專利名稱：一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，屬于水產配合飼料添加劑技 術領域。
背景技術：
羅非魚(Tilapia)，俗稱非洲鯽魚，隸屬于鱸形目、鱸形亞目、麗魚科Cichlidae、 羅非魚屬Tilapia(亦稱麗鯛科，麗鯛屬)。該屬原產于非洲，有600多種，目前被養殖的 有15種。羅非魚是一群中小型魚類，它的外形、個體大小有點類似鯽魚，鰭條多荊似鱖魚。 廣鹽性魚類，海淡水中皆可生存，具有生長快，產量高，抗病力強，易于飼養，經濟價值和市 場潛力巨大，同時具有出肉率多，肉質豐滿、細嫩，味道鮮美等特點，是水產養殖的一個新品 種。近年來，羅非魚消費需求的數量和質量有逐年上升之勢，為了追求高的效益，集約 化、高密度的養殖下，特別高溫應激條件下，病害頻繁發生，特別羅非魚鏈球菌病首度大面 積流行，病魚呈現出病魚眼睛渾濁、凸出，在水中打轉的病征，消化系統受到嚴重破壞，肝膽 腫大，腸道充血、潰爛等，影響羅非魚的經濟效益，給養殖業帶來巨大的經濟損失；為防治病 原菌，抗生素及抗菌藥物得到了大量使用，并造成藥物殘留、耐藥性增強、引起動物免疫力 下降、微生態失調以及致畸、致癌、環境污染等一系列不良后果，同時抗生素與抗菌藥物本 身也是一種藥物應激源，影響魚體的生長。因此，一些綠色、安全、高效飼料添加劑的開發與應用應運而生。植物提取物具有 天然、高效、毒副作用少、資源豐富等優點，含有與動物的免疫功能密切相關的生物堿、茶多 酚、皂甙、低聚糖、黃酮類、揮發油類等，可促進機體的生長發育，并通過影響非特異性免疫 系統，激活和誘生多種細胞因子等途徑提高水產動物機體免疫力。姜黃素(Curcumin；是從 姜科姜黃屬iPurmtm longa L.)植物姜黃、莪術、郁金等的根莖中提取的一種天然的黃色 酸性酚類物質，是姜黃發揮藥理作用的最主要的活性成分，具有抗氧化、抗菌、降肝臟脂肪、 保肝利膽等功能，提高免疫功能，維持動物機體健康，促進魚體生長，。谷氨酰胺是L-谷氨酸的Y-羧基酰胺化物，是體液中最豐富的氨基酸之一，可增 強魚體免疫功能、維持酸堿平衡、增加細胞的吞噬作用和淋巴細胞的增殖、增加細胞體積、 增強肌肉細胞內蛋白質的合成等，是一種極有發展前景的新型藥物和動物營養性飼料添加 劑。甜菜堿又名甘氨酸三甲基內鹽，是一種最早從甜菜糖蜜中分離出來的季氨型生物 堿，是一種高效的甲基供體。甜菜堿具有活性甲基和兩性電解質的結構，可為機體高效提供 活性甲基，參與蛋白質與脂類代謝、膽堿、肉堿、腎上腺素的合成及DNA、RNA的甲基化，具 有維持維生素的穩定性、調節滲透壓、緩和應激的作用。甜菜堿還可作為一種生物體系細胞 滲透保護劑，提高生物體細胞對干旱、高溫、高鹽和高滲環境下的耐受力，具有穩定酶活性 和生物大分子功能的作用。目前已有一些關于姜黃素、谷氨酰胺、甜菜堿的在水產養殖的少量使用，但是有關與姜黃素、谷氨酰胺、甜菜堿的配伍使用，還未見報道。因此研制一種羅非魚免疫增強劑，提 高羅非魚抗病能力，抗應激能力，對水產健康養殖和可持續發展具有重要意義。
發明內容
本發明的目的在于克服上述的一些不足之處，從而提供一種羅非魚免疫增強劑及 其制備方法，其能耗低、工藝簡單、生產成本低，能提高羅非魚免疫與抗氧化能力，提高羅非 魚體抵抗鏈球菌感染能力，且可促進羅非魚生長的免疫增強劑。按照本發明提供的技術方案，一種羅非魚免疫增強劑包含下列組份，其組分配比 以重量份數計
取姜黃素為0. 25 1. 0份、谷氨酰胺二肽為0. 25 0. 75份、甜菜堿為2. 5 7. 5 份、載體為92. 0-95. 75份；將上述各組份在混合機內混合后，經粉碎機粉碎，制成800 120目干粉的免疫增強劑。所述載體選自玉米粉、麩皮、小麥粉、大豆粉、米糠或沸石粉等。一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法采用以下制備步驟，其組分配比以重量份數 計
取姜黃素為0. 25 1. 0份、谷氨酰胺二肽為0. 25 0. 75份、甜菜堿為2. 5 7. 5 份、載體為92. 0-95. 75份；
將上述各組份在混合機內混合后，經粉碎機粉碎，制成800 120目干粉的免疫增強 劑。粉碎轉速為300-400轉/分。所述姜黃素，含大黃素為99. 2%，由河南中大生物工程有限公司提供。所述谷氨酰 胺二肽，由浙江安木化工有限公司提供。所述甜菜堿，含甜菜堿96%，由丹尼斯克(芬蘭)動 物營養提供。所述免疫增強劑在魚飼料中的添加量為1%1%。此免疫增強劑直接清除羅非魚體內的自由基，消除自由基對機體組織器官正常功 能的負面影響，加快修復被破壞的免疫系統，減緩機體對應激條件的反應，能提高魚體的免 疫與抗氧化能力、抵抗鏈球菌感染能力，改善飼料適口性，促進魚體生長。本發明與已有技術相比具有以下優點
