專利名稱：：含有氯吡格雷的藥物組合物的制作方法
技術領域：
：本發明屬于醫藥
技術領域：
，具體涉及一種含有原花青素和氯吡格雷或其藥理上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物。
背景技術：
：花青素(anthocyanin)屬酚類化合物中的類黃酮類，是一種水溶性色素，是一類廣泛存在于植物中的主要呈色物質，可以隨著細胞液的酸堿改變顏色(細胞液呈酸性則偏紅，細胞液呈堿性則偏藍)，多存在于葡萄、蘋果、高粱和櫻桃等植物中，其中以葡萄(籽和皮)含量最為豐富。花青素是構成花瓣和果實顏色的主要色素之一，它是由不同數量的兒茶素或表兒茶素結合而成，自然條件下游離的花青素極少見，原花青素是山不同數量的兒茶素或表兒茶素結合而成，最簡單的原花青素是兒茶素或表兒茶素或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體，此外還有三聚體、四聚體等直至十聚體。按聚合度的大小，通常將二至四聚體稱為低聚體(0PC)，將五聚體以上的稱為高聚體(PPC)。原花青素具有廣泛的生物活性，近年來的研究發現其在抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抗病毒、抗腫瘤、抗輻射、抗炎癥、抗過敏、保健功效等許多功能上均顯示了一定效果，作用廣泛、使用時幾乎無任何副作用。隨著年齡的增長，動脈中的彈性纖維由于逐漸氧化而變硬，而動脈硬化是導致老年人心腦血管疾病的一個主要原因，機體內的低密度酯蛋白、膽固醇增加也是導致動脈硬化和心臟病的關鍵因素。動物實驗和臨床研究發現，葡萄籽提取物原花青素可以有效地降低膽固醇和低密度脂蛋白水平，預防血栓形成，有助于預防心腦血管疾病的發生。血小板聚集在止血與血栓形成中具有關鍵的作用，多種物質都可以通過各自特異性受體引起血小板的活化與聚集。二磷酸腺苷(ADP)是人們發現最早、也是體內最重要的誘導血小板聚集的物質。血小板二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑包括噻氯吡定、氯吡格雷、普拉格雷等。氯吡格雷是一種新型高效的抗血小板藥物，臨床上應用于治療動脈粥狀硬化疾病、急性冠脈綜合癥、預防冠脈內支架植入術后支架內再狹窄和血栓性并發癥等，與其他抗血小板藥物相比，氯吡格雷具有療效強、費用低、副作用小等優點，氯吡格雷與阿司匹林聯用正逐漸成為心腦血管病中抗血栓治療的標準。氯吡格雷為血小板聚集抑制劑，能選擇性地抑制ADP與血小板受體的結合，隨后抑制激活ADP與糖蛋白GPlIb/IIla復合物，從而抑制血小板的聚集，氯吡格雷作為一種有效的抗血小板制劑正被臨床廣泛使用。國際專家已達成"抗血小板制劑越有效越容易導致出血"的共識，同時這也是臨床上的治療矛盾，氯吡格雷抗凝活性強、抑制血小板聚集有效、作用迅速，但不可避免的導致出血危險性增加。如果藥物引發出血風險增加，即便出血不嚴重，也會顯著降低患者的依從性，依從性降低的風險在抗血小板制劑中很重要，這可能會導致心血管事件的反彈。因此在應用抗血小板制劑氯吡格雷治療血栓性疾病時如何有效降低出血風險成為臨床治療中迫切需要解決的問題。
發明內容本發明提供了一種含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物。本發明將原花青素和氯吡格雷這兩者聯合用藥，找到了一種更為有效的治療血栓性疾病的方法。基于目前臨床上關于"抗血小板制劑越有效越容易導致出血"的共識，氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性越好、越有效、作用越迅速，其出血風險越大。尋找一種即能保持抗凝活性的迅速強勁又能有效降低出血風險的復方藥物組合物成為治療血栓性疾病的研究方向。氯吡格雷是通過抑制血小板聚集發揮抗凝效果的藥物，而原花青素卻是從植物中提取的類黃酮類物質，是一種強有力的抗氧化劑，可抑制炎癥和過敏，改善關節的柔韌性等作用。本發明通過反復多次的試驗摸索，創造性地把氯吡格雷和中藥提取物原花青素有效組合在一起，發現在應用氯吡格雷治療血栓類疾病的同時聯合應用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但沒有影響氯吡格雷的抗凝效果，兩者合用后在降低出血不良反應上取得了非常好的效果，這樣就在充分發揮氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優勢的同時，出血風險大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中帶來的出血風險，大大降低了氯吡格雷的不良反應。