一種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物的制作方法
【專利摘要】本發明屬水產養殖疾病防控領域，涉及一種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物，是將金銀花、馬兜鈴粉碎后混合得到混合料，然后用乙醇溶液提取，減壓蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液稀釋或濃縮至瓊脂擴散法抑菌圈直徑為18mm的濃度，備用。本發明針對羅非魚的鏈球菌病進行針對性篩選和組合，將天然中草藥進行科學配伍，協同作用，能有效地抑制環境中鏈球菌的生長繁殖，降低鏈球菌病爆發的風險，可對羅非魚鏈球菌病進行安全高效防治，具有高效、低毒、來源廣泛、不易引起病原菌耐藥等特點，有利于水產養殖業的健康發展。
【專利說明】一種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物
【技術領域】
[0001] 本發明屬水產養殖疾病防控領域，涉及一種鏈球菌病的防治藥物，具體是一種防 治水產動物鏈球菌病的中藥組合物。
【背景技術】
[0002] 鏈球菌是廣泛分布于自然界的革蘭氏陽性菌，大部分為過氧化氫酶陰性的兼性厭 氧菌，呈球形或卵圓形，直徑小于2i!m呈鏈狀排列，最適生長溫度為20?34°C，是人、畜、 魚共患的病原菌，常感染豬、牛、羊、馬、雞等畜禽，最近在水貂、犢牛和兔等類禽畜也發現有 鏈球菌，可引起化膿創和敗血癥，也表現為各種局限性感染，危害嚴重。對水生生物危害方 面，鏈球菌廣泛危害羅非魚、虹鱒、斑點叉尾、牙鲆和多耙等淡海水養殖魚類，其對溫水性魚 類，尤其是對羅非魚的危害最為嚴重。我國是全球最大的羅非魚養殖國，2007年羅非魚養殖 產量達161. 25萬噸，占全球羅非魚產量的62. 1%，羅非魚產品的出口已成為我國水產品出 口創匯的主要品種之一。隨著養殖集約化程度的不斷提高，鏈球菌對羅非魚的養殖以及羅 非魚產業的發展造成了巨大影響，該病發病速度快、流行范圍廣、死亡率高，2009年廣東、海 南、福建和廣西地區養殖羅非魚鏈球菌發病率為20?50 %，死亡率達50?70% ;2011年 以來，羅非魚鏈球菌病不僅發病時間提前，而且危害范圍擴大，逐漸向原來不發病的小規格 魚種和魚苗蔓延，損失極為慘重。目前，鏈球菌病已成為制約羅非魚養殖可持續健康發展的 最主要因素之一。
[0003] 鏈球菌具有多種耐藥和免疫逃避途徑，耐藥途徑方面，僅針對陽離子抗菌肽的耐 藥途徑就存在改變細胞表面電荷、青霉素結合蛋白調節、菌毛調節等途徑；在免疫逃避方 面，研究較多的有莢膜多糖抗原、Alp家族、0蛋白、C5a肽酶、Lmb、FbsA、Sip等介導的途 徑，其中莢膜多糖抗原含有末端唾液酸的成分，是抗吞噬細胞功能的重要因子，0蛋白具有 與人IgA和因子H結合能力，有助于免疫逃避。隨著羅非魚鏈球菌病爆發日益頻繁，許多養 殖場為了控制病害的發生和蔓延，濫用和亂用抗生素等違禁藥物進行疾病防控的現象也大 幅增加，導致養殖羅非魚產品違禁藥物殘留嚴重，已嚴重影響養殖羅非魚產品品質，對消費 者健康和養殖產品出口造成了巨大的潛在威脅。
[0004] 中草藥具有天然、毒副作用少、殘留少、致病菌不易產生抗藥性、資源豐富等優勢， 因其含有與動物的免疫功能密切相關的生物堿、黃酮、茶多酚、低聚糖、精油等，能促進機體 的健康、減少抗生素的使用，其作用既針對致病微生物本身直接的抑制和殺滅作用，又可提 高飼喂動物免疫技能和抗應激能力，因此在動物疾病和預防中發揮了重要的作用。將中草 藥成分作為藥物或者飼料添加劑，用于防治水產養殖中容易出現的病害完全符合發展無公 害水產業、生產綠色水產品的病害防治準則，尤其適用于當前水產業集約化、規模化生產的 需要，便于進行高密度養殖病害的菌體防治，又可增強水產動物的免疫機能，提高養殖的養 成率。因此針對鏈球菌存在的問題，亟需開發一種防治水產養殖動物鏈球菌病的中藥組合 物，以降低鏈球菌的耐藥性和避免抗生素的藥物殘留，促進水產養殖業的健康和可持續發 展。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的是提供一種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物，將天然中草藥進 行科學配伍，協同作用，可對羅非魚鏈球菌病進行安全高效防治，具有高效、低毒、來源廣 泛、不易引起病原菌耐藥等特點。
