專利名稱：：抗菌劑的腸胃外制劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及安全、藥學上可接受的和易于腸胃外給予的抗菌劑，具體是(3S，5S)-7-[3-氨基-5-甲基-哌啶基]-l-環丙基-l，4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸或其藥學上可接受的鹽的制劑、其藥物組合物及其用途。
背景技術：
：抗菌藥物的的腸胃外注射是治療各種感染、尤其是甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(5Ya;力;^occ3cc"s禾卩多抗性月巿炎鏈球菌(5Yre/z^cocczAs;^e腳o/7^e)引起的感染的最有效方法之一。它需要使用穩定的水性制劑。
發明內容一方面，本發明提供一種抗菌劑腸胃外制劑(如靜脈制劑)，該制劑含有下式I所示化合物、水、和等張劑。該化合物和水溶解在水中，形成腸胃外制劑。該化合物包括其鹽和前藥。所述鹽可以是例如該化合物上帶正電的氨基和與陰離子之間形成的鹽。合適的陰離子包括但不限于氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、D，L-蘋果酸根、D-蘋果酸根、L-蘋果酸根、檸檬酸根、甲苯磺酸根、D，L-酒石酸根、D-酒石酸根、L-酒石酸根、延胡索酸根、三氟醋酸根、L-谷氨酸根、D-葡萄糖醛酸根、馬來酸根、甲苯磺酸根、乳酸根、檸檬酸根和醋酸根。合適的陽離子包括但不限于鈉離子、鉀離子、鎂離子、牽丐離子、和銨陽離子如四甲基銨離子。前藥的例子包括給予對象之后能夠提供上述化合物的酯或藥學上可接受的衍生物(Goodman和Gilraan，s，ThePharmacologicalbasisofTherapeutics,第8版，McGraw-Hill，Int.Ed.1992,"BiotransformationofDrugs")。此外，具有不對稱中心的該化合物可以外消旋物、外消旋混合物、單一的對映異構體、單獨的非對映異構體以及非對映異構體混合物的形式出現。等張劑，如非電解質和電解質，調節著滲透壓比。見US6015810。例子包括但不限于甘油、乳糖、甘露醇、葡萄糖、氯化鈉、硫酸鈉和山梨糖醇。在本發明的制劑中，化合物的濃度可以是0.2到45mM，等張劑的濃度可以是0.2%到13%w/v，尤其可以是0.2%—1.3w/v。等張劑的濃度(w/v)計算為等張劑的重量(g)與制劑體積(升)之間的比值。本發明的制劑還可含有緩沖劑、穩定劑或抗氧化劑。本發明制劑的一個例子是含有濃度為0.2-45mM的該化合物的蘋果酸鹽、濃度為0.9%w/v的氯化鈉、濃度為0.l-1.0%w/v的穩定劑和濃度為0.01-5Xw/v的緩沖劑的制劑。在另一例子中，該制劑含有0.2-45mM的該化合物的蘋果酸鹽、濃度為l一7。乂w/v的葡萄糖、濃度為0.l-1.0%w/v的穩定劑和濃度為0.01-5Xw/v的緩沖劑。與等張劑的濃度的計算方式相同，穩定劑、緩沖劑和抗氧化劑的濃度也是試劑的重量與制劑的體積之比。另一方面，本發明提供一種給對象腸胃外注射有效量的上述制劑而治療各種感染性疾病的方法。所述感染性疾病可由感染革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、厭氧菌、甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌和多抗性肺炎鏈球菌引起。所述感染性疾病的例子包括但不限于尿道感染、前列腺炎、呼吸道感染、骨髓炎、淋病、結核桿菌感染、鳥型結核分枝桿菌綜合癥、慢性支氣管炎的急性惡化、肺炎、竇炎、傳染性腹瀉、幽門螺桿菌感染、皮膚感染、婦科感染、和腹部感染。本發明還包括使用上述制劑經腸胃外注射治療感染性疾病。下文將詳細描述本發明的一個或多個實施例。在說明書以及權利要求書的基礎上，本發明的其它特征、目標和優點將更明顯。具體實施例方式用于實施本發明的化合物可采用常規的方法合成。具體可見下文實施例1。由此合成的化合物可采用快速柱色譜、高效液相色譜、結晶或任何其它合適的方法進一步純化。為了制備本發明的腸胃外制劑，技術人員可以任何順序和所需的比例混合式I化合物、等張劑和水。例如，可將預定量的該化合物與預定濃度的生理鹽水(含有氯化鈉和等張劑的溶液)混合。可通過搖動、攪拌或渦流等方式進行混合，并且控制混合以使固體成分溶解到水中而不形成嚴重的泡沫。在制備的任何階段，可進行消毒處理(如高壓滅菌)。本發明的制劑還可含有一種或多種添加劑，如緩沖劑、穩定劑和抗氧化劑。緩沖劑的例子包括但不限于乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽、和磷酸鹽。