青蒿素類化合物在制備治療神經病理性疼痛和/或并發癥的藥物中的應用的制作方法

本申請涉及一種青蒿素類化合物的新制藥用途，特別是在制備治療神經病理性疼痛和/或其并發癥藥物中的制藥用途。

背景技術：

神經病理性疼痛是一種由神經系統的原發損害或功能障礙引發的疼痛。流行病學研究顯示，神經病理性疼痛的人群患病率高達8％，中國約有9000萬患者急需安全有效的針對性治療。因病因復雜，神經病理性疼痛難以在疾病早期得到重視，待就醫時，約有50％的患者已并發諸如重性抑郁、焦慮等嚴重的精神類癥狀。導致痛敏癥狀延綿反復，嚴重影響患者生活質量，給患者及社會帶來巨大的經濟負擔與壓力。

鑒于以上病理特點，神經病理性疼痛急需高效鎮痛，長效鎮痛，兼顧疼痛誘發的精神癥狀，毒性低，耐藥性低的針對性藥物。雖同屬于慢性疼痛，神經病理性疼痛與炎癥性疼痛存在本質上的差別。現有技術中治療神經病理性疼痛的臨床一線藥物有普瑞巴林(pregabalin,pgb)、三環類抗抑郁藥、阿片類鎮痛藥物。然而現有的藥物普遍存在各種問題，藥效不能令人滿意。

普瑞巴林(pregabalin,pgb)為食品與藥品監督管理局批準并大量應用于臨床的一線藥品。臨床研究顯示，即便高劑量使用(600mg)也僅對部分患者(約38％)有短暫的鎮痛效果。并且，高劑量的使用大大增加了患者頭暈、嗜睡、共濟失調、意識模糊、乏力、思維異常、視物模糊、運動失調、口干、水腫、體重增加及、注意困難等副反應癥的出現，并對抑郁等并發性精神類癥狀無顯著效果。三環類抗抑郁藥副反應強烈，具有嚴重的心臟毒性，導致臨床停藥率高達15-20％。阿片類鎮痛藥物則具有耐藥性及成癮的風險，不適合長期使用。

由此可見，穩定有效地緩解痛敏癥狀及并發精神系統癥狀、降低毒副作用將是神經病理性疼痛新藥的研發目標。

中國中醫科學研究院中藥研究所自七十年代開始，在屠呦呦研究員的帶領下，進行了對青蒿素類藥物的深入研究。現已證明青蒿素類藥物具有毒性低、安全性高的特點，已被廣泛應用于炎癥性疾病中，包括瘧疾、系統性紅斑狼瘡等。除了上述廣泛應用的治療或制藥用途以外，青蒿素及其類似物還用于以下與本申請相關的制藥用途。

cn1561994a(公開日2009年01月12日)公開了青蒿素類藥物在治療類風濕性關節炎中具有一定效果。然而，神經病理性疼痛不同于一般的炎癥性疼痛。在諸如類風濕性關節炎等炎癥性疼痛中，其中樞敏化過程是依賴于外周損傷性刺激，即依賴于外周炎癥的存在及傷害感受神經元的異常激活的，其痛覺癥狀會伴隨外周損傷或炎癥的治愈而自然消失。因此，對于炎癥性疼痛，外周炎癥的緩解在疼痛感的治療中具有顯著的療效；而神經病理性疼痛在外周損傷或炎癥消失后，痛覺癥狀仍持續而強烈。其內在機理為，初期外周炎癥或損傷引發脊髓背角神經元、上行傳入神經元及多個腦核團內神經元異常放電，造成外周及中樞敏化，在炎癥或外周損傷愈合后，中樞敏化過程依然持續。神經病理性疼痛中，中樞敏化過程雖起源于外周但不依賴于外周損傷，因此在神經病理性疼痛中，僅針對外周損傷或炎癥治療并無顯著的療效。由于病理機理不同，本領域技術人員難以基于青蒿素類藥物對風濕性關節炎的效果聯想到神經病理性疼痛。

