專利名稱：：一種治療糖尿病的藥物組合物的制作方法
技術領域：
：本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種通過腸道促吸收劑提高口服鹽酸小檗堿生物利用度的藥物組合物及其用在治療糖尿病的應用。
背景技術：
：糖尿病是常見病，多發病，其患病率正隨著人們生活水平的提高，人口老化、生活方式的改變而迅速增加。估計我國現有糖尿病患者約3千萬，其中2型糖尿病(T2DM)患者占95%左右，T2DM的發病正趨向低齡化。糖尿病已成為居心血管病和腫瘤之后的第三大非傳染性疾病，對社會和經濟帶來沉重的負擔。因此找到安全有效的降血糖及防治糖尿病并發癥的藥物具有重要意義。小檗堿(Berberine,Ber)又名黃連素，作為一種廣譜抗菌藥治療腸道細菌感染性疾病已有較長的歷史，近年來發現小檗堿具有廣泛藥理作用，對心律失常、高血壓、充血性心力衰竭、糖尿病、高血脂等多種疾病有很好的治療作用。其中小檗堿對2型糖尿病患者有顯著的降血糖作用，近年來，大量臨床及實驗研究表明，小檗堿在治療2型糖尿病患者中不僅具有降血糖，改善糖耐量受損的作用，而且對糖尿病并發癥如糖尿病腎病、高血壓、高血脂、血栓形成、糖尿病神經病變、糖尿病合并心腦血管疾病等疾病均有較好的防治作用。小檗堿治療糖尿病作用肯定，對其機制的研究也在不斷深入。目前的實驗表明小檗堿治療糖尿病的機制可能有以下幾方面①增加胰島素敏感性，改善胰島素抵抗；②促進胰島卩細胞的再生和功能修復，即導致胰島素釋放增加；③提高機體抗氧化能力；④降血脂、抗血小板凝集作用；⑤抑制醛糖還原酶活性。與其他大多數臨床常用藥相比，鹽酸小檗堿具有以下優勢療效確切；作用廣泛，能起到一藥多用的作用；應用范圍廣；副作用少；價格低廉等，因此越來越受到廣大臨床醫生的關注，有較大發展空間，具有巨大的市場潛力。鹽酸小檗堿具有如此顯著的優勢，但臨床上除用于腸道感染之外，其他重要的藥理作用并未得到廣泛應用。限制鹽酸小檗堿臨床應用的最根本問題是其生物利用度很低，在10%左右，口服用藥難以達到有效血藥濃度，且用量過大造成病人用藥次數頻繁，耐受性差，藥效差，胃腸道副作用明顯，大大限制了其臨床應用。如何改善鹽酸小檗堿在腸道的吸收，提高其生物利用度，降低其臨床服用量，避免其副作用成為目前亟待解決的問題。腸道吸收促進劑與透過性差的藥物共同服用時，會增加藥物的透過性，進而提高其生物利用度。目前腸道吸收促進劑有很多類型，其中中鏈脂肪酸及其鹽類是常用的一類，其主要包括辛酸鈉、癸酸鈉、十二碳酸鈉、月桂酸鈉和油酸鈉等。其中癸酸鈉是一種低毒而有效的吸收促進劑，并作為栓劑用于臨床，是一種被批準在藥品中使用的促吸收劑。其促吸收機理主要是與膜結合，使膜的結構產生紊亂，同時與細胞間緊密連接處的各種離子產生螯合作用，導致肌動蛋白微絲收縮而暫時打開上皮緊密連接，調節緊密連接的孔徑促進吸收，增加旁細胞轉運。癸酸鈉的這種螯合作用造成的腸細胞損傷具有可逆性，在停藥后可迅速恢復，毒性較小，癸酸鈉促進藥物在腸道的吸收效果確切。為此，本發明考慮將鹽酸小檗堿與腸吸收促進劑合用從而改善鹽酸小檗堿的口服生物利用度。
發明內容本發明提供一種治療糖尿病的藥物組合物，目的在于通過鹽酸小檗堿與腸吸收促進劑合用，改善鹽酸小檗堿在腸道的吸收，提高其血藥濃度，改善生物利用度，降低用量，減輕其副作用，從而能廣泛應用于臨床。本發明采取的技術方案是是由鹽酸小檗堿和腸吸收促進劑按重量份數比1:(0.1~10)組成。本發明腸吸收促進劑包括下列一種或幾種辛酸鈉、癸酸鈉、十二碳酸鈉、月桂酸鈉、山梨酸鈉、油酸鈉。本發明鹽酸小檗堿與癸酸鈉的重量份數比為1:(0.5~2)。本發明鹽酸小檗堿與癸酸鈉優選的重量份數比為1:1。本發明鹽酸小檗堿的口服給藥劑量是50-200mg/kg。本發明的藥物組合物在制備治療糖尿病藥物中的應用。