一種補氣養血的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法

專利名稱：：一種補氣養血的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法
技術領域：
：本發明涉及一種補氣養血的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法，具體地本發明涉及一種補氣養血，用于治療婦女體弱血虛，月經不調，經期腹痛的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法。屬于中藥
技術領域：
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背景技術：
：痛經是青春期至絕經期年齡段婦女的一種癥狀，多見于2025歲以下的未婚女性。一般在初潮后l2年后出現，大約50%的青年女性在經期有癥狀，有10%因此而影響正常的生活和工作。一些化學止痛藥物，雖然能緩解癥狀，但不能根治，需反復用藥。中醫認為，痛經的原因與氣血有直接的關系，眾所周知，月經的成份主要是血，血由臟腑所化生，通過經絡輸注下行而為月經。如果血虛則無血可下，氣虛則血瘀，使子宮失去血的滋養而產生疼痛。因此，發明一種能補氣養血，治療婦女體弱血虛，月經不調，經期腹痛的中藥是切實可行的。
發明內容本發明的目的是提供一種補氣養血，治療婦女體弱血虛，月經不調，經期腹痛的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法。上述發明目的，是通過以下技術方案實現的。本發明所述的中藥組合物是通過下述重量份的原料藥制成的烏雞108.8重量份艾葉18.8重量份益母草9.8重量份干姜4.5重量份枳實75重量份茯苓12重量份黨參9.8重量份川貝母9.8重量份地骨皮4.5重量份制成本發明中藥組合物的原料藥中，益母草還可以是等重量份的丹參、紅花、牛膝、桃仁中的一種或幾種；所述的何首烏還可以是等重量份的當歸、白芍、阿膠中的一種或幾種；所述的玄參還可以是等重量份的生地黃、牡丹皮、水牛角中的一種或幾種；所述的枳實還可以是等重量份的香附、青皮、枳實、木香、沉香中的一種或幾種；所述的乳香還可以是等重柴胡9.8重量份玄參9.8重量份知母9.8重量份秦艽6.8重量份熟地黃18.8重量份何首烏9.8重量份乳香4.5重量份黃連(酒制)4.5重量份18.8重量份量份的延胡索、郁金、姜黃、沒藥中的一種或幾種；所述的黨參還可以是等重量份的黃芪、白術、山藥中的一種或幾種。本發明所述的中藥組合物的制備方法為以上藥味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；其余藥味加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液，回收乙醇后備用；另取蔗糖、蜂蜜，加水,煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加入防腐劑，攪勻，濾過，加水稀釋，分裝，即得。本發明所述的中藥組合物的制備方法還可以為以上藥味，烏雞切塊后，每次加8倍量水，在壓力為0.05Mpa的條件下加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，在70。C、一0.06Mpa條件下減壓濃縮至相對密度為1.011.05，加入0.2%的防腐劑，備用；其余藥味加水提取兩次，第一次2小時，加水量為8倍，第二次2小時，加水量為6倍，合并煎液，濾過，7(TC、一0.06Mpa條件下減壓濃縮至相對密度為l.l(Tl.15，加入等量95%乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液，在65t、一0.07Mpa條件下回收乙醇后備用；另取蔗糖300重量份、蜂蜜100重量份，加500體積份水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加入防腐劑1.67重量份，攪勻，濾過，加水稀釋至1000體積份，分裝，即得。上述重量份/體積份的比例與g/ml相對應。本發明所述的中藥組合物的質量控制方法，包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.鹽酸小檗堿的定性檢測取本品，用水飽和的正丁醇一無水乙醇混合液，振搖提取，合并提取液，用氨試液洗滌提取液，棄去氨洗液，再用水洗滌，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇使溶解，加于中性氧化鋁柱上，用甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷一乙酸乙酯_異丙醇_甲醇一水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置波長365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；b.延胡索的定性檢測取本品，用氨試液調至堿性，用乙醚一無水乙醇振搖提取，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷一氯仿—甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C.香附的定性檢測取本品，用乙醚萃取，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯作為供試品溶液。另取香附對照藥材，加水煎煮，濾過，濾液濃縮，放冷后用乙醚萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷一乙酸乙酯一冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置波長254ran的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d.