cn102884428a(公開日2013年01月16日)記載了青蒿琥酯與抑郁的相關性，然而該表述是由于其中文譯文錯誤地將artn基因的英文縮寫翻譯為青蒿琥酯而產生的，事實上該文件并不包含任何關于青蒿琥酯與抑郁的研究性內容。目前，尚未有任何報道指出青蒿素類藥物對神經病理性痛誘發抑郁具有治療效果。

cn103948585a(公開日2014年07月30日)公開了青蒿素類藥物在神經退行性疾病中的潛在應用價值。雖然神經退行性疾病和神經病理性疼痛均為涉及神經的疾病。但首先，神經推行性疾病與神經病理性疼痛的病理機制完全不同，因而本領域技術人員難以基于青蒿素類藥物對神經退行性疾病的效果聯想到神經病理性疼痛。其次，該文件中所有實施例均僅限于細胞水平，本領域技術人員無法由細胞水平的實驗效果推斷出其在整體動物中的藥效，尤其是對于神經病理性疼痛及其并發精神癥狀，這種病理機理涉及整個神經系統的病癥。

技術實現要素：

本申請要解決的技術問題為提供一種具有治療神經病理性疼痛和/或其并發癥狀性能的化合物、其產品、及其在治療和制藥中的用途。

本申請技術方案的第一方面為提供一種用于治療神經病理性疼痛和/或其并發癥狀的青蒿素類化合物。

所述青蒿素類化合物為：

a)：青蒿素，

b)：以青蒿素為結構母核，在體內以雙氫青蒿素為活性形式的青蒿素衍生物，

或c)：a)或b)藥學上可接受的鹽。

進一步地，所述青蒿素類化合物包括但不限于青蒿素、雙氫青蒿素、去氧青蒿素、青蒿素甲酯、青蒿素乙酯、蒿甲醚、蒿乙醚和/或青蒿琥酯。

進一步地，所述藥學上可接受的鹽包括但不限于與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、碳酸、甲酸、乙酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、扁桃酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、谷氨酸、天冬氨酸反應而獲得的鹽。

所述青蒿素類化合物是商業上可獲得的，并且也可使用本領域技術人員已知的常規方法進行制備。

本申請技術方案的第二方面為提供一種用于治療神經病理性疼痛和/或其并發癥狀的含青蒿素類化合物的組合物。

進一步地，所述組合物包括藥物組合物。

進一步地，所述藥物組合物包含一種或多種可接受的載體、助劑、和/或輔料。

進一步地，所述組合物進一步包含已知的治療神經病理性疼痛和/或其并發精神癥狀的其他活性成分。

本申請技術方案的第三方面為提供一種用于治療神經病理性疼痛和/或其并發癥狀的青蒿素類化合物的生產原料。

進一步地，所述青蒿素類化合物的生產原料包括青蒿素類化合物的原料藥、中藥藥材、生物合成載體。優選所述青蒿素類化合物的生產原料為中藥青蒿。

本申請技術方案的第四方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產原料在制備治療、預防和/或緩解神經病理性疼痛和/或其并發癥狀的藥物中的用途。

進一步地，所述藥物包括常規的多種劑型，包括但不限于口服劑、栓劑、注射劑、涂敷劑。

進一步地，所述藥物包括常規的多種劑型，包括但不限于脂質體制劑、納米顆粒制劑、固體分散劑、自乳化劑、經皮給藥劑、β-環糊精包合物、磷脂復合物。

進一步地，所述藥物的給藥途徑包括靜脈內、經皮、皮內、皮下、肌內、腹膜內、口腔、直腸、鼻內或其組合。

本申請技術方案的第五方面為前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產原料的在治療、預防和/或緩解神經病理性疼痛和/或其并發癥狀中的用途。

本申請技術方案的第六方面為一種治療、預防和/或緩解神經病理性疼痛和/或其并發癥狀中的方法，使用了前述青蒿素類化合物、含青蒿素類化合物的組合物和/或青蒿素類化合物的生產原料。

