一種醫用可吸收防粘連膜的制備方法

專利名稱：一種醫用可吸收防粘連膜的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種醫用預防術后粘連的生物膜的制備方法。
背景技術：
從醫療實踐看，幾乎所有的手術都會涉及到組織之間的粘連問題，它可以引起嚴重的并發癥，如腹腔、盆腔手術后因粘連而發生的腸梗阻、不孕癥；顱部手術后因局部粘連而導致術后癲癇；甲狀腺術后因粘連而致繼發性喉返神經損傷等，同時它也是再次手術時并發癥明顯增高的主要原因之一，如腸道、膽管的損傷等，給病人及其家庭造成了巨大的痛 苦和經濟損失。術后粘連成為外科醫生面臨的最常見、最棘手的問題。已有的預防粘連的方法主要有改良手術技巧和干預粘連的形成過程兩大類，而干預粘連的形成過程又可分為藥物干預和物理屏障干預兩類。物理屏障是將易形成粘連的受傷部位分離開，是目前最有效的防止粘連的方法。目前國內外的主要產品有液體屏障和固體屏障。理想的防止粘連的物理屏障應該是組織相容性好，能在創面上皮再生過程中持續存在，然后吸收。已經上市的此類產品有氧化再生纖維素、彈性纖維多聚五肽、纖維蛋白膠、HA-SCMC膜(S印rafilm)、聚乳酸防粘連膜、殼聚糖膜等。但上述產品中還存在一些技術瑕疵，如聚乳酸可吸收醫用膜須縫合固定在局部，不適用于防止腹盆腔手術粘連。而氧化纖維素膜遇出血可明顯降低其防止腸粘連的作用，使用前必須徹底止血，遇到局部出血時不能使用。

發明內容
本發明目的是克服上述已有技術的不足，提供一種能自行粘附在手術創傷部位形成物理屏障、防止粘連的形成并在傷口愈合過程中自行降解、吸收的醫用可吸收防粘連膜的制備方法。本發明醫用可吸收防粘連膜在至少10000級凈化空氣環境下制備，具體制備方法是
(I)制備膜溶液
A.膜溶液所含成分及其按質量單位份計的配比為
羧甲基纖維素鈉(SCMC) O. 7-2份，硫酸軟骨素(CS) O. 1-0. 5份，透明質酸納(HA)O. 1-0. 5份，甘油O. 1-0. 4份，聚乙二醇O. 1-0. 4份，氯化鈣O. 01-0. I份，純化水(或注射用水)96. 1-98. 89份。上述各組分質量之和為100份。所述羧甲基纖維素鈉又名羧甲基纖維素，英文名稱為Carboxyl methylCellulose,英文縮寫為CMC。分子式為[C6H7O2 (OH) 2CH2C00Na]n。分子量為分子量6400(±1000)。羧甲基纖維素是纖維素醚類中產量最大的、用途最廣、使用最為方便的產品，俗稱"工業味精"。本品屬陰離子型纖維素醚類，外觀為白色或乳白色纖維狀粉末或顆粒，無臭無味，具吸濕性。易溶于冷水或熱水，形成具有一定粘度的透明溶液。溶液為中性或微堿性，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有機溶劑，具有粘著、增稠、流動、乳化分散、賦形、保水、保護膠體、薄膜成型等特性。
所述透明質酸鈉又名玻璃酸鈉,英文名為Hyaluronic Acid,英文縮寫為HA。分子式(C14H2tlNO11Na)n，為一鏈狀聚合物，由(I-￠-4)D-葡糖醛酸(I-P _3)N-乙酰基-D-氨基葡糖的雙糖單位重復連接組成，分子量為500000 730000。本品廣泛存在于動物和人體的生理活性物質，在人皮膚、關節滑膜液、臍帶、房水及眼玻璃體中均有分布，本品為白色纖維狀或粉末狀固體，有很強的吸濕性，溶于水，不溶于醇、酮、乙醚等有機溶劑。所述硫酸軟骨素鈉又名硫酸軟骨素鈉或康得靈。