一種多烯磷脂酰膽堿注射液及其制備方法
【專利摘要】本發明屬于藥物制劑領域，具體而言涉及一種多烯磷脂酰膽堿注射液及其制備方法。本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液包含多烯磷脂酰膽堿、增溶劑、防腐劑和穩定劑，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑選自氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液與不加入穩定劑的對照相比，高溫滅菌和長期存儲后穩定性都顯著增加，而且處方和工藝都較簡單，便于工業化生產。
【專利說明】一種多烯磷脂酰膽堿注射液及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物制劑領域，具體而言涉及一種穩定的多烯磷脂酰膽堿注射液及其制備方法。
【背景技術】 [0002]多烯磷脂酰膽堿是從大豆磷脂中提取出來的一種高純度磷脂酰膽堿，含有大量的不飽和脂肪酸，主要為亞油酸(約占70%)、亞麻酸和油酸，由于富含多種不飽和脂肪酸，故稱為多烯磷脂酰膽堿。多烯磷脂酰膽堿為人體內不能合成的“必需”磷脂，是一種肝細胞膜保護劑，能治療多種急慢性肝臟疾病。各種肝病均存在肝細胞膜與細胞線粒體超微結構損傷并伴磷脂丟失以及細胞呼吸與能量合成不足，采取補充外源性磷脂，將不飽和磷脂引入肝細胞膜結構內，替代內源性飽和磷脂，可使膜流動性與跨膜轉運系統活性增強，受損的膜結構因之得以恢復。多烯磷脂酰膽堿為目前療效較為肯定的保肝藥物。目前，該藥物有膠囊劑和注射液兩種劑型。
[0003]多烯磷脂酰膽堿注射液為磷脂類藥物，和其他磷脂一樣，具有熱不穩定的特點，高溫滅菌過程以及長期存儲過程中都會發生不同程度的磷脂水解，由此引起三大問題:1)主藥多烯磷脂酰膽堿的含量下降；2)毒性物質溶血磷脂酰膽堿的生成；3)磷脂的水解導致產品PH值下降。
[0004]實際上，磷脂水解生成溶血磷脂酰膽堿和游離脂肪酸是導致產品pH值下降的主要原因，因此，控制磷脂水解是控制產品PH降低的根本手段。然而，磷脂在高溫或長期存儲過程中水解的控制是磷脂類藥物研發中廣泛存在的難題。
[0005]為提高多烯磷脂酰膽堿的穩定性，將注射液劑型改為凍干粉針劑型是一種被普遍認為有效的手段。已有眾多研究者進行了嘗試，例如以下中國專利或專利申請:CN201010264516.9、 CN200510030631.9、 CN200610009780.1、 CN200510094998.7、CN200510021089.0、CN200510057457.7、CN200510037429.9、CN200610003436.1、CN200510021636.5等。然而，與注射液劑型相比，凍干制劑的生產周期更長、生產成本明顯增高，且需要額外加入凍干保護劑；另外，凍干制劑在臨床使用前需要用溶媒復溶，操作繁瑣，且容易引起藥液污染。
[0006]因此，開發一種穩定性好的多烯磷脂酰膽堿注射液，對于降低生產成本、簡化生產操作、確保臨床用藥安全均具較高的實用價值。有研究者致力于多烯磷脂酰膽堿注射液的開發，例如中國專利申請CN200510105183.4公開了一種提高多烯磷脂酰膽堿穩定性的大輸液，其由處方量的多烯磷脂酰膽堿、營養劑、維生素、助溶劑、抗氧劑、等滲劑、防腐劑、活性炭和注射用水組成；中國專利CN200710050223.9公開了一種澄明度好、穩定性強的多烯磷脂酰膽堿注射液，其由處方量的多烯磷脂酰膽堿、苯甲醇、甘氨膽酸或膽酸或吐溫-80、乙醇或丙二醇或甘油、氫氧化鈉或碳酸鈉、2，6_ 二叔丁基對甲酚、叔丁基-4-羥基茴香醚和維生素E組成。但上述注射液處方較復雜，帶來了諸如成本、安全性和質控等方面的問題，因此仍需研究新的處方來解決多烯磷脂酰膽堿不穩定的技術問題。
【發明內容】
[0007]出乎意料地， 申請人:發現在多烯磷脂酰膽堿注射液中加入氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷時，可顯著提高多烯磷脂酰膽堿在高溫滅菌和長期儲存過程中的穩定性。
[0008]本發明的一個方面在于提供一種多烯磷脂酰膽堿注射液，其包含多烯磷脂酰膽堿、增溶劑、防腐劑和穩定劑，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑選自氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。
[0009]本發明的增溶劑優選為去氧膽酸或去氧膽酸鈉，更優選為去氧膽酸。
[0010]本發明的防腐劑優選為苯甲醇。
[0011]本發明的氨基酸包括非蛋白質氨基酸和蛋白質氨基酸。優選的，氨基酸為蛋白質氨基酸，包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸或纈氨酸中的一種或一種以上。更優選地，本發明的氨基酸為甘氨酸或精氨酸或者它們的混合物。