1、使用姜黃素、谷氨酰胺、甜菜堿等配伍制劑后，能克服上述的某一種產品的不足之 處，相互補充，促進團頭魴魚體生長。2、本發明原料來源穩定，制備簡單，取材廣泛，成本低廉。3、本發明從魚體免疫的機理出來，免疫增強劑既補充中草藥，又補充西藥谷氨酰 胺二肽；從中西結合藥物提高魚體的免疫能力，促進魚體生長。4、本發明免疫增強劑通過動物試驗，表明免疫增強劑能提高羅非魚免疫與抗氧化 能力，提高羅非魚抵抗鏈球菌感染能力，促進魚體生長。
具體實施例方式下面本發明將結合實施例作進一步描述
實施例一本發明一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，采用以下制備步驟，其組份配 比以重量份數計取姜黃素為0. 25份、谷氨酰胺二肽為0. 25份、甜菜堿為7. 5份、玉米粉載體為 92.0份；將上述各組分充分在混合機(V型混合機，溧陽市匯達機械有限公司)內混勻；后超 微粉碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)粉碎，并通過120目 的篩網制成免疫增強劑干粉；超微粉碎機粉碎速度400轉/分；混合機投料轉速18轉/ 分；
上述免疫增強劑在魚飼料中的添加量為1%_3%。免疫增強劑的添加量與使用的周期有 關，當使用周期在30天以上，在飼料中添加量為1%- ；當使用周期在60天以上，在飼料中 添加量為0. 5%-1. 0%。生長實驗羅非魚由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、 規格、重量基本一致的鯽魚，個體初均重約log。隨機分組，設有對照組與對照組，每組設3 個平行試驗，每平行組30尾試驗魚，共6個網箱(規格為IOOOcmX IOOcmX 100cm)。鯽魚馴 化30天后投喂對照組基礎日糧和1. 0%免疫增強劑60天，測定其生長、免疫等影響。結果表明與對照組相比，1.0%免疫增強劑增重率顯著(P<0.(^)分別提高了 10. 66% ；病原菌鏈球菌感染魚體7d，魚體內臟出血、肝膽潰爛、腸道潰爛等現象，對照組死 亡率為85. 0%，1. 0%免疫增強劑魚死亡率為38. 0% ；與對照組相比，1. 0%免疫增強劑顯著 (P<0. 05)降低血液皮質醇濃度8. 17%，及丙二醛濃度8. 55%，增加了血液溶菌酶活性9. 87%、 超氧化物歧化酶活性6. 12%。因此，該免疫增強劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高羅非 魚抵抗鏈球菌感染能力，促進魚體生長。實施例二 本發明一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，采用以下制備步驟，其組 份配比以重量份數計
取姜黃素為0. 5份、谷氨酰胺二肽為0. 5份、甜菜堿為5. 0份、大豆粉載體為94. 0 份；將上述各組分充分在混合機(V型混合機，溧陽市匯達機械有限公司)內混勻；后超微粉 碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)粉碎，并通過100目的篩 網制成免疫增強劑干粉；超微粉碎機粉碎速度350轉/分；混合機投料轉速16轉/分；
生長實驗羅非魚由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、規 格、重量基本一致的鯽魚，個體初均重約10g。隨機分組，設有對照組與對照組，每組設3個 平行試驗，每平行組30尾試驗魚，共6個網箱(規格為IOOOcmX IOOcmX 100cm)。鯽魚馴化 30天后投喂對照組基礎日糧和1. 0%免疫增強劑60天，測定其生長、免疫等影響。結果表明與對照組相比，1.0%免疫增強劑增重率顯著(P<0.(^)分別提高了 9. 21% ；病原菌鏈球菌感染魚體7天，魚體內臟出血、肝膽潰爛、腸道潰爛等現象，對照組 死亡率為86. 0%，1. 0%免疫增強劑魚死亡率為45. 0% ；與對照組相比，1. 0%免疫增強劑顯 著(P<0.(^)降低血液皮質醇濃度9. 88%，及丙二醛濃度12. 34%，增加了血液溶菌酶活性 12. 33%、超氧化物歧化酶活性8. 11%。因此，該免疫增強劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提 高羅非魚抵抗鏈球菌感染能力，促進魚體生長。實施例三本發明一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，采用以下工藝步驟，其組 份配比以重量份數計
