專利名稱：一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物的制作方法
技術領域：
本發明所屬醫藥產品研究開發技術領域。本發明涉及一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物。
背景技術：
小葉丁香Syringa Pubescens Turcz.又名毛(葉)丁香，雀舌花，巧玲花，是木犀科(oleaceace) 丁香屬植物,分布于遼寧、河北、河南、山西、陜西和甘肅。高約2. 5m,幼枝灰褐色，被柔毛。葉卵圓形或橢圓狀卵形，全緣，有緣毛。圓錐花序疏松，側生，淡紫紅色；花期4月下旬至5月上旬；秋季7月下旬至8月上旬。長期以來，民間以其花泡茶飲用治療慢性肝炎、腸炎、食管癌、肝硬化、肝癌等病，療效顯著.但至今未被藥典收錄。目前，對丁香的研究雖然較多，但對小葉丁香的研究甚少。小葉丁香花和果實含有裂環環烯醚萜苷類、芳醇類，黃酮類化合物和揮發油成分。小葉丁香主要藥理作用治愈肝疾、抗肝纖維化、有降血壓作用、抗菌作用、抗炎作用、抗病毒作用、抗氧化作用、抗腫瘤作用、降血糖作用。
發明內容
I、一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物，其特征在于該提取物的制備包括以下過程步驟(I):稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉，加入以粗粉重量為8-10倍量的水浸泡 8h-10h，煎煮I. 5h-2h，煎煮后真空抽濾，收集濾液；步驟(2):將步驟(I)中的小葉丁香樹皮干燥粗粉的濾渣再加水煎煮lh-1. 5h，然后超聲lh-1. 5h，溫度為30°C，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；步驟⑶將步驟⑴和⑵中的濾液合并，將濾液濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物。2、一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物的用途，其特征在于該提取物用于制備對酒精性肝損傷具有保護作用的藥物制劑。
具體實施例方式本發明所述的一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物包括以下實施例，下面的實施例可進一步說明本發明，但不以任何方式限制本發明。實施例I :I、一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物，其特征在于該提取物的制備包括以下過程步驟(I):稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉100g，加入以粗粉重量為8倍量的水浸泡 8h,煎煮I. 5，煎煮后真空抽濾，收集濾液；步驟(2):將步驟(I)中的小葉丁香樹皮干燥粗粉的濾渣再加水煎煮lh，然后超聲lh，溫度為30°C，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；步驟(3):將步驟(I)和(2)中的濾液合并，將濾液濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物19. 6g。2、該提取物用于制備對酒精性肝損傷具有保護作用的藥物制劑。實施例2:I、一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物，其特征在于該提取物的制備包括以下過程步驟(I):稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉200g，加入以粗粉重量為10倍量的水浸泡 IOh,煎煮2h，煎煮后真空抽濾，收集濾液；步驟(2):將步驟(I)中的小葉丁香樹皮干燥粗粉的濾渣再加水煎煮I. 5h，然后超聲I. 5h，溫度為30°C，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；步驟(3):將步驟(I)和(2)中的濾液合并，將濾液濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物37. 3g。2、該提取物用于制備對酒精性肝損傷具有保護作用的藥物制劑。小葉丁香樹皮提取物對小鼠酒精性肝損傷保護作用的實驗I實驗材料、動物、儀器和試劑I. I實驗材料藥材采自吉林農業大學校園，由吉林農業大學園藝學院胡全德教授鑒定為木樨科 (Oleaceae) 丁香屬(Syringa)植物小葉丁香(Syringa Pubescens Turcz.)的樹皮。I. 2實驗動物實驗動物購自吉林大學基礎醫學院實驗動物中心，動物系昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重(20 ± I) g，合格證號SCXK(吉)2011-0001。實驗動物在溫度25 °C 27 °C，濕度 55°C 60°C的條件下飼養。I. 3儀器與試劑LPZ5-2型離心機(北京醫用離心機廠)，76新世紀紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)，百靈LA114型電子天平(110g/0. OOOlg，常熟市百靈天平儀器有限公司)，電子計數天平(500g/0. OOlg，金羊天平儀器廠)，KQ-250DB型超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司)，高速冷凍離心機(GI-20B上海安亭科學儀器廠)。丙氨酸轉氨酶(ALT)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所)； 56% (V/V)北京二鍋頭白酒(北京紅星釀酒有限公司)，冰醋酸、無水乙醇(北京化工廠)； 護肝片(吉林修正藥業)。