芍藥苷的定量檢測取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成溶液，即得。精密量取本品，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。本發明所述的中藥組合物的質量控制方法，還可以包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.鹽酸小檗堿的定性檢測取本品50ml，用4:l比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次50ml，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，加于用8g中性氧化鋁處理好的內徑2cm的色譜柱上，用甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以6:3:i.5:i.5:o.3比例的環己垸一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置波長為365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。b.延胡索的定性檢測取本品50ml，用氨試液調至pH10，用4:1比例的乙醚一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材lg，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15:4:1比例的正己垸一氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長為365nm的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。C.香附的定性檢測取本品40ml，用乙醚萃取3次，每次40ml，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml作為供試品溶液。另取香附對照藥材5g，加水200ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至30ml，放冷后用乙醚50ml萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以5:5:0.2比例的三氯甲垸一乙酸乙酯一冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置波長為254nm的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d.芍藥苷的定量檢測以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(25:75:0.2)為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算應不低于2000。取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml約含50ug的溶液，即得。精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5ul，10yl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每lml含白芍以芍藥苷(C2晶80n)計，不得少于0.2mg。本發明處方中，烏雞、當歸、熟地黃、白芍、阿膠、何首烏養血益陰為君藥，黨參、黃賞、白術、山藥補氣活血為臣藥；知母、黃芩、黃連、黃柏、龍膽草、苦參、秦艽、青蒿、地骨皮、生地黃、玄參、牡丹皮燥濕止血，干姜、艾葉溫經止血，散寒調經以佐制君藥滋陰之寒膩；柴胡、青皮、枳實、木香、沉香、香附疏肝理氣，調經止痛，牛膝、丹參紅花、桃仁、益母草活血調經，引火下行為使藥；諸藥合用共奏補氣養血之功。本發明的制備方法和質量控制方法，便于藥品的標準化、現代化生產，有利于提高生產效率，保證了藥品的安全性和有效性。為了更好地理解本發明，現在結合具體實施方式對本發明進行詳細的說明。具體實施例方式下述實驗例和實施例進一步說明但不限于本發明實驗例1.鹽酸小檗堿的定性檢測方法研究1.本檢測方法樣品溶液的制備中提取液的選擇取實驗例1中所制得的口服液4份，每份50ml，用下述比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇振搖提取3次，測定其中鹽酸小檗堿含量，結果見下表表1提取液的選擇優選實驗結果水飽和的正丁醇一無水乙醇2:i3]14!15:i鹽酸小檗堿含量(mg)9.614.818.415.5由表l可以看出，用4:1比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇振搖提取3次，就可以將其中的鹽酸小檗堿提取完全，所以本實驗優選提取液為4:1比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇。2.本檢測方法展開劑用量配比的優選取實驗例l中所制得的口服液50ml，用4:l比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次50ml，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇lral使溶解，加于用8g中性氧化鋁處理好的內徑2cm的色譜柱上，用甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，分另U以5:3:i.5:3:o.3、5:3:3:i.5:o.3、6:3:i.5:i.5:o.3、7:2:i:i:0.3比例的環己垸一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置波長為365nm紫外光燈下檢視，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表表2展開劑用量配比優選實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從表2可以看出展開劑環己烷一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水配比為6:3:i.5:i.5:0.3時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾等現象。