專利名稱：一種治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑及其制備方法
技術領域：
本發明屬于生物制藥技術領域，具體涉及一種治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑及其制備方法。
背景技術：
蜚蠊，又名美洲大蠊(俗稱蟑螂，)是蜚蠊科中體積最大的，成蟲體長四 35毫米。 蜚蠊表皮含有鞏膜質和甲殼質，溴、鋅、鎳、錳、鉀、鈣、鈦、氯、硫、硅、鋁、鎂等元素，肌肉水解可得13種氨基酸，身體內還貯藏著微生素Bi、B2、煙酸和抗壞血酸等，淋巴中含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原兒茶酸葡萄甙等；全體含麥角硫因、龍蝦肌堿、胡蘆巴堿、甘氨酸、 甜菜堿、肛堿、三甲胺、腺嘌呤等。現代科學研究表明，蜚蠊提取物具有很強的生物活性，但是現有技術對于蜚蠊提取物的應用還存在很大的局限性，蜚蠊提取物應用潛力有待于進一步開發和利用。
發明內容
本發明的第一目的在于針對現有技術的不足，提供一種治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑；第二目的在于提供一種該該注射劑的制備方法。本發明的第一目的是這樣實現的，
所述的注射劑中含有重量比3 6%的蜚蠊醇提取物，10 30%聚乙二醇和0. 7 1% 氯化鈉，余量為注射用水。其優化方案，所述的注射劑中含有重量比4 5%的蜚蠊提取物，15 20%聚乙二醇和0. 8 1%氯化鈉，余量為注射用水。所述的聚乙二醇為400型聚乙二醇。本發明的第二目的是這樣實現的，所述的注射劑的制備方法包括
蜚蠊醇提取物制備蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉，經5 10倍重量的90 95%乙醇滲漉提取8 12小時，提取液經減壓濃縮得稠膏；再加4 6倍純化水充分攪拌并靜置12 24 小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置1 2小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮后加入8 10倍重量的65 85% 乙醇進行二次醇提，冷藏12 M小時后過濾，濾液經減壓濃縮后，再加入8 10倍重量份的純化水進行水提，經冷藏后12 24小時，低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 1 0. 5% 重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至60 80°C后靜止0. 5 1小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得蜚蠊提取物稠膏；
藥物注射劑的制備按組合物配比將蜚蠊提取物、藥用聚乙二醇和醫用氯化鈉混合，用注射用水稀釋至1000ml，濾過，灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得蜚蠊提取物的注射劑。其優化方案，
所述的蜚蠊提取物制備中，蜚蠊粗粉加入5 10倍重量比的90 95%乙醇浸漬48 60小時，再用90 95%乙醇作溶劑緩慢滲濾至濾液呈微黃色，濾液經減壓濃縮得稠膏。
所述的蜚蠊提取物制備中離心時的溫度為2 6°C。所述的蜚蠊提取物制備中冷藏溫度為4 8°C。所述的蜚蠊提取物制備中，減壓濃縮溫度為60 80°C。所述的蜚蠊提取物制備中，稠膏的相對密度為1. 2 1. 3。本發明蜚蠊提取物及其制劑能夠促進心肌細胞Ca2+內流，溫和持久地增加心肌收縮力，擴張血管，降低肺動脈壓、肺毛細血管壓；擴張冠脈、增加冠脈流量，抑制氧自由基介導的心肌損傷；擴張腎血管、增加腎血流量、利尿；改善微循環；糾正神經內分泌失衡。
附圖為本發明注射液的標準指紋圖譜。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的說明，但不以任何方式對本發明加以限制， 基于本發明教導所作的任何變換，均屬于本發明的保護范圍。本發明所述的注射劑中含有重量比3 6%的蜚蠊醇提取物，10 30%聚乙二醇和 0. 7 1%氯化鈉，余量為注射用水。其優選實施方式，所述的注射劑中含有重量比4 5%的蜚蠊提取物，15 20%聚乙二醇和0. 8 1%氯化鈉，余量為注射用水。所述的聚乙二醇為400型聚乙二醇。本發明所述的注射劑的制備方法包括
蜚蠊醇提取物制備蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉，經5 10倍重量的90 95%乙醇滲漉提取8 12小時，提取液經減壓濃縮得稠膏；再加4 6倍純化水充分攪拌并靜置12 24 小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置1 2小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮后加入8 10倍重量的65 85% 乙醇進行二次醇提，冷藏12 M小時后過濾，濾液經減壓濃縮后，再加入8 10倍重量份的純化水進行水提，經冷藏后12 M小時，低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 1 0. 5% 重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至60 80°C后靜止0. 5 1小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得蜚蠊提取物稠膏；