穩定劑的例子包括但不限于組氨酸、賴氨酸、甘氨酸、蔗糖、果糖、海藻糖以及它們的混合物。抗氧化劑的例子包括但不限于亞硫酸氫鈉、丁基化羥基苯甲醚、半胱氨酸、龍膽酸、谷氨酸單鈉、硫基乙醇酸鈉或抗壞血酸。可在制備的任何階段加入添加劑。可采用常規的方法測定制劑中添加劑的合適濃度，以產生本領域技術人員所認可的所需效果。本發明的制劑在制備后可立即使用，也可保存備用。立即使用的話，可提供一藥盒，該藥盒包括含有式I化合物的小瓶和含有等張劑或含有等張劑的水性溶液的另一小瓶。或者，可提供包括含有式I化合物的小瓶和含有等張劑的水溶液(如生理鹽水)的另一小瓶的藥盒。藥盒還可包括一種或多種添加劑，如穩定劑、緩沖劑或抗氧化劑。在給予前，可即時將藥盒中提供的物質混合來制備該制劑。可通過腸胃外注射或輸液給予需要治療的對象有效量的本發明的制劑來治感染性疾病。術語"治療"在本文中定義為將有效量的制劑給予患有感染性疾病、有感染癥狀、由該感染引發的繼發性疾病或病癥、或者對該感染易感的對象，以治愈、減緩、緩解、矯正或改善該感染性疾病、感染癥狀、由該感染引發的繼發性疾病或病癥、或者對該感染的易感性。HO、NaBH4,CaCl2x2H20EtOH/MTBE術語"有效量"指制劑的量能夠給治療對象產生治療效果。術語"腸胃外"在本文中包括皮下、皮內、靜脈內、肌肉內、關節內、動脈內、滑膜內、胸骨內、鞘內、損害內(intralesional)和顱內注射或輸液技術。其中，優選靜脈內注射或輸液。勿需贅述，可以認為根據上述描述已足以實施本發明。因此，以下實施例僅僅是闡述性的，而不是以任何方式對本發明剩余的公開內容做出限制。本文引用的所有出版物都被全文納入作為參考。實施例1如下合成(3S，5S)-7-[3-氨基-5-甲基-哌啶基]-l-環丙基-l,4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸的蘋果酸鹽(化合物1):A.(3S，5S)-(5-甲基-哌啶-3-基)-氨基甲酸叔丁酯(化合物9)的合成CH3S02CI,Et3NiPrOAc9將化合物2(5.50kg，42.60mol)、甲醇(27L)裝入一50升的反應器中，并且冷至l(TC至15°C。在65分鐘的時間段內通過滴加漏斗加入亞硫酰氯(10.llkg，2.0當量)，同時外部冷卻以維持溫度低于3(TC。在25。C攪拌所得溶液1.0小時，在這之后減壓下蒸去甲醇。將所得油狀殘留物與乙酸乙酯(3x2.5L)共沸以除去殘留的甲醇。將殘留物溶解于乙酸乙酯(27.4L),裝進50L1)S0C12，MeOHH，COOH2>(Boc)20，TEAMeCNIPA,H2(g)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>的反應器中，并且在低3(TC的溫度下緩慢加入三乙基胺(3.6kg)中和。過濾所得的懸浮液，除去三乙基胺鹽酸鹽。將濾液連同雇AP(0.53kg)—起裝入50L的反應器。在20°C至30°C的溫度在30分鐘的時間內通過熱水加熱的加料漏斗加入二碳酸二-叔丁酯(8.43kg)。1小時后用TLC分析檢測，反應完全。用冰冷的1NHC1(2x7.5L)、飽和碳酸氫鈉溶液(1x7.5L)洗滌有機相，并且用硫酸鎂干燥，過濾。減壓下除去乙酸乙酯后獲得結晶漿，將其與MTBE(10.0L)—起搗碎并且過濾以得到化合物3白色固體(5.45kg，52.4%)。分析CuH,7N0s的計算值C，54.3;H，7.04;N，5.76。檢測值C，54.5;H,6.96;N，5.80。H腿S(ESI+)對于期望的CH18N05，[M+H]244.1185。檢測值244.1174;'HNMR(CDC13,500MHz):S=4.54(dd,J=3,1，9.5Hz，IH)，3.7(s，3H)，2.58—2.50(m,1H)，2.41(ddd，1H,J=17.6，9.5，3.7)，2.30—2.23(m'IH)，1.98—1.93(ra，1H)，1.40(s，9H);13CNMR(CDC13，125.70MHz)S173.3，171.9,149.2,83,5，58.8，52.5,31.1，27.9，21.5;Mp70.2。C。將化合物3(7.25kg，28.8mol)、DME(6.31kg)和Bredereck試劑(7,7kg,44.2mole)裝入一50升反應器中。攪拌溶液并且加熱至75°C±5°C至少三小時。在一小時的時間內將反應物冷至0°C，在此期間形成沉淀。將該混合物維持在0。C一小時，過濾，并且將產品在真空干燥箱中在30°C±5°C干燥至少30小時以得到化合物4白色結晶固體(6.93kg，77.9%)。分析C14H22N205的計算值:C，56.4;H，7.43;N,9.39。檢測值C,56.4;H，7.32;N，9.48;HRMS(ESI+)對于期望的C14H22NA，[M+H]299.1607。