使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法
【專利摘要】本發明公開了一種使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，它是由蘆薈粉和三七粉制備而成，首先將蘆薈粉和三七粉按比例配制，加蒸餾水制成混合溶液；靜置過夜后取上清液過濾澄清；加鹽酸調整pH值6.3~6.5，加熱滅菌后冷卻；再將冷卻液的pH值調至4.2~4.5，經超濾膜超濾，截留得分子量≤10000Da的含藥溶液，分裝入安瓿瓶中凍干即可。本發明突破了傳統將蘆薈僅當做排毒養顏、通便降脂產品的使用范圍，將蘆薈、三七配伍制成注射液凍干粉，使其藥用領域拓寬到促進雌激素分泌治療方面。試驗證明，本發明凍干粉制劑可促進雌雄性激素的分泌，治療效果突出且無毒副作用，大大拓寬了蘆薈的藥物治療領域。
【專利說明】使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及凍干粉針劑，尤其是涉及一種使用蘆薈制備促進雌激素分泌的注射液凍干粉針劑的方法。
【背景技術】
[0002]蘆薈(Aloe)是一種多年生百合科肉質的草本植物，是一種具有食用、美容、保健、醫藥以及觀賞等功能的植物。蘆薈化學成分復雜，已發現的成分超過160多種，主要有多糖、蒽醌類化合物、有機酸、氨基酸、酶和多肽、維生素、留族化合物、礦物質、微量元素等有效活性成分。目前蘆薈行業只有蘆薈(蘆薈丁)罐頭、蘆薈液、全葉蘆薈粉、蘆薈凝膠粉等基礎原料，可以制造成蘆薈膠、蘆薈膠囊、蘆薈片劑、蘆薈口服液等口服蘆薈產品。口服蘆薈制品具有排毒養顏，潤通腸胃，增強免疫功能等作用，但實際效果主要集中在通便功能上，對其他人體疾病沒有明顯改善和治療作用。
[0003]植物三七(學名:Panax pseudo-ginseng)的主產地在中國的云南及廣西深山中，是人們熟知的止血、活血化瘀的中藥。《本草綱目》中記載:三七性溫，味甘微苦，入肝、胃、大腸經。三七的功能主治化瘀止血,活血消腫定痛,主治各種出血癥,跌撲瘀腫，胸痹心痛，中醫歷來都是以三七作為傷科金瘡藥使用的。
[0004]從目前情況看，對蘆薈產品進行的更深層次的研究和將其與三七一起配伍作為藥物應用方面的研究還尚顯欠缺。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一種使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法。
[0006]為實現上述目的，本發明 可采取下述技術方案:
本發明所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，它是由蘆薈粉、三七粉按照下述重量份配比和方法制備而成:
第一步，將蘆薈粉50-99份，三七粉f 50份混合成原料藥，按100份原料藥添加2000份蒸餾水的比例配制成混合水溶液；
第二步，將混合水溶液攪拌至蘆薈粉和三七粉完全溶解后，靜置過夜分離；
第三步，將第二步分離得到的上清液過濾澄清；
第四步，將第三步得到的濾液加鹽酸，調整PH值至6.3飛.5，加熱到11(T120°C滅菌30分鐘，然后自然冷卻；
第五步，用鹽酸將第四步得到的冷卻液的PH值調至4.2^4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量< 1000ODa的含藥溶液；
第六步，將第五步得到的藥液分裝入安瓿瓶中凍干即可。
[0007]所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比為:蘆薈粉:三七粉=50:50。
[0008]所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比可以為:蘆薈粉:三七粉=70:30。[0009]所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比也可以為:蘆薈粉:三七粉=90:10。
[0010]所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比還可以為:蘆薈粉:三七粉=99:1。
[0011]為保證本發明制備的針劑的療效，所述蘆薈粉的制備方法為:
第一步，將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后粉碎成蘆薈漿汁；
第二步，將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至8_12°C，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，50-60分鐘后，將溫度升至75-80°C，保溫3_5個小時進行滅活處理；
第三步，將第二步經過滅活處理后的的溶液過濾、濃縮、干燥后得到外觀為淡黃色的蘆薈粉成品。
[0012]為保證本發明制備的針劑的療效，所述三七粉的制備方法為:
第一步，將三七根浸泡30-60分鐘，清洗干凈后烘干粉碎成0.02-15微米的超微粉；第二步，將第一步得到的三七超微粉，按100:2000重量份之比例加入蒸餾水溶解，然后倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至75-80°C，保溫3-5個小時，濃縮、干燥后即可得到外觀為淡黃色的三七粉成品。
