花生浸提物的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種花生浸提物的應用。所述花生浸提物用于制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品。本發明還提供了花生活性組分在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用，花生活性組分為整顆花生或花生局部通過乙醇水溶液浸提、非極性樹脂吸附，并經乙醇洗脫、濃縮、干燥步驟制備得到。本發明還提供了花生浸提物、花生活性組分在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥品中的應用。本發明花生浸提物、花生活性組分具有顯著的擬神經生長因子的活性，能夠改善小鼠的認知功能，能夠發揮預防、治療老年性癡呆癥、改善認知及學習記憶能力的作用，為制備預防及治療神經退行性疾病、改善認知及學習記憶能力的食品和藥品提供新思路。
【專利說明】花生浸提物的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及食品、藥品用途領域，尤其涉及整顆花生或局部的浸提物、活性組分在制備預防、治療神經退行性疾病以及改善認知、學習記憶能力的食品和藥品中的應用。
【背景技術】
[0002]隨著全球社會人口的發展，老年人口的增長是世界性的趨勢，而老年性癡呆的患病率和發病率也逐漸增高，老年性癡呆不僅是一個醫學難題，而將成為一個突出的社會問題。目前，全球老年性癡呆患者可能已達1700萬，隨著人口老齡化的進程，老年性癡呆的發病率已上升為常見死亡原因的第4位，僅次于心腦血管病，癌癥和中風。老年性癡呆癥在我國也已逐漸成為嚴重威脅老年人健康的頑癥。
[0003]老年期癡呆 是指老年期發生的癡呆，包括阿爾茨海默病(AD，Alzheimer’ sDementia),血管性癡呆(Vascular dementia),混合性癡呆(mixed dementia)和其他原因所致癡呆。阿爾茨海默病的病理學特征表現為腦內大量淀粉樣老年斑(SP)，神經纖維纏結(NFT)及選擇性神經元和突觸缺失，多種神經遞質尤其是乙酰膽堿嚴重下降，相應地形成了以β淀粉樣蛋白(Αβ )、tau蛋白及神經元缺失三大機制研究領域。
[0004]近年來隨著對AD的神經生理、生化、藥理等方面不斷的深入研究，防治AD的藥物開發研究不斷取得進展。目前對老年癡呆的藥物治療主要是通過抑制acChE來提高患者體內的乙酰膽堿水平，即乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase, AChE)抑制劑,它是臨床上用于治療AD最早最為成熟的一類藥物。目前，對于輕、中度AD患者的治療，經美國FDA批準上市的藥品有4種,他克林(tacrine)、多奈哌齊(donepezil)、利斯的明(Rivastigmine)、加蘭他敏(Galantamine),均為乙酰膽堿酯酶抑制劑。其他的治療藥物如β、Y分泌酶抑制藥，長春胺、尼莫地平等腦代謝調節劑，還有司來吉林、維生素E等影響自由基代謝的藥物等。
[0005]目前用于治療AD的藥物品種繁多，適用于不同的作用機制，它們在某種程度上，是起到了緩解老年癡呆的作用，但是無論是上市或者在研的藥物，都有一定的毒副作用，目前AD仍為一個沒有辦法根治的頑疾。因此，尋找針對AD病因的新的有效治療藥物和方法，成為當今研究的熱點和難點。在眾多的待選藥物中，我們把目光投向了神經生長因子。
[0006]神經生長因子(NGF)屬于神經營養因子(NTF)家族的成員，維持神經元的數量和存活。NGF對神經系統的正常發育及功能維持，促進損傷神經的再生與修復具有重要作用。NGF作為一種可能治療AD的有效方法,但目前仍存在下列問題:⑴價格昂貴；(2)相對分子質量大，不能透過血-腦屏障(Blood Brain Barrier, BBB),只可腦室內注射,長期治療存在許多技術問題。因此，尋找擬NGF活性，并且可以通過血腦屏障的小分子化合物即NGF mimics，已經成為了目前的研究熱點。到目前為止，科學家們已經發現了近百種NGFmimics，可以有效的促進神經細胞增長，部分化合物已經完成了結構修飾或是全合成。目前，NGF mimics已有化合物處于三期臨床階段。
[0007]民以食為天，我國地大物博，果蔬魚肉，山珍海味，十分富饒，人類的生存和繁衍離不開飲食，通過飲食，獲得能量及各種營養以滿足機體的需要。因此，在日常食物中開發具有藥用價值的成分不僅可以避免藥品的毒副作用，還能夠大大降低藥品的研發、生產成本。
【發明內容】
[0008]本發明提供了花生浸提物在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用。
[0009]所述花生浸提物是指水、醇或兩者混合液的浸提物。
[0010]花生浸提物具有顯著的擬神經生長因子的活性，動物藥理學實驗也證明花生浸提物能改善小鼠的記憶障礙 ，因此可將花生浸提物作為有效成分，添加藥學或食品可接受的載體，制備預防、治療老年性癡呆癥(特別是阿爾茨海默病)等神經退行性疾病的食品和藥品O