檢測值299.1613;'HNMR(CDCL,499.8MHz)5=7.11(s，IH)，4.54(dd，1H,J=10.8，3.6)，3.74(s，3H),3.28—3.19(m，IH)，3.00(s，6H)，2.97—2.85(m,IH)，1.48(s，9H);13CNMR(CDC13，125.7MHz)5=172.6，169.5,150.5，146,5，90.8,82.2,56.0，52.3,42.0，28.1'26.3。Mp127.9°C。將ESCAT142(獲自Engelhard公司，N.J，美國)5%鈀碳粉末(50%浸潤，0.58kg浸潤重量)、化合物4(1.89kg，6.33mol)以及異丙醇(22.4kg)加到一IO加侖Pfaudler反應器中。在45°C45psi氫氣下攪拌反應混合物18小時后，將反應混合物冷至室溫，并通過硅藻土(Celite)(0.51kg)層過濾。減壓下蒸發濾液，得到粘稠油狀物，靜置固化得到化合物5(1.69kg，100%)，其為93:7非對映異構體混合物。通過制備型HPLC純化產品混合物樣品以給出用于分析數據的材料。分析C,晶9N0s的計算值C，56.0;H,7,44;N，5.44。檢測值C,55.8;H，7.31;N，5.44;MS(ESr)對于期望的C12H19N05,[M+H]258.1342。檢測值258.1321;'HNMR(CDC13，499,8MHz)5=4.44(m，1H)，3.72(s，3H)，2.60—2.48(m，2H)，1.59—1.54(m，1H)，1.43(s，9H)，1.20(d,J=6.8Hz，3H);13CNMR(CDC13,125.7MHz)S=175.7，172.1，149.5，83.6，57.4，52.5,37.5，29.8，27.9，16.2。Mp89.9°C。將化合物5(3.02kg,11.7mol)、無水乙醇(8.22kg)和MTBE(14.81kg)裝入一50升反應器中。在0°C士5。C以小份加入硼氫化鈉(1.36kg，35.9mol)。觀察到少量冒泡。將反應混合物升溫至10°C±5°C，并且在該溫度下在一小時的時間內以小份加入氯化鈣二水合物(2.65kg)。在一小時的時間內使反應升溫至20°C±5°C，并且在20°C±5°C再攪拌12小時。將反應冷卻至-5。C士5°C，在0t:土5t:緩慢加入冰冷的2NHC1(26.9kg)。停止攪拌。移去下層水相。在五分鐘時間內將飽和碳酸氫鈉水溶液(15.6kg)裝入反應器，同時攪拌。再次停止攪拌，移去下層水相。將硫酸鎂(2.5kg)裝入反應器并且攪拌至少10分鐘。通過nutsche過濾器過濾混合物，并且在減壓下濃縮以得到化合物6(1.80kg,66%)。分析CuH23N0,的計算值:C，56.6H，9.94;N,6.00。檢測值C，56.0;H,9.68;N，5.96;醒S(EST)對于期望的CH24N04，[M+H]234.1705。檢測值234,1703;!HNMR(CDCl:i，500MHz)S=6.34(d，J=8.9Hz,1H，鄉，4.51(t，J=5.8,5.3Hz，1H，NHCHCH20g)，4.34(t，J=5.3'5.3Hz，1H，CH3CHCH20H)，3.46—3.45，(m，1H，NHC旦)，3.28(dd，J二10.6，5.3Hz,NHCHC朋OH)，3.21(dd,J=10.2，5.8Hz，1H，CH3CHQiHOH)，3.16(dd，J=10.2,6.2Hz,1H，NHCHCHgOH)'3.12(dd，J=10.6，7,1Hz，1H，CH3CHCHgOH)，I.53-1.50(ra，1H,CH3QiCHHOH),1.35(s,9H，0(Qi3)3，1.30(ddd,J=13.9，10.2，3.7Hz,1H，NHC腦旦CH)，1.14(ddd，J=13.6,10.2，3.4Hz'1H,NHCHCgHCH)，0.80(d，J=6.6Hz，3H，CH3);13CNMR(CDC13，125.7MHz)S156.1,77.9，50.8，65.1,67.6，65.1，35,6，32.8，29.0，17.1。Mp92.1°C。將化合物6(5.lkg)的乙酸異丙酯(11.8kg)溶液加入一50升反應器。將反應冷卻至15°C±5°C，并在該溫度下加入三乙基胺(7.8kg)。將反應進一步冷卻至0°C±5°C，向反應液加入甲磺酰氯(MsCl)(6.6kg)。將反應攪拌數小時并且用HPLC或TLC監控反應完成。通過加入飽和的碳酸氫鹽水溶液結束該反應。分離有機相，并且用冷的10%三乙基胺水溶液，冷的HC1水溶液，冷的飽和碳酸氫鹽水溶液，和最后飽和食鹽水溶液接連洗滌分離所得的有機相。將有機相干燥，過濾，并且在低于55°C±5°C真空濃縮，以提供化合物7的固體/液體漿。