實施例io采用組胺致大鼠背部皮膚急性炎癥反應，使血漿蛋白透入血管外組織速率加快，致毛細血管通透性增加，然后注入伊文思藍，通過比較藍染面積和其丙酮生理鹽水浸出液吸光度值來反應本發明藥物組合物在降低毛細血管通透性的作用。本發明的藥物組合物的優勢體現在下列幾個方面一、原花青素和氯吡格雷的聯合應用產生了很好的協同效果，取得了意想不到的療效。氯吡格雷能有效抑制血小板聚集，但同時會引發出血風險，我們通過設計不同的實驗，證實了合用原花青素不但沒有影響到氯吡格雷的抗凝活性，反而使得氯吡格雷的抗凝活十3增強，更為可貴的是使氯吡格雷的出血率減小，降低出血風險可使氯吡格雷的抗凝活性發揮的更有效、更迅速徹底。二、長期使用本發明的藥物組合物，對血栓性疾病患者的長期生存率具有有益的影響，對患者的預后產生積極的影響，這也是本發明所解決的最具有意義的臨床治療問題。本發明要求保護的是一種含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物。根據藥物的性質和患者用藥方便的需要，我們將本發明的藥物組合物制備成固體藥物制劑，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、膜劑等。其中片劑包括普通片劑、分散片、緩釋片、崩解片、咀嚼片、泡騰片、腸溶衣片等劑型。氯吡格雷藥理上可接受的鹽為其煙酸鹽、枸櫞酸鹽、硫酸氫鹽、鹽酸鹽、馬來酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽等。所述的原花青素為花青素單體、低聚體或高聚體中的一種或多種，原花青素單體為兒茶素或表兒茶素或者其混合物，原花青素二聚體為兒茶素、表兒茶素或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體或其混合物。藥物組合物中氯吡格雷或氯吡格雷可藥用鹽中的游離氯吡格雷和原花青素的重量比為1:0.21:100。氯吡格雷或氯吡格雷可藥用鹽中的游離氯吡格雷和原花青素的重量比優選為1:0.2~1:20，在此優選比例中氯吡格雷和原花青素聯合應用在藥效試驗中發現效果最好，并能更大程度充分發揮氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優勢，同時出血風險大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中帶來的出血風險，并降低了氯吡格雷的不良反應。本發明采用固體藥物制劑，具有攜帶、使用方便，給藥途徑簡單、易行的優點，易于為患者接受。本發明的藥物組合物按照通常的制藥技術配制，可以使用以下添加劑按常規技術制備賦形劑(例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉、糊精、結晶纖維素、阿拉伯膠、葡聚糖等)，潤滑劑(硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石粉、微粉硅膠、硼酸、十二烷基硫酸鈉等)，粘合劑(羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等)，崩解劑(低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基淀粉、交聯聚乙烯吡咯烷酮等)，乳化劑(膨潤土、氫氧化鎂、氫氧化鋁、十二垸基硫酸鈉等)，穩定劑(對羥基苯甲酸甲酯、苯甲醇、苯乙醇、苯酚、山梨酸、脫氫乙酸等)，矯味劑(蔗糖、香料、阿斯巴甜、環糊精等)，稀釋劑等。具體實施例方式現通過以下實施例詳細闡述本發明，但本發明的范圍并不僅限于此。下面實施例中所述的氯吡格雷可藥用鹽的重量均是以藥用鹽中所含氯吡格雷的重量計。實施例1普通片劑5原花青素25g氯吡格雷硫酸氫鹽25g微晶纖維素250g乳糖20g10%淀粉漿適量硬脂酸鎂1.5g制備工藝稱取處方量的原花青素、氯吡格雷硫酸氫鹽、微晶纖維素、乳糖混合均勻。另將適量的10%淀粉漿加入于混合粉末中，混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，6(TC左右干燥，干粒水分應控制在1.5%以下。