一種從新鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種從新鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法，屬核桃青皮多酚的 制備技術領域。
【背景技術】
[0002]核桃青皮(walnut green husk)又名胡桃青龍，是核桃外部一層厚厚的綠色外果 皮。核桃青皮味辛苦，性澀平、微寒，具有清熱解毒、祛風療癬、止痛止痢功效，現代藥理研究 表明核桃青皮具有抗腫瘤、鎮痛、抗菌消炎等活性。核桃青皮富含多酚，多酚具有抗氧化、抗 輻射、抗病毒、降脂、抑菌、延緩衰老、提高機體免疫能力、抑制高脂血癥總膽固醇(TC)、甘油 三酯(TG)升高、抑制肝脂質過氧化、提高超氧化物歧化酶(SOD)活力、減少自由基生成、預防 和治療高脂血癥、抑制心血管疾病等作用。
[0003] 現報道的核桃青皮多酚提取純化方法有：
[0004] 1、以干燥粉碎的核桃青皮粉為原料經乙醇水提、有機溶劑萃取核桃青皮總單寧的 方法（ZL2009100700385);
[0005] 2、以核桃青皮粉碎后用加水拌合超聲波破壁提取，固液分離，分子超濾膜分級分 離純化，然后納濾膜濃縮，減壓外循環濃縮，微波干燥，獲得核桃青皮單寧酸的方法 (ZL2011101155114)；
[0006] 3、一種核桃青皮晾干粉碎，用果膠酶和纖維素酶水溶液酶解、酶解液明膠沉淀、沉 淀物乙酸乙酯萃取、萃取液氧化鋁層析分離獲取核桃鞣質的方法(CN2013102461953);
[0007] 4、一種亞臨界水提取核桃青皮粉色素多酚的方法(CN2015106713562);
[0008] 5、一種超聲水提取核桃青皮粉多酚的方法(CN2014103330145);
[0009] 6、朱霞，劉育聰，吳振琳，郭麗娟，羅游，李煥榮.響應面法優化超聲波提取核桃青 皮多酚的工藝研究[J].食品科，2014,39(11):207~211;
[0010] 7、乙醇提取的核桃青皮多酚浸膏的大孔吸附樹脂分離純化核桃青皮總多酚方法 【李瓊，陳愷，陳燕勤，李煥榮.大孔吸附樹脂分離純化核桃青皮總多酚[J].食品與機械， 2015,31(1):175~180】。
[0011]上述方法均采用干燥粉碎的核桃青皮粉，用水提或乙醇或甲醇水提取，然后再進 行分離純化;存在新鮮核桃青皮需先干燥，需要消耗熱量、自然干燥時間長、且核桃收獲季 節氣候極不利于自然干燥，提取純化需要大量有機溶劑、干燥及提取溫度較高、有效成分易 被破壞的問題。
[0012]我國核桃種植面積和產量均居世界第一，云南又居全國之首，其種植面積超過 2400萬畝，核桃采收期間，大量的核桃青皮廢棄于田間、地頭或溝邊，不僅造成環境污染和 資源浪費，還會產生化感現象、干擾其它植物的生長繁殖，加強核桃青皮資源的開發利用研 究，對核桃產業的健康發展具有重要意義。
【發明內容】
[0013] 本發明的目的在于克服現有從核桃青皮中制備核桃青皮多酚方法中的不足，而提 供一種從新鮮核桃青皮制備青皮多酚的方法。
[0014] 本發明的一種從新鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法，不需要對新鮮核桃青 皮進行干燥、粉碎和提取，具體包括以下步驟：
[0015] a)剝取新鮮核桃青皮，用榨汁機榨汁；
[0016] b)將前述汁液于3000~4500轉/分鐘，離心10~20分鐘，之后分離上層液體和下面 殘渣；
[0017] C)將步驟b得到的上層液體的pH值調至3~4,混勻；
[0018] d)將步驟C得到的溶液以上樣液多酚濃度2-3mg/mL，上樣液pH3~4,上樣體積為 1.6BV，上樣流速為2BV/h加入到其內裝有1000-2000克AB-8型樹脂的層析柱中；
[0019] e)在步驟d中的層析柱中加入水，用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色；
[0020] f)以體積百分數為65 %~75 %的乙醇洗脫步驟e中的層析柱，洗脫流速1~2BV/h， 洗脫體積2. IOBV;