該漿體直接用于隨后的反應不用進一步純化。將9.lkg的純芐胺裝入一50升反應器后，將反應器升至55°C，在此溫度下向反應器加入化合物7(8.2kg)的1，2-二甲氧基乙烷(14.lkg)溶液。在將該溶液加入完成之后，在60°C±5°C攪拌該反應物數小時并且用TLC或HPLC監控完成。將反應冷至環境溫度并且真空除去溶劑。將殘留物用11.7kg的15%(體積/體積)乙酸乙酯/己烷溶液稀釋，并且在攪拌的同時用18.7kg的20%(重量)碳酸鉀水溶液處理。靜置后得到三相混合物。收集上層有機相。用11.7kg量的15%(體積/體積)乙酸乙酯/己垸溶液萃取分離出的中間相兩次。在真空下濃縮合并的有機層，得到油狀殘留物。然后通過色譜純化殘留物，得到化合物8，為油。在氮氣流下將0.6kg50%浸潤的固體鈀碳(EIOI，10重量％)裝入一40升壓力容器。然后在氮氣下將3.2kg化合物8的無水乙醇(13.7kg)溶液裝入反應器。用氮氣凈化反應器，然后以45psi壓入氫氣。然后將反應物加熱至45°C。用TLC或LC監控反應。反應完成后，將反應物冷至環境溫度，放空，并且通以氮氣。通過硅藻土層過濾混合物，并且用2.8kg無水乙醇洗滌該固體。通過真空下濃縮濾液，得到蠟狀固體混合物9:TLCRf(硅膠F254，70:30體積/體積乙酸乙酯-己烷，KMn04顯色)=0.12;'HNMR(300MHz,CDC1:,)5.31(brs，1H),3.80-3.68(m，1H)，2.92(d，J=ll,4Hz，1H)，2.77(ABquart,JAB=12.0Hz，v=50,2Hz，2H)，2.19(t,J二IO.7Hz,1H)，1.82-1.68(m，2H)，1.54(brs，1H)，1.43(s，9H)，1.25—1.15(m，1H),0.83(d，J=6.6Hz,3H);'.!CNMR(75MHz,CDC13)155.3，78.9，54.3,50.8，45.3，37.9，28.4'27.1'19.2;MS(ESI+)m/z215(M+H)，429(2M+H)。B.1-環丙基-7-氟-8-甲氧基-4-氧代-1,4-二氫-喹啉-3-羧酸(化合物IO)的合成根據美國專利US6329391所述的方法制備化合物10。C.1-環丙基-7-氟-8-甲氧基-4-氧代-1，4-二氫喹啉-3-羧酸硼酯螯合物的合成(化合物ll):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>將氧化硼(2.0kg，29mol)、冰醋酸(8.1L，142mol)和乙酸酐(16.2L，171raol)裝入反應器，隨后用稀釋。將所得混合物回流至少2小時，然后冷卻至4CTC，在該溫度加入7-氟喹諾酮酸化合物10(14.2kg，51mol)。將混合物回流至少6小時，然后冷卻至約90°C。將甲苯(45L)加至反應中。在50°C加入叔-丁基甲基醚(19L)以促使產品沉淀。然后將混合物冷卻至20°C，過濾分離出沉淀物。然后在4(TC真空爐(50托)中干燥之前用叔-丁基甲基醚(26L)洗滌分離出的固體，得到化合物ll，收率為86.4%。Raman(cm1):3084.7,3022.3,2930.8,1709.2，1620.8,1548.5，1468.0，1397.7，1368.3，1338.5，1201.5，955.3，653.9，580.7,552.8,384.0，305.8。NMR(CDC13，300MHz)(ppm):9.22(s,1H)，8.38—8.33(m，1H)，7.54(t，J=9.8Hz，IH)，4.38—4.35(m，IH)，4.13(s，3H)，2.04(s，6H)，1.42-1.38(m，2H)，1.34-1.29(m，2H)。TLC(WhatmanMKC18F硅膠，60A，200Wn),流動相1:1(體積/體積)CH3CN:0.5NNaCl(aq)，UV(254/366nm)顯示；Rr=0.4-0.5。D.(3S，5S)-7-[3-氨基-5-甲基-哌啶基]-卜環丙基-1,4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸的蘋果酸鹽(化合物1)的合成方案3方案2a.CH3COOH,(CH3CO)20回流，2h曱笨，叔-丁基曱基醚20-50°C,過濾.將化合物11(4.4kg，10.9mol)、化合物9(2.lkg，9.8mo1)、三乙基胺(TEA)(2.1L，14.8mol)和乙腈(33.5L,15.7L/kg)裝入反應器。將所得混合物在約5(TC攪拌直至用HPLC或反相TLC監控到反應已結束。將反應冷卻至約35°C，并且通過在0至400托(torr)之間的真空下蒸發乙腈以使反應體積減少至約一半。然后將28.2kg的3.0NNaOH(aq)溶液裝入反應器，并且溫度升至約4(TC。