鹽酸小檗堿與腸道吸收促進劑混合后加入適當的藥用輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素混合均勻，可制成相應的片劑、顆粒劑、膠囊劑等各種口服制劑。本發明的鹽酸小檗堿與腸道吸收促進劑合用，提供了一種提高口服鹽酸小檗堿生物利用度的方法，對鹽酸小檗堿在腸道的吸收所產生的積極效果是①可顯著提高鹽酸小檗堿在各小腸段的通透系數，增加其吸收量。②提高鹽酸小檗堿的血藥濃度，改善生物利用度。③大量實驗及臨床研究證實鹽酸小檗堿對糖尿病療效確切，同時改善其并發癥，能起到一藥多治的作用。本發明可降低鹽酸小檗堿的臨床用量，降低副作用，對鹽酸小檗堿應用于臨床提供新思路和新方法。目前國內外文獻尚無鹽酸小檗堿與腸道吸收促進劑合用的報道。因此，本發明具有極大的創新性，能夠為鹽酸小檗堿更廣泛、有效地應用提供了新方法。本發明的鹽酸小檗堿與腸道吸收促進劑合用用于治療糖尿病，其中鹽酸小檗堿的口服給藥劑量是50-200mg/kg，腸吸收促進劑的給藥劑量與鹽酸小檗堿劑的量重量比為1:(0.5~2)。通過實驗證明采用鹽酸小檗堿與腸道吸收促進劑合用合用后治療效果要顯著高于單獨使用鹽酸小檗堿治療，并且對腸道黏膜無明顯損傷作用，證明與腸吸收促進劑合用后相同劑量鹽酸小檗堿的藥效增強。圖1240min時癸酸鈉對鹽酸小檗堿累積吸收量的影響(*<0.05,與同劑量鹽酸小檗堿組相比，n=5)圖290min時癸酸鈉對鹽酸小檗堿經各小腸段滲透的影響(*P<0.05，**P<0.01，與同腸段鹽酸小檗堿組相比，n=5)圖3鹽酸小檗堿口服給藥后不同時間點血藥濃度(n=6)圖4各時間點大鼠腸黏膜病理切片觀察(A:空白對照組；B:鹽酸小檗堿組；C:鹽酸小檗堿加癸酸鈉組)圖5各實驗組給藥l個月后空腹血糖(###P<0.001,DMvs.con;*P<0.05,"P<0.01,DM與各治療組相比，5,』』P0.01，Ber50+sc組與Ber50組相比。@P<0.05,Berl00+sc組與BerlOO組相比,n=6)圖6各實驗組葡萄糖耐量曲線下面積(##P<0.01，DM組與正常組相比；*P<0.05,"PO.Ol，給藥組與模型組相比；』P<0.05，Ber50+sc組與Ber50組相比；@P<0.05，BerlOO+30組與86譏00組相比，n=6)具體實施例方式下面舉例腸道吸收及藥效學方面的實施例進一步說明本發明。該實施例僅用于說明本發明而對本發明并沒有任何限制。實施例l在體實驗考察癸酸鈉對鹽酸小檗堿小腸段促吸收作用1.1實驗動物分組Ber將30只Wistar大鼠隨機分為6組，分別為鹽酸小檗堿低劑量組(50pmol丄—1)、中劑量組(lOOpmol丄-1)、高劑量組(SOOnmoLL-1)，鹽酸小檗堿加癸酸鈉低劑量組(50ixmol丄"+0.2。/。SC)、中劑量組(100(imol丄"+0.2。/。SC)、高劑量組(200(imol丄"十0.2。/。SC)。每組各5只。1.2酚紅紫外分光光度分析方法的建立(1)酚紅標準曲線的建立精密配制28、56、84、112、140、168pmol丄-l系列濃度酚紅溶液，分別吸取0.5ml，加入0.2mol丄"NaOH溶液5ml顯色，在波長557nm處以0.2mol丄"NaOH溶液為空白對照，測定吸收度A值為縱坐標，酚紅濃度C為橫坐標進行線性回歸，得標準曲線方程A=0.0058C-0.0092(r=0.9999)，可見標準曲線線性關系良好。(2)腸循環液中酚紅含量的測定精密吸取大鼠在體腸循環液0.5mL，加入0.2mol丄-'氫氧化鈉溶液5mL。按上述方法測定吸收度，計算出酚紅濃度。1.3鹽酸小檗堿高效液相色譜分析方法的建立(1)色譜分析條件色譜柱ZorbaxExtend-Cl8;(4.6mmx250mm，5pm);流動相10mM醋酸銨(0.1%甲酸)乙腈=72:28;用孔徑為0.45mhi微孔濾膜過濾器過濾，再超聲脫氣；流速:1.2mL/min;柱溫室溫；檢測波長:346nm;進樣量20pl。