[0011]所述的食品可接受的載體是指食品領域常規的載體，例如淀粉、蔗糖、微晶纖維素等填充劑，淀粉漿、羥丙纖維素、明膠、聚乙二醇等粘合劑，硬脂酸鎂、微粉硅膠、聚乙二醇類等濕潤劑，聚山梨脂、卵磷脂等吸收促進劑，伯洛沙姆、脂肪酸山梨坦、聚山梨脂等表面活性劑，另外還可以添加香味劑、甜味劑等其它輔劑。
[0012]所述的藥學可接受的載體可參照現有技術。
[0013]將所述的花生浸提物制成藥品后，可以以單位劑量形式給用，給藥途徑可以為腸道或非腸道給藥。
[0014]藥品的劑型可以是固體制劑、液體制劑或半固體劑型，上述各種劑型可采用現有生產方法進行制備。
[0015]所述花生浸提物具體可通過如下方法制備:
[0016]取整顆花生或局部，粉碎后加溶劑浸提，收集浸提液，除去溶劑，干燥，獲得所述浸提物。
[0017]所述溶劑為水、醇或兩者的混合，更優選的，所述溶劑為醇和水的混合溶液。
[0018]所述醇與水的體積比為20:80~80:20，優選為40:60~60:40。
[0019]所述醇為乙醇。
[0020]制備花生浸提物時，可以以花生的整體為原料，也可以以花生的局部如花生仁、花生殼或花生衣為原料，可針對不同的人群如兒童、老人等具體需求相應的進行選擇。
[0021]將整顆花生或局部粉碎后，有利于浸提過程中原料中的活性成分的釋放，一般粉碎至粒度為50~300目，優選為100~150目，更優選為100目。
[0022]通常粒徑越小越有利于活性成分析出，但是如果過細，容易造成原料粉末對活性成分和浸提溶劑(水、醇或兩者的混合液)的吸附量增加，造成活性成分的損失，同時破碎的細胞過多，浸出的雜質多，也導致后續固液分離困難。
[0023]浸提時間為0.5~120h，優選為5~48小時，更優選為24h。
[0024]浸提溫度為20~50°C，優選為25~35°C，更優選為25°C。
[0025]適宜的浸提溫度和時間有利于原料中活性成分的浸出，但是浸提時間過長會使雜質浸出量增加，并容易導致已浸出的活性成分的水解。
[0026]浸提液料比為2:1~50:1，優選為3:1~15:1，更優選為10:1。
[0027]本領域人員可以理解，液料比為浸提液的體積(ml)與原料的質量(g)的比。[0028]濃縮可采用常規的方法進行，濃縮結束后，通常干燥至含水量< 5%。
[0029]花生整體或局部的浸提物可進一步純化，純化后，多酚類化合物的重量百分含量大于50%。
[0030]本發明還提供了花生浸提物在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物中的應用。實驗證明，本發明的花生浸提物能夠改善正常小鼠的學習記憶、認知功能，因此，可利用該花生浸提物來制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物。所述的花生浸提物即上述“花生浸提物在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用”中所涉及的花生浸提物。
[0031]本發明還提供了花生活性組分在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用，所述花生活性組分通過如下方法制備:取整顆花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液過濾后用非極性樹脂進行吸附，水洗后，用乙醇洗脫，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥后制得所述的花生活性組分，其中，所述的局部為花生殼或花生仁。 [0032]動物藥理學實驗證明，本發明的花生活性組分能改善小鼠的認知功能，因此可將花生活性組分作為有效成分，添加藥學或食品可接受的載體，制備預防、治療老年性癡呆癥(特別是阿爾茨海默病)等神經退行性疾病的食品和藥品。其中，藥學或食品可接受的載體可參照上述涉及的相關載體。
[0033]在提取花生活性組分的過程中，浸提的時間為0.5~120h，優選為5~48小時，更優選為24h，浸提的溫度為20~50°C，優選為25~35°C，更優選為25°C。浸提的液料比為3:1~15:1，更優選為10:1，浸提時，乙醇和水的體積比為20:80~80:20，優選為40:60~60:40,更優選為40:60o
[0034]浸提、過濾后，可以先將濾液濃縮后再用樹脂吸附，一般濾液濃縮至1/50體積。
[0035]所述的非極性樹脂可以為XAD、HP、SP等系列的能用于食品和藥品生產的品種。通過非極性樹脂能夠洗脫浸提物中的糖類等極性較強的成分，對活性成分進一步濃縮，同時去除糖類更加適用于老年人，具體的，所述的非極性樹脂可以為HP-20樹脂或XAD16樹脂，最好為XAD16樹脂(羅門哈斯(Amberlite)公司)。
[0036]洗脫時，用乙醇作為洗脫劑，洗脫時，乙醇與非極性樹脂的體積比為2:1~5:1，更優選為4:1。