真空下蒸餾直至再沒觀察到餾出液，室溫下水解。用HPLC或反相TLC監控該水解反應完成后，加入4至5kg的冰醋酸中和反應混合物。使用12.7kg(9.6L)的二氯甲烷萃取所得溶液兩次。合并有機層，將其轉移到另一反應器中。在4(TC蒸餾將反應體積減至約一半。然后加入20.2kg6.0NHC1(aq)溶液，在35'C攪拌反應混合物至少12小時。用HPLC或反相TLC監控該反應。當完成時，停止攪拌，使相分離。移去下層有機相用12.7kg(9.6L)提取水層用18.3kg蒸餾水水層，并且將溫度升至約5(TC。真空下(100-400托)進行蒸餾以進一步除去二氯甲烷。在65。C的溫度以下用約9.42kg的3.0NNa0H(aq)溶液將該水溶液的pH值調節到7.8和8.1之間。在5(TC攪拌反應混合物至少1小時，然后冷卻至室溫。通過抽濾分離出固體，用5.2kg的蒸餾水洗滌兩次。通過抽吸(suction)將該固體干燥至少12小時，然后在55°C的對流烘箱中另外干燥12小時。獲得固體化合物12(3.2kg，79%)。將3.2kg的化合物12和25.6kg的95%乙醇裝入反應器中。然后向反應器加入l.lkg的固體D，L-蘋果酸(24)。并且將混合物加熱至回流溫度(80°C)。加入蒸餾水(5.7L)來溶解沉淀物，并且加入0.2kg的活性炭。將反應混合物通過一過濾器。將澄清的濾液冷至45°C，并且保存至少2小時的時間以使得出現結晶。將反應混合物進一步冷至5X:后，用抽濾分離出沉淀物，然后用6.6kg的95%乙醇洗滌，抽吸干燥至少4小時。然后在45"C的對流烘箱內進一步干燥該固體至少12小時，得到3.lkg的化合物l(得率70%)。醒R(D20，300MHz)(ppm):8.54(s，1H)，7.37(d，J=9.0Hz，1H)，7.05(d，J二9.0Hz，1H)，4.23-4.18(m，1H)，4.10-3.89(m，1H)，3.66(brs，1H)，3,58(s，3H)，3.45(d，J=9.0Hz，1H)，3.34(d，J=9.3Hz,1H)，3.16(d,J=12.9Hz，1H)，2.65(dd，J=16.1，4.1Hz，1H)，2.64-2.53(m，1H)，2.46(dd，J=16.1，8.0Hz，1H),2.06(brs，1H),1.87(d，J二14.4Hz，1H)，1.58—1.45(m,1H)，1.15—0.95(m，2H)，0.91(d，J=6.3Hz，3H)，0.85-0.78(m，2H)。將化合物1溶解在乙腈/水/蟻酸(12:88:0.2)中。。用梯度反相HPLC分析所得溶液，在292nm進行UV檢測。用梯度洗脫液(見下表)實現分離，其中移動相含有乙腈、水和蟻酸，在C8柱上(WatersSymmetryShieldRP8，5Mra，4.6x150mm)，流速為1.5mL/分鐘，30°C。移動相不同時間的組成顯示在下表中<table>complextableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例2制備和研究葡萄糖制劑和氯化鈉制劑。1.5%葡萄糖溶液制劑將化合物溶解在5%葡萄糖無菌水溶液中(5mg/mL)。過濾該溶液，裝到lOOmL聚丙烯瓶中。蓋上該瓶，密封，11(TC滅菌35分鐘。6(TC烘箱中保存該瓶，在第0、5和10天分析該溶液。下表中中的結果顯示，對于化合物1的5%葡萄糖溶液，活性成分的含量下降、pH增加、顏色變化和形成褐色沉淀物。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>以O.1、1、3、4、5、6、10和15mg/mL的濃度制備化合物1的0.9%生理鹽水溶液。過濾這些溶液，裝到lOOmL聚丙烯瓶中。蓋上該瓶，密封，ll(TC滅菌35分鐘。用1、3、5、10mg/inL劑量對大鼠和狗進行GLP毒性研究。實施例3研究活性炭、pH值和鐵含量對制劑的影響。1.活性炭的影響將13.85g的化合物1和18g的氯化鈉溶解在無菌水中。加入額外的無菌水，攪拌，使溶液的最終體積達到2000mL，得到濃度為5mg/mL化合物1的溶液。將所得溶液分成4份，每份500毫升。將0%、0.02%、0.05%和0.5%(g/mL)的活性炭加到每一份溶液中。將所得溶液加熱至沸騰，同時攪拌25分鐘，用0.45微米的濾紙過濾。將濾液加到一系列的lOOmL聚丙烯瓶中，蓋上蓋子，密封，11(TC滅菌35分鐘。分析四個瓶子中每瓶的化合物1的含量和pH,結果顯示在下表中。選擇0.05%(g/niL)的活性炭用于配制過程。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>2.PH的影響釆用與前述實驗相同的步驟制備2000毫升的化合物l的0.9%生理鹽水溶液。將溶液等分成6份。