分別取空白腸循環液、鹽酸小檗堿標準品及樣品在上述色譜條件下測定，色譜圖顯示樣品的主峰保留時間與標準品對照液一致，保留時間約為5min，PBS(含Nacl8.00g/L、Na2HP04.H201.56g/L、Kcl0.20g/L、KH2P040.20g/L)緩沖液對鹽酸小檗堿的測定無干擾。(2)標準曲線和線性范圍將鹽酸小檗堿標準品用含酚紅PBS溶液配制成濃度分別為O.l，0.3，1，5，15，30，60嗎/ml系列溶液，在上述色譜條件下測定，以峰面積S對濃度C進行線性回歸，繪制標準曲線S=31.763C-1.4038(r=0.9996)。表明鹽酸小檗堿在0.160嗎/ml的范圍內線性關系良好。(3)方法的精密度與準確度分別取0.3、5、30ng/ml3個濃度的鹽酸小檗堿PBS溶液，每一濃度進行6樣本分析，連續測定3天并與標準曲線同時進行，計算樣品的濃度與配制濃度對照，求算測定方法的準確度與精密度。測得日內平均RSD分別為0.76。/。，0.62%，0.85%,日間RSD分別為0.93%,0.87%,1.30%。(4)腸循環液中鹽酸小檗堿濃度的測定大鼠在體腸循環液樣品經0.45pm微孔濾膜過濾后，精確吸取2(HiL，按上述色譜條件測定，計算鹽酸小檗堿濃度。1.4在體腸循環實驗將大鼠禁食16h后，腹腔注射20%烏拉坦溶液(5ml.kg'')麻醉、固定。沿腹中線打開腹腔，結扎膽總管，在十二指腸上端和回腸下端各剪開一個小口，用37'C生理鹽水將小腸內容物沖洗干凈，以空氣排出生理鹽水。然后在兩開口端插管并結扎，插管與恒流泵連接形成回路。先用37'C恒溫的PBS液以5ml/min速度循環20min，空氣排凈循環系統內PBS液；然后用37"C恒溫供試藥液100ml以5ml/min的速度循環10min，繼之以lml/min的速度循環，計時開始。供試液為含酚紅56pmol丄"和鹽酸小檗堿或鹽酸小檗堿加癸酸鈉的PBS緩沖液。于循環0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0h取回流液1.5ml，同時補充等量56pmol丄"酚紅溶液。分別測定各時間點回流液中酚紅和鹽酸小檗堿在腸循環液中濃度。1.5實驗結果1.5.1大鼠在體腸循環鹽酸小檗堿吸收量鹽酸小檗堿高、中、低3個濃度小腸吸收量見表1。可見在5020(Himol丄"內Ber吸收呈濃度依賴性和時間依賴性，高、中、低3個濃度4h鹽酸小檗堿吸收百分率分別為20.05%，17.59%，24.18%，說明鹽酸小檗堿腸道吸收較差。鹽酸小檗堿高、中、低三個濃度吸收速率常數ka依次為0.044、0.061、0.063h",Ka值基本保持不變，組間比較無統計學差異(P>0.05),且r值均X).9(表2)，表明鹽酸小檗堿濃度對數的下降與循環時間存在線性關系。說明在此濃度范圍內，鹽酸小檗堿的吸收動力學為一級吸收，吸收方式為被動擴散。由表l及圖l可見，癸酸鈉對鹽酸小檗堿高、中、低三個劑量組均有明顯的促吸收作用。4h鹽酸小檗堿吸收百分率分別為28.33%，29.24%,31.37%。其中以低劑量組50nmol丄"促吸收作用最為明顯，兩組各時間點的吸收量都有統計學差異(PO.05或PO.01)。而中、高劑量組180min后的兩個時間點才有統計學差異(PO.05)。癸酸鈉對鹽酸小檗堿吸收速率常數ka無顯著影響，各組間均無統計學差異(P>0.05)(見表2)。說明癸酸鈉對鹽酸小檗堿腸道吸收的影響只是增加其吸收程度，對其吸收速度影響很小。