英文名=Chondroitin Sulfate Sodium，英文縮寫CS。分子式為(C14H19NO14SNa2)n，是一種從動物軟骨中提取制備的酸性粘多糖，是硫酸軟骨素A、C及各種硫酸軟骨素的混合物，硫酸軟骨素一般含有50-70個雙糖分子，鏈長不均一，分子量35，000-50，000.。本品呈本白色粉末狀，略帶咸味，無臭，具有較強引濕性，易溶于水并形成粘稠溶液，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有機溶劑。所述甘油又名丙三醇， 英文名稱GLYCERIN。分子式C3H803，分子量92. 09。性狀 無色透明的粘稠液體，無臭而有甜味，吸水性強，能從空氣中吸收水分，可以任何比例與水、 乙醇混合，微溶于乙醚，不溶于苯、三氯甲烷、四氯化碳、二硫化碳等有機溶劑和油脂。所述聚乙二醇為環氧乙烷與水縮聚而成的混合物，英文名稱為Macrogol，分子式 H0(CH2CH20)nH，此處“n”代表氧乙烯基團的平均數，分子量因品種不同而不同。有聚乙二醇 300 (PEG300)、聚乙二醇600(PEG600)、聚乙二醇20000 (PEG20M)，PEG后面數字表示平均分子量。常用的除上述外，還有1000，1500，2000，4000，6000等。本品為白色蠟狀固體薄皮或顆粒狀粉末，略有特臭。本品在水或乙醇中易溶，在乙醚中不容。本發明所用聚乙二醇分子量為400。所述氯化鈣的分子式為CaC12H2O,分子量為147. 02，英文名為Calcium Chloride, 白色、堅硬的碎塊或顆粒，無臭，味微苦，極易潮解。在水中極易溶解，在乙醇中易溶。B 具體制備步驟為
用100目不銹鋼篩網將羧甲基纖維素鈉(SCMC)和硫酸軟骨素(CS)分別篩分，并分別按其用量稱量后混合備用。在真空攪拌罐內按比例加入40°C -50°C純化水(或注射用水)，啟動攪拌罐的攪拌裝置，轉速設定在100-500轉/分之間，然后投入稱量好的透明質酸納(HA)，攪拌溶脹1-2 小時；目視觀察透明質酸納(HA)全部溶解即可。加入混合好的羧甲基纖維素鈉(SCMC)和硫酸軟骨素(CS)，攪拌10-30分鐘，再依次加入稱量好的甘油(丙三醇)、聚乙二醇、氯化鈣，攪拌溶脹1-3小時，抽真空至0. 03 Mpa/ cm2 0. 06Mpa/cm2,保持30-60分鐘之后停止,備用；
根據所用設備情況，也可邊攪拌邊抽真空。待膜溶液抽真空脫泡后可備用。(2)過濾、注模將溶脹攪拌好的膜溶液經120目不銹鋼濾網過濾后放入靜置罐中，再將靜置罐放置在冷藏柜中，設定溫度在2V _8°C間，冷藏5-12小時，再將靜置罐放在灌裝機中，設定好每次灌裝量，將溶液注入模具中。(3)烘干將盛放液體的模具放入真空烘干箱中進行低溫烘干，烘干溫度在 400C -60。。間(不能高于60。。)，濕度35%±5%，真空度0. I Mpa 0. 5Mpa。持續烘干3-5小時后取出。(4)脫膜、切割將模具中已經干燥成型的防粘連膜片小心取出，用沖裁機按需要的尺寸進行裁割。