通過加入稀釋的鹽酸或氫氧化鈉，將每份的pH調節為2.43、3.00、3.76、4.51、6.01和7.13。分析溶液的外觀和含量，結果顯示在下表。結果顯示，5mg/mL的化合物1的生理鹽水溶液在pH6.6沉淀。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>3.鐵含量的影響采用與前述實驗相同的方法配制1000毫升化合物1的0.9%生理鹽水溶液。將該溶液等分為2份。一份加入0.25g活性炭，另一份加入0.25g活性炭和0.lg鐵粉。攪拌所得到的各個混合物，過濾到100mL聚丙烯瓶中。蓋上瓶蓋，密封，ll(TC滅菌35分鐘。所述溶液各自的pH和外觀顯示在下表中。基于這些結果，在配制IV制劑過程中應避免與鐵接觸。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.滅菌期間溫度和時間的影響采用與前述實驗相同的方法配制3000毫升I化合物1的0.9%生理鹽水溶液。加入1.5g(0.05%g/mL)活性炭到該溶液中，攪拌15分鐘，過濾。將濾液加到一系列的lOOmL的聚丙烯瓶中。給這些裝入濾液的瓶子蓋上蓋子，密封，分成4組，每組7瓶。根據以下條件給這些樣品滅菌115"C/35分鐘、ll(TC/35分鐘和105TV35分鐘。測量每組化合物1的含量和雜質水平以及pH(包括對照組)并顯示在下表中。基于此研究，腸胃外制劑的滅菌選用1KTC/35分鐘。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>5.較低溫度(一15'C)的影響將含有化合物1(5mg/mL)的0.9%生理鹽水溶液的瓶子保存在一15°C的冰箱中。在第0、5和10天分析樣品。結果顯示在下表中。結果顯示，在一15r保存10天后，外觀、化合物含量、pH和總雜質維持不變。-<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>6.光對制劑的影響將含有化合物1(5mg/mL，基于游離的堿)的0.9%生理鹽水溶液的瓶子放置在4500Lx+/-500Lx的光盒(lightbox)中。在第0、5和10天分析樣品。結果顯示在下表中。研究顯示在強光下溶液沒有變化。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實施例4制備化合物l(5mg/mL，基于游離的堿)在0.9%氯化鈉無菌水中的溶液，過濾，裝到100mL聚丙烯瓶中。蓋上該瓶，密封，ll(TC滅菌35分鐘。在40"/20%相對濕度(RH)下保存這些瓶子6個月和在25匸/60%相對濕度下保存這些瓶子12個月，并根據下表所示進行測試。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>在各采樣點(如表中"X"所示)評估樣品的外觀、顏色、澄清度、pH、UV吸收、定量分析(assay)以及雜質。未觀察到顯著變化。實施例5如下研究化合物1的體外和體內活性。1.體外抗菌活性從臨床樣品中分離出各種細菌種類，如革蘭氏陽性菌(如梭菌屬、葡糖球菌屬、和鏈球菌屬)、革蘭氏陰性菌(如莫拉氏菌屬、嗜血桿菌屬、假單胞菌屬、變形桿菌屬、和變形細菌(Bacteriodes))、厭氧的和非典型的致病原。采用U.S.NationalCommitteeforClinicalLaboratory(M7—A6、2003，禾口Mll-A5，2001)描述的瓊脂稀釋測試法測定化合物1對這些細菌物種的抗菌活性。結果顯示，化合物l具有強力的廣譜抗菌活性，包括抗革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、厭氧的和非典型的致病原的活性。該鹽尤其能有效抗葡糖球菌和鏈球菌，包括甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(MRSA)和多抗性肺炎鏈球菌。對于抗巻須霉素敏感的甲氧苯青霉素易感性金黃色葡萄球菌(MSSA)和MRSA，90%的測試的分離物的最小抑制濃度(MIC9。)是0.06叫/ml。抗巻須霉素抗性MSSA的MIU是0.5叫/mL，抗巻須霉素抗性MRSA的MIC卯是l嗎/mL。抗易感的、青霉素抗性和大環內酯抗性肺炎鏈球菌的MIC9。是0.12|ag/niL。在此研究中，抗所有葡糖球菌和鏈球菌的MIC分別為《2pg/raL和《liig/mL。考慮到所有的革蘭氏陽性微生物，化合物1的效力要比左氧氟沙星強4一8倍，比加替沙星強2一4倍。在革蘭氏陰性微生物中，化合物1能有效抗粘膜炎莫拉菌(ifol^^^Scaz^rr力a7i50(MIC90=0.03(ig/mL)、》究感嗜血桿菌(^ae/T/opAiiwsi//7we"zae)(MICm=0.12|ng/mL)禾口淋病奈瑟氏菌(jVw'5^eriago/arr/cieae)(MIC9。