表l癸酸鈉對不同劑量鹽酸小檗堿在各時間點小腸吸收量的影響(XiS,n-5)吸收量4ig30min60min120min180min240minBer50173.30±12.81146.44±41.69211.05±57.37246.62±55.10272.75±50.03Ber50+0.2%sc543.7±27.6*567.0±38.0**501.5±39.2*503.6±24.5*526.6±30.9*Ber腦372.8±72.14540.45±98.23571.97±96.15592.6±49.6654.U86.15Berl00+0.2%sc486.6±63.49565.5±33.84662.7±53.05996.6±78.99*1087.3±179.8*Ber200756.9±166.4965.9±155.61275.5±257.41680.6±128.11798.2±261.8Ber200+0.2%sc1893.3±367.21833.7±330.21907.7±416.12233.4±399.5*2333.1±279.3*注*P<0.05，**P<0.01，與對應鹽酸小檗堿組相比。7表2各實驗組鹽酸小檗堿在體腸吸收速率常數Ka,h"(x士S，n=5)nKa.h"50+0.2%scioo,ii;1100+0.2%sc200pmoli;1200+0.2%sc10.0430.0380.0750.0760.0830.07120.0680.0440.0490.0880.0610.0540.0340.050.070.0630.0520細40.0480.0510.0550層0.0550.0740.0310.0420.0590.0840細0.065X0.0440.0450.0610.0770.0630扁S0扁50.00240.00480據60.00550細4實施例2.離體實驗分腸段考察癸酸鈉對鹽酸小檗堿的腸道促吸收部位1.1實驗動物分組將10只Wistar大鼠隨機分為2組，分別為鹽酸小檗堿組50pmol丄—1、鹽酸小檗堿加癸酸鈉組5(^mol丄"+0.2。/。SC。每組各5只。1.2分腸段外翻腸囊法禁食16h的大鼠腹腔注射20X烏拉坦溶液麻醉后，沿腹中線開腹后，在十二指腸上端和回腸下端(盲腸上5cm)處各開一個小口，用50ml注射器抽取37'C生理鹽水，自開口處沖洗腸管，取十二指腸(幽門下lcm為起始點)、空腸上段(以幽門下15cm為起始點)，回腸(以盲腸上20cm為起始點)各8cm，迅速移入持續通氣的冰冷的PBS液中。用濾紙吸干腸段漿膜面水分，一端結扎后用細玻璃棒將腸段輕柔向外翻轉，使黏膜面朝外，漿膜面朝內。另一端插管，注入2ml的PBS液體，迅速懸于盛有35mlBer50nmol丄"加或不加0.2y。SC供試液的大試管中，向試管中持續通入95%02和5%(:02。整個裝置放在37'C恒溫水浴中，于15、30、60、90min取腸囊內液體lml，同時補充相同體積的不含藥PBS。HPLC法測定樣品中鹽酸小檗堿濃度。1.3數據處理各腸段鹽酸小檗堿表觀通透系數(叩parentpermeabilitycoefficients,Papp)的計算Papp=[V/(Area-Co)].dC/dt。其中V是腸囊內液體體積，Area是腸囊的表面積，Q是囊夕卜Ber的初始濃度，dC/dt是囊內Ber濃度對時間的變化率，可由囊內Ber的濃度與時間直線回歸求得。用增滲比(EnhancementRatio,ER)來比較癸酸鈉對不同腸段鹽酸小檗堿吸收的促進作用ER=P/PD(P和PQ分別是加和不加促進劑后鹽酸小檗堿在腸囊的表觀滲透系數)。1.4實驗結果在腸外翻模型中，鹽酸小檗堿從黏膜面向漿膜面吸收的情況如表3所示，隨著孵育時間的延長，透過腸壁藥物量逐漸增加，其中以十二指腸、空腸段吸收較好，回腸段吸收較差，但各腸段間無統計學差異(P>0.05)，表明Ber在各小腸段均有一定量吸收，無特定吸收部位。加入癸酸鈉后孵育30分鐘時，鹽酸小檗堿在回腸段的吸收明顯增加(P<0.05);孵育60分鐘時，十二指腸鹽酸小檗堿吸收增多，與對照組相比有統計學差異(PO.05);孵育90分鐘時，癸酸鈉可顯著促進各腸斷鹽酸小檗堿的吸收(PO.05或PO.01)，其中以回腸段作用效果最為明顯(圖2)。