以山綠茶總三萜為原料的抗腫瘤藥物制劑的制作方法
【專利摘要】以山綠茶總三萜為原料的抗腫瘤藥物制劑，涉及醫藥【技術領域】，本發明制劑包括山綠茶總三萜和至少一種藥用賦形劑。本發明利用山綠茶總三萜對多種人體腫瘤細胞具有很強的細胞毒作用，該化合物可劑量依賴性的將人肝癌細胞阻滯在G1-S期，但不影響人體正常細胞的活力和功能。同樣，此化合物對人癌細胞株裸鼠移植瘤模型A375和HepG2實體瘤具有強力抑制作用，抑瘤率均在50%以上，次作用下未引起荷瘤裸鼠重要臟器的病理損害。
【專利說明】以山綠茶總三萜為原料的抗腫瘤藥物制劑
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥【技術領域】，尤其涉及抗腫瘤藥物的研究技術。
【背景技術】
[0002] 山綠茶是冬青科冬青屬植物海南冬青的葉，山綠茶總三萜為山綠茶提取的有效部 位。如專利文獻CN2012103974798公開了一種從山綠茶中提取山綠茶總三萜的方法，并且， 還公開了山綠茶總三萜在治療心血管疾病方面，特別是動脈粥樣硬化方面具有潛在的開發 價值。
[0003] 但至今未見有文獻報道山綠茶的總三萜在抗腫瘤藥物方面的應用技術。
【發明內容】
[0004] 本發明目的在于提出一種以山綠茶總三萜為原料的抗腫瘤藥物制劑。
[0005] 本發明制劑包括山綠茶總三萜和至少一種藥用賦形劑。
[0006] 按藥劑學方法，可以將本發明的山綠茶總三萜制備成多個臨床藥物劑型用于抗 腫瘤，包括口服制劑和非腸道給藥的劑型。所指的口服制劑選自于膠囊劑、片劑、丸劑、顆 粒劑、懸浮劑、滴丸劑、口服液體制劑中的任何一種，所指的非腸道給藥劑型為注射劑、氣霧 齊U、栓劑或皮下給藥制劑的任何一種。
[0007] 本發明的抗腫瘤藥物中的輔料是指常規的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐 齊IJ、著色劑、粘合劑等。本發明抗腫瘤藥物中的其他配伍用的藥物，指的是有效劑量的山綠 茶總三萜為一定的藥物原料，再配伍其他已允許合用的中藥或化學藥品。
[0008] 本發明所指的抗腫瘤活性為抗肝癌、胃癌、肺癌、大腸癌、宮頸癌、皮膚癌等多種腫 瘤的抑制活性。山綠茶總三萜對多種人體腫瘤細胞具有很強的細胞毒作用。該化合物可劑 量依賴性的將人肝癌細胞阻滯在Gl-S期，但不影響人體正常細胞的活力和功能。同樣，此 化合物對人癌細胞株裸鼠移植瘤模型A375和H印G2實體瘤具有強力抑制作用，抑瘤率均 在50%以上，次作用下未引起荷瘤裸鼠重要臟器的病理損害。可見，山綠茶總三萜具有高效 抗癌且低毒等特點。據此，山綠茶總三萜用于制備抗腫瘤藥物和預防腫瘤發生的藥品或保 健食品。
[0009] 本發明所述山綠茶總三萜占制劑總質量的1%?99%，優選為30%?80%，更優選為 60% ?70%。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010] 圖1為人肝細胞癌HepG2細胞周期的流式細胞儀分析圖。
[0011] 圖2為在人肝細胞癌!fepG2中加入25μg/mL山綠茶總三萜后細胞周期的流式細 胞儀分析圖。
[0012] 圖3為在人肝細胞癌!fepG2中加入50μg/mL山綠茶總三萜后細胞周期的流式細 胞儀分析圖。
[0013] 圖4為在人肝細胞癌H印G2中加入100μg/mL山綠茶總三萜后細胞周期的流式細 胞儀分析圖。
[0014] 圖5為在人肝細胞癌H印G2中加入200μg/mL山綠茶總三萜后細胞周期的流式細 胞儀分析圖。
[0015] 圖6是山綠茶總三萜對人肝癌H印G2細胞周期的影響圖。
[0016] 圖7為模型組和山綠茶總三萜25、50、100、200 11^/1^4個劑量組的山綠茶總三萜 對裸鼠移植瘤模型A375實體瘤的生長抑制率關系圖。