[0012]除上述組分外，本發明的多烯磷脂酰膽堿亦可包括其他藥學上可接受的組分。這些組分包括但不限于氯化鈉、氫氧化鈉、核黃素、核黃素磷酸鈉、維生素E、維生素E醋酸酯、維生素C、維生素C棕櫚酸酯、BHA (叔丁基對羥基茴香醚，叔丁基-4-羥基茴香醚，丁基羥基茴香醚)、BHT (2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚，2，6- 二叔丁基對甲酚)、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、EDTA(乙二胺四乙酸)、EDTA 二鈉和EDTA鈣鈉。任選地，可加入一種或多種這些組分。
[0013]本發明多烯磷脂酰膽堿注射液的各組分的含量不特別限制，本領域技術人員可根據臨床用量、各組分的特性等進行合宜地選擇。應該理解，所選擇的特定含量是優選的含量，并不旨在說明其他含量不能達到本發明的技術效果。
[0014]在本發明的一個優選的實施方案中，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-275份、增溶劑120-200份、防腐劑30-60份、穩定劑1_40份，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑指氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-275份、去氧膽酸或去氧膽酸鈉120-200份、苯甲醇30-60份、氨基酸或三羥甲基氨基甲烷1-40份。更優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-275份、去氧膽酸120-200份、苯甲醇30-60份、甘氨酸或精氨酸或三羥甲基氨基甲烷1-40份。
[0015]在本發明另一個優選實施方案中，本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-250份、增溶劑125-175份、防腐劑40-50份、穩定劑10-30份，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑指氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-250份、去氧膽酸或去氧膽酸鈉125-175份、苯甲醇40-50份、氨基酸或三羥甲基氨基甲烷10-30份。更優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿220-250份、去氧膽酸125-175份、苯甲醇40-50份、 甘氨酸或精氨酸或三羥甲基氨基甲烷10-30份。[0016]在本發明再另一個優選實施方案中，本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿230-245份、增溶劑140-160份、防腐劑45-50份、穩定劑15-25份，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑指氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿230-245份、去氧膽酸或去氧膽酸鈉140-160份、苯甲醇45-50份、氨基酸或三羥甲基氨基甲烷15-25份。更優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿230-245份、去氧膽酸140-160份、苯甲醇45-50份、甘氨酸或精氨酸或三羥甲基氨基甲烷15-25份。
[0017]在本發明還一個優選實施方案中，本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿232.5份、增溶劑140-160份、防腐劑45-50份、穩定劑15-25份，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑指氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿232.5份、去氧膽酸或去氧膽酸鈉140-160份、苯甲醇45-50份、氨基酸或三羥甲基氨基甲烷15-25份。更優選地，多烯磷脂酰膽堿注射液包含如下組分和含量(重量份):多烯磷脂酰膽堿232.5份、去氧膽酸140-160份、苯甲醇45-50份、甘氨酸或精氨酸或三羥甲基氨基甲烷15-25份。
[0018]在本發明又一實施方案中，本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液除了包含上文所述的組分和含量(重量份)外，還包含如下組分和含量(重量份):氯化鈉6-25份，優選8-20份，更優選10-18份；核黃素或核黃素磷酸鈉(以核黃素計)0.1-2份，優選0.3-1份，更優選0.35-0.6份；氫氧化鈉11-30份，優選11-25份，更優選15-20份。
