專利名稱：：百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途，屬于醫藥領域。
背景技術：
：廣霍香，Pogostemoncablin(Blanco)Benth，是唇形科刺蕊草屬植物，多年生草本，全草藥用。其味辛，微溫，歸脾、胃、肺三經，具有芳香化濁、開胃止嘔、發表解暑的功能。廣霍香的藥用成分主要是其揮發油，稱廣霍香油(patchoulioil)，具有調節消化道功能、胃腸平滑肌解痙和抗菌作用。其主要成分是廣霍香醇(patchoulialcohol,百秋李醇)，具有f丐離子拮抗作用(ChemPharmBu11，1989,37(2):345-348)。廣霍香醇屬三環倍半萜類化合物，可結晶，熔點5556%，沸點140°C(1.06kPa)，旋光度-97.4°(c=24，氯仿)，不溶于水，溶于醇、醚和常用有機溶劑。分子式C15H260，CAS登記號為5986-55-0，分子量為222.37，化學名為(lR-(lalpha，4beta,4-alpha,6beta，8-alpha))-Octahydro-4，8a,9，9-tetramethyl-l<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage3</formula>,6-methano-l(2H)-naphthol，結構式如下老年癡呆病是一種以進行性認知功能減退為主要臨床癥狀的慢性中樞神經系統退行性疾病。其發病率隨著年齡增長而急劇上升，我國65歲以上老年人的患病率為1%5%,85歲以上達到20%40%。老年癡呆的病理改變包括廣泛的神經元丟失、腦內出現無數神經元纖維纏結(neurofibrillarytangles)和老年斑(senilepl叫ue)等。目前已上市的老年癡呆治療藥物如安理申、他克林等，可以在一定程度上改善或緩解輕度患者的癡呆癥狀，但不能阻止或逆轉病變的進一步發展。
發明內容本發明要解決的技術問題是提供百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途。本發明要解決的另一個技術問題是提供一種防治老年性癡呆癥的藥物組合物。為實現上述目的，本發明采用以下技術方案百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途。一種防治老年性癡呆癥的藥物組合物，由活性成分百秋李醇和藥學接受的輔料組成。所述藥學接受的輔料包括但不限于藥學上可接受的稀釋劑、防腐劑、溶劑、乳化劑、佐劑和/或載體。所述防治老年性癡呆癥的藥物或藥物組合物為口服制劑、注射劑、經肺、鼻劑、經皮或其他方式給藥劑型。所述口服劑型包含但不限于膠囊、片劑、丸劑、錠劑、顆粒劑、脂質體等。本發明中的百秋李醇購自中國藥品生物制品檢定所，純度達98%以上。在細胞水平，采用流式細胞術檢測百秋李醇抗P淀粉樣蛋白(A0)致PC12凋亡作用以及對原代海馬神經元軸突生長促進作用。在動物水平，采用小鼠跳臺試驗和Morris水迷宮試驗觀測其對東莨菪堿所致老年癡呆模型小鼠學習記憶的促進作用。結果顯示，百秋李醇對神經細胞具有保護及營養作用，能夠改善老年癡呆模型小鼠學習記憶能力。本發明的優點是本發明經過廣泛深入的研究，在篩選抗老年性癡呆病的藥物中出人意料地發現百秋李醇具有神經保護及營養作用。進一步研究發現其對老年癡呆模型小鼠學習記憶有促進作用。因此，可將百秋李醇用于制備防治老年癡呆病的藥物。以百秋李醇為活性成分的藥物在臨床上可能會有顯著療效，從而產生巨大的社會效益和經濟效益。下面結合具體實施方式對本發明發明作進一步說明，并非對本發明的限定，依照本領域公知的現有技術，本發明的實施方式并不限于此，因此凡依照本公開內容所作出的本領域的等同替換，均屬于本發明的保護范圍。具體實施例方式實施例1:百秋李醇抗凋亡作用一.材料1.百秋李醇，購自中國藥品生物制品檢定所，純度達98%以上。2.Ae25~35，購自Sigma公司。3.AnnexinV-FITC，FITC標記的膜聯蛋白V，購自晶美生物工程有限公司。4.PI溶液，碘化丙啶溶液。5.大鼠嗜鉻細胞瘤細胞(PC12)細胞株，本室傳代保存。二.方法采用流式細胞術檢測百秋李醇對抗八025~35導致大鼠嗜鉻細胞瘤細胞(PC12)凋亡作用。實驗分組如下對照組；Ae25~35處理組；不同劑量藥物組。取100W的細胞懸液于流式管中，加入AnnexinV-FITC和PI溶液(20W/ml)混勻，室溫避光孵育15分鐘，加400WPBS，流式細胞儀分析。