3、本發明檢測方法中樣品溶液點樣量的優選取供試品溶液lul、3ul、5ixl、7yl、9ul，對照品溶液5u1，點于同一硅膠G薄層板上，用環己烷一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水配比為6:3:i.5:i.5:o.3的展開劑展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表表3樣品溶液點樣量優選實驗結果點樣量U13u15u17wl9u1供試品在供試品在相供試品在相供試品在相應供試品在相應相應對照應對照品位應對照品位對照品位置斑對照品位置斑效果品位置顯置斑點顯色置斑點顯色點顯色斑點較點分離不好色較淺較淺效果好大，分離不好從表3可以看出供試品點樣量在5ul時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。4、陰性對照試驗按處方比例制備缺黃連的陰性樣品，照上述供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明該方法專屬性強。實驗例2延胡索的定性檢測方法研究1.本發明檢測方法中展開劑用量配比的優選取實驗例1中所制得的口服液50ml,用氨試液調至pH10，用4:1比例的乙醚一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材lg,加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。取供試品溶液、對照藥材溶液各5yl點于不同的硅膠G薄層板上，分別用正己垸一氯仿一甲醇配比為25:5:1、20:5:1、15:4:1、10:5:1、5:5:1的展開劑展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表-表4展開劑用量配比優選實驗結果展開劑配比25:5:120:5:115:4:110:5:15:5:1展開效果很差差好較差出現拖尾從表4可以看出展開劑配比為15:4:l時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。112、本發明檢測方法中樣品溶液點樣量的優選取供試品溶液lul、3yl、5ul、7yl，對照品溶液5yl，點于同一硅膠G薄層板上，用正己烷一氯仿一甲醇配比為15:4:l的展開劑展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長為365nm的紫外光燈下檢視，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表表5樣品溶液點樣量優選實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從表5可以看出供試品點樣量在5wl時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。3、陰性對照試驗制備缺延胡所的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照藥材溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測方法專屬性強。實驗例3.香附的定性檢測試驗研究1、展開劑用量配比的優選-取實驗例1中所制得的口服液40ml，用乙醚萃取3次，每次40ml，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml作為供試品溶液。另取香附對照藥材5g，加水200ml煎煮1小時，濾過，濾液濃縮至30ml，放冷后用乙醚50ml萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，分別用三氯甲垸一乙酸乙酯一冰醋酸配比為8:2:0.2、7:3:0.2、5:5:0.2、3:7:0,2的展開劑展開，取出，晾干，置波長為254nm的紫外光燈下檢視，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表表6展開劑用量配比優選實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從表6可以看出展開劑配比為5:5:0.2時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。2、樣品溶液點樣量的優選取供試品溶液lyl、3ul、5yl、7p1，對照品溶液5ul，點于同一硅膠GF254薄層板上，用三氯甲烷一乙酸乙酯—冰醋酸配比為5:5:0.2的展開劑展開，取出，晾干，置波長為254nm的紫外光燈下檢視，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>從表7可以看出供試品點樣量在5ul時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。3、陰性對照試驗按實驗例1方法制備缺香附的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測方法專屬性強。實驗例4芍藥苷的定量檢測研究檢測儀器島津公司SPD-10ATvp型高效液相色譜儀色譜柱安捷倫公司(ZorbaxSB-C184.6X150,，5Mm)流動相甲醇-水-冰醋酸(25:75:0.2)(甲醇為色譜級，水為重蒸水)檢測波長230nm流速1.000ml/min柱溫室溫對照品芍藥苷購于中國藥品生物制品檢定所批號110736-200526測定方法供試品溶液的制備精密量取實驗例1中所制得的口服液2ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得。