[0019]本發明的另一個方 面提供一種多烯磷脂酰膽堿注射液的制備方法，其包括以下步驟:
[0020](I)在氮氣保護下，向60%~95%配制量的注射用水中加入各組分，攪拌均勻，必要時適當加熱；
[0021](2)向步驟⑴溶液中加入0.01%~I % (以重量計)的活性炭吸附15~30min，之后進行脫炭處理；
[0022](3)如有必要，用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至7.5~9.5 ;
[0023](4)加水至配制量；
[0024](5)過濾，于氮氣覆蓋下灌封，滅菌，視檢合格，即得。
[0025]其中步驟(1)中的各組分可同時加入，也可先加入一部分，然后再加入剩余組分。此外，各組分的加入順序不特別限制，例如可最先加入多烯磷脂酰膽堿，也可最后加入多烯磷脂酰膽堿。部分組分也可在步驟(2)的脫炭后加入。
[0026]其中步驟(5)中也可先滅菌，再在氮氣覆蓋下灌封，此外步驟(5)中也可不進行滅菌步驟。
[0027]另外，應該理解，該方法中的部分步驟可以互換，例如可按⑴、(3)、⑷、(2)、(5)的順序進行制備，但并不僅限于此種互換方式，本領域的技術人員可根據具體情況合意地進行選擇。
[0028]本發明的多烯磷脂酰膽堿注射液與不加入穩定劑的對照相比，高溫滅菌和長期存儲后穩定性都顯著增加，而且處方和工藝都較簡單，便于工業化生產。[0029]本發明不限于本文所述的特定方法學、方案和試劑，因為它們可變化。另外，本文使用的術語是僅用于描述特定實施方案的目的而不旨在限制本發明的范圍。除非文中明確指示，否則措辭“包含”和“包括”將解讀為開放式的而不是封閉式的
【具體實施方式】
[0030]下面結合具體實施例對本發明進行進一步的描述，然而，本發明中這些和其他實施例僅用于闡明并不限制本發明的范圍。同樣，本發明不限于本文描述的任何具體優選的實施方案。本領域技術人員應該理解，對本發明技術特征所作的等同替換，或相應的改進，仍屬于本發明的保護范圍之內。
[0031]實施例1
[0032]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸150g、精氨酸17.8g、氯化鈉16g、苯甲醇48.2g、氫氧化鈉15g和核黃素磷酸鈉0.45g (以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0033]實施例2
[0034]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸160g、精氨酸19.6g、氯化鈉18g、苯甲醇50g、氫氧化鈉16.3g和核黃素磷酸鈉0.60g (以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0035]實施例3·[0036]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸140g、三羥甲基氨基甲烷15g、氯化鈉10g、苯甲醇47.6g、氫氧化鈉16.Sg和核黃素磷酸鈉0.50g (以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0037]實施例4
[0038]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸150g、甘氨酸25g、氯化鈉16g、苯甲醇45g、氫氧化鈉20g和核黃素磷酸鈉0.35g(以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0039]實施例5
[0040]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸140g、甘氨酸18.8g、氯化鈉15g、苯甲醇47.3g、氫氧化鈉15.5g和核黃素磷酸鈉0.35g(以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min,脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。[0041]實施例6
[0042]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸150g、三羥甲基氨基甲烷15.6g、氯化鈉16g、苯甲醇48g、氫氧化鈉16.3g和核黃素磷酸鈉0.45g(以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0043]實施例7
[0044]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿220g、去氧膽酸120g、精氨酸lg、氯化鈉6g、苯甲醇30g、氫氧化鈉IIg和核黃素磷酸鈉0.1g (以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min,脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0045]實施例8