按1.3中的公式求出Ber在大鼠各腸段的表觀通透系數Papp，結果見表4。鹽酸小檗堿在十二指腸、空腸、回腸段Papp以空腸較高，但各組間無統計學差異。加入癸酸鈉后，十二指腸、空腸、回腸段鹽酸小檗堿的Papp均有不同程度的升高(P《.05或PO.01)。增滲比ER分別為2.08、1.49、3.49，可見在回腸段癸酸鈉對鹽酸小檗堿促吸收作用最為顯著，不加促進劑的回腸段的Papp為2.82"(T7cm's—1，加入癸酸鈉后Papp為9.85"(T7cnvs'、滲透系數提高了3.49倍。表3癸酸鈉對鹽酸小檗堿經離體腸段滲透的影響(XiS，n=5)Time吸收量/ng(min)十:二指腸空腸回腸BERBER+SCBERBER+SCBERBER+SC1520.6±2.242.5±5.620.8±1.833.1±4.511.9±0.929.7±3.83063.9±5.460.7±5.936.1±2.955.9±6.227.7±3.279.4±6.8*60137.7±12.4260.7±24.5*116.1±12.5143.7±15.777.5±8.5267.9±29.3*90410.4±39.11056.2±120.1"540.8±48.7814.0±92.4*319.7±38.91664.6士303.1"注*P<0.05,**P<0.01，與相應鹽酸小檗堿組相比。表4癸酸鈉對鹽酸小檗堿在大鼠各腸段的表觀通透系數Papp(cm's")的影響(x±S，n=5)Papp(cm's—)十二指腸^Ber3.56xl0'74.76x1(T7Ber+sc7.42x10—7*7.09xl0-7*ER2.081.49注*P<0.05，**P<0.01，與同腸段鹽酸小檗堿組相比。回腸2.82x10-79.85x10—7**3.49實施例3.整體實驗考察吸收促進劑對口服鹽酸小檗堿血藥濃度的影響U實驗動物取Wistar大鼠24只，雄性，體重(160-180)g，分為4組，分別為鹽酸小檗堿組和鹽酸小檗堿+癸酸鈉組、鹽酸小檗堿+辛酸鈉組、鹽酸小檗堿+十二碳酸鈉組。1.2血漿中鹽酸小檗堿的高效液相色譜分析方法的建立(1)色譜分析條件流動相甲醇-水-三乙胺(75:25:0.5v/v)，用磷酸調整pH為6.8。然后將流動相用孔徑為0.45pm微孔濾膜過濾器過濾，再超聲脫氣。流速:1.0mL/min;柱溫室溫；檢測波長340nm;進樣量20jxL。(2)血漿樣品的預處理空白血漿中加入鹽酸小檗堿標準品，取含鹽酸小檗堿血漿0.2mL，加入0.5mL色譜級乙腈，超聲處理lmin后，12000r/m，離心10min，再用油系一次性微孔濾膜過濾器過濾后，取2(HiL上清液進樣。(3)標準曲線的制備將空白大鼠血漿中加入鹽酸小檗堿標準品溶液，將其配制成含鹽酸小檗堿濃度為0、10、50、100、200、400、800、1600ng/mL的溶液。樣品的預處理后，分別進樣20pL按上述色譜條件測定。以濃度C(橫坐標X)對峰面積A(縱坐標Y)進行線性回歸，得回歸方程A=12.043C—764.97(R=0.9986)，線形關系良好。1.3藥物代謝動力學實驗方法實驗前禁食24h，按藥物按照Berl00mg/kg、Berl00mg/kg+SC50mg/kg、Berl00mg/kg+C855mg/kg、Berl00mg/kg+C12100mg/kg的濃度灌胃給藥，分別于給藥后0h、0.5h、lh、2h、4h、6h自尾靜脈采血0.5mL，按照血漿樣品進行處理的方法進行后，用上述檢測方法檢測鹽酸小檗堿濃度，并計算6h內藥時曲線下面積。1.4血藥濃度測定結果灌胃給藥后不同時間內測定鹽酸小檗堿血藥濃度，以鹽酸小檗堿在大鼠體內的血藥濃度的平均值為縱坐標，以時間為橫坐標繪制成血藥濃度隨時間變化圖，見圖3。從圖3中可看出，加促吸收劑組鹽酸小檗堿血藥濃度自lh起高于單純鹽酸小檗堿組，計算藥時曲線下面積，加癸酸鈉、辛酸鈉、十二碳酸鈉組曲線下面積與單純鹽酸小檗堿組相比顯著增高(P<0.05)。