[0017] 圖8為模型組和山綠茶總三萜25、50、100、200 11^/1^4個劑量組對裸鼠移植瘤模 型A375實體瘤抑制作用后的瘤重散點圖。
[0018] 圖9是山綠茶總三萜對裸鼠重要臟器組織學切片的影響對比圖。
【具體實施方式】
[0019] 下面通過具體實例對本發明作進一步說明，但這些實例只是為了說明，而不是對 本發明的限制。
[0020] 一、各制劑的制備： 實施例1 :膠囊的制備工藝：山綠茶總三萜250g，干燥淀粉2500g，將淀粉與山綠茶總三 萜充分混合，過120目篩，充分混勻后制備膠囊1000粒，每粒含山綠茶總三萜250mg。
[0021] 實施例2 :滴丸的制備工藝：600g聚乙二醇水浴溶化后加入200g山綠茶總三萜， 充分攪拌后置于保溫管中，后采用液體石蠟包裹，吸干石蠟油后加入少量滑石粉混勻，制備 滴丸1000丸。
[0022] 實施例3 :片劑制備工藝：山綠茶總三萜100g，淀粉lOOOg，糖粉200g，適量乙醇， 混合制粒后，經整粒機處理后，壓片分裝。
[0023] 實施例4 :注射劑制備工藝：山綠茶總三萜10g，丙二醇20ml，聚乙二醇40ml，注射 用水200ml，將各原料混合后水浴加熱0. 5h，注射用水加至500ml，超聲處理10min，水浴加 熱0. 5h，調節pH值至5. 5?6. 5,過濾澄清，灌封滅菌即得。
[0024] 二、山綠茶總三萜對人肝細胞癌HEPG2細胞活力的影響試驗： 取對數生長期的肝癌細胞株H印G2,0. 25 %胰蛋白酶消化，收集消化狀態下的細胞，計 數細胞，用DMEM培養基稀釋成IO3-IO4個/100μ1濃度的單細胞懸液，每孔100μ1，接種 到96孔板上，置37°C，5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中，培養24h后，空白對照組加入緩沖 液PBS，陰性對照組用等體積DMEM培養液，陽性對照組加入不同濃度順鉬溶液，實驗組加入 不同濃度山綠茶總三萜（12. 5，25，50，100和200μg/mL),每個濃度設6個復孔,每孔 20μ?。96孔板置37 °C、5 %CO2、飽和濕度的細胞培養箱中，培養4h后，加入5mg/ml MTT，每孔10μ1，培養4h，每孔加入150μIDMS0,搖床振蕩10min，酶標儀測定吸光度，吸 收波長為570nm。
[0025] 測定48h0·D.值，根據GraphPadPrism軟件計算山綠茶三廠對人肝癌細胞的半 數抑制濃度（IC5tl),結果見表1。
[0026]表1:山綠茶總三萜對十三種人腫瘤細胞株的抑制作用。
【權利要求】
1. 以山綠茶總三萜為原料的抗腫瘤藥物制劑，其特征在于所述制劑包括山綠茶總三萜 和至少一種藥用賦形劑。
2. 根據權利要求1所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總三萜占制劑總質量的1%? 99%。
3. 根據權利要求2所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總三萜占制劑總質量的 30% ?80%。
4. 根據權利要求3所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總三萜占制劑總質量的 60% ?70%。
5. 根據權利要求1或2或3或4所述藥物制劑，其特征在于所述制劑的劑型為顆粒劑、 膠囊劑、片劑、滴丸劑、口服液體制劑或注射劑。
【文檔編號】A61K36/185GK104398546SQ201410764972
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年12月15日 優先權日:2014年12月15日
【發明者】孫云, 王德俊, 劉暢, 張亞琦 申請人:揚州大學