三.結果與正常組比，Ae2EM5處理模型組凋亡率明顯增加，且有統計學意義(P〈0.01);各加藥組凋亡率與模型組比顯著降低(P〈0.01)，百秋李醇有抗AP:25,致PC12細胞凋亡作用。表l-百秋李醇抗AP2535致PC12細胞的凋亡作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注〃與對照組比P〈0.01;A與模型組比P〈0.01實施例2:百秋李醇促進原代培養海馬神經元軸突生長作用一.材料1.百秋李醇，購自中國藥品生物制品檢定所，純度達98%以上。2.胰酶，濃度為0.25%，購自Sigma公司3.DMEM/F-12培養基，購自Gibco公司。4.神經生長因子(NGF)，購自北京圣日醫藥科技發展有限責任公司。5.胎牛血清，購自Gibco公司。6.N2，購自Gibco公司。7.B27,購自Gibco公司。8.阿糖胞苷，購自哈爾濱博萊制藥有限公司。9.SD大鼠乳鼠，出生12h內，早$兼用，分為對照組和不同劑量藥物組，購自軍事醫學科學院實驗動物中心。二.方法大鼠乳鼠經體積分數為75%乙醇消毒后，斷頭置于含解剖液的平皿中，分離出全腦，解剖顯微鏡下分離海馬組織。將其置于0.25%胰蛋白酶中并用剪刀剪碎。每隔4min吸取胰酶至含血清離心管中，并加入新鮮胰酶直至無肉眼可見的組織塊。200目金屬篩網過濾后以1000rpmmin—'離心10min。將其重懸于10%胎牛血清的DMEM/F-12種植液，接種于預先包被多聚賴氨酸的24孔板，培養過夜后換為3%胎牛血清、1%N2、腦7和3ng'mL-'阿糖胞苷的DMEM/F-12培養液。加入終濃度質量分數為0.05、0.5、5yg'mL—'百秋李醇，同時加入2ngm1/1神經生長因子(NGF);對照組僅加2ngmL—1的NGF。2d后于熒光顯微鏡下拍照，并統計軸突長度，方法為每組10張，每張測量各神經元軸突長度，求和后除以其神經元總數。三.結果百秋李醇本身對原代海馬神經元軸突生長無促進作用，但在2ng*mL—'NGF存在下可明顯促進其軸突生長，其軸突長度明顯長于對照組(P<0.01)。結果表明，在極低濃度NGF存在下，百秋李醇0.055ug*mL—'的濃度范圍內對原代海馬神經元軸突生長有促進作用(表2)。表2:<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注n=10^與對照組比P〈0.01實施例3:百秋李醇對老年癡呆模型小鼠學習記憶的促進作用一.材料1.百秋李醇，購自中國藥品生物制品檢定所，純度達98%以上。2.東莨菪堿，徐州萊恩藥業有限公司生產。3.昆明小鼠，體重1416g，雌性，分為正常對照、東莨菪堿組和不同劑量藥物組，小鼠按體重均衡的原則隨機原則分組，每組10只，購自軍事醫學科學院實驗動物中心。二.方法采用小鼠跳臺試驗和Morris水迷宮試驗觀測百秋李醇對東莨菪堿所致老年癡呆模型小鼠學習記憶的促進作用。小鼠按體重均衡的原則隨機原則分組。給藥7d后，造模并進行試驗。1.小鼠跳臺試驗將動物放置在平臺上，適應環境3min，然后通以36V電壓，訓練5min。24h后測驗，記錄第一次跳下平臺的潛伏期、5min內的錯誤次數和總電擊時間，以此作為記憶成績。2.Morris水迷宮試驗試驗前一天先將小鼠放入水迷宮中自由游泳2min以適應環境。每日上午訓練前15min腹腔注射東莨菪堿5mg'kg—1，每天給藥一次。第一天小鼠訓練3次，每次分別從3個不同入水點將小鼠面向容器壁放入水中游泳，若小鼠在90s內不能找到水下平臺，則將其直接置于平臺上并停留30s。第二天開始每天上下午各訓練一次，記錄小鼠入水后爬上平臺所用的時間、路經軌跡等作為檢測小鼠對空間和線索學習的指標，24小時后按步進行復測，共訓練3天。每組取4只鼠腦組織做免疫組化測定膽堿能Mi受體水平，每只鼠做兩張切片，免疫組化采用SABC法，DAB顯色，最后用蘇木素進行核復染。每組取一張切片作為陰性對照(一抗用PBS代替)。數據分析時，每張切片按海馬和皮層相同部位選取5個視野，結果用MIAS醫學圖像分析管理系統4.0進行處理，分析平均光密度和積分光密度。三.結果1.小鼠跳臺試驗跳臺結果顯示，與正常組比，模型組5min內錯誤次數明顯增加，潛伏期顯著縮短。與模型組比，百秋李醇組錯誤次數明顯減少，但潛伏期有增加的趨勢但無統計學差異(見表3)。