實施例4.癸酸鈉安全性考察1.1腸循環液中乳酸脫氫酶含量測定10乳酸脫氫酶(Lactatedehydrogenase，LDH)是一種存在于上皮細胞內的酶，腸循環液中存在LDH提示有細胞損壞，因此測定腸循環液中LDH的含量可以揭示腸上皮細胞發生的細微變化。在體腸循環實驗取得的標本各20pL，按照乳酸脫氫酶試劑盒步驟進行，測得絕對吸收度OD值，代入標準方程計算其LDH活力。1.2腸黏膜形態學觀察本實驗通過制備大鼠腸黏膜病理切片標本，觀察促吸收劑SC對腸黏膜形態學的影響。腸黏膜毒性最直觀的評價方法是用顯微鏡觀察給藥后黏膜組織結構的變化及表面纖毛的形態變化。根據吸收促進劑對黏膜的刺激作用，將吸收促進劑對黏膜的刺激作用分別為3個級別輕度、中度和重度。評判標準如下①輕度黏膜上皮細胞完整，黏膜下少量炎細胞浸潤，杯狀細胞密度增加；②中度黏膜上皮細胞水腫，黏膜下炎細胞浸潤；③重度黏膜上皮細胞變性壞死或脫落，大量炎細胞浸潤。1.3實驗結果表6顯示隨著腸道灌流時間的增加，各實驗組腸循環液中LDH的含量也在不斷增加，鹽酸小檗堿組、癸酸鈉+鹽酸小檗堿組腸循環液中LDH的含量與空白對照組無顯著差異(P>0.05),癸酸鈉+鹽酸小檗堿組與鹽酸小檗堿組相比亦無統計學差異(P>0.05)，說明鹽酸小檗堿、癸酸鈉對腸道細胞無明顯損傷作用。腸黏膜形態學圖4，可見隨著實驗時間的延長，空白組、鹽酸小檗堿組和鹽酸小檗堿加癸酸鈉組腸黏膜均有明顯的損傷。在實驗O分鐘時刻腸黏膜完整、絨毛排列整齊30分鐘時可見黏膜下有少量嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤。60分鐘時可見少量炎細胞浸潤，杯狀細胞增多；在90分鐘時微絨毛稀疏，排列不整齊，黏膜上皮細胞水腫、炎細胞浸潤明顯，局部黏膜有缺損、變性壞死和脫落狀況，可見腸黏膜呈中度到重度刺激作用。與空白對照組相比，鹽酸小檗堿組、鹽酸小檗堿加癸酸鈉組均無明顯加重腸黏膜損傷的表現，說明這種損傷來自于影響腸黏膜活性的其它因素如手術過程中的損傷，供氧、能量不足、溫度以及PBS緩沖液等很多因素。表6大鼠腸循環液中LDH的活力(^士S，n=5)preOmin30min60min120min180min240min<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例5.癸酸鈉對鹽酸小檗堿降血糖作用藥效學考察1.1實驗性2型糖尿病大鼠模型的制備將Wistar大鼠分為正常對照組(IO只)與模型組(90只)。正常對照組喂以普通飼料，模型組喂以高脂飼料。高脂高糖飼料由基礎飼料加煉豬油、蛋白質、淀粉等混合而成，總熱量為44.3kJ/kg。飼養4周后,給予腹腔注射STZ30mg/kg2次，期間間隔1周。對照組注射等量檸檬酸緩沖液。自第二次給STZ起1月后測定大鼠體重、攝食量(Foodintake)、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、甘油三脂(TG)、膽固醇(TC)含量。將6.9〈FBG〈5mmol/l的糖尿病模型大鼠納入實驗。1.2動物分組取6只正常大鼠設為正常空白對照組，另取54只2型糖尿病模型大鼠隨機分為6組，分別為模型組(DM)鹽酸小檗堿低劑量組Ber50mg/kg鹽酸小檗堿高劑量組:Ber100mg/kg鹽酸小檗堿低劑量加癸酸鈉低劑量組:Ber50mg/kg十SC25mg/kg鹽酸小檗堿低劑量加癸酸鈉中劑量組:Ber50mg/kg+SC50mg/kg鹽酸小檗堿低劑量加癸酸鈉高劑量組:Ber50tng/kg+SC100mg/kg鹽酸小檗堿高劑量加癸酸鈉低劑量組:Ber100mg/kg+SC25mg/kg鹽酸小檗堿高劑量加癸酸鈉中劑量組:Ber100mg/kg+SC50mg/kg鹽酸小檗堿高劑量加癸酸鈉高劑量組:Ber100mg/kg+SC100mg/kg每組各6只。