藥物注射劑的制備按組合物配比將蜚蠊提取物、藥用聚乙二醇和醫用氯化鈉混合，用注射用水稀釋至1000ml，濾過，灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得蜚蠊提取物的注射劑。其優選實施方式，
所述的蜚蠊提取物制備中，蜚蠊粗粉加入5 10倍重量比的90 95%乙醇浸漬48 60小時，再用90 95%乙醇作溶劑緩慢滲濾至濾液呈微黃色，濾液經減壓濃縮得稠膏。所述的蜚蠊提取物制備中離心時的溫度為2 6°C。所述的蜚蠊提取物制備中冷藏溫度為4 8°C。所述的蜚蠊提取物制備中，減壓濃縮溫度為60 80°C。所述的蜚蠊提取物制備中，稠膏的相對密度為1. 2 1. 3。實施例1
取蜚蠊干蟲體IOOOg粉碎成粗粉，加入5倍重量的90%乙醇浸漬48小時，再以90%的
4乙醇滲漉提取8小時，提取液在60°C下減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的稠膏；再加4 倍純化水充分攪拌并靜置12小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置1小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮后加入 8倍重量的65%乙醇進行二次醇提，在4°C下冷藏12小時后過濾，濾液在60°C下減壓濃縮后，再加入8倍重量份的純化水進行水提，在4°C下冷藏12小時后，在2°C下低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 1%重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至60°C后靜止0.5 小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的蜚蠊提取物稠膏；
按3%的蜚蠊醇提取物，10%聚乙二醇和0. 7%%氯化鈉，余量為注射用水的比例配合，經濾過、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得所述的注射劑。實施例2
蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉lOOOg，加入10倍重量的95%乙醇浸漬60小時，然后再用95% 回流提取12小時，提取液在80°C下減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的稠膏；再加6倍純化水充分攪拌并靜置M小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置2小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液在80°C下減壓濃縮后加入0倍重量的85%乙醇進行二次醇提，在8°C下冷藏M小時后過濾，濾液在80°C下減壓濃縮后，再加入10倍重量份的純化水進行水提，在8°C下冷藏M小時后，在6°C下低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 5%重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至80°C后靜止1 小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的蜚蠊提取物稠膏；
按6%的蜚蠊醇提取物，30%聚乙二醇和1. 0%氯化鈉，余量為注射用水的比例配合，經濾過、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得所述的注射劑。實施例3
蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉lOOOg，經8倍重量的95%乙醇浸漬55小時，然后再用95%回流提取10小時，提取液在70°C下減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的稠膏；再加5倍純化水充分攪拌并靜置18小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置1. 5小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液在70°C下減壓濃縮后加入 9倍重量的75%乙醇進行二次醇提，在6°C下冷藏18小時后過濾，濾液在70°C下減壓濃縮后，再加入9倍重量份的純化水進行水提，在6°C下冷藏18小時后，在4°C下低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 3%重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至70°C后靜止0. 7 小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得相對密度為1. 2 1. 3的蜚蠊提取物稠膏；