[0006] 本發明所采用的技術方案：
[0007] -種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物，是將金銀花、馬兜鈴粉碎后混合得到 混合料，然后用60?80%的乙醇溶液在常溫或加熱至60°C以下提取1?4h，減壓蒸餾回收 全部乙醇，收集剩余提取液稀釋或濃縮至瓊脂擴散法抑菌圈直徑為18mm的濃度，備用。所 述混合料中金銀花與馬兜鈴的重量比為1:1。
[0008] 在提取過程中，乙醇溶液與混合料的體積質量比為18?22 :1(L:kg)。
[0009] 應用方法：將中藥組合物提取液拌入飼料中（分為1號飼料和2號飼料，1號飼料 每千克飼料拌200ml藥液，2號飼料每千克飼料拌100ml藥液），首次投喂采用1號飼料投 喂，之后采用2號飼料投喂，按魚體重的1?2%進行投喂，一天投喂兩次，連續投喂14d。
[0010] 本發明針對羅非魚的鏈球菌病進行針對性篩選和組合，將天然中草藥進行科學配 伍，協同作用，能有效地抑制環境中鏈球菌的生長繁殖，降低鏈球菌病爆發的風險，可對羅 非魚鏈球菌病進行安全高效防治，同時也能避免抗生素的濫用，具有高效、低毒、來源廣泛、 不易引起病原菌耐藥等特點，有利于水產養殖業的健康發展。
【具體實施方式】
[0011] 下面結合實施例，對本發明的【具體實施方式】作進一步詳細描述。以下實施例用于 說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。所述實施例中的實驗方法，如無特別說明，均為 常規方法。
[0012] 實施例一
[0013] 分別將金銀花、馬兜鈴粉碎后按重量比為1:1的比例混合得到混合料，按乙醇溶 液與混合料的體積質量比為20 :1的比例用60%的乙醇溶液提取4h，提取溫度50°C。減壓 蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液，備用。
[0014] 實施例二
[0015] 分別將金銀花、馬兜鈴粉碎后按重量比為1:1的比例混合得到混合料，按乙醇溶 液與混合料的體積質量比為22 :1的比例用70%的乙醇溶液提取3h，提取溫度40°C。減壓 蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液，備用。
[0016] 實施例三
[0017] 分別將金銀花、馬兜鈴粉碎后按重量比為1:1的比例混合得到混合料，按乙醇溶 液與混合料的體積質量比為19 :1的比例用80%的乙醇溶液提取2h，提取溫度30°C。減壓 蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液，備用。
[0018] 試驗：
[0019] 1、抑菌效果
[0020] 采用60%、70%和80%乙醇、料液比1:18. 7(g/ml)、浸提溫度39°C、浸提時間2h 的提取方法分別提取金銀花、馬兜鈴，減壓蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液，備用。
[0021] 采用瓊脂擴散法測實施例所得提取液的抑菌效果，以金銀花、馬兜鈴的單質提取 液為對照，結果見表1。
[0022] 表1各提取液的抑菌效果
[0023]
【權利要求】
1. 一種防治水產動物鏈球菌病的中藥組合物，其特征在于：是將金銀花、馬兜鈴粉碎 后混合得到混合料，然后用60?80%的乙醇溶液在常溫或加熱至60°C以下提取1?4h，減 壓蒸餾回收全部乙醇，收集剩余提取液稀釋或濃縮至瓊脂擴散法抑菌圈直徑為18mm的濃 度，備用；所述混合料中金銀花與馬兜鈴的重量比為1:1。
2. 根據權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于：乙醇溶液與混合料的體積質量比 為 18 ?22 :1。
【文檔編號】A61P31/04GK104257721SQ201410568884
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月23日 優先權日:2014年10月23日
【發明者】郭偉良, 周永燦, 胡文婷, 謝珍玉, 王世鋒, 鄧恒為, 王文慧 申請人:海南大學