1.3實驗操作動物分組后分別按照上述劑量灌胃給藥，正常對照組及模型組給予等劑量生理鹽水，每天一次，連續4周。實驗結束后測定各組大鼠空腹血糖及葡萄糖耐量。葡萄糖耐量測定試驗大鼠禁食12小時后，測空腹血糖值，然后給予5(P/。葡萄糖2g/kg腹腔注射，分別于30min、60min、120min尾靜脈取血，3000卬m離心后取血清，氧化酶法測定血糖值。1.4實驗結果1.4.1糖尿病模型大鼠的各項指標自第二次給STZ起1月后，測定模型組體重、進食量、空腹血糖、空腹胰島素、膽固醇及甘油三脂，結果見表7。可見與正常對照組相比，模型組大鼠的空腹胰島素值明顯降低(P<0.05)，FBG升高極顯著(PO.OOl)，平均值為11.56土0.57。模型組較對照組攝食能量增加，TG、TC值也有明顯增高(P<0.05)，符合T2DM臨床特點，造模成功。表7造模結束后大鼠的各項指標。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注*P<0.05，"P<0.01，***PO.001,DM與Control組相比.1.4.2空腹血糖測量實驗結果將6.9《FBG〈5mmol/l的糖尿病模型大鼠納入實驗。灌胃給藥l月后，測量其空腹血糖，結果如圖7所示，模型組FBG為10.65mmol/l，與空白對照組相比有極顯著的差異(PO.001)。給藥組與模型組相比，除Ber50組外，其余各組FBG均有顯著降低(P〈0.05或PO.01)。與Ber50組相比，Ber50+sc組降血糖效果均顯著提高。Berl00+sc組FBG值均低于Berl00組，其中100mg/kg+SC100mg/kg組與Berl00組相比有統計學差異(P<0.05),降血糖效果顯著提高。1.4.3各實驗組糖耐量實驗結果腹腔給予葡萄糖后0min、30min、60min、120min分別測定血糖值見表8。結果可見與空白對照組相比，模型組各時間點血糖值均顯著增高，120min仍處于較高水平，其葡萄糖耐量曲線下面積顯著高于空白對照組[(3765土244)mmol/L'minvs(1234±166)mmol/Lmin,PO.01](圖5)。各給藥組血糖曲線均處于正常組和模型組之間，說明各給藥組都有一定的改善糖尿病模型大鼠糖耐量的作用。與模型組相比，給藥組除Ber50組外，其余各組曲線下面積均有顯著減少(PO.05或PO.01)。另夕卜，Ber50mg/kg+SC50mg/kg組、Ber50mg/kg+SC100mg/kg組與單純Ber50組相比有統計學差異(P<0.05)，Ber100mg/kg+SC100mg/kg組與單純BerlOO組相比有統計學差異(P<0.05)，說明加入癸酸鈉后顯著增強了鹽酸小檗堿改善2型糖尿病模型葡萄糖耐量的作用。表8各給藥組葡萄糖耐量實驗各時間點血糖值(n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>CON4.70713.20511.6178.164DM10.43634.73938.21128.244Ber5010.46233細29.97521.916Berl007.35827.62225.39814.948Ber50+SC256.52425.77427.63817.569Ber50+SC508.40521.79716.87111.191Ber50+SC滿5.42015,78315.3846.357Berl00+SC257.09724.38725.49916.452BerlOO+SC506扁16.84824.87220.355BerlOO+SClOO5.88723.25218.02314.293實施例6.