[0037]本發明還提供了花生活性組分在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物中的應用，所述花生活性組分通過如下方法制備:取整顆花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液過濾后用非極性樹脂進行吸附，水洗后，用乙醇洗脫，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥后制得所述的花生活性組分，其中，所述的局部為花生殼或花生仁。實驗證明，本發明的花生活性組分能夠改善正常小鼠的學習記憶、認知功能，因此，可利用該花生活性組分來制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物。所述的花生活性組分即上述“花生活性組分在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用”中所涉及的花生活性組分。
[0038]與現有技術相比，本發明的有益效果為:
[0039](I)本發明提供了花生浸提物的一種新用途，花生浸提物具有顯著的擬神經生長因子的活性，能夠發揮預防和治療老年性癡呆癥的作用，為制備預防、治療老年癡呆癥等神經退行性疾病的食品和藥品提供新的思路。[0040](2)花生浸提物以日常所食的花生為基本原料，產品安全性高，對人體無毒副作用，且原料來源廣，成本低廉，同時花生浸提物的制備方法簡單、快速，大大降低了產品的研發和生產成本。
[0041] (3)本發明還對花生浸提物進一步純化，純化的花生活性組分具有顯著的擬神經生長因子的活性，能夠發揮預防和治療老年性癡呆癥的作用。
[0042](4)本發明提供了花生浸提物、花生活性組分在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥品的應用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0043]圖1A為48小時后，其中一部分不同處理對PC12細胞神經突起分化影響的顯微照片。
[0044]圖1B為48小時后，另一部分不同處理對PC12細胞神經突起分化影響的顯微照片;
[0045]其中，圖1A~圖1B中；
[0046]a-1 % DMSO,陰性對照；b_40ng/mL NGF,陽性對照；
[0047]C-花生衣 100% 水提物(HSY，lug/mL) ;d_ 花生衣 20% 醇提物(HSY20，lug/mL)；
[0048]e-花生衣 40 % 醇提物(HSY40，lug/mL) ； f-花生衣 60 % 醇提物(HSY60，lug/mL)；
[0049]g-花生衣 80% 醇提物(HSY80，lug/mL) ；h-花生衣 100% 醇提物(HSY100，0.3ug/mL)；
[0050]1-花生殼 100%水提物(HSK，lug/mL) ；j-花生殼 20%醇提物(HSK20，lug/mL)；
[0051]k-花生殼 40% 醇提物(HSK40，lug/mL) ;1_ 花生殼 60% 醇提物(HSK60，lug/mL)；
[0052]m-花生殼 80% 醇提物(HSK80，lug/mL) ；n-花生殼 100% 醇提物(HSK100，0.3ug/mL)；
[0053]ο-花生 100%水提物(HS，3ug/mL) ;p_ 花生 20%醇提物(HS20，3ug/mL)；
[0054]q-花生 40%醇提物(HS40，3ug/mL) ;r_ 花生 60%醇提物(HS60，10ug/mL)；
[0055]s-花生 80%醇提物(HS80，lug/mL) ；t-花生 100%醇提物(HS100，lug/mL)；
[0056]u-花生仁 100%水提物(HSR，lug/mL) ；v-花生仁 20%醇提物(HSR20，lug/mL)；
[0057]w-花生仁40%醇提物(HSR40，10ug/mL) ；χ-花生仁60%醇提物
[0058](HSR60,10ug/mL)；
[0059]y-花生仁80%醇提物(HSR80，lug/mL) ；z-花生仁100%醇提物
[0060](HSR100, lug/mL)。
[0061]圖2a為24和48小時后一部分不同花生衣浸提物對PC12細胞的神經突起分化率的影響。
[0062]圖2b為24和48小時后另一部分不同花生衣浸提物對PC12細胞的神經突起分化
率的影響。
[0063]圖2c為24和48小時后一部分不同花生殼浸提物對PC12細胞的神經突起分化率的影響。
[0064]圖2d為24和48小時后另一部分不同花生殼浸提物對PC12細胞的神經突起分化
率的影響。[0065]圖2e為24和48小時后一部分不同花生浸提物對PC12細胞的神經突起分化率的影響。
[0066]圖2f為24和48小時后另一部分不同花生浸提物對PC12細胞的神經突起分化率的影響。
[0067]圖2g為24和48小時后一部分不同花生仁浸提物對PC12細胞的神經突起分化率的影響。
[0068]圖2h為24和48小時后另一部分不同花生仁浸提物對PC12細胞的神經突起分化
率的影響。
[0069]圖3a為花生衣浸提物對小鼠的Y迷宮試驗影響結果圖。