(5)包裝、滅菌將裁割好的單片產品裝入聚乙烯復合內包裝袋中，再將內包裝袋裝入鋁塑復合中包裝袋中。經鈷60輻射滅菌后將中包裝袋裝入白卡紙外包裝中。本發明產品成品外觀為半透明、無色或微黃色的薄膜片，厚度在0.02-0. 04mm之間，有一定柔韌性，可有少量小氣泡。主要成分為糖胺聚糖及其衍生物。手術后將防粘連膜覆蓋于易發生粘連的創傷組織表面，轉化為水凝膠，形成暫時保護層，起到物理阻隔作用， 減少炎性細胞、成纖維細胞等入侵和粘連的形成，而后在體內逐漸降解，大分子產物主要經過網狀內皮系統清除，最終分解為葡萄糖、水、二氧化碳等，通過呼吸道、腎臟和消化道排出。本發明產品能自行粘附在手術創傷部位形成物理屏障，防止粘連的形成并在傷口愈合過程中自行降解、吸收，粘附特性好，對創傷組織能自行粘附，不需縫合固定。但對非創傷組織、手術器械、手術手套等不粘附，可根據手術傷口大小自由剪裁使用，方便使用。防粘連有效率達到80%以上，具有良好的生物相容性、降解性，無免疫原性。產品植入人體后14 天內基本降解，28天內可完全降解，且降解物對人體無毒，無刺激、無致敏、無細胞毒性。此夕卜，還有抗炎、減少手術創面出血，促進傷口愈合、減少術后并發癥的輔助作用。本發明產品經國家食品藥品監督管理局濟南醫療器械質量監督中心檢測，其物理、化學、生物等性能指標全部達到YZB/國3147-64-2004注冊標準要求。 本發明產品在北京大學人民醫院和北京朝陽醫院進行了 80例臨床試驗，其中實驗組40例，對照組40例。主要檢驗本產品在腹腔內的防粘連膜效果。試驗組手術中使用本發明產品可吸收防粘連膜，對照組不使用。在手術室嚴格無菌條件下，關閉腹腔前將醫用可吸收防粘連膜放置于切口下，隨后關閉腹腔。手術后第I天、第4天檢測體溫、脈搏、呼吸和血壓，復查血常規和生化，術后第4天加查凝血分析。術后I月復查血常規和血生化檢查。 手術后I月通過腹部B超檢查(檢查者不知道患者組別)，測定切口下腸管移動度，了解腹腔內容物與切口下腹壁的粘連程度。通過手術前后的各項檢查，觀察該防粘連膜的使用安全性及有效性。試驗組、對照組均不能使用其它防止腹腔內粘連的任何藥物或生物制品。統計方法及評價方法使用SPSS 13.0統計軟件包進行統計學處理，計量資料采用獨立樣本t 檢驗，計數資料采用四格表卡方檢驗，/7 < 0. 05提示差異具有統計學意義。臨床評價標準進行腹部B型彩色超聲，在靜息狀態、深呼吸兩種狀態下，分3個部位即切口頭部、中部、尾部，測定切口下腸管移動度。
臨床試驗驗結論本產品具有預防腹腔內容物與切口下腹壁粘連的作用。根據目前的觀察和隨訪，未發現明顯的毒副作用。本發明產品在使用中應該注意腹、盆腔內感染者禁用；對透明質酸鈉、硫酸軟骨素、羧甲基纖維素、甘油、聚乙二醇、氯化鈣有過敏史者禁用。瘢痕體質、過敏體質者慎重使用。在腹腔手術中不能用本產品包裹腸-腸吻合端。本產品為一次性使用，嚴格執行無菌操作。包裝破損的也禁止使用。
具體實施例方式因配料罐容積大小不同，每次配料產出成品數量不同，但每次配料應至少在200片以上。為方便使用和計量，單片成品規格一般為長155mmX寬115mm，厚度
0.02mm-Q. 04mm。所用模具規格為長 160mmX 寬 120mm,深 7mm。
實施例I :膜溶液按質量單位克計的配料為羧甲基纖維素鈉1.5g，硫酸軟骨素O. 2g，透明質酸納O. 3g，甘油O. Ig,聚乙二醇O. 2g，氯化鈣O. 02g,純化水或注射用水
97.68g0用100目不銹鋼篩網將羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素篩分好后分別稱量并混合備用。在200ml燒杯中加入45° C純化水，加入透明質酸納，啟動攪拌器，攪拌速度為100轉/分鐘，開始攪拌溶脹，攪拌60分鐘后，再加入混合好的硫酸軟骨素和羧甲基纖維素鈉，攪拌10分鐘后，再依次加入甘油、聚乙二醇、氯化鈣，加大攪拌速度，攪拌60分鐘，使溶液充分溶脹溶解；然后將盛放溶液的燒杯放入真空箱中抽真空60分鐘，再經過濾后，將過濾后的溶液放入冰柜中放置5小時取出，經灌裝機注入不銹鋼模具中，放入真空干燥箱中烘干，真空度為O. 