片劑鹽酸小檗堿32kg，癸酸鈉32kg，將原料鹽酸小檗堿和癸酸鈉配以制備片劑的常規輔料淀粉、乳糖、糊精、纖維素、硬脂酸鎂混合均勻，過16目篩千燥，壓制成片劑。實施例7.膠囊劑鹽酸小檗堿16kg，癸酸鈉32kg，將原料鹽酸小檗堿和癸酸鈉加入適量的輔料，采用常規膠囊劑制備方法即可制成。實施例8.顆粒劑鹽酸小檗堿32kg，癸酸鈉16kg,將原料鹽酸小檗堿和癸酸鈉加入適量的輔料，采用常規顆粒劑制備方法即可制成。實施例9.片劑鹽酸小檗堿32kg,辛酸鈉3.2kg,將原料鹽酸小檗堿和辛酸鈉配以制備片劑的常規輔料淀粉、乳糖、糊精、纖維素、硬脂酸鎂混合均勻，過16目篩干燥，壓制成片劑。實施例10.顆粒劑鹽酸小檗堿1.6kg，辛酸鈉16kg，將原料鹽酸小檗堿和辛酸鈉加入適量的輔料，采用常規顆粒劑制備方法即可制成。實施例11.膠囊劑鹽酸小檗堿16kg,辛酸鈉16kg，將原料鹽酸小檗堿和辛酸鈉加入適量的輔料，采用常規膠囊劑制備方法即可制成實施例12.顆粒劑鹽酸小檗堿1.6kg，十二碳酸鈉16kg，將原料鹽酸小檗堿和十二碳酸鈉加入適量的輔料,采用常規顆粒劑制備方法即可制成。14實施例13.膠囊劑鹽酸小檗堿16kg，十二碳酸鈉16kg，將原料鹽酸小檗堿和十二碳酸鈉加入適量的輔料，采用常規膠囊劑制備方法即可制成實施例14.顆粒劑鹽酸小檗堿16kg，十二碳酸鈉1.6kg,將原料鹽酸小檗堿和十二碳酸鈉加入適量的輔料，采用常規顆粒劑制備方法即可制成。實施例15.片劑鹽酸小檗堿16kg，辛酸鈉8kg，十二碳酸鈉8kg，將原料鹽酸小檗堿和辛酸鈉、十二碳酸鈉加入適量的輔料，采用常規片劑制備方法即可制成。實施例16.膠囊劑鹽酸小檗堿24kg,癸酸鈉8kg、辛酸鈉8kg，十二碳酸鈉8kg,將原料鹽酸小檗堿和癸酸鈉、辛酸鈉、十二碳酸鈉加入適量的輔料，采用常規膠囊劑制備方法即可制成實施例17.顆粒劑鹽酸小檗堿16kg，癸酸鈉4kg、辛酸鈉4kg，十二碳酸鈉4kg，月桂酸鈉4kg、山梨酸鈉4kg、油酸鈉4kg，將原料鹽酸小檗堿和十二碳酸鈉加入適量的輔料，采用常規顆粒劑制備方法即可制成。權利要求1、一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于是由鹽酸小檗堿和腸吸收促進劑按重量份數比1∶(0.1～10)組成。2、根據權利要求1所述的治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于腸吸收促進劑包括下列一種或幾種辛酸鈉、癸酸鈉、十二碳酸鈉、月桂酸鈉、山梨酸鈉、油酸鈉。3、根據權利要求2所述的治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于，鹽酸小檗堿與癸酸鈉的重量份數比為1:(0.5~2)。4、根據權利要求3所述的治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于，鹽酸小檗堿與癸酸鈉優選的重量份數比為1:1。5、根據權利要求1、2、3或4所述的促進口服小檗堿吸收的藥物組合物，其特征在于鹽酸小檗堿的口服給藥劑量是50-200mg/kg。6、如權利要求1所述的藥物組合物在制備治療糖尿病的藥物中的應用。全文摘要本發明涉及一種治療糖尿病的藥物組合物，屬于醫藥領域。是由鹽酸小檗堿和腸吸收促進劑按重量份數比1∶(0.1～10)組成，優選鹽酸小檗堿與癸酸鈉的重量份數比為1∶(0.5～2)。促吸收劑與小檗堿聯用能夠顯著改善后者在腸道的吸收，提高血藥濃度，改善鹽酸小檗堿的生物利用度，增強其藥效，并且對腸道黏膜無明顯損傷作用，為鹽酸小檗堿廣泛應用于臨床治療提供了一種安全、有效的途徑。本發明可廣泛應用于片劑、膠囊劑、顆粒劑等多種劑型藥物的生產。文檔編號A61K31/4353GK101574343SQ200810050679公開日2009年11月11日申請日期2008年5月7日優先權日2008年5月7日發明者呂曉艷,晶李,立陳申請人:吉林大學