20目篩整粒，再與硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。實施例2普通片劑兒茶素5g氯吡格雷鹽酸鹽25g淀粉400g糊精20g50%乙醇適量硬脂酸鎂2.0g制備工藝稱取處方量的兒茶素、氯吡格雷鹽酸鹽、淀粉、糊精混合均勻。另將適量的50%乙醇加入于混合粉末中，混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，6(TC左右千燥，干粒水分應控制在1.5%以下。20目篩整粒，再與硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。實施例3分散片表兒茶素600g氯吡格雷15g交聯羧甲基纖維素鈉10g微晶纖維素500g聚乙烯吡咯烷酮50g5%PVP60%乙醇溶液適量微粉硅膠5g制備工藝按處方量稱取表兒茶素、氯吡格雷，以微品纖維素為填充劑，交聯羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮為崩解劑，5MPVP60M乙醇溶液為黏合劑，微粉硅膠為助流劑，用流化床一步制粒，然后壓片，即得。實施例4緩釋片原花青素低聚體75g氯吡格雷15g羥丙基甲基纖維素20g乳糖250g80%乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g制備工藝先將原花青素低聚體、氯吡格雷、乳糖粉碎過100目篩；羥丙基甲基纖維素過80目篩。然后按處方量稱取處方量的原花青素、氯吡格雷、羥丙基甲基纖維素及乳糖將其混勻，加80%乙醇溶液制軟材，過18目篩制粒，濕顆粒在60。C左右千燥，干顆粒經16目篩整粒，加硬脂酸鎂混勻，混勻壓片，即得。實施例5膠囊劑原花青素高聚體500g氯吡格雷5g微晶纖維素300g微粉硅膠5g制備工藝將原花青素低聚體、氯吡格雷、微晶纖維素、微分硅膠粉碎過100目篩混勻，直接填裝膠囊即得。實施例6顆粒劑原花青素氯吡格雷淀粉糊精庶糖粉80%乙醇制備工藝稱取處方腦g5g加0g25g30g適量量的原花青素、氯吡格雷、淀粉、糊精、蔗糖粉混合均勻。另將適量的80%乙醇加入于混合粉末中，混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，60°C左右干燥，20目篩整粒，分裝，即得。實施例7滴丸劑原花青素250g氯吡格雷25g聚乙二醇4000150g聚乙二醇6000150g制備工藝將聚乙二醇4000和聚乙二醇6000置容器中，加熱至90。C10(TC，待全部熔融后，加入原花青素及氯吡格雷攪拌至熔解，轉移至貯液瓶中，密閉并保溫在80°C9(、°C，調節滴液定量閥門，由上往下，滴入10。C15t:的液狀石蠟中，將成形的滴丸瀝盡并擦除液狀石蠟，置石灰缸里干燥，即得。實施例8分散片原花青素400g氯吡格雷5g交聯羧甲基纖維素鈉80g微晶纖維素500g聚乙烯吡咯垸酮50g5%PVP60%乙醇溶液適量微粉硅膠5g制備工藝按處方量稱取原花青素、氯吡格雷，以微晶纖維素為填充劑，交聯羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯垸酮為崩解劑，5XPVP60X乙醇溶液為黏合劑，微粉硅膠為助流劑，用流化床一步制粒，然后壓片，即得。實施例9氯吡格雷原花青素藥物組合物對大鼠血小板聚集的抑制作用1.試驗方法取SD大鼠64只，雄性，重量200-300g，山東新時代藥業新藥藥理中心提供，隨機分8組，每組8只，預養一周。對照組(生理鹽水)、氯吡格雷組(6mg/kg)、原花青素組(6ing/kg)、兒茶素組(6mg/kg)、表兒茶素組(6mg/kg)、原花青素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)組、8兒茶素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)組、表兒茶素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)組，灌胃給藥，每日一次，共7天。抗血小板聚集作用的測定動物經上述給藥2天后，隔夜禁食，于次R給藥1小時后，用烏拉坦腹腔注射麻醉后剖腹分離腹主動脈，插入聚乙烯管取血5ml于試管內(管內按抗凝劑和血1:9預置3.8%枸櫞酸鈉溶液0.5ml)，將全血按1000轉/分離心4min，取富血小板血漿(PRP)lml。