專利名稱：一種聚合物微泡超聲造影劑的制備方法
技術領域：
本發明涉及造影剤的制備方法，具體涉及聚乳酸及聚乳酸羥基こ酸微泡超聲造影劑的制備方法。
背景技術：
超聲診斷技術是利用超聲波在人體的組織界面發生的反射和散射信號強弱差異來傳遞生物內部信息，從而達到診斷目的的技木。超聲造影剤是ー類能顯著增強超聲背向散射強度的化學制劑，微泡是ー種最廣泛研究以及市面上最常見的超聲造影剤，主要原理是利用微泡的中空結構，在超聲下產生諧波，從而達到增強諧波強度的目的。超聲診斷是一種無創、無痛、方便、直觀的有效檢查手段，可用于心血管及肝臟系統的超聲診斷。微泡造影劑是ー種由蛋白質、脂質、表面活性劑或者高分子材料包裹空氣或其他惰性氣體的中空微 粒。聚乳酸是ー類可以調節的生物降解速度，可以在體內被新陳代謝吸收，且降解產物對生物機體沒有副作用，因此在醫學領域得到廣泛的臨床應用。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種聚合物微泡超聲造影剤的制備方法。為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下一種聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，將聚乳酸(PLA)或聚乳酸-羥基こ酸共聚物(PLGA)溶解在ニ氯甲烷中，加入碳酸氫銨水溶液和吐溫80，超聲乳化f2min，得到混合液(水/油)用高壓氮氣將其從SPG膜中壓出，分散到含有聚こ烯醇的外水相中，得到復乳液(水/油/水)，再將復乳液倒入氯化鈉水溶液中，室溫下固化攪拌3飛小吋，離心分離，去除上清液，用蒸餾水洗滌剩下的固體沉淀，然后冷凍干燥得到白色產物。其中，所述的聚乳酸以及聚乳酸-羥基こ酸共聚物為醫用級別；其中，聚乳酸-羥基こ酸共聚物為聚乳酸與聚羥基こ酸按重量比75:25或50:50的共聚物。其中，對于每Ig聚乳酸或聚乳酸-羥基こ酸共聚物，ニ氯甲烷的使用量為2(T80ml。其中，碳酸氫銨水溶液的質量百分濃度為(Tl% (碳酸氫銨水溶液的質量百分濃度為0%時，即使用不含碳酸氫銨的水)，碳酸氫銨水溶液的加入體積為ニ氯甲烷體積的10 20%，吐溫80的加入量為ニ氯甲烷體積的(Tl% (吐溫80的加入量為ニ氯甲烷體積的0%時，即不添加吐溫80)。其中，所述的高壓氮氣，條件為f 2. 5個大氣壓。其中，所述的SPG膜孔徑為0. 5微米。其中，含有聚こ烯醇的外水相中，聚こ烯醇的質量百分濃度為1 4%;含有聚こ烯醇的外水相的使用體積為ニ氯甲烷體積的61倍。其中，所述的氯化鈉水溶液中，氯化鈉的質量百分濃度為1%;氯化鈉水溶液的使用體積為ニ氯甲烷用量的10 20倍。
其中，離心條件為3000 4000rpm, 10 20min。有益效果本發明采用了 PLA及其與聚羥基こ酸PGA不同比例的共聚物PLGA作為微囊的囊材，該類材料是ー類可生物降解的材料，其降解速率可以調節，降解產物對機體沒有危害，最終產物可以被代謝或者吸收，是ー種綠色環保的材料，PGA的加入改善了材料的親水性能，使得降解速度加快，使得。復乳液-溶劑揮法發制備的微粒為中空微囊，有回聲響應性，可作為超聲造影剤使用。在第二次乳化時采用SPG膜乳化法，該技術使用方法簡單，條件溫和，耗能低，有利于擴大生產，通過該技術制備的乳液粒徑均一，其粒徑大小可以通過膜孔大小來控制。
圖I為聚合物微泡粉末的實物照片。圖2為PLA微囊的SEM圖，其中，I為較小放大倍數，2為較大放大倍數。
圖3PLGA50/50微囊的SEM圖，I為較小放大倍數，2為較大放大倍數。圖4PLGA75/25微囊的SEM圖(I)以及TEM圖⑵。圖5聚合物微囊的體外顯影效果圖(I)水(2)PLA (3)PLGA75/25 (4)PLGA50/50。
具體實施例方式根據下述實施例，可以更好地理解本發明。然而，本領域的技術人員容易理解，實施例所描述的內容僅用于說明本發明，而不應當也不會限制權利要求書中所詳細描述的本發明。以下實施例中PLA購自于山東醫療器械研究所，特性粘度0. 57dl/g (CHCL3/25 ° C)，醫用級別。PLGA5050為聚乳酸與聚羥基こ酸按重量比50:50的共聚物，購自于山東醫療器械研究所，特性粘度0. 29dl/g(CHCL3/25° C)，醫用級別。PLGA7525為聚乳酸與聚羥基こ酸按重量比75:25的共聚物，購自于山東醫療器械研究所，特性粘度0. 50dl/g(CHCL3/25° C)，醫用級別。實施例I :0. 2g PLA溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml水溶液滴入其中，加入I滴(I滴相當于
0.05毫升，以下相同)吐溫80，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カIOOkpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有60ml 2wt% PVA的外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小吋，4000rpm離心分離IOmin并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例2 0. 2g PLA溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml 0. 1%碳酸氫銨溶液滴入其中，加入I滴吐溫80，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有70ml 2wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,4000rpm離心分離20min并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。
實施例3 0. 3g PLA溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml水溶液滴入其中，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ200kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有75ml 2wt%PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液,再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小吋，4000rpm離心分離15min并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例4 0. 5gPLGA7525溶解在IOml ニ氯甲烷中，取2ml水溶液滴入其中，加入I滴吐溫80，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 2wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有200ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時，4000rpm離心分離IOmin并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。 實施例5 0. 