按5%的蜚蠊醇提取物，20%聚乙二醇和0. 8%氯化鈉，余量為注射用水的比例配合，經濾過、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得所述的注射劑。實施例4
用實施例1中制備的蜚蠊提取物稠膏，按4%的蜚蠊提取物，15%的聚乙二醇和0. 8%的氯化鈉，余量為注射用水，經濾過、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得所述的注射劑。實施例5
用實施例1中制備的蜚蠊提取物稠膏，按5%的蜚蠊提取物，20%聚乙二醇和1. 0%氯化鈉，余量為注射用水，經濾過、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得所述的注射劑。本發明的注射劑為黃色澄明液體，按以下方法對注射液和蜚蠊提取物進行鑒別、 檢查和測定1、鑒別
(1)薄層色譜法試驗
取注射劑1ml，加水稀釋至5ml，作為供試品溶液。取蜚蠊干品lg，加正丁醇-冰醋酸(4 1)混合液50ml，超聲處理30分鐘后過濾， 將濾液蒸干，殘渣加水Iml溶解，作為藥材對照溶液。依照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1 :1)混合液展開，取出，晾干， 置紫外光燈(2Mnm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應的位置上，應顯3 個相同顏色的斑點。再噴以1的茚三酮溶液，105°C下加熱至斑點顯色清晰，在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯1個相同顏色的斑點。( 2 )高效液相色譜法試驗
取注射劑1ml，加水稀釋至5ml，通過強堿性陰離子交換葡聚糖層析柱(QAE-kphadex A-25型，內徑1. 5cm,柱高5cm)，用20ml水洗脫，棄去水洗脫液，再用0. 02mol/L鹽酸洗脫， 棄去初洗脫液8ml，收集續洗脫液20ml，作為供試品溶液。依照高效液相色譜法(《中國藥典》一部附錄VI D)試驗，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱(柱長150mm，柱內徑為4. 6mm);以0. 05mol/L醋酸鈉緩沖液(pH 5. 0)-甲醇(90 10)混合液為流動相，用二極管陣列檢測器(DAD)進行檢測，檢測波長為246nm，流速為每分鐘0. 5ml，柱溫為30°C。精密吸取供試品溶液5μ1，注入液相色譜儀，測定，記錄12 分鐘內的色譜圖。供試品色譜圖中主峰(最大峰面積)的DAD紫外檢測光譜圖在246nm與 286nm的波長處有最大吸收。2、檢查
色澤取本品1ml，加水至10ml，搖勻，依照《中國藥典》一部附錄XI A第一法進行檢查， 與黃色8號標準比色液比較，不得更深。pH值應為5. 4 6. 4 (《中國藥典》一部附錄ΥΠ G)。蛋白質取注射劑1ml，加入新鮮配制的30%磺基水楊酸溶液1ml，混勻，放置5分鐘，不得出現渾濁。樹脂取注射劑5ml，加鹽酸1滴，放置30分鐘，應無樹脂狀物析出。草酸鹽取注射劑2ml，加3%氯化鈣試液2 3滴，放置10分鐘，不得出現渾濁或沉淀。鉀離子取注射劑anl，先用小火熾灼至炭化，再在500 600°C熾灼至完全灰化， 加入6%醋酸使溶解。置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，量取Iml置于IOml納氏比色管中，加堿性甲醛溶液(甲醛溶液用0. lmol/L氫氧化鈉溶液調pH至8. 0 9. 0)12滴，3%的乙二胺四醋酸鈉溶液2滴，3%的四苯硼酸鈉溶液0. 5ml，加水至IOml作為供試品管。取硫酸鉀適量研細，于110°C干燥至恒重，精密稱取2. 330g，加水適量使溶解成1000ml，精密吸取 IOml加水稀釋成100ml，即得標準鉀離子溶液；取標準鉀離子溶液(100 μ g/ml )0. 8ml，置于 IOml納氏比色管中，同上操作作為對照品管，取供試品管和對照品管進行目測比濁，供試品管不得更渾濁。重金屬取注射劑anl，依照《中國藥典》一部附錄IX E第二法檢查，含重金屬不得過百萬分之五。
砷鹽取注射劑1. 0ml，緩緩加熱炭化，如炭化不完全，加少量硫酸潤濕后，緩緩加熱使完全炭化，再于500 600°C熾灼灰化，放冷，加鹽酸5ml，加水23ml，依照《中國藥典》 一部附錄IX F第一法檢查，應符合規定的0. 0002%。熱原取注射劑依照《中國藥典》一部附錄XIII A檢查，劑量按家兔體重每kg注射 lml，其結果應符合規定。異常毒性取注射劑，每Iml中加入氯化鈉注射液稀釋至10ml，依照《中國藥典》二部附錄XI C檢查，按靜脈注射給藥，其結果應符合規定。3、過敏試驗