再將余液按3000轉/分離心8min，取貧血小板血漿(PPP)lml，分置兩塑料試管內。調劑后恒溫(37±0.1)°C。用ADP(30ul/管)和膠原(30ul/管)做聚集誘導劑，描計最大聚集強度，并計算其抑制率。聚集抑制率=(對照組聚集強度一試驗組聚集強度)/對照組聚集強度X100%2.試驗結果表1對ADP和膠原引起的大鼠血小板聚集的抑制作用(x土s，n=8)組別齊u量ADP膠原(mg/kg)聚集強度(％)抑制率(％)聚集強度(％)抑制率(％)對照組NS0.601±0扁0.758±0.081氯吡格雷組60.403±0.056**32.90.504士0.07(T33.5原花青素組60.585±0.0652.660.701±0扁7.52兒茶素組60.593±0.0501.330.717±0.0405,41表兒茶素組60.581±0.0433.330.722±0.0554.75原花青素+氯組6+60.289土0.052樹51.90.302±0.065***52.2兒茶素+氯組6+60.291±0.055**#51.60.339±0細***55.3表兒茶素+氯組6+60.263±0.053***56,20.363土0.061樹52.1注"與對照組比較p〈0.01;#與氯吡格雷組比較p<0.05;由表1可見，原花青素、兒茶素以及表兒茶素和氯吡格雷聯合用藥后，對ADP或者膠原引起的大鼠血小板聚集有明顯的抑制作用，聯合應用產生了很好的協同作用，且隨著藥物劑量的增加，其抑制率也增高呈劑量依賴性。實施例10原花青素氯吡格雷聯合用藥對大鼠皮膚毛細血管通透性的影響1.試驗方法SD大鼠40只，雄性，體重(200±20)g，山東新時代藥業新藥藥理中心提供，按體重隨機分為模型組、氯吡格雷組(3mg/kg)、原花青素氯吡格雷低劑量組(18mg/kg+3mg/kg)9及原花青素氯吡格雷高劑量組(36mg/kg+6mg/kg)，每組10只。按體重灌胃給藥，模型組灌胃生理鹽水，試驗前1天將大鼠背部毛除凈，給藥1小時后，將大鼠背部皮下注入200ug組胺(lmg/ml)，立即在尾靜脈注射1%伊文思藍0.4ml/100nig，20min后斷頭處死，剝皮測著色皮斑面積，以圓面積計算公式計算，然后用標準的2cm直徑打孔器打下藍染皮片。將大鼠皮膚藍染皮片放入7:3丙酮與生理鹽水混合液(4ml)中，分兩次浸泡，每次2小時，合并浸液，加上述混合液至5ml，放置電熱恒溫水槽，在65。C孵存36小時，直至皮膚藍色完全消失。在用離心機離心10min，取上清液，用紫外可見光光度計測定吸光度。運用SPSS統計軟件處理，藍染面積采用多樣品組間兩兩比較檢驗，多個樣本吸光度數據間比較采用非參數檢驗。2.試驗結果表2原花青素氯吡格雷聯合用藥對大鼠皮膚通透性的影響(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注^與模型組比較P〈0.05;"與模型組比較P〈0.01;^與氯吡格雷組比較，P〈0.01。實驗表明，原花青素氯吡格雷低、高劑量組均對組胺所致的大鼠皮膚毛細血管通透性的發生有明顯的抑制作用，隨著劑量的增加，其抑制程度增高呈劑量依賴性，與模型組比較，原花青素氯吡格雷低、高劑量組均有顯著性差異，單獨使用氯吡格雷藍染面積增大，吸光度增加，使毛細血管通透性增加更嚴重，與文獻報道一致，應用原花青素氯吡格雷藥物組合物后吸光度減小，有效降低大鼠皮膚毛細血管通透性。實施例11原花青素氯吡格雷藥物組合物對實驗大鼠頸動-靜脈旁路血栓形成的抑制作用1.試驗方法取大鼠110只，雄性，體重200-250g，隨機分為6組，每組20只(對照組10只)，預養一周。共設對照組(生理鹽水)、氯吡格雷組(5mg/kg)、原花青素高聚體組(50mg/kg)、原花青素低聚體組(50mg/kg)、原花青素高聚體氯吡格雷組(50mg/kg+5mg/kg)及原花青素低聚體氯吡格雷組(50mg/kg+5mg/kg)。血栓形成抑制率的測定取大鼠稱重，灌胃給藥后60min，用烏拉坦腹腔注射麻醉后，分離左頸外靜脈和右頸總動脈，取三段聚乙烯管組成的套管，其中間一段置一根5cm長的稱重絲線，以肝素生理鹽水(50u/ml)充滿聚乙烯管。當管的一端插入頸外靜脈后，夾住管的一端，將絲線固定的一端套管插入右頸總動脈，手術完成后立即丌放血流。15min后中斷血流，迅速取出絲線稱重。總重量減去絲線重量即為血栓濕重。按以下公式計算血栓形成抑制率。