5gPLGA5050溶解在IOml ニ氯甲烷中，取2ml lwt%—酸氫銨溶液滴入其中，加入2滴吐溫80，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml lwt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小吋，3500rpm離心分離并用蒸餾水清洗離心產物，重復三次，然后冷凍干燥得到白色產物。實施例6 0. 5gPLGA7525溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml lwt%碳酸氫銨溶液滴入其中，均質乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ200kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 4wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,4000rpm離心分離IOmin并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例I 0. 5gPLGA5050溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml lwt%碳酸氫銨溶液滴入其中，均質乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ250kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 2wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,4000rpm離心分離IOmin并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例8 0. 5gPLGA5050溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml lwt%碳酸氫銨溶液滴入其中，均質乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 2wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,4000rpm離心分離IOmin并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例9 0. 5gPLA溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml 0. lwt%碳酸氫銨溶液滴入其中，均質乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 2wt% PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有IOOmllwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,3000rpm離心分離IOmin并用蒸懼水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。實施例10 0. 125g PLA溶解在IOml ニ氯甲烷中，取Iml 0. lwt%碳酸氫銨溶液滴入其中，超聲乳化lmin，得到水/油的溶液，用壓カ150kpa的氮氣將其從孔徑為0. 5微米的SPG膜中壓出，分散到裝有80ml 2wt%PVA外水相中，得到水/油/水的復乳液，再將復乳倒入含有100ml lwt%氯化鈉溶液的燒杯中，室溫下固化攪拌3小時,3000rpm離心分離15min并用蒸餾水清洗離心固體沉淀，重復三次，取固體沉淀冷凍干燥得到白色產物。冷凍干燥后所得的產物(實施例I)如圖所示為白色粉末狀，見圖I。從圖2 4中可以看到，我們得到的樣品(實施例2、4、8)都成球形，表面比較光滑，尺寸均勻，沒有明顯的連結，采用膜乳化法所制備的復乳液滴粒徑要比機械攪拌法所制備
的復乳液滴均勻，每個乳液滴表面自由能幾乎相同，因此在復乳液形成和固化過程中，復乳液滴之間的凝聚和破裂的可能性很小，所得到的微囊分散性較好。在透射電子顯微鏡圖中可以看到，球形微粒是ー個中空結構的微囊，壁比較薄。將所得產物(實施例2、4、8)溶解在生理鹽水中，制成水囊，用多普勒超聲診斷儀測試其造影性能。其造影效果圖如圖5。從圖5中，我們可以看到，三種不同的聚合物得到的微泡對超聲顯影都有比較明顯的效果。
權利要求
1.一種聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，將聚乳酸或聚乳酸-羥基こ酸共聚物溶解在ニ氯甲烷中，加入碳酸氫銨水溶液和吐溫80，超聲乳化f2min，得到混合液用高壓氮氣將其從SPG膜中壓出，分散到含有聚こ烯醇的外水相中，得到復乳液，再將復乳液倒入氯化鈉水溶液中，室溫下固化攪拌3飛小時，離心分離，去除上清液，用蒸餾水洗滌剩下的固體沉淀，然后冷凍干燥得到白色產物。
2.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，所述的聚乳酸以及聚乳酸-羥基こ酸共聚物為醫用級別；其中，聚乳酸-羥基こ酸共聚物為聚乳酸與聚羥基こ酸按重量比75:25或50:50的共聚物。
3.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在干，對于每Ig聚乳酸或聚乳酸-羥基こ酸共聚物，ニ氯甲烷的使用量為2(T80ml。
4.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，碳酸氫銨水溶液的質量百分濃度為(Tl%，碳酸氫銨水溶液的加入體積為ニ氯甲烷體積的1(T20%，吐溫80的加入量為ニ氯甲烷體積的(Tl%。
5.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，所述的高壓氮氣，條件為廣2. 5個大氣壓。
6.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，所述的SPG膜孔徑為0. 5微米。
7.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，含有聚こ烯醇的外水相中，聚こ烯醇的質量百分濃度為廣4% ;含有聚こ烯醇的外水相的使用體積為ニ氯甲烷體積的6 8倍。
8.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，所述的氯化鈉水溶液中，氯化鈉的質量百分濃度為1% ;氯化鈉水溶液的使用體積為ニ氯甲烷用量的10 20倍。
9.根據權利要求I所述的聚合物微泡超聲造影剤的制備方法，其特征在于，離心條件為 3000 4000rpm，10 20min。
全文摘要
本發明公開了一種聚合物微泡超聲造影劑的制備方法，將聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶解在二氯甲烷中，加入碳酸氫銨水溶液和吐溫80，超聲乳化1~2min，得到混合液用高壓氮氣將其從SPG膜中壓出，分散到含有聚乙烯醇的外水相中，得到復乳液，再將復乳液倒入氯化鈉水溶液中，室溫下固化攪拌3~5小時，離心分離，去除上清液，用蒸餾水洗滌剩下的固體沉淀，然后冷凍干燥得到可用于超聲造影劑的白色粉末材料。
文檔編號A61K9/50GK102861345SQ201210404418
公開日2013年1月9日 申請日期2012年10月22日 優先權日2012年10月22日
發明者徐鵬, 夏靜, 張蕤 申請人:南京林業大學