[0013]本發明的優點在于突破了傳統的將蘆薈僅當做排毒養顏、通便降脂產品的使用范圍，運用現代醫藥學手段，將蘆薈、三七配伍制成注射液凍干粉用于靜脈注射，使其藥用領域拓寬到促進雌激素分泌治療方面，試驗證明，本發明凍干粉制劑可促進雌雄性激素的分泌，替代了現有的雌雄性激素產品，治療效果突出且無毒副作用，大大拓寬了蘆薈的藥物治療領域。
【具體實施方式】
[0014]本發明所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法包括下述步驟:
第一步，制備蘆薈粉:
將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后采用食品用不銹鋼破碎機將其粉碎成蘆薈漿汁；粉碎時可將蘆薈葉去皮粉碎，或將蘆薈葉不去皮全葉進行粉碎均可；將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至8-12°C，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，以促進蘆薈的降解，50-60分鐘后，將溫度升至75-80°C，保溫3_5個小時進行滅活處理；然后將溶液用振篩、硅藻土或板框過濾，也可將兩種方式相結合進行過濾，如果需要脫色，還可加入活性炭進行脫色處理；濃縮后(濃縮汁的可溶性固形物控制在10%以內)采用噴霧干燥或凍干的方法將其制成外觀為淡黃色的蘆薈粉基礎原料。
[0015]第二步，制備三七粉:
將三七根浸泡30-60分鐘，清洗干凈后烘干粉碎成0.02-15微米的超微粉；將三七超微粉按100:2000的重量份加入蒸餾水溶解，然后倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至75-80°C，保溫3-5個小時，濃縮后真空干燥或冷凍干燥，得到外觀為淡黃色的三七粉成品。
[0016]第三步，制備注射液凍干粉針劑
1、取上述蘆薈粉和三七粉按5(T99: f 50之比例混合成基礎原料(實際制作時，蘆薈粉和三七粉可以按50:50之比例混合，也可以按70:30, 90:10或90:10之比例混合)，按照每100g基礎原料加蒸餾水2000g的比例進行配制，工業生產時可按比例放大，得到混合水溶液；
2、將混合溶液攪拌均勻或超聲溶解15分鐘，至蘆薈粉和三七粉完全溶解，得到淺棕色溶液，靜置過夜分離(可使用上海東華高壓均質機設備);
3、將上述分離得到的上清液過濾澄清；
4、將所得濾液用37%的鹽酸調整pH值至6.3飛.5，然后加熱到ll(Tl20°C高溫滅菌30分鐘，然后自然冷卻；
5、用37%的鹽酸將上述得到的冷卻液的pH值調至4.2^4.5，使用超濾工藝，經超濾膜超濾，截留獲得分子量< 1000ODa的含藥溶液(工業生產可使用合肥風云膜分離技術有限公司生產的全自動膜分離超濾設備，實驗室使用4號濾斗)；
6、將上述藥液分裝入IOmm的安瓿瓶中，_30°C凍干即可得到促進雌激素分泌注射液粉針劑(可使用蘭州科近真空凍干技術有限公司生產的JDG-100F全自動真空凍干機)。
[0017]注射使用時，將本發明制備的促進雌激素分泌注射液凍干粉針劑用0.9%生理鹽水稀釋溶化成注射液即可。
[0018]本發明制備的促進雌激素分泌注射液凍干粉針劑分為兩種:
1、采用去皮蘆薈制得的注射液凍干粉針劑，呈淡棕色，規格:每瓶含可溶性蘆薈有效成分0.75克，以下簡稱JOl。
[0019]2、采用不去皮蘆薈(全葉蘆薈)制得的注射液凍干粉針劑，呈棕色，規格:每瓶含可溶性蘆薈有效成分0.9克，以下簡稱J02。
`[0020]本發明制備的促進雌激素分泌注射液凍干粉針劑的試驗結果如下:
一、JOl和1J02擬雌激素樣作用研究
1.目的
應用小鼠雙側卵巢切除模型，考察JOl和J02受試樣品的擬雌激素樣作用。
[0021]材料
動物:雌性ICR小鼠，18-22g左右，由南京醫科大學實驗動物中心提供，動物合格證號:SCXK (蘇)2013-0005。
[0022]J01，注射粉針形式，呈淡棕色，規格:每瓶含可溶性成分0.75克。J02，注射粉針形式，呈棕色，規格:每瓶含可溶性成分0.9克。給藥時直接用注射用無菌生理鹽水溶解，并稀釋成所用濃度。
[0023]己烯雌酚注射液，規格:1ml:3mg，批號:20120516,上海通用藥業股份有限公司提供。
[0024]方法
3.1切除雙側卵巢小鼠模型
選取健康雌性ICR小鼠，體重量(20±2)g，乙醚麻醉后，腹位固定，肋骨下背部中線兩側切口摘除雙側卵巢，縫合傷口，常規飼養，待傷口充分愈合后，進行陰道涂片檢查，I次/d，連續5 d，檢查卵巢是否摘除完全。連續5 d呈間情期(陰道涂片鏡下細胞學檢查，見大量多核白細胞，少量上皮細胞)的小鼠作為合格鼠。選取合格鼠48只，隨機均分6組，每組8只，模型組(給予等體積注射生理鹽水)，己烯雌酹組(I mg/kg) ,JOl (144 mg/kg、288mg/kg), J02 (180 mg/kg,360 mg/kg)，同時選取不切除雙側卵巢的小鼠6只作為正常對照組(給予等體積注射生理鹽水)，腹腔注射I次/d，連續14 d。末次注射后I h，眼眶后靜脈叢取血，3000 r/min離心10 min,分離血清,用ELISA法測定血清E2、LH、FSH的水平。迅速剖開腹腔，分離、剪下胸腺、脾臟和子宮，然后稱量質量，計算胸腺、脾臟和子宮系數。