[0021] g)收集步驟f中從層析柱下方流出的洗脫液；
[0022] h)將步驟g得到的洗脫液真空濃縮至溶液的固溶物含量>52%~55% ;其中：真空 度0 · 065Pa~0 · 09Pa，溫度55 cC ~60 cC ;
[0023] i)將步驟h中得到的濃縮液真空冷凍干燥得核桃青皮多酚;其真空冷凍干燥程序 如下： 千燥時段： 1、 2、 3s： 4、 5、 ：6s: 7s :8 :;
[0024] 千燥溫度sC: -50, -50, -10 , -Ss 0、4、 10、 10? 干燥時間 h: 6、： 6、 6 12 9、4、 4、 3 ；
[0025]干燥系統真空度Pa:8個干燥時段均為< 9。
[0026]本發明方法所用的試劑及儀器均為是市場購買。
[0027]本發明的有益效果在于：
[0028] 1.制備溫度低，不需將新鮮核桃青皮先干燥和粉碎，避免常規煎煮法和回流提取 法中需對新鮮核桃青皮干燥和粉碎，避免干燥中長時間加熱對多酚的不良影響。
[0029] 2.不需采用乙醇或甲醇溶劑進行提取，鮮核桃青皮榨汁后，直接用AB-8型樹脂分 離純化核桃青皮汁，避免常規煎煮法和回流提取法中需用乙醇或甲醇提取，避免提取中長 時間加熱對多酚的不良影響，避免消耗大量的有機溶劑。
[0030] 3.采用新鮮核桃青皮為原料，榨汁后和離心處理后，直接利用AB-8型樹脂分離純 化核桃青皮汁中的多酚，有效的減少了核桃青皮在加熱干燥過程中與空氣和熱量長時間接 觸而發生的氧化，快速分離純化出其中多酚，使核桃青皮多酚純度從9%提高到53%。
【具體實施方式】
[0031] 實施例所用的從新鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法同
【發明內容】
部分所述。 實施例所用的試劑及儀器均為是市場購買。
[0032] 本發明的技術方案，通過如下實施方式予以進一步說明。
[0033] 實施例一：
[0034] 新鮮核桃剝取新鮮核桃青皮，新鮮核桃青皮用榨汁機榨汁，汁液于3000轉/分鐘， 離心20分鐘，之后分離上層液體和下面殘渣，上層液體的pH值調至3，混勻，以上樣液多酚濃 度2mg/mL，上樣體積1.6BV，上樣流速2BV/h加入到其內裝有1000克AB-8型樹脂的層析柱中， 在層析柱中加入水，并用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色后，以體積分數為65%的 乙醇洗脫層析柱，洗脫流速lBV/h，洗脫體積2. IOBV，收集從層析柱下方流出的洗脫液，將該 洗脫液在真空度0. 〇65Pa、溫度60°C時真空濃縮至溶液的固溶物含量52 %后，真空冷凍干燥 得核桃青皮多酸，其真空冷凍干燥程序如下： 干燥時段： 1、 .1' 3、 4、 5, :6、 ?:、 8 ：；：
[0035] 干燥溫度 °C: -50、-50、 -10、-5、 0、4、10、10；； 干燥時間 h: 6、 6, 6, 12、 9、 4、 4, 3 ?：
[0036]干燥系統真空度Pa:8個干燥時段均為< 9。
[0037] 實施例二：
[0038] 新鮮核桃剝取新鮮核桃青皮，新鮮核桃青皮用榨汁機榨汁，汁液于4500轉/分鐘， 離心10分鐘，之后分離上層液體和下面殘渣，上層液體的pH值調至4,混勻，以上樣液多酚濃 度3mg/mL，上樣體積1.6BV，上樣流速2BV/h加入到其內裝有2000克AB-8型樹脂的層析柱中， 在層析柱中加入水，并用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色后，以體積分數為70%的 乙醇洗脫層析柱，洗脫流速2BV/h，洗脫體積2. IOBV，收集從層析柱下方流出的洗脫液，將該 洗脫液在真空度0. 〇8Pa、溫度58°C時真空濃縮至溶液的固溶物含量54%后，真空冷凍干燥 得核桃青皮多酸，其真空冷凍干燥程序如下： 干燥時段： 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8