[0046]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿245g、去氧膽酸160g、三羥甲基氨基甲烷25g、氯化鈉18g、苯甲醇50g、氫氧化鈉20g和核黃素磷酸鈉0.60g(以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1 %活性炭吸附30min,脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0047]實施例9:
[0048]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿275g、去氧膽酸200g、精氨酸40g、氯化鈉25g、苯甲醇60g、氫氧化鈉30g和核黃素磷酸鈉2.0g (以核黃素計)，攪`拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0049]對照實施例
[0050]以制備5L多烯磷脂酰膽堿注射液為例，在氮氣保護下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰膽堿232.5g、去氧膽酸150g、氯化鈉16g、苯甲醇48.2g、氫氧化鈉15g和核黃素磷酸鈉0.45g(以核黃素計)，攪拌均勻；加入0.1%活性炭吸附30min，脫炭；用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節PH至9.0 ;加水至配制量；過濾，于氮氣覆蓋下分裝灌封，121°C滅菌12min，視檢合格，即得。
[0051]實施例10多烯磷脂酰膽堿注射液的高溫加熱穩定性
[0052]按照實施例1-9以及對照實施例中的處方和方法，制備多烯磷脂酰膽堿注射液10批。將每批注射液在121°C滅菌12min，比較滅菌前后多烯磷脂酰膽堿(PPC)含量、主要雜質溶血磷脂酰膽堿(LPC)含量和溶液pH值的變化，其中PPC含量和LPC含量均按PPC標示量 46.5mg/mL 為 100% 計算。
[0053]
【權利要求】
1.一種多烯磷脂酰膽堿注射液，其包含多烯磷脂酰膽堿、增溶劑、防腐劑和穩定劑，其中所述增溶劑選自去氧膽酸、去氧膽酸鈉、去氫膽酸、去氫膽酸鈉、膽酸或膽酸鈉，其中所述穩定劑選自氨基酸或其鈉鹽或者三羥甲基氨基甲烷。
2.權利要求1的多烯磷脂酰膽堿注射液，其包含如下組分和含量:多烯磷脂酰膽堿220-275份、增溶劑120-200份、防腐劑30-60份、穩定劑1_40份，其中含量是重量份。
3.權利要求2的多烯磷脂酰膽堿注射液，其包括如下組分和含量:多烯磷脂酰膽堿220-250份、增溶劑125-175份、防腐劑40-50份、穩定劑10-30份，其中含量是重量份。
4.權利要求3的多烯磷脂酰膽堿注射液，其包括如下組分和含量:多烯磷脂酰膽堿230-245份、增溶劑140-160份、防腐劑45-50份、穩定劑15-25份，其中含量是重量份。
5.權利要求4的多烯磷脂酰膽堿注射液，其包括如下組分和含量:多烯磷脂酰膽堿232.5份、增溶劑140-160份、防腐劑45-50份、穩定劑15-25份，其中含量是重量份。
6.權利要求1-5中任一項的多烯磷脂酰膽堿注射液，其還包括如下組分和含量:氯化鈉6-25份、核黃素或核黃素磷酸鈉0.1-2份、氫氧化鈉11-30份,其中含量是重量份,其中核黃素磷酸鈉含量以核黃素計。
7.權利要求1-6中任一項的多烯磷脂酰膽堿注射液，其中所述增溶劑選自去氧膽酸或去氧膽酸鈉，其中所述穩定劑選自蛋白質氨基酸或三羥甲基氨基甲烷，其中所述防腐劑選自苯甲醇。
8.權利要求7的多烯磷脂酰膽堿注射液，其中所述增溶劑是去氧膽酸。
9.權利要求7的多烯磷脂酰膽堿注射液，其中所述蛋白質氨基酸選自甘氨酸或精氨酸或者它們的混合物。·
10.一種制備權利要求1-9中任一項的多烯磷脂酰膽堿注射液的方法，其包括以下步驟: (1)在氮氣保護下，向60%~95%配制量的注射用水中加入各組分，攪拌均勻，必要時適當加熱； (2)向步驟(1)溶液中加入0.01%~1%的活性炭吸附15~30min，之后進行脫炭處理，其中活性炭含量是重量份； (3)如有必要，用氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液調節pH至7.5~9.5 ; (4)加水至配制量； (5)過濾，于氮氣覆蓋下灌封，滅菌，視檢合格，即得。
【文檔編號】A61K9/08GK103705446SQ201210391320
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2012年10月8日 優先權日:2012年10月8日
【發明者】程艷菊, 張勇 申請人:正大天晴藥業集團股份有限公司