3 Mpa，烘干溫度45°C，濕度33%，3小時后取出模具，再裁割，包裝，滅菌。聚乙二醇是最常用的、最安全的塑型劑，也是常用的注射劑輔料。試驗結果顯示PEG在膜溶液配料中質量百分比含量為O. 1%-0. 4%時，對于產品性能有改善作用，使之更為平整均勻。如PEG > O. 4%或< O. 1%，膜均勻度不夠，平整度較差。實施例2 :膜溶液按質量單位克計的配料為羧甲基纖維素鈉O. 7 g，硫酸軟骨素O. 3g，透明質酸納O. 2g，甘油O. 2g，聚乙二醇O. 3g，氯化鈣O. Olg,純化水(或注射用水)
98.29g0具體制法是用100目不銹鋼篩網將羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素篩分好后分別稱量并混合備用。在200ml燒杯中加入45°C純化水，加入透明質酸納，啟動攪拌器，攪拌速度為100轉/分鐘，開始攪拌溶脹，攪拌60分鐘后，加入混合好的硫酸軟骨素和羧甲基纖維素鈉，攪拌10分鐘，再依次加入甘油、聚乙二醇、氯化鈣，加大攪拌速度，攪拌60分鐘，使溶液充分溶脹溶解；然后將盛放溶液的燒杯放入真空箱中抽真空60分鐘，再經過濾，將過濾后的溶液放入冰柜中放置5小時取出，經灌裝機注入不銹鋼模具中，放入真空干燥箱中烘干，真空度為O. 3 Mpa,烘干溫度45°C，濕度35%，3小時后取出模具，再裁割，包裝，滅菌。羧甲基纖維素鈉用量減少，有利減少體內代謝。但對成膜性影響較大，當SCMC用量少于O. 7g時,成膜性較差。實施例3 :膜溶液按質量單位克計的配料為羧甲基纖維素鈉2g，硫酸軟骨素
O.5g，透明質酸納O. 5g，甘油O. 4g，聚乙二醇O. 4g，氯化鈣O. Ig,純化水(或注射用水)96. Ig0具體制法是用100目不銹鋼篩網將羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素篩分好后分別稱量并混合備用。在200ml燒杯中加入45°C純化水，加入透明質酸納，啟動攪拌器，攪拌速度為100轉/分鐘，開始攪拌溶脹，攪拌60分鐘后，再加入混合好的硫酸軟骨素和羧甲基纖維素鈉，攪拌10分鐘后，再依次加入甘油、聚乙二醇、氯化鈣，加大攪拌速度，攪拌60分鐘，使溶液充分溶脹溶解；然后將盛放溶液的燒杯放入真空箱中抽真空60分鐘。再經過濾后，將過濾后的溶液放入冰柜中放置5小時取出，經灌裝機注入不銹鋼模具中，之后放入真空干燥箱中烘干，真空度為O. 3 Mpa，烘干溫度45°C，濕度35%，3小時后取出模具，再裁割，包裝，滅菌。甘油是最安全、最常用的增塑劑。HA、CS與基質SCMC生成的膜，脆性較大，韌性有待提高。加入甘油對膜性能改善有明顯的作用。結果顯示，甘油劑量在O. I %至O. 4%之間，膜的韌性更好，更柔軟。
權利要求
1.一種醫用可吸收防粘連膜的制備方法，其特征是(1)制備膜溶液A.膜溶液所含成分及其按質量單位份計的配比為羧甲基纖維素鈉0.7-2份，硫酸軟骨素0. 1-0. 5份，透明質酸納0. 1-0.5份，甘油0.1-0. 4份，聚乙二醇0. 1-0. 4份，氯化鈣0. 01-0. I份，純化水或注射用水96. 1-98. 