取姜黃素為1. O份、谷氨酰胺二肽為0. 75份、甜菜堿為2. 5份、麩皮載體為95. 75 份；將上述各組分充分在混合機(V型混合機，溧陽市匯達機械有限公司)內混勻；后超微粉 碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)粉碎，并通過80目的篩網制成免疫增強劑干粉；超微粉碎機粉碎速度300轉/分；混合機投料轉速17轉/分；
生長實驗羅非魚由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、規 格、重量基本一致的鯽魚，個體初均重約10g。隨機分組，設有對照組與對照組，每組設3個 平行試驗，每平行組30尾試驗魚，共6個網箱(規格為IOOOcmX IOOcmX 100cm)。鯽魚馴化 30天后投喂對照組基礎日糧和1. 0%免疫增強劑60天，測定其生長、免疫等影響。
結果表明與對照組相比，1.0%免疫增強劑增重率顯著(P<0.(^)分別提高了 7. 58%;病原菌鏈球菌感染魚體7d，魚體內臟出血、肝膽潰爛、腸道潰爛等現象，對照組死 亡率為84. 0%，1. 0%免疫增強劑魚死亡率為52. 0% ；與對照組相比，1. 0%免疫增強劑顯著 (P<0. 05)降低血液皮質醇濃度6. 75%，及丙二醛濃度6. 33%，增加了血液溶菌酶活性8. 78%、 超氧化物歧化酶活性8. 22%。因此，該免疫增強劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高羅非 魚抵抗鏈球菌感染能力，促進魚體生長。
權利要求
1.一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是包含下列組份，其組分配比按重 量份數計取姜黃素為0. 25 1. 0份、谷氨酰胺二肽為0. 25 0. 75份、甜菜堿為2. 5 7. 5 份、載體為92. 0-95. 75份；將上述各組份在混合機內混合后，經粉碎機粉碎，制成800 120目干粉的免疫增強劑。
2.如權利要求1所述的一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是所述載體選 用玉米粉或麩皮或小麥粉或大豆粉或米糠或沸石粉。
3.如一種權利要求1所述的羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是采用以下制 備步驟，其組分配比以重量份數計取姜黃素為0. 25 1. 0份、谷氨酰胺二肽為0. 25 0. 75份、甜菜堿為2. 5 7. 5 份、載體為92. 0-95. 75份；將上述各組份在混合機內混合后，經粉碎機粉碎，制成800 120目干粉的免疫增強 劑；所述粉碎機轉速為300-400轉/分。
4.如權利要求3所述的一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是所述姜黃素， 含大黃素為99. m。
5.如權利要求3所述的一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是所述甜菜堿 含甜菜堿96%。
6.如權利要求3所述的一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，其特征是所述免疫增 強劑在魚飼料中的添加量為1%力％。
全文摘要
本發明涉及一種羅非魚免疫增強劑及其制備方法，屬于水產配合飼料添加劑技術領域。特征是取姜黃素、谷氨酰胺、甜菜堿及載體；將上述各組份充分混合后粉碎，制成干粉。本發明原料來源穩定，制備簡單，取材廣泛，成本低廉；從魚體免疫的機理出來，免疫增強劑既補充中草藥，又補充西藥谷氨酰胺二肽；從中西結合藥物提高魚體免疫能力。使用時能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高羅非魚抗病原菌鏈球菌的感染能力，且可促進羅非魚生長。
文檔編號A61K9/14GK102077928SQ20101059193
公開日2011年6月1日 申請日期2010年12月17日 優先權日2010年12月17日
發明者劉波, 徐跑, 戈賢平, 許福泉, 謝駿, 金建國, 高啟平 申請人:中國水產科學研究院淡水漁業研究中心, 蘇州金庭大成現代農業股份有限公司, 通威股份有限公司