本申請所述神經病理性疼痛為由神經系統原發性損害和功能障礙所激發或引起的疼痛。其屬于一種慢性疼痛，臨床表現包括但不限于自發性疼痛、痛覺過敏、異常疼痛、感覺異常。

本申請所述神經病理性疼痛并發癥狀包括精神癥狀，其包括但不限于抑郁、焦慮、認知功能障礙和/或上述癥狀的組合。

有益效果

本申請相較現有針對神經病理性疼痛和/或其并發癥的一些藥物具有以下效果：

1)對神經病理性疼痛具有確定、顯著的治療效果；

2)能夠同時抑制神經病理性疼痛和抑制其并發癥；

2)對神經病理性疼痛中的慢性疼痛療效持久，耐藥性低；

3)毒副作用低，用藥安全；

4)成本低廉，制備簡單。

附圖說明

圖1雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的鎮痛療效。

圖2a雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖2b雙氫青蒿素早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖3雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的鎮痛療效。

圖4a雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(強迫游泳)。

圖4b雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗抑郁療效(懸尾檢測)。

圖4c雙氫青蒿素晚期(造模后第18天)給藥的抗焦慮療效(曠場檢測)。

圖5青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的鎮痛療效。

圖6a青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖6b青蒿琥酯早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

圖7蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的鎮痛療效。

圖8a蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗抑郁療效。

圖8b蒿甲醚早期(造模后第4天)給藥的抗焦慮療效。

具體實施方式

以下實施例通過證實雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚在降低小鼠snl模型中神經病理性疼痛的機械痛敏、抑制焦慮和/或抑郁中均具有確切而顯著的治療效果，以證明青蒿素類化合物具有治療神經病理性疼痛和/或其并發癥狀的效果，能夠用于治療所述疾病或制備相關藥物。

其中選擇小鼠snl模型的理由在于其為公認較好的神經病理性疼痛模型，其痛覺癥狀穩定，個體差異小，誘發抑郁、焦慮、認知功能障礙的癥狀也較穩定。

實驗例1：實驗準備、模型構建及檢測方法

1、實驗動物

清潔級8周成年雄性c57/bl6小鼠，體重24-26g,由北京市維通利華實驗動物技術有限公司提供，動物合格證編號syxk-2010-0034.

2、實驗分組

小鼠在適應環境4天后，稱量體重，并進行曠場檢測、強迫游泳檢測及懸尾檢測，剔除體重低于23克，曠場試驗中心場停留時間小于15秒，強迫游泳不動時間超過160秒，或懸尾檢測不動時間在50-100秒以外的個體，而后隨機分組，即假手術組，模型snl組、及用藥組，每次平行實驗中的每組大于12只。

3、小鼠神經病理性疼痛模型的建立方法

本申請采用脊神經結扎的方法(thespinalcordligation,snl)制備小鼠神經病理性疼痛模型。

具體方法如下：模型組合用藥組以戊巴比妥鈉麻醉，解剖鏡下暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經，以6號眼科線對第5脊神經進行結扎，術后縫合。假手術組在以戊巴比妥鈉麻醉后，僅暴露第六腰椎橫突，將橫突剪去，分離第6、5、4脊神經，直接術后縫合。觀察所有小鼠術后行動狀態，剔除運動行為受損個體。由于造模成功率一般在70％左右，在造模穩定的第4天對小鼠模型進行鑒定。對所有動物進行機械痛閾檢測，在模型組及用藥組小鼠中剔除對vonfrey探針0.16g及以上有痛敏反應的個體，在假手術組中剔除對vonfrey探針0.16g及以下有痛敏反應的個體。

4、機械痛閾檢測

以vonfrey法進行機械痛閾值檢測。有感探針壓力越高表示痛閾越高。

5、強迫游泳檢測：抑郁行為

于實驗前一天進行游泳訓練，將小鼠放入深度高于16cm，溫度為20℃的深水區中，游泳12分鐘。實驗當天，將小鼠放入深度高于16cm,溫度為20℃的有限空間中，進行6分鐘強迫游泳實驗，并記錄后4分鐘內，小鼠停止掙扎的總時長。該時長越長表示抑郁程度越重。