按實驗例l方法制備缺白芍的空白樣品，制備陰性對照液，用微孔濾膜(0.45ym)過濾。分別精密吸取陰性對照液與供試品溶液各10yl，對照品液5ul，注入液相色譜儀，測定，即得。1、含量測定方法考察1.l空白試驗空白溶液的制備是按實驗例l處方中藥味的比例，自配不含白芍的群藥，按其工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制備，上述色譜條件測定，結果空白溶液在與芍藥苷對照品相同保留時間處未顯色譜峰，故認為無干擾。1.2穩定性試驗取同一供試品溶液，分別于配制后0、2、4、6、12、24小時進樣IOW，依法測定，結果見下表表8.穩定性試驗時間02461224峰面積平均值RSD301651297953299712309581303188.81.5%307338302898結果表明其在24小時內基本穩定。1.3線性關系考察取芍藥苷對照品溶液(54.5^g/ml)搖勻，分別精密吸取1、2、3、5、7、9pl注入高效液相色譜儀，測定峰面積，結果見下表，并繪制標準曲線，結果表明芍藥苷對照品在0.0545pg_0.4905|xg間呈線性關系，其回歸方程為y=1.1794E+06x—1.6901E+04,R=0.9996表9.線性關系考察進樣量(tig)0.05450.10900.16350.27250.38150.4905峰面積54636108723170588.5305526.5428166.55664151.4精密度試驗精密吸取對照品溶液5^1，供試品溶液lOpl，重復進樣5次，求得相對標準偏差<2%，結果見下表表10.精密度試驗次數12345峰面積317652320462320326321649319857平均值319989.2RSD0.461.5重現性試驗取上述供試品溶液連續進樣5份,對每份進行測定，求得相對標準偏差<2%，結果見下表表ll.重現性試驗樣品12345芍藥苷含量(mg/ml)平均含量(mg/ml)RSD值0.5550.5710.5780.5661.60.5640.562141.6回收率試驗精密量取上述供試品溶液lml，置50ml量瓶中，再精密加入芍藥苷對照品母液溶液(0.109mg/ml)5ml置同一50ml量瓶中，并以50%甲醇稀釋至刻度，按正文供試品溶液的制備方法操作，測定其含量，并計算其回收率，測定結果見下表實測總量-樣品中含量<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>根據以上數據,將含量限度定為本品每lml含白芍以芍藥苷(C23H2sOn)計，不得少于0.2mg。從以上試驗結果可以看出，本發明所采用的含量測定方法其線性關系、穩定性、精密度、重現性、回收率均良好，能夠有效控制本發明中藥組合物中中芍藥苷的含量。實驗例5藥理實驗l.材料1.1試驗藥物本發明中藥組和物I、II、III、IV、分別按實施例l、2、3、4制得；烏雞白鳳口服液，北京同仁堂有限責任公司，批號050216001。1.2試驗器械半自動血液分析儀，日本東亞公司提供，型號SysniexF—820。1.3試驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，北京醫科大學動物室提供，醫動字第310101001號。2.方法與結果2.1對失血性貧血的影響將60只小鼠，體重2530g，雌雄各半，測Hb(血紅蛋白)及RBC(紅細胞)后眶后靜脈叢放血O.5ml/只，24h后尾靜脈取血測Hb及RBC，根據測定結果分為6組，每組10只。按下表灌胃給藥，連續給藥10天。分別于給藥后第3天、6天、lO天尾靜脈取血測定各組的Hb、RBC值。由表13、14可見本發明中藥組合物能使失血性貧血小鼠的RBC及Hb明顯升高。表13.本發明中藥組合物對血虛小鼠的Hb、RBC的影響(X士SD)組別劑量Hb(g/L)RBC(10I2/L)造型前造型后造型前造型后本發明中藥4.065.25±13.2446.91±5.933.81±0.722.85±0.37**組合物Iml/kg本發明中藥4.065.40±2.7447.04±5.524.03±0.362.85±0.35**組合物nml/kg**本發明中藥4.067.41±4.5446.82±5.553.84±0.842.79±0.32**組合物inml/kg**本發明中藥4.062.34±4.9647.30±4.533.63±0.342.85±0.33**組合物IVml/kg*空白對照組/66.48±3.1647.16±承*7.023.93±0.272.85±0.43**烏雞白鳳口18.062.23±3.1846.47±8.343.77±0.262.85±0.32**服液ml/kg水*與造型前相比*P<0.05,**P<0.01表14.本發明中藥組合物對血虛小鼠的Hb、RBC的影響(X±SD)組別劑量Hb(g/L)RBC(1012/L)3d6d10d3d6d10d本發明中4.068.23±66.54±71.53±4.56±4.50±4.91±藥組和物fml/kg6.54*3.45*4.93*0.41*0.37*0.38*本發明中4.063.64±67.41±64.25±5.335.45±5.16藥組和物ml/kg5.425.86*7.450.29**0.39**0.55II**本發明中4.066.00±67.00±68.03±5.36±5.49±4.67±藥組和物ml/kg5.75*4.35=*4,270.35*0.21*0.36*<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>與烏雞白鳳口服液相比**P<0.05,**P<0,01由以上數據可以看出，本發明中藥組合物與烏雞白鳳口服液相比可明顯提高小鼠血液Hb及RBC的含量。2.2本發明中藥組合物對縮宮素所致小鼠扭體反應的影響方法試驗用雌性小鼠，體重18—22克，共84只，分為6組，即本發明中藥組合物組I—W、烏雞白鳳口服液組、空白對照組。