[0039] 千燥溫度°C: -50s -50, -1:0、-5、 0、4、 10, 10；： 干燥時間 k 6、 6、 6、 12、 9、 4、 4、 3 ；
[0040] 干燥系統真空度Pa:8個干燥時段均為< 9。
[0041] 實施例三：
[0042]新鮮核桃剝取新鮮核桃青皮，新鮮核桃青皮用榨汁機榨汁，汁液于4000轉/分鐘， 離心15分鐘，之后分離上層液體和下面殘渣，上層液體的pH值調至3.6，混勻，以上樣液多酚 濃度2.5mg/mL，上樣體積1.6BV，上樣流速2BV/h加入到其內裝有1500克AB-8型樹脂的層析 柱中，在層析柱中加入水，并用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色后，以體積分數為 75%的乙醇洗脫層析柱，洗脫流速1~2BV/h，洗脫體積2.10BV，收集從層析柱下方流出的洗 脫液，將該洗脫液在真空度0. 〇9Pa，溫度55 °C下真空濃縮至溶液的固溶物含量55 %后，真空 冷凍干燥得核桃青皮多酚，其真空冷凍干燥程序如下： 干燥時段： 1、 2、： 3、 4、 5> 6、 7、 8 ；
[0043] 干燥溫度。C: -50、-50、 -1:0、-5、 0、4、 10、1? 千燥時間 h: 6 % 6、 6、： 12、 .9:、'4、： .4.、 3 *?
[0044] 干燥系統真空度Pa:8個干燥時段均為< 9。
【主權項】
1. 一種從鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法，其特征在于該方法包括如下步驟： a) 剝取新鮮核桃青皮，用榨汁機榨汁； b) 將前述汁液于3000~4500轉/分鐘，離心10~20分鐘，之后分離上層液體和下面殘 渣； c) 將步驟b得到的上層液體的pH值調至3~4,混勻； d) 將步驟c得到的溶液以上樣液多酚濃度2~3 m g / m L，上樣液p Η 3~4，上樣體積為 1.6BV，上樣流速為2BV/h加入到其內裝有1000~2000克ΑΒ-8型樹脂的層析柱中； e) 在步驟d中的層析柱中加入水，用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色； f) 以體積百分數為65%~75%的乙醇洗脫步驟e中的層析柱，洗脫流速1~2BV/h，洗脫 體積2.10BV; g) 收集步驟f中從層析柱下方流出的洗脫液； h) 將步驟g得到的洗脫液真空濃縮至溶液的固溶物含量>52 %~55 % ;其中：真空度 0 · 065Pa~0 · 09Pa，溫度55 Γ ~60 Γ ; i) 將步驟h中得到的濃縮液真空冷凍干燥得核桃青皮多酚;其真空冷凍干燥程序如下： 干燥時段： 1、 2、 3、 4、 5、6、7、 8； 干燥溫度。C: -50、-50、-10、-5、0、4、10、10； 干燥時間 h: 6、 6、 6、 12、9、4、4、 3; 干燥系統真空度Pa: 8個干燥時段均為< 9。
【專利摘要】本發明涉及一種從新鮮核桃青皮中制備核桃青皮多酚的方法，屬核桃青皮多酚制備技術領域。本發明方法的工藝流程是：新鮮核桃青皮榨汁，離心，固液分離，將液體pH值調至3～4后，以上樣液多酚濃度2?3mg/mL，上樣液pH3～4，上樣體積1.6BV，上樣流速2BV/h加入到其內裝有AB?8型樹脂的層析柱中，用水洗滌至從層析柱下方流出的液體無色后，以65～75％乙醇洗脫，洗脫流速1～2BV/h，洗脫體積2.10BV。收集65～75％乙醇洗脫液，真空濃縮，真空干燥得含量為53％的核桃青皮多酚。本發明方法與傳統方法相比較，減少了核桃青皮干燥和用有機溶劑提取的步驟，縮短了青皮與空氣的接觸時間，減少了核桃青皮多酚的氧化，有效的保護多酚物質，顯著地節約了熱量和有機溶劑消耗量。
【IPC分類】A61K131/00, A61K36/52
【公開號】CN105708894
【申請號】CN201610107933
【發明人】趙聲蘭, 陳丹, 張旭, 趙慶宇婧, 曹麗娟
【申請人】云南中醫學院