/ml即90mg/250ml，氯化鈳0. 18mg/ml 即45mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml,熒光素鈉lmg/250ml。規格250ml， 500ml。實施例2:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.6mg/ml即 1650mg/250ml，氯化鉀0. 36mg/ml即90mg/250ml，氯化f丐0. 18mg/ml 即45mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml,熒光素鈉10mg/250ml。規格250ml， 500ml 實施例3:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.6nig/ml即 1650mg/250ml，氯化鉀0. 36mg/ml即90mg/250ml，氯化轉0. 18mg/ml 即45mg/250ml，硫酸鎂:0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml，熒光素鈉2.5mg/250ml。規格250ml, 500ml。實施例4:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.6mg/ml即 1650mg/250ml，氯化鉀0. 36mg/ml即90mg/250ml，氯化轉0. 18mg/ml 即45mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml,碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml，熒光素鈉0. 25mg/250ml 。規格250ml， 500ml。實施例5:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.6mg/ml即 1650mg/250ml，氯化鉀0. 36mg/ml即90mg/250ml，氯化鈣0. 18mg/ml 即45mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml,碳酸氫鈉2. lmg/ml
即525mg/250ml，熒光素鈉25mg/250ml。規格250ml, 500ml。實施例1-5配方的眼科手術專用有色灌注液特別適用于一般的 玻璃體視網膜疾病的玻璃體手術與白內障患者的手術治療，特別是 成熟期、過熟期白內障，部分外傷性白內障。實施例6:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.0mg/ml即 1500mg/250ml，氯化鉀0. 38mg/ml即95mg/250ml，氯化轉0. 20mg/ml 即50mg/250ml,硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml，葡萄糖1. 5mg/ml,腎上腺素..0. 5mg/250ml,熒光 素鈉2, 5mg/250ml。規格250ml， 500ml 。此配方或還包括有微量的地塞米松或慶大霉素等，該眼科手術專 用有色灌注液適用于玻璃體發生不完全后脫離，或玻璃體已發生增殖 但時間較短，特別視網膜表面增殖膜未成形，極不易與視網膜區分的 玻璃體視網膜疾病的玻璃體手術中，如一些需玻璃體手術的PVR C3 期的孔源性視網膜脫離、增生性糖尿病性視網膜病變等；還適用于玻 璃體混濁非常嚴重的病例，如眼內炎、眼外傷、玻璃體積血等；以及 黃斑部疾病，如黃斑裂孔、前膜，特別是高度近視合并黃斑裂孔性視 網膜脫離的病例。實施例7:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉:6.0mg/ml即 1500mg/250ml，氯化鉀0. 30mg/ml即75mg/250ml，氯化鈣0. 20mg/ml 即50mg/250ml，乳酸鈉3. lmg/ml 即775mg/250ml，葡萄糖3mg/ml 即750mg/250ffll，腎上腺素2mg/250ml,熒光素鈉2. 5mg/250ml 。 規格250ml， 500ml 。 此配方特別適用于合并有糖尿病的患者的玻璃體視網膜手術。