小鼠腹腔注射己稀雌酚0.4mg/只,連續給藥3日,第4日小鼠灌胃被試藥物后1小時,腹腔注射縮宮素lu/只,記錄扭體出現的潛伏期,給藥后0—10分及10—20分鐘內出現的扭體次數,比較給藥本發明中藥組合物組與烏雞白鳳口服液組之間的差別,進行組間t檢驗,以p<0.05及p<0.01為藥物作用有顯著性差異。結果本發明中藥組合物組較烏雞白鳳口服液組減少小鼠扭體次數作用顯著(表15)。表15本發明中藥組合物對縮宮素引起小鼠痛反應影響<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注與參白痛經顆粒組比申p0.05**p<0.01由表中結果可以看出，本發明中藥組合物，較烏雞白鳳口服液能明顯減少縮宮素引起的小鼠扭體反應次數。實施例1稱取下列重量的原料藥<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>以上二十味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；香附等十九味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液,回收乙醇后備用；另取蔗糖300g、蜂蜜100g，加適量水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加適量防腐劑，攪勻，濾過，加水使成1000ml，分裝，即得。功能主治補氣養血。用于婦女體弱血虛，月經不調，經期腹痛。用法用量口服，一次10毫升，一日2次。實施例2.<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>以上十八味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；其余十七味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇,攪勻，靜置過夜，取上清液，回收乙醇后備用；另取蔗糖300g、蜂蜜100g，加適量水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加適量防腐劑，攪勻，濾過，加水使成1000ml，分裝，即得。實施例3烏雞108.8g艾葉18.8g丹參9.8g柴胡9.8g干姜4.5g何首烏9.8g牡丹皮9.8g郁金75g延胡索(醋制)4.5g知母9.8g茯苓12g黃連(酒制)4.5g秦艽6.8g當歸9.8g黃芪(炙)9.8g青蒿18.8g地黃9.8g熟地黃18.8g川貝母9.8g地骨皮4.5g以上二十味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；香附等十九味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液，回收乙醇后備用；另取蔗糖300g、蜂蜜100g，加適量水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加適量防腐劑，攪勻，濾過，加水使成1000ml，分裝，即得。實施例4烏雞108.8g艾葉18.8g紅花9.8g柴胡9.8g干姜4.5g白芍(酒炒)9.8g牡丹皮9.8g木香75g姜黃4.5g知母9.8g茯苓12g黃連(酒制)4.5g秦充6.8g當歸9.8g白術9.8g青蒿18.8g熟地黃18.8g玄參9.8g川貝母9.8g地骨皮4.5g以上二十味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；香附等十九味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇,攪勻，靜置過夜，取上清液，回收乙醇后備用；另取蔗糖300g、蜂蜜100g，加適量水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加適量防腐劑，攪勻，濾過，加水使成1000ml，分裝，即得。實施例5-14按照實施例1相同的方法和藥材比例，中試生產10批本發明中藥組合物。實施例15.本發明的質量控制方法(1)取本發明口服液50ml，用水飽和的正丁醇一無水乙醇(4:1)振搖提取3次，每次1950ml，合并提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次50ml，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，加于已處理好的中性氧化鋁柱(8g,內徑2cm)上，用甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液各514，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一tK(6:3:i.5:i.5:o.3)為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)取本發明口服液50ml，用氨試液調至堿性(pH10)，用乙醚一無水乙醇(4:1)振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材lg，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷一氯仿一甲醇(15:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(3)取本發明口服液40ml，用乙醚萃取3次，每次40ml，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml作為供試品溶液。另取香附對照藥材5g，加水200ml煎煮1小時，濾過，濾液濃縮至30ml，放冷后用乙醚50ml萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5t4，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷一乙酸乙酯一冰醋酸(5:5:0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(25:75:0.2)為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算應不低于2000。