89份； 各組分質量之和為100份；其中所述羧甲基纖維素鈉的分子式為[C6H7O2(OH)2CH2COONa]n，分子量為6400±1000 ； 粘度為 300-1400 mpa. s ；透明質酸鈉為鏈狀聚合物，由(I- P -4) D-葡糖醛酸(I- ^ -3) N-乙酰基-D-氨基葡糖的雙糖單位重復連接組成，分子式為(C14H2tlNO11Na)n，分子量為500000 730000 ；硫酸軟骨素鈉的分子式為(C14H19NO14SNa2)n,分子量35，000-50，000 ；甘油的分子式為C3H8O3,分子量為92. 09 ；聚乙二醇為環氧乙烷與水縮聚而成的混合物，分子式為H0(CH2CH20)nH，其中“n”代表氧乙烯基團的平均數，分子量為400 ；氯化鈣的分子式為CaC12H2O,分子量為147. 02 ；B.制備步驟為將羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素用100目不銹鋼篩網分別篩分，并分別按其用量稱量后混合；在真空攪拌罐內按比例加入40°C-5(TC純化水，啟動攪拌罐的攪拌裝置，轉速設定在 100-500轉/分之間，然后投入稱量好的透明質酸納，攪拌溶脹1-2小時；目視觀察透明質酸納全部溶解；加入混合好的羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素，攪拌10-30分鐘，再依次加入稱量好的甘油、聚乙二醇、氯化I丐,攪拌溶脹1-3小時,抽真空至0. 03 Mpa/cm2 .0. 06Mpa/cm2,保持 30-60分鐘之后停止，備用；(2)過濾、注模將溶脹攪拌好的膜溶液經120目不銹鋼濾網過濾后放入靜置罐中，將靜置罐放置在冷藏柜中，設定溫度在2°C _8°C間，冷藏5-12小時；再將靜置罐放在灌裝機中，設定好每次灌裝量，將溶液注入模具中；(3)烘干將盛放液體的模具放入真空烘干箱中進行低溫烘干，烘干溫度在 40 0C -60。。，濕度35%±5%，真空度0. I Mpa 0. 5Mpa ;持續烘干3-5小時后取出；(4)脫膜、切割將模具中已經干燥成型的防粘連膜片小心取出，用沖裁機按需要的尺寸進行裁割；(5)包裝、滅菌將裁割好的單片產品裝入聚乙烯復合內包裝袋中，再將內包裝袋裝入鋁塑復合中包裝袋中；經鈷60輻射滅菌后將中包裝袋裝入白卡紙外包裝中。
2.如權利要求I所述醫用可吸收防粘連膜的制備方法，其特征是在至少10000級凈化空氣環境下制備。
全文摘要
一種醫用可吸收防粘連膜制備方法，目的是防止粘連并在傷口愈合過程中自行降解吸收；本發明先制備膜溶液，膜溶液所含成分及配比為羧甲基纖維素鈉0.7-2份，硫酸軟骨素0.1-0.5份，透明質酸納0.1-0.5份，甘油0.1-0.4份，聚乙二醇0.1-0.4份，氯化鈣0.01-0.1份，純化水或注射用水96.1-98.89份；制備時將羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素用不銹鋼篩網分別篩分后混合；在真空攪拌罐內加入40℃-50℃純化水，啟動攪拌罐，投入稱量好的透明質酸納，攪拌溶脹1-2小時；加入混合好的羧甲基纖維素鈉和硫酸軟骨素，攪拌10-30分鐘，再依次加入稱量好的甘油、聚乙二醇、氯化鈣，攪拌溶脹1-3小時，抽真空至0.03MPa/cm2～0.06Mpa/cm2，保持30-60分鐘之后停止；再將膜溶液過濾、注模、烘干，再經過脫膜、切割后包裝、滅菌。
文檔編號A61L31/04GK102614551SQ20121009495
公開日2012年8月1日 申請日期2012年3月31日 優先權日2012年3月31日
發明者褚寶麟 申請人:山西伯朗生物技術有限公司