表3:百秋李醇對東莨菪堿小鼠學習記憶障礙模型跳臺成績的影響組別齊'J量(mg-kg-1)錯誤次數(n)潛伏期(s)正常對照組—0.2±0.4259.9±95.2東莨菪堿組55.0±1.7"*8.3±2.3***百秋李醇低劑量組501.5±1.2#110.0±94.4百秋李醇高劑量組1001.0±1.1##141.2±137.8注與正常組相比，***P<0.001;與模型組相比#<0.05,辨O.Ol.2.Morris水迷宮試驗Morris水迷宮結果顯示，隨著訓練次數的增加，各組小鼠找到平臺的潛伏期逐漸縮短。與對照組相比，模型組(東莨菪堿5mgkg—1)各次訓練成績均顯示出顯著差異。百秋李醇組從第5次訓練開始與模型組顯示出顯著差異。結果如表4所示表4:百秋李醇對東莨菪堿小鼠學習記憶障礙模型水迷宮上臺潛伏期的影響潛伏期(s)對照組東莨菪堿百秋李醇百秋李醇__(100mgkg")(50mgkg懇1)第1次60.10±29.5386.94±9.49*81.53±20.5887.38±6.64第2次40.32±31.0389.08±1.85***70.50±31.2582.46±11.23第3次40.43±27.3077.73±26.37**55.42±31.2269.87±22.16第4次24.87±10.4176.52±28.31***52.28±33.5359.81±24.90第5次19.80±12.0478.43±1.74***32.07±16.53,44.49±33.24##第6次15.22±7.4983.30±20.15***31.77±23.97###34.03±10.58###第7次17.19±12.8660.02±30.74**28.02±10.58##32.70±19.24#注與正常組相比*P<0.05,**P<0.01，***P〈0.001;與模型組相比#P<0.05，P<0.01，###PO.OOl。第l一3次為第一天訓練結果，第4、5次為第二天訓練結果，第6、7次為第三天訓練結果。平均光密度結果顯示，與正常對照組相比，模型對照組平均光密度值顯著下降，說明細胞染色程度下降，膽堿能M1受體水平降低。而百秋李醇組平均光密度值均比模型組有所提高，說明藥物可能使M1受體水平提高。積分光密度結果亦顯示模型組比正常對照組顯著降低，而百秋李醇組比模型組顯著升高。說明藥物組陽性細胞染色水平的整體水平升高，即抗原總量水平升高，結果見表5。表5:百秋李醇對東莨菪堿造成小鼠獲得性學習記憶障礙模型腦組織M！受體水平的影響組別平均光密度積分光密度正常對照0.21±0.041077.70±612.46東莨菪堿模型0.15±0.04***261.24±103.28***百秋李醇100rag'kg—10.18±0.05抑858.88±165.8柳#百秋李醇50mgkg—10.17±0.03tt673.44±171.66#抑注與正常組相比，***PO.001;與模型組相比#P<0.05,##P<0.01，###P<0.001。權利要求1.百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途。2.—種防治老年性癡呆癥的藥物組合物，其特征在于由活性成分百秋李醇和藥學接受的輔料組成。3.根據權利要求2所述的一種防治老年性癡呆癥的藥物組合物，其特征在于所述藥學接受的輔料為藥學上可接受的稀釋劑、防腐劑、溶劑、乳化劑、佐劑和/或載體。4.根據權利要求2所述的一種防治老年性癡呆癥的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為口服制劑、注射劑、經肺、鼻劑、經皮或其他方式給藥劑型。5.根據權利要求4所述的一種防治老年性癡呆癥的藥物組合物，其特征在于所述口服劑型為膠囊、片劑、丸劑、錠劑、顆粒劑或脂質體。全文摘要本發明公開了百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途，屬于醫藥領域。百秋李醇在制備防治老年性癡呆癥的藥物中的用途。本發明的優點是本發明經過廣泛深入的研究，在篩選抗老年性癡呆病的藥物中出人意料地發現百秋李醇具有神經保護及營養作用。進一步研究發現其對老年癡呆模型小鼠學習記憶有促進作用。因此，可將百秋李醇用于制備防治老年癡呆病的藥物。以百秋李醇為活性成分的藥物在臨床上可能會有顯著療效，從而產生巨大的社會效益和經濟效益。文檔編號A61K31/045GK101194899SQ20071017634公開日2008年6月11日申請日期2007年10月25日優先權日2007年10月25日發明者徐風華,欒復新,黃曉舞申請人:中國人民解放軍總醫院