對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml約含50ug的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取本發明口服液2ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5ul，lOnl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每lml含白芍以芍藥苷(C2晶A》計，不得少于0.2mg。本發明實施例5-14所制得的中藥組合物進行了上述質量控制，證明實施例5-14所制得的口服液完全符合本發明的質量控制標準。表16實施例5-14所得樣品的芍藥苷含量測定結果實施例樣品含量(mg/ml)10.54620.53730.54940.54850.53760.53970.55080.56290.543100.534110.541另外，也以處方原料藥的比例和制備工藝分別制成了不含黃連、香附和延胡所的陰性樣品，按照質量控制方法中供試樣品的制備方法制備了陰性對照溶液，按照相應樣品的檢測方法檢測，陰性樣品在相應位置上未出現斑點，經反復試驗，該質量控制方法專屬性、重復性好，因此做為本發明中藥組合物質量控制定性檢測方法，本發明中藥組合物進行質量控制。2權利要求1.一種補氣養血的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物是由下述重量份的原料藥制成的烏雞108.8重量份艾葉18.8重量份益母草9.8重量份柴胡9.8重量份干姜4.5重量份何首烏9.8重量份玄參9.8重量份枳實75重量份乳香4.5重量份知母9.8重量份茯苓12重量份黃連(酒制)4.5重量份秦艽6.8重量份黨參9.8重量份青蒿18.8重量份熟地黃18.8重量份川貝母9.8重量份地骨皮4.5重量份。1.一種補氣養血的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物是由下述重量份的原料藥制成的艾葉18.8重量份干姜4.5重量份枳實75重量份茯苓12重量份黨參9.8重量份川貝母9.8重量份地骨皮4.5重量份。2.如權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于所述的益母草還可以是等重量份的丹參、紅花、牛膝、桃仁中的一種或幾種；所述的何首烏還可以是等重量份的當歸、白芍、阿膠中的一種或幾種；所述的玄參還可以是等重量份的生地黃、牡丹皮、水牛角中的一種或幾種；所述的枳實還可以是等重量份的香附、青皮、枳實、木香、沉香中的一種或幾種；所述的乳香還可以是等重量份的延胡索、郁金、姜黃、沒藥中的一種或幾種；所述的黨參還可以是等重量份的黃芪、白術、山藥中的一種或幾種。3.如權利要求2所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的制備方法為以上藥味，烏雞切塊后加水，加壓煎煮三次，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，濃縮至適量，加入適量防腐劑，備用；其余藥味加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入等量乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液，回收乙醇后備用；另取蔗糖、蜂蜜，加水,煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加入防腐劑，攪勻，濾過，加水稀釋，分裝，即得。4.如權利要求3所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的制備方法為-以上藥味，烏雞切塊后，每次加8倍量水，在壓力為0.05Mpa的條件下加壓煎煮三次，每次1小時，合并煎煮液，靜置，除去上層脂肪油，取上清液，在7(TC、一0.06Mpa條件下減壓濃縮至相對密度為1.011.05，加入0.2%的防腐劑，備用；其余藥味加水提取兩次，第一次2小時，加水量為8倍，第二次2小時，加水量為6倍，合并煎液，濾過，70°C、一O.06Mpa條件下減壓濃縮至相對密度為1.101.15，加入等量95%乙醇，攪勻，靜置過夜，取上清液，在65。C、一0.07Mpa條件下回收乙醇后備用；另取蔗糖300重量份、蜂蜜100重量份，加500體積份水，煮沸使溶解，加入上述藥液及烏雞提取液，混勻，加入防腐劑1.67重量份，攪勻，濾過，加水稀釋至iooo體積份，分裝，即得。5.如權利要求2所述的中藥組合物的質量控制方法，其特征在于該方法包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.鹽酸小檗堿的定性檢測取本品，用水飽和的正丁醇一無水乙醇混合液，振搖提取，合并提取液，用氨試液洗滌提取液，棄去氨洗液，再用水洗滌，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇使溶解，加于中性氧化鋁柱上，用甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以環己烷一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置波長365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；b.延胡索的定性檢測取本品，用氨試液調至堿性，用乙醚一無水乙醇振搖提取，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索對照藥材，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以正己烷一氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C.