供試液制備取注射劑，每Iml加氯化鈉注射液稀釋至作為供試品。取體重250 350g健康豚鼠6只，隔日每只每次腹腔注射供試品0. 5ml，共3次， 進行致敏。然后將其均分為2組，每組3只，分別在首次注射后14日及21日，由靜脈注射供試品Iml進行攻擊。在注射后30分鐘內，不得出現過敏反應。如有豎毛、噴嚏、干嘔、連續咳嗽3聲和呼吸困難等現象中的2種或2種以上，或出現抽搐、休克、死亡現象之一者，則判定供試品不符合規定。溶血與凝聚試驗
先配制m的紅細胞混懸液。取家兔血數毫升，放入盛有玻璃珠的錐形瓶中，振搖 ο 分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血液，加 ο倍量的生理氯化鈉溶液，搖勻，離心，除去上清夜，沉淀的紅細胞再生理氯化鈉溶液洗滌2 3次，至上清液不顯紅色為止；將所得的紅細胞用生理氯化鈉溶液配制成m的紅細胞混懸液，即得。進行試驗。取潔凈試管5支，編號，1 3號管為供試品管，4號管為陰性對照管，5 號管為陽性對照管；按下表所示依次加入m的紅細胞混懸液、生理氯化鈉溶液、蒸餾水、供試注射液，混均后，立即置于37°c的恒溫水浴中，開始每隔15分鐘觀察一次，1小時后，每隔 1小時觀察一次，共觀察3小時。
權利要求
1.一種治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑，其特征是所述的注射劑中含有重量比 3 6%的蜚蠊醇提取物，10 30%聚乙二醇和0. 7 1%氯化鈉，余量為注射用水。
2.根據權利要求1所述的治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑，其特征是所述的注射劑中含有重量比4 5%的蜚蠊提取物，15 20%聚乙二醇和0. 8 1%氯化鈉，余量為注射用水。
3.根據權利要求1或2治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑，其特征是所述的聚乙二醇為400型聚乙二醇。
4.一種權利要求1所述的注射劑的制備方法，其特征在于所述的注射劑的制備方法包括蜚蠊醇提取物制備蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉，經5 10倍重量的90 95%乙醇滲漉提取8 12小時，提取液經減壓濃縮得稠膏；再加4 6倍純化水充分攪拌并靜置12 M 小時使油水分離，去除沉淀物和油脂，收集水層藥液，加入藥用活性炭靜置1 2小時吸附藥液至無色，裝柱，水飽和正丁醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮后加入8 10倍重量的65 85% 乙醇進行二次醇提，冷藏12 M小時后過濾，濾液經減壓濃縮后，再加入8 10倍重量份的純化水進行水提，經冷藏后12 M小時，低溫離心過濾得水提液，水提液用0. 1 0. 5% 重量比的針用活性炭脫色，邊加邊攪拌，并加熱至60 80°C后靜止0. 5 1小時；經膜過濾器過濾、超濾后減壓濃縮得蜚蠊提取物稠膏；藥物注射劑的制備按組合物配比將蜚蠊提取物、藥用聚乙二醇和醫用氯化鈉混合，用注射用水稀釋至1000ml，濾過，灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得蜚蠊提取物的注射劑。
5.根據權利要求4所述的注射劑的制備方法，其特征是所述的蜚蠊提取物制備中，蜚蠊粗粉加入5 10倍重量比的90 95%乙醇浸漬48 60小時，再用90 95%乙醇作溶劑緩慢滲濾至濾液呈微黃色，濾液經減壓濃縮得稠膏。
6.根據權利要求4所述的注射劑的制備方法，其特征是所述的蜚蠊提取物制備中離心時的溫度為2 6°C。
7.根據權利要求4所述的注射劑的制備方法，其特征是所述的蜚蠊提取物制備中冷藏溫度為4 8°C。
8.根據權利要求4所述的注射劑的制備方法，其特征是所述的蜚蠊提取物制備中，減壓濃縮溫度為60 80°C。
9.根據權利要求4所述的注射劑的制備方法，其特征是所述的蜚蠊提取物制備中，稠膏的相對密度為1.2 1.3。
全文摘要
本發明提供了一種治療慢性充血性心力衰竭征的注射劑及其制備方法。所述的藥物組合物含有重量比3%～6%的蜚蠊提取物，10%～30%聚乙二醇和0.7～1.0%氯化鈉，余量為注射用水。所述的制備方法包括蜚蠊提取物制備蜚蠊干蟲體粉碎成粗粉，經乙醇回流，提取液經減壓濃縮得稠膏；再加純化水使油水分離，收集水層藥液，活性炭吸附，裝柱，正丁醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮后進行二次醇提，濾液經減壓濃縮后水提，離心、過濾，脫色、超濾后減壓濃縮得蜚蠊提取物稠膏。藥物注射劑的制備按組合物配比將蜚蠊提取物、藥用聚乙二醇和藥用氯化鈉混合，調PH值5.4～6.4，用注射用水稀釋至1000ml，濾過，灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得蜚蠊提取物的注射劑。
文檔編號A61P9/04GK102319268SQ20111023007
公開日2012年1月18日 申請日期2011年8月12日 優先權日2011年8月12日
發明者徐自學, 李立華, 李筱玲, 楊枝時, 邵維在 申請人:云南省騰沖制藥廠