6、懸尾檢測：抑郁行為

將小鼠尾部尖端2cm處以膠帶固定，懸掛于檢測箱內。總計懸掛時間為6分鐘，記錄后4分鐘內，小鼠停止掙扎的總時長。該時長越長表示抑郁程度越重。

7、曠場檢測：焦慮行為

準備底面四邊長50cm,高30cm的正方形純黑色曠場檢測箱，在底面標記距箱壁20cm的邊長30cm的正方形中心區域。將小鼠頭朝箱壁的方向，放入曠場檢測箱，記錄4分鐘內，小鼠在中心區域停留的總時長。該時長越長表示焦慮程度越輕。

8、給藥方法

造模/假手術操作當日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；假手術組和模型snl組的給藥時間及途徑同用藥組，以等體積的溶劑載體替代藥液。

早期給藥為第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥為第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續給藥5天，最后一天記為d22(5)。

實驗例2：雙氫青蒿素對神經病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備、給藥方案

造模/假手術操作當日記為d0。用藥組按照40mg/kg(青蒿素類似物或陽性藥物普瑞巴林/小鼠體重)的比例灌胃，藥液體積為150μl；雙氫青蒿素或普瑞巴林預先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術組與模型snl組使用等體積食用油代替藥液，給藥時間及途徑同用藥組。

早期給藥實驗中，第4天起灌胃給藥，記為d4(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續給藥14天，最后一天記為d17(14)。

晚期給藥實驗中，第18天起灌胃給藥，記為d18(1)。灌胃給藥于每天于下午5點進行，連續給藥5天，最后一天記為d22(5)。

2、觀察指標

早期給藥實驗中，在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

晚期給藥實驗中，在造模后d1-d17天中的隔天和d17-d22的每天進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時。在造模后d22天分別進行強迫游泳檢測、懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結果

3.1雙氫青蒿素能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

雙氫青蒿素對機械痛閾值影響的檢測結果如圖1和圖3顯示：

在早期給藥實驗中：模型snl組相對于假手術組機械痛閾值顯著降低，證明神經病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，雙氫青蒿素均顯示出顯著的鎮痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮痛效果(^***p<0.001)。

在晚期給藥實驗中：模型snl組相對于假手術組機械痛閾值顯著降低，證明神經病理性疼痛模型造模成功。與模型snl組相比，陽性藥普瑞巴林組在給藥期間d1-d22顯示出顯著的鎮痛效果(^&&&p<0.001)，其中d1-d3可恢復痛閾至與假手術組相當的水平，但從d4起逐漸下降。雙氫青蒿素用藥組自d18開始給藥，與模型snl組相比，d19-d22可顯著恢復痛閾值(^***p<0.001)，至給藥第4天d22鎮痛效果已超過普瑞巴林組。

3.2雙氫青蒿素能夠緩解抑郁

在早期給藥實驗中：雙氫青蒿素對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結果如圖2a結果顯示：在造模/假手術處理之前的d0，模型snl組/假手術組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經病理性疼痛模型并發抑郁。雙氫青蒿素用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，已達到和假手術組相同的水平，證明雙氫青蒿素具有對神經病理性疼痛并發的抑郁的療效。

在晚期給藥實驗中：

強迫游泳檢測:在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術組，的停止掙扎時間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，停止掙扎時間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經病理性疼痛并發的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

懸尾檢測:在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術組，的停止掙扎時間明顯增加(^***p<0.001)，表明模型組顯示抑郁狀態；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，停止掙扎時間明顯縮短(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經病理性疼痛并發的抑郁的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗抑郁效果。

3.3雙氫青蒿素能夠緩解焦慮

在早期給藥實驗中：雙氫青蒿素對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結果如圖2b顯示：在造模/假手術處理之前的d0，模型組/假手術組/用藥組的中心區域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經病理性疼痛模型并發焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區域停留時間顯著升高，證明雙氫青蒿素具有對神經病理性疼痛并發的焦慮的療效。