血栓形成抑制率-(對照組血栓重一試驗組血栓重)/對照組血栓重X100呢測定完血栓濕重后處死大鼠，解剖，借助放大鏡觀察胃粘膜充血、水腫、出血情況，有胃粘膜充血、水腫、出血現象的大鼠，記入相應的實驗組胃粘膜出血例。2.試驗結果表3花青素氯吡格雷對實驗大鼠頸動-靜脈旁路血栓形成的抑制作用(x士s)組別n劑量他.栓濕重(mg)抑制率(％)出血出血率(mg/kg)例數對照組10NS34.72±5.38氯吡格雷組20525.84±4.47w25.58315%原花青素高聚體組205031.15±6.8910.2800%"原花青素低聚體組205030.22±8.0112.9600%**原花青素高聚體氯吡格雷組2050+517.66±4.23""**49.1400%**原花青素低聚體氯吡格雷組2050+513.09±3.35,62.3000%**注""與對照組比較，P〈0.01;"與氯吡格雷組比較，P〈0.01。由表3可見，原花青素高聚體、原花青素低聚體和氯吡格雷聯合用藥后，在抑制血栓形成上取得了很好的協同性作用，而且在聯合用藥后，對氯吡格雷的主要不良反應，出血危險性增加有了很好的抑制作用，使得出血率明顯降低，說明原花青素高聚體、原花青素低聚體和氯吡格雷聯合用藥后，在抑制大鼠動-靜脈旁路血栓形成取得很好效果的同時，并沒有產生任何的出血風險。1權利要求1.一種藥物組合物，其特征在于它含有原花青素和氯吡格雷或其藥理上可接受的鹽。2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其中所述的氯吡格雷藥理上可接受的鹽為其煙酸鹽、枸櫞酸鹽、硫酸氫鹽、鹽酸鹽、馬來酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸iL硝酸鹽或草酸鹽。3.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的原花青素是其單體、低聚體或高聚體中的一種或一種以上。4.如權利要求1-3中任一權利要求所述的原花青素，其特征在于所述的原花青素單體是兒茶素或表兒茶素。5.如權利要求1所述的原花青素，其特征在于它是兒茶素或表兒茶素形成的低聚體。6.如權利要求1所述的原花青素，其特征在于它是兒茶素形成的二聚體、表兒茶素形成的,二聚體或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體或其混合物。7.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物中氯吡格雷或氯吡格雷可藥用鹽中的游離氯吡格雷和原花青素的重量比為1:0.21:100。8.如權利要求l所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物中氯吡格雷或氯吡格雷可藥用鹽中的游離氯吡格雷和原花青素的重量比為1:0.21:20。9.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物為固體藥物制劑。10.如權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑、散劑。全文摘要本發明提供了一種含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物，將原花青素和氯吡格雷這兩者聯合用藥，找到了一種更為有效的治療血栓性疾病的方法，通過反復多次的試驗摸索，本發明創造性地把氯吡格雷和中藥提取物原花青素有效組合在一起，發現在應用氯吡格雷治療血栓類疾病的同時聯合應用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但沒有影響氯吡格雷的抗凝效果，兩者合用后在降低出血不良反應上取得了非常好的效果，這樣就在充分發揮氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優勢的同時，出血風險大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中帶來的出血風險，大大降低了氯吡格雷的不良反應。文檔編號A61K31/4365GK101554379SQ20081001498公開日2009年10月14日申請日期2008年4月9日優先權日2008年4月9日發明者程國良,趙志全申請人:魯南制藥集團股份有限公司