實施例8:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.0mg/ml即 1500mg/250ml，氯化鉀0. 38mg/ml即95mg/250ml，氯化f5:0. 20mg/ml 即50mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml，葡萄糖3mg/ml即750mg/250ml，腎上腺素 0. 5mg/250ml，地塞米松2mg/250ml，熒光素鈉2. 5mg/250ml 。規 格250ml， 500ml。此配方適用于嚴重眼內炎癥和增殖的眼，外傷性視網膜脫離的患 者，兒童及青少年患者，合并牽拉孔源性視網膜脫離的增生性糖尿病 性視網膜病變。實施例9:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.0mg/ml即 1500mg/250ml，氯化鉀0. 38mg/ml即95mg/250ml，氯化鈣0. 20mg/ml 即50mg/250ml，硫酸鎂0. 3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氫鈉2. lmg/ml 即525mg/250ml，葡萄糖2mg/ml即500mg/250ml,腎上腺素 5mg/250ml，慶大霉素0. 2 0. 4mg mg/250ml，熒光素鈉1 mg/250ml。規格250ml， 50(M。此配方適用于眼內炎的患者，或有感染傾向的患者。 實施例10:眼科手術專用有色灌注液包括有氯化鈉6.0mg/ml 即1500mg/250ml，氯化鉀0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化鈣 0. 20mg/ml即50mg/250ml，乳酸鈉3. lmg/ml 即775mg/250ml,腎 上腺素0.5mg/250ml，地塞米松2 mg/250ml ，熒光素鈉 2.5mg/250ml。規格250ml, 500ml 。
此配方也適用于眼內炎的患者，或有感染傾向或者眼外傷行玻璃 體視網膜手術的患者。將實施例所獲得的不同組份眼科手術專用有色灌注液均進行細 胞毒性實驗，目的是觀察灌注液的細胞毒性。其方法是將相應濃度 的染色劑加入培養的視網膜色素上皮細胞、觀察染色劑對培養的形 態、生長曲線有無影響以及細胞內代謝過程等。結果是在視網膜色 素上皮細胞培養液中加入以上各濃度的物質，30分鐘、l小時、3小時和24小時后觀察發現細胞的形態、活性以及顯微鏡下結構和正常細胞無明顯差別。將實施例所獲得的不同組份眼科手術專用有色灌注液均進行動物試驗觀察，目的是通過配制應用于眼科手術的眼科手術專用有色 灌注液，觀察其對兔眼內組織毒性及組織相容性，驗證其在手術操作 中的有效性、安全性、優越性。其方法是選取健康成年日本大耳白兔40只，普通級，體重2.0 2.5kg， 雌雄不限。20只兔為超聲乳化組，行超聲乳化術，20只為玻璃體手術 組，行玻璃體切除聯合晶狀體切除手術， 一眼為實驗眼，另眼為對照 眼。實驗眼使用常規眼科平衡鹽溶液，對照眼使用眼科手術專用有色 灌注液。術前對所有眼行裂隙燈顯微鏡觀察并照相、角膜內皮鏡檢査、 眼壓測量、視網膜電圖(ERG)檢査，術后定期觀察術眼，并予以抗 生素滴眼液、糖皮質激素滴眼液和睫狀肌麻痹劑等點眼。術后6小時、 24小時、7d、 lm、 3m時裂隙燈顯微鏡觀察并照相，角膜內皮鏡檢査、 眼壓測量、視網膜電圖(ERG)檢查。術后3月時處死動物，摘除眼球
制作標本，對角膜、視網膜行光學顯微鏡檢査，對角膜內皮細胞行掃 描電子顯微鏡檢查，視網膜組織行透射電子顯微鏡檢査。對實驗數據應用統計學軟件SPSS 12. 0進行方差分析，收集資料并進行分析的結 果是1. 手術結果含熒光素鈉的眼科手術專用有色灌注液在兔眼內透光度良好，對 比度適中。過高濃度的熒光素影響顯微鏡光線的穿透，過低的濃度則 在介質中和晶狀體囊膜、玻璃體和視網膜組織等的反差小，顯微鏡下 不易產生差別。(1) 平均手術時間超聲乳化組實驗眼3m，對照眼5m; 玻璃體手術組實驗眼33m，對照眼41m(2) 術中組織意外損傷次數(包括后囊膜破裂、前囊膜裂開、虹 膜損傷和視網膜損傷等)-超聲乳化組實驗眼0次，對照眼3次； 玻璃體手術組實驗眼l次，對照眼6次(3) 顯微鏡下，實驗眼明顯比對照眼溶液和晶狀體囊膜、玻璃體 &視網膜表明的反差明顯，組織的分辨速度快，組織意外損傷機會小， 手術速度快。