在晚期給藥實驗中：雙氫青蒿素對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結果如圖4c顯示：在d22(給藥第4天)，模型snl組相對于假手術組，中心區域停留時間明顯縮短(^***p<0.001)，表明模型組顯示焦慮狀態；雙氫青蒿素用藥組相對于模型snl組，中心區域停留時間明顯延長(^***p<0.001)，證明雙氫青蒿素具有對神經病理性疼痛并發的焦慮的療效；然而普瑞巴林組相較模型snl組并未顯示出抗焦慮效果。

實驗例3：青蒿琥酯對神經病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

青蒿琥酯預先懸溶于150μl的5％醫用碳酸氫鈉注射液中制成藥液；假手術組與模型snl組使用5％醫用碳酸氫鈉注射液為溶劑載體。

2、觀察指標

在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。

在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結果

3.1青蒿琥酯能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

青蒿琥酯對機械痛閾值影響的檢測結果如圖5顯示：模型snl組相對于假手術組機械痛閾值顯著降低，證明神經病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，青蒿琥酯均顯示出顯著的鎮痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮痛效果(^***p<0.001)。

3.2青蒿琥酯能夠緩解抑郁

青蒿琥酯對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結果如圖6a結果顯示：在造模/假手術處理之前的d0，模型snl組/假手術組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經病理性疼痛模型并發抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，證明青蒿琥酯具有對神經病理性疼痛并發的抑郁的療效。

3.3青蒿琥酯能夠緩解焦慮

青蒿琥酯對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結果如圖6b結果顯示：在造模/假手術處理之前的d0，模型組/假手術組/用藥組的中心區域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣癥狀,證明神經病理性疼痛模型并發焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區域停留時間顯著升高，證明青蒿琥酯具有對神經病理性疼痛并發的焦慮的療效。

實驗例4：蒿甲醚對神經病理性疼痛中機械痛敏、抑郁及焦慮的治療效果

1、藥物制備

蒿甲醚預先懸溶于150μl的食用油中制成藥液；假手術組與模型snl組使用食用油為溶劑載體。

2、觀察指標

在造模后d4、d7、d10、d13進行機械痛閾值檢測,檢測時間點分別在灌胃給藥后的第1.5小時、3小時及24小時。

在造模后d9、d17天分別進行懸尾檢測和曠場檢測。

3、實驗結果

3.1蒿甲醚能夠提高機械痛閾值，降低痛敏

蒿甲醚對機械痛閾值影響的檢測結果如圖7顯示：模型snl組相對于假手術組機械痛閾值顯著降低，證明神經病理性疼痛模型造模成功。在給藥1.5小時的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4為首次給藥日)，蒿甲醚均顯示出顯著的鎮痛效果(^&&&p<0.001)；在給藥3小時和24小時(次日給藥前)的檢測結果中，與模型snl組相比，在造模后d10、d13、d17天均顯示出顯著的鎮痛效果(^***p<0.001)。

3.2蒿甲醚能夠緩解抑郁

蒿甲醚對抑郁行為影響的懸尾實驗檢測結果如圖8a結果顯示：在造模/假手術處理之前的第0天，模型snl組/假手術組/用藥組的停止掙扎時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止掙扎時間顯著增加，顯示出抑郁樣癥狀，證明神經病理性疼痛模型并發抑郁。用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，停止掙扎時間顯著降低，證明蒿甲醚具有對神經病理性疼痛并發的抑郁的療效。

3.3蒿甲醚能夠緩解焦慮

蒿甲醚對焦慮行為影響的曠場實驗檢測結果如圖8b結果顯示：在造模/假手術處理之前的d0，模型組/假手術組/用藥組的中心區域停留時間相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次給藥)，模型snl組與假手術組小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心區域停留時間顯著降低，顯示出焦慮樣樣癥狀,證明神經病理性疼痛模型并發焦慮；用藥組小鼠與模型snl組相比(^***p<0.001)，中心區域停留時間顯著升高，證明蒿甲醚具有對神經病理性疼痛并發的焦慮的療效。