=0.06jig/mL)。該化合物能有效抗大多數的腸微生物，對大腸桿菌coh')的MICm是0.12jug/mL，對肺炎克雷白氏桿菌(A7eZ^ie"3/wewzww'se)的MIC9。是1(ig/mL，對奇異變形桿菌G°r"e〃s的MIC9。是0.5|ig/mL。它也能有效地抗綠膿假單胞菌(/^e^咖o朋saen/^'wosa)的許多分離物以及厭氧致病菌，艱難梭菌(C7o^nW咖力'/ZYci2e)和擬桿菌屬2.體內效力在小鼠模型中評估式I化合物的體內效力。麻醉小鼠，用致死量的肺炎鏈球菌Stp6301鼻內感染小鼠。感染后12、18和24小時，以50、25、12.5或6.25的總劑量將含有化合物1或莫西沙星(作為陽性對照)、0.7%乳酸和3%葡萄糖的組合物皮下給予小鼠。在最后一次用化合物1或莫西沙星處理后4小時，使一半小鼠安樂死，采集它們的血液和肺組織。測定血液和肺中存活的細菌數量。也對肺組織進行組織病理學評估。另一半小鼠則繼續監控6天，記錄存活小鼠的數量。與用載體處理的對照相比，所測試的所有劑量水平的化合物1明顯減少了肺和血液中存活的細菌。此外，所測試的所有劑量水平的該抗生素針對該致死感染提供了完全的保護(100%存活)。在此肺部感染模型中，化合物1要比相同劑量水平的莫西沙星更有效。其它實施例可以各種結合方式結合本說明書所公開的所有這些特征。可用起到相同、等價或類似目的的其它特征來替換本說明書公開的各個特征。因此，除非另有說明，所公開的各特征僅僅是總的一系列等價或類似特征的具體實例。從上述說明可以看出，本領域熟練的技術人員可容易地確定本發明的必要特征，且在不偏離其精神和范圍的情況下，他們可對本發明做出各種變化和改動，以適應各種用途和條件。因此，其它實施方式也在本文權利要求所述的范圍之內。權利要求1.一種腸胃外制劑，它含有有效量的式I化合物水，和濃度為0.2％-13％w/v的等張劑，其中，所述化合物和等張劑溶解在水中，形成腸胃外制劑。2.如權利要求1所述的制劑，其特征在于，所述制劑中化合物的濃度為0.2-45mM,所述等張劑的濃度為0.2%-1.3%w/v。3.如權利要求2所述的制劑，其特征在于，所述等張劑是氯化鈉，其濃度為0.9%w/v。4.如權利要求l所述的制劑，其特征在于，所述化合物成D，L-蘋果酸鹽形式。5.如權利要求4所述的制劑，其特征在于，該制劑中所述化合物的濃度為0.2-45mM，所述等張劑的濃度為0.2%-l.3%w/v。6.如權利要求4所述的制劑，其特征在于，所述等張劑選自甘油、乳糖、甘露醇、氯化鈉、葡萄糖、硫酸鈉和山梨糖醇。7.如權利要求6所述的制劑，其特征在于，所述等張劑是氯化鈉，其濃度為0.9%w/v。8.如權利要求4所述的制劑，其特征在于，該制劑還含有選自組氨酸、賴氨酸、甘氨酸、蔗糖、果糖、海藻糖或其混合物的穩定劑。9.如權利要求4所述的制劑，其特征在于，所述制劑還含有選自乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽或磷酸鹽的緩沖劑。10.如權利要求4所述的制劑，其特征在于，所述制劑還含有選自亞硫酸氫鈉、丁基化羥基苯甲醚、半胱氨酸、龍膽酸、谷氨酸單鈉、硫基乙醇酸鈉或抗壞血酸的抗氧化劑。11.如權利要求5所述的制劑，其特征在于，所述等張劑是葡萄糖，其中該制劑中的濃度為l—7%w/v，且該制劑還含有濃度為O.1-1.0Xw/v的穩定劑和濃度為0.01-5Wv的緩沖劑。12.—種治療感染性疾病的方法，該方法包括經腸胃外注射或輸液給予需要的對象有效量的含有以下組分的制劑式I化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>濃度為0.2%-13%w/v的等張劑，其中，所述化合物和等張劑溶解在水中，形成腸胃外制劑。13.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是尿道感染、前列腺炎、呼吸道感染、骨髓炎、淋病、結核桿菌感染、鳥型結核分枝桿菌綜合癥、慢性支氣管炎的急性惡化、肺炎、竇炎、傳染性腹瀉、幽門螺桿菌感染、皮膚感染、婦科感染、或腹部感染。14.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌感染而引起的。15.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受厭氧菌感染而引起的。16.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(5Y3p力/2ococcws犯re^)和多抗性肺炎鏈球菌(&re/7tcC(7CCW51//e"膨/7iae)的感染而弓l起的。