[0070]圖3b為花生衣浸提物對小鼠的新奇物體辨別實驗影響結果圖；
[0071]圖3c為花生衣浸提物對小鼠的水迷宮試驗影響結果圖。
[0072]圖4a為花 生殼浸提物對小鼠的Y迷宮試驗影響結果圖。
[0073]圖4b為花生殼浸提物對小鼠的新奇物體辨別實驗影響結果圖。
[0074]圖4c為花生殼浸提物對小鼠的水迷宮試驗(登臺潛伏期)影響結果圖。
[0075]圖4d為花生殼浸提物對小鼠的水迷宮試驗(穿臺次數)影響結果圖。
[0076]圖5為48小時后，花生殼活性組分處理對PC12細胞神經突起分化影響的顯微照片。
[0077]圖6a為花生殼組分對小鼠的Y迷宮試驗影響結果圖。
[0078]圖6b為花生殼組分對小鼠的新奇物體辨別實驗影響結果圖。
[0079]圖6c為花生殼組分對小鼠的水迷宮試驗(登臺潛伏期)影響結果圖。
[0080]圖7a為花生仁浸提物對小鼠的Y迷宮試驗影響結果圖。
[0081]圖7b為花生仁浸提物對小鼠的新奇物體辨別實驗影響結果圖。
[0082]圖7c為花生仁浸提物對小鼠的水迷宮試驗(登臺潛伏期)影響結果圖。
[0083]圖7d為花生仁浸提物對小鼠的水迷宮試驗(穿臺次數)影響結果圖。
[0084]圖8為48小時后，花生仁組分處理對PC12細胞神經突起分化影響的顯微照片。
[0085]圖9為花生仁組分對小鼠的水迷宮試驗影響結果圖。
[0086]圖10為全花生浸提物對小鼠的水迷宮試驗影響結果圖。
[0087]圖11為48小時后，全花生組分處理對PC12細胞神經突起分化影響的顯微照片。
[0088]圖12為全花生組分對小鼠的水迷宮試驗影響結果圖。
【具體實施方式】
[0089]下面結合具體實施例進一步闡釋本發明。
[0090]實施例1花生衣浸提物的制備
[0091](I)取IOg花生衣粉碎至100目后，用IOOmL不同乙醇含量的水溶液室溫(25°C )浸提24小時，抽濾，得到浸提液；
[0092](2)將花生衣浸提液濃縮、干燥至含水量為4%后得到花生衣浸提物。
[0093]樣品名、花生衣質量、料液比、乙醇含量及浸提物質量的對應關系參見表1。
[0094]表1實驗因素對花生衣浸提物質量的影響
【權利要求】
1.花生浸提物在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述花生浸提物通過如下方法制備: 取整顆花生或局部，粉碎后加溶劑浸提，收集浸提液，除去溶劑，干燥，獲得所述花生浸提物。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述溶劑為水、醇或兩者的混合。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述溶劑為醇和水的混合溶液。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述醇與水的體積比為20:80~80:20o
6.如權利要求3~5任一項所述的應用，其特征在于，所述醇為乙醇。
7.如權利要求2所述的應用，其特征在于，花生局部為花生衣、花生仁或花生殼。
8.如權利要求2所述的應用，其特征在于，浸提時間為0.5~120h，浸提溫度為20~50。。。
9.如權利要求2所述的應用，其特征在于，浸提液料比為2:1~50:1。
10.花生浸提物在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物中的應用。
11.花生活性組分在制備預防、治療神經退行性疾病的食品和藥品中的應用，所述花生活性組分通過如下方法制備:取整顆花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液過濾后用非極性樹脂進行吸附，水洗后，用乙醇洗脫，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥后制得所述的花生活性組分，其中，所述的局部為花生殼或花生仁。
12.如權利要求11所述的應用，其特征在于，浸提時間為0.5~120h，浸提溫度為20~50。。。
13.如權利要求11所述的應用，其特征在于，浸提時，乙醇與水的體積比為20:80~80: 20 ο
14.如權利要求11所述的應用，其特征在于，所述的非極性樹脂為HP-20樹脂或XAD16樹脂。
15.花生活性組分在制備改善認知、學習記憶能力的食品和藥物中的應用，所述花生活性組分通過如下方法制備:取整顆花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液過濾后用非極性樹脂進行吸附，水洗后，用乙醇洗脫，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥后制得所述的花生活性組分，其中，所述的局部為花生殼或花生仁。
【文檔編號】A61K36/48GK103933111SQ201410175140
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月28日 優先權日:2013年5月2日
【發明者】戚建華 申請人:杭州耐奇睿生物醫藥科技有限公司