[0025]給藥方式及時間
采用腹腔注射給藥，5ml/kg,每天一次,共給藥14天。
[0026]評價指標
臟器指數:胸腺、脾臟和子宮指數。臟器指數=臟器重/小鼠體重*10。血清指標:E2(雌二醇)、LH (促黃體生成素)、FSH (卵泡生成素)。
[0027]統計方法
計量數據采用SPSS10.0進行ANOVA T-TEST檢驗組間差異。
[0028]結果
雌性小鼠被切去卵巢后，子宮指數及E2水平明顯下降(P < 0.01)，而LH及FSH水平則有增加(P < 0.01)。J01VJ02干預后，小鼠變化不同。JOl作用小鼠兩周，144 mg/kg和288mg/kg兩劑量組小鼠子宮指數明顯增加，與模型組小鼠比較有顯著性差異(P < 0.01)(見表I);同時，該兩劑量小鼠血清E2也有明顯增加(見表2)，說明JOl具有明顯的擬雌激素樣作用，可促進去卵巢小鼠恢復部分雌性特征；對其它激素方面，JOl能明顯降低雌性小鼠血清LH的水平，與模型組比較P〈 0.05 (見表3) JOl對血清FSH沒有明顯影響作用(見表4)。
[0029]J02干預去卵巢小鼠后，高劑量組(360mg/kg)小鼠的子宮指數有明顯升高，與模型組比較有明顯差異(P < 0.05)，但低劑量組(180!1^/1^)小鼠的子宮指數未見明顯變化(見表1)。同時從雌激素水平看，J02干預雌小鼠后，小鼠E2水平有一定的升高，但與模型組比較均未見顯著性差異(P > 0.05)(見表2)。此外LH與FSH的血清水平在J02的干預下也未見明顯變化(見表3、4)。說明J02對去除卵巢小鼠沒有明顯的刺激作用，擬雌激素作用未能體現。
[0030]表1 JOl和J02對去卵巢小鼠臟器指數的影響(M±SD)_
【權利要求】
1.一種使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:它是由蘆薈粉、三七粉按照下述重量份配比和方法制備而成: 第一步，將蘆薈粉50-99份，三七粉1~ 50份混合成原料藥，按100份原料藥添加2000份蒸餾水的比例配制成混合水溶液； 第二步，將混合水溶液攪拌至蘆薈粉和三七粉完全溶解后，靜置過夜分離； 第三步，將第二步分離得到的上清液過濾澄清； 第四步，將第三步得到的濾液加鹽酸，調整PH值至6.3~6.5，加熱到110~120°C滅菌30分鐘，然后自然冷卻； 第五步，用鹽酸將第四步得到的冷卻液的PH值調至4.2^4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量≤1000ODa的含藥溶液； 第六步，將第五步得到的藥液分裝入安瓿瓶中凍干即可。
2.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈粉的制備方法為: 第一步，將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后粉碎成蘆薈漿汁； 第二步，將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至8-12°C，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，50-60分鐘后，將溫度升至75-80°C，保溫3_5個小時進行滅活處理； 第三步，將第二步經過滅活處理后的的溶液過濾、濃縮、干燥后得到外觀為淡黃色的蘆薈粉成品。
3.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述三七粉的制備方法為: 第一步，將三七根浸泡30-60分鐘，清洗干凈后烘干粉碎成0.02-15微米的超微粉； 第二步，將第一步得到的三七超微粉，按100:2000重量份之比例加入蒸餾水溶解，然后倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至75-80°C，保溫3-5個小時，濃縮、干燥后即可得到外觀為淡黃色的三七粉成品。
4.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比為:蘆薈粉:三七粉=50:50。
5.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比為:蘆薈粉:三七粉=70:30。
6.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比為:蘆薈粉:三七粉=90:10。
7.根據權利要求1所述的使用蘆薈、三七制備促進雌激素分泌的凍干粉針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈粉和三七粉的重量份配比為:蘆薈粉:三七粉=99:1。
【文檔編號】A61K9/19GK103479845SQ201310448923
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月28日 優先權日:2013年9月28日
【發明者】張榮軒, 陸大杰 申請人:河南九福來科技集團股份有限公司