17.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述化合物成成D，L-蘋果酸鹽形式。18.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述等張劑是氯化鈉。19.如權利要求18所述的方法，其特征在于，該制劑中所述化合物的濃度為0.2-45mM，所述等張劑的濃度為0.2%-1.3%w/v。20.如權利要求19所述的方法，其特征在于，所述制劑經靜脈內注射或輸液給予。21.如權利要求20所述的方法，其特征在于，該制劑中所述氯化鈉的濃度是0.9%w/v。22.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是尿道感染、前列腺炎、呼吸道感染、骨髓炎、淋病、結核桿菌感染、鳥型結核分枝桿菌綜合癥、慢性支氣管炎的急性惡化、肺炎、竇炎、傳染性腹瀉、幽門螺桿菌感染、皮膚感染、婦科感染、或腹部感染。23.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌感染而引起的。24.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受厭氧菌感染而引起的。25.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(^邵力Wococc^a"re^)和多抗性肺炎鏈球菌(5Yi-epfococc"5"p/7e"/7o/7iae)的感染而引起的。26.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述制劑還含有選自組氨酸、賴氨酸、甘氨酸、蔗糖、果糖、海藻糖或其混合物的穩定劑。27.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述制劑還含有選自乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽或磷酸鹽的緩沖劑。28.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述制劑還含有選自亞硫酸氫鈉、丁基化羥基苯甲醚、半胱氨酸、龍膽酸、谷氨酸單鈉、硫基乙醇酸鈉或抗壞血酸的抗氧化劑。29.如權利要求20所述的方法，其特征在于，所述制劑還含有濃度為0.0%w/v的穩定劑和濃度為0.01-5%w/v的緩沖劑。30.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述等張劑選自甘油、乳糖、甘露醇、氯化鈉、葡萄糖、硫酸鈉和山梨糖醇。31.如權利要求30所述的方法，其特征在于，所述等張劑是葡萄糖，它在制劑中的濃度為l-7%w/v。32.如權利要求31所述的方法，其特征在于，所述制劑還含有濃度為0.1-1.0%w/v的穩定劑和濃度為0.01-5%w/v的緩沖劑。33.如權利要求31所述的方法，其特征在于，所述制劑經靜脈內注射或輸液給予。34.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是尿道感染、前列腺炎、呼吸道感染、骨髓炎、淋病、結核桿菌感染、鳥型結核分枝桿菌綜合癥、慢性支氣管炎的急性惡化、肺炎、竇炎、傳染性腹瀉、幽門螺桿菌感染、皮膚感染、婦科感染、或腹部感染。35.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌感染而引起的。36.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受厭氧菌感染而引起的。37.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述感染性疾病是受甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(5YspA^ococcwsswews)和多抗性肺炎鏈球菌(5Yreptococc〃s/we咖ow'ae)的感染而引起的。38.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述等張劑是氯化鈉，它在制劑中的濃度為0.2-1.3%w/v。全文摘要本發明涉及一種含有有效量的右式I化合物、水和等張劑的腸胃外制劑。本發明還公開一種通過腸胃外注射或輸液給予對象該制劑來治療感染性疾病的方法。文檔編號A61K31/4709GK101361739SQ20071014128公開日2009年2月11日申請日期2007年8月9日優先權日2007年8月9日發明者吳柏義,孫爾寬,李麗惠,金其新申請人:太景生物科技股份有限公司