2、 裂隙燈顯微鏡檢査結果超聲乳化組各組術后24h內結膜充血、角膜傷口處輕度水腫，3d 后充血與水腫消退，兩組無明確差異。玻璃體手術組在術后2 3天結膜混合充血明顯，角膜輕度水腫；術后5 7天逐漸減輕，術后7 10 天結膜充血消退，角膜透明；早期有一過性的前房炎性反應，術后5天 內消失。3、 角膜內皮鏡檢查結果① 角膜內皮細胞數目(CD)兩組術后檢査結果較術前無明顯改 變(P〉0. 05)，兩組實驗眼和對照眼比較，術后各個時間段的差別無 統計學意義(P〉0.05)。② 六邊形細胞百分率(6A9&)各組術后檢査結果較術前均有降 低，但是無統計學意義(P〉0.01);③細胞面積變異系數(CV)各組術后檢査結果較術前均無明顯 改變(P 〉 0. 05)，術后1月及3月時各組間差別無統計學意義 (P>0.05)。4、 眼壓術后1月及3月各組眼壓情況較術前均無明顯變化(P > 0. 05)， 術后各組間比較差異無統計學意義(P〉0.05)。5、 視網膜電圖(ERG):各組視網膜電圖情況較術前均無明顯變化(P 〉 0. 05)，術后l 月、3月時各組之間比較無明顯差異(P 〉 0. 05)。6、 光學顯微鏡檢査兩組術后3月光鏡下角膜及視網膜組織各層結構清晰，無明顯 病理性改變；7、 電子顯微鏡檢査-
透射電鏡觀察眼內組織包括視網膜組織各層結構均無明顯病理 性改變。結論是使用含熒光素鈉的眼科手術專用有色灌注液進行內眼手 術，眼內組織反差大，術中意外損傷少，手術速度明顯比使用常規溶 液快，術中使用安全，是一種良好的新型眼科手術材料。
權利要求
1、一種眼科手術專用有色灌注液，包括常規的眼用平衡鹽液，其特征是還含有0.001-0.1mg/ml的熒光素鈉。
2、 按照權利要求1所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在于 含有0. 004-0. 04 mg/ml的熒光素鈉。
3、 按照權利要求1或2所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在 于眼用平衡鹽液其成份為氯化鈉6. 0mg/m1-6. 6 mg/ml 氯化鉀0. 30mg/ml-0. 38mg/ml 氯化轉0. 18mg/ml-0. 20mg/ml 硫酸鎂0. 25mg/ml- 0. 35mg/ml 碳酸氫鈉1. 7mg/ml-2. lmg/ml 余量蒸餾水。
4、 按照權利要求3所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在于 還包括有葡萄糖1.5-4. Omg/ml。
5、 按照權利要求3所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在于 還包括有腎上腺素0.0002mg/ml-0.0016 mg/ral。
6、 按照權利要求4所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在于 還包括有腎上腺素0. 0002mg/ml-0. 0016 mg/ml。
7、 按照權利要求3所述的眼科手術專用有色灌注液，其特征在于 還包括有地塞米松0.004 mg/ml-0.008mg/ml。
8、 按照權利要求4或5或6所述的眼科手術專用有色灌注液，其特 征在于還包括有地塞米松0.004 mg/ml-0.008mg/ml。
全文摘要
本發明涉及一種眼科手術專用有色灌注液。本發明所述的眼科手術專用有色灌注液，包括常規的眼用平衡鹽液，其特點是還含有0.001-0.1mg/ml的熒光素鈉。本發明首次提出眼內有色灌注液和有色手術的概念，其優點是可充填于前房、玻璃體和晶狀體囊袋等腔隙，與眼內透明的、半透膜的組織如角膜、晶狀體囊膜、玻璃體以及視網膜等形成反差，使術者更易辨認這些結構，使不易辨別的組織變為可視，從而使手術變得容易、操作準確、縮短時間、保護視網膜、晶狀體囊膜等主要結構，減少手術并發癥，以達到更好的手術效果。另外改變并克服了以往局部染色的方法中局部染色法費時、需要沖洗，手術過程復雜、操作比較麻煩；無法對周圍的組織進行差異顯示，即范圍太小等問題。
文檔編號A61P41/00GK101125149SQ20071013255
公開日2008年2月20日 申請日期2007年9月19日 優先權日2007年9月19日
發明者宋宗明, 王勤美, 佳 瞿, 趙振全 申請人:溫州醫學院眼視光研究院