香附的定性檢測取本品，用乙醚萃取，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯作為供試品溶液；另取香附對照藥材，加水煎煮，濾過，濾液濃縮，放冷后用乙醚萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠重量份F254薄層板上，以三氯甲烷一乙酸乙酯一冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置波長254nm的紫外光燈下檢視;供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.芍藥苷的定量檢測取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成溶液，即得；精密量取本品，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。6.如權利要求5所述的中藥組合物的質量控制方法，其特征在于該方法包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.鹽酸小檗堿的定性檢測取本品50ml，用4:l比例的水飽和的正丁醇一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次50ml，棄去水洗液，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，加于用8重量份中性氧化鋁處理好的內徑2cm的色譜柱上，用甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.2m重量份的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液各5W，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以6:3:i.5:i.5:o.3比例的環己垸一乙酸乙酯一異丙醇一甲醇一水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置波長為365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；b.延胡索的定性檢測取本品50ml，用氨試液調至pH10，用4:1比例的乙醚一無水乙醇振搖提取3次，每次50ml，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索對照藥材1重量份，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，照供試品溶液制備方法操作，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠重量份薄層板上，以15:4:1比例的正己烷一氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣中熏后，置波長為365ran的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C.香附的定性檢測取本品40ml，用乙醚萃取3次，每次40ml，合并醚層，揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml作為供試品溶液；另取香附對照藥材5重量份，加水200ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至30ml，放冷后用乙醚50ml萃取，乙醚液揮干，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5W，分別點于同一硅膠重量份F254薄層板上，以5:5:0.2比例的三氯甲烷一乙酸乙酯一冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置波長為254tim的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.芍藥苷的定量檢測以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以25:75:0.2比例的甲醇-水-冰醋酸為流動相；檢測波長為230nm;理論板數按芍藥苷峰計算應不低于2000;取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml約含50u重量份的溶液，即得；精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，取上清液，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5ul，10iil，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每lml含白芍以芍藥苷(C23H28Ou)計，不得少于0.2mg。全文摘要本發明提供了一種補氣養血的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法。該中藥組合物由烏雞、艾葉、益母草、柴胡、干姜、何首烏、玄參、枳實、乳香、知母、茯苓、黃連(酒制)、秦艽、黨參、青蒿、熟地黃、川貝母、地骨皮等原料藥組成，其制備方法為烏雞以外的藥味加水煎煮后醇沉取上清液，濃縮，烏雞加水煎煮，將所得溶液混合制得口服液。本發明的質量控制方法包括黃連、延胡索、香附的定性檢測和芍藥苷的定量檢測。該中藥組合物對婦女體弱血虛，月經不調，經期腹痛等癥狀有顯著的療效。文檔編號A61P15/00GK101513519SQ200810057968公開日2009年8月26日申請日期2008年2月22日優先權日2008年2月22日發明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物制藥有限公司