2實驗方法2. I小葉丁香樹皮提取物的制備步驟(I):稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉100g，加入以粗粉重量為8倍量的水浸泡 8h,煎煮I. 5，煎煮后真空抽濾，收集濾液；步驟(2):將步驟(I)中的小葉丁香樹皮干燥粗粉的濾渣再加水煎煮lh，然后超聲 lh，溫度為30°C，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；步驟(3):將步驟(I)和(2)中的濾液合并，將濾液濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物19. 5g，用水溶解，使其每克溶液相當于Ig原藥材(小葉丁香樹皮粗粉)。2. 2動物分組及給藥2. 2. I動物分組小鼠60只適應性喂養3d后，隨機分為正常組、陰性(模型)對照組、陽性對照組， 小葉丁香樹皮水提物高、中、低劑量組，每組10只，雌雄各半，按鼠體重給藥。2. 2. 2給藥設計A組正常組正常喂食、喂水。B組陰性(模型)對照組只給酒精，不給藥。C組陽性對照組將陽性藥護肝片的成人劑量，按成人體重與小鼠體重的比例折合成小鼠的劑量。每天給小鼠灌胃。D組小葉丁香樹皮低劑量組每天按5g小葉丁香樹皮提取物/kg小鼠的給藥量給
小鼠灌胃。E組小葉丁香樹皮中劑量組每天按IOg小葉丁香樹皮提取物/kg小鼠的給藥量
給小鼠灌胃。F組小葉丁香樹皮高劑量組每天按20g小葉丁香樹皮提取物/kg小鼠的給藥量給小鼠灌胃。2. 2. 3動物給藥除正常組外，其余各組每日均于給藥Ih后灌胃56% (V/V) 二鍋頭白酒16mL/ kg(陰性對照組只給酒精，不給藥)，連續7d。自造模第I日起，每日給酒4h前灌胃相應的水煎液I次，共7d。末次給酒24h后(禁食不禁水12h)，摘除小鼠眼球取血，靜置Ih后， 3500r/min離心IOmin分離血清，檢測血清ALT活性。小鼠脫臼處死，迅速取出肝臟，剪碎后以4°C生理鹽水制成10%肝勻漿，3500r/min離心lOmin，取肝臟上清液，測定MDA活性。2. 3指標檢測2. 3. I動物一般情況觀察并且記錄各組小鼠每日的飲食、體重、活動、毛色、死亡等情況。2. 3. 2血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)的活性檢測小鼠眼球取血后，靜置lh，3500r/min離心IOmin分離血清，測定管用移液槍加入待測血清O. Iml加入試管中，對照管不加待測血清。將試劑盒中的基質液先于37°C的水浴鍋中預熱5min后，取出O. 5ml加入測定管和對照管中，充分混勻后，于37°C水浴30min。然后測定管和對照管同時加入0.5ml的2，4-二硝基苯肼液，混勻。再取O. Iml待測血清只加入對照管中，混勻后于37°C水浴20min。最后在測定管和對照管中都加入5ml0. 4mol/l的氫氧化鈉液混勻。室溫放置IOmin,于505nm處,蒸懼水調零,測定對照管和測定管的OD值。 每組重復三次。絕對OD值=測定管OD值-對照管OD值查標準曲線，通過擬合公式求得相應的ALT活性2. 3. 3肝組織勻漿MDA的檢測各組小鼠處死后，剖腹取肝臟，在4°C生理鹽水清洗，洗去血液，濾紙拭干后，取肝右葉相同部位的一小塊肝組織約O. 5g，剪碎后以4°C生理鹽水制成10%肝勻漿，勻漿液以 3500r/min，離心lOmin，取其上清液，具體操作按試劑盒說明書測定MDA的含量。
組織中MDA含量的計算公式組織中MDA含量=(測定管吸光度-測定空白管吸光度/標準管吸光度-標準空白管吸光度)X標準品濃度+待測樣本蛋白濃度2. 4數據處理數據應用SPSS 10. O軟件包進行處理。各項數據以x±s表示，用方差分析及t檢驗比較組間差異的顯著性，P < O. 05表示差異顯著，有統計學意義。3實驗結果3. I動物一般情況A組小鼠活動正常，被毛整齊、光澤，反應靈敏，食量及大便正常，體重逐漸增減。B 組小鼠在每日給酒后，活動明顯減少，行走不穩，反應遲鈍，倦臥少動，多在30min Ih內醉倒酣睡，隨著給酒時間的延長，其醉酒時間逐漸縮短。造模3天左右，小鼠飲食減少，大便稀軟，被毛蓬松無光澤，體重無明顯增加甚至有下降。C組、D組、E組、F組小鼠每日給酒給藥后，醉酒癥狀較輕，活動減少，反應尚靈敏，被毛整齊，體重遞增，各組小鼠無死亡。3. 2血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)的活性檢測見表1。表I小葉丁香樹皮提取物對酒精性肝損傷小鼠血清ALT活性的影響
權利要求
1.一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物，其特征在于該提取物的制備包括以下過程步驟(I):稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉，加入以粗粉重量為8-10倍量的水浸泡8h-10h， 煎煮I. 5h-2h，煎煮后真空抽濾，收集濾液；步驟(2):將步驟(I)中的小葉丁香樹皮干燥粗粉的濾渣再加水煎煮lh-1. 5h，然后超聲lh-1. 5h，溫度為30°C，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；步驟(3):將步驟(I)和(2)中的濾液合并，將濾液濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物。
2.如權利要求I中所述的一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物的用途，其特征在于該提取物用于制備對酒精性肝損傷具有保護作用的藥物制劑。
全文摘要
本發明所屬醫藥產品研究開發技術領域。本發明涉及一種對酒精性肝損傷具有保護作用的小葉丁香樹皮提取物。稱取小葉丁香樹皮干燥粗粉，加入以粗粉重量為8-10倍量的水浸泡8h-10h，煎煮1.5h-2h，煎煮后真空抽濾，收集濾液；將其濾渣再加水煎煮1h-1.5h，然后超聲1h-1.5h，溫度為30℃，功率為80W，真空抽濾，收集濾液；將濾液合并，濃縮至浸膏狀，烘干浸膏，粉碎，得到小葉丁香樹皮提取物。該提取物用于制備對酒精性肝損傷具有保護作用的藥物制劑。
文檔編號A61K36/63GK102579592SQ201210046758
公開日2012年7月18日 申請日期2012年2月20日 優先權日2012年2月20日
發明者侯欣池, 張崇禧, 張成城, 徐蕊, 鄭友蘭 申請人:山東大學威海分校