本發明屬于生物醫藥材料領域，尤其涉及一種海蜇蛋白復合生物玻璃組織修復材料的制備方法。
背景技術：
自發現生物玻璃至今，人們更多關注的是生物玻璃組份對生物活性的影響。納米技術的興起，使人們開始認識到結構對生物活性也有重要影響，更加注重于尺寸效應、微觀精細結構對材料結構和性能的影響。從納米尺寸出發研發設計的納米生物玻璃、介孔生物玻璃更是備受國內外學者的關注。生物玻璃能激活細胞基因，有利于增強細胞的增殖與分化，具有骨誘導和骨傳導的作用。但鑒于其無定形硅骨架的存在，生物玻璃仍呈現為無定形態，機械性能差，且藥物附著性差，其在生物醫藥材料上的應用還有待進一步開發。
技術實現要素：
為了解決現有技術中存在的問題，本發明提供了一種機械性能好，且具有優良的藥物附著性的海蜇蛋白復合生物玻璃組織修復材料的制備方法。
本發明采用以下技術方案：
一種海蜇蛋白復合生物玻璃組織修復材料的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：將新鮮的海蜇傘部用自來水流水清洗，剪碎，放入燒杯中，加入10倍體積的0.1m氫氧化鈉溶液，攪拌3d后清洗至中性；再加入10倍體積的0.5mol/l乙酸溶液，攪拌2d，清洗至中性后，將海蜇溶于8倍體積的0.5m乙酸溶液中，并加入質量百分比1％的胃蛋白酶于5℃條件下攪拌抽提3d，離心處理10000rpm×1h，取出上清液，上清液為胃蛋白酶促溶膠原蛋白粗制液，向粗制液中加入nacl濃度至0.9m，攪拌過夜，離心處理10000rpm×15min，取出沉淀溶于6倍體積0.5m乙酸，轉入透析袋透析2d，離心處理10000rpm×15min，所得沉淀再用0.5m乙酸溶液洗2遍，轉入透析袋透析2d，干燥后即得海蜇蛋白；
步驟二：將2l去離子水燒熱至沸騰，加入4.24g碳酸鈉及5g家蠶生絲，煮沸30min，用去離子水清洗干凈，烘干后，用9.3mol/l的libr溶液溶解；待完全溶解后將溶液裝入透析袋，去離子水透析72h，9000r/min離心處理20min，重復兩次，得蠶絲蛋白溶液；
步驟三：將5g聚環氧乙烷-聚環氧丙烷-聚環氧乙烷三嵌段共聚物溶于62g體積濃度為70％的乙醇溶液中，充分攪拌后，依次加入6g硅酸乙酯、0.7g磷酸三乙酯、1.5gca(no3)2·4h2o、1g0.5m鹽酸溶液，得混合液；
步驟四：將混合液在室溫下攪拌24h后靜置，當溶液呈粘稠狀溶液時，即制得生物玻璃溶液；
步驟五：將蠶絲蛋白溶液、海蜇蛋白、生物玻璃溶液按質量比50:5:9混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫用針管中，通過靜電紡絲制得修復材料，高壓裝置電壓為20kv，將制得的材料在40℃下真空干燥。
優選的，步驟五中所述的醫用針管的容量為20ml。
優選的，步驟五中所述的醫用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。
本發明的有益效果在于：
1)蠶絲蛋白具有良好的生物相容性及組織修復能力，有利于增強細胞的增殖與分化。
2)生物玻璃具有良好的生物相容性，且具有組織修復的功能，能激活細胞基因，有利于增強細胞的增殖與分化，具有骨誘導和骨傳導的作用。
3)海蜇膠原蛋白能夠保持i/iii型膠原蛋白比例，改善膠原纖維的排列與分布，促進皮膚組織細胞的恢復和再生。
4)蠶絲蛋白可以改善材料的機械性能，生物玻璃可以改善材料的醫藥性能。
5)采用靜電紡絲技術制備的材料，具有良好的孔隙率，有利于藥物的附著。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明做進一步的描述。
實施例1
一種海蜇蛋白復合生物玻璃組織修復材料的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：將新鮮的海蜇傘部用自來水流水清洗，剪碎，放入燒杯中，加入10倍體積的0.1m氫氧化鈉溶液，攪拌3d后清洗至中性；再加入10倍體積的0.5mol/l乙酸溶液，攪拌2d，清洗至中性后，將海蜇溶于8倍體積的0.5m乙酸溶液中，并加入質量百分比1％的胃蛋白酶于5℃條件下攪拌抽提3d，離心處理10000rpm×1h，取出上清液，上清液為胃蛋白酶促溶膠原蛋白粗制液，向粗制液中加入nacl濃度至0.9m，攪拌過夜，離心處理10000rpm×15min，取出沉淀溶于6倍體積0.5m乙酸，轉入透析袋透析2d，離心處理10000rpm×15min，所得沉淀再用0.5m乙酸溶液洗2遍，轉入透析袋透析2d，干燥后即得海蜇蛋白；
步驟二：將2l去離子水燒熱至沸騰，加入4.24g碳酸鈉及5g家蠶生絲，煮沸30min，用去離子水清洗干凈，烘干后，用9.3mol/l的libr溶液溶解；待完全溶解后將溶液裝入透析袋，去離子水透析72h，9000r/min離心處理20min，重復兩次，得蠶絲蛋白溶液；
步驟三：將5g聚環氧乙烷-聚環氧丙烷-聚環氧乙烷三嵌段共聚物溶于62g體積濃度為70％的乙醇溶液中，充分攪拌后，依次加入6g硅酸乙酯、0.7g磷酸三乙酯、1.5gca(no3)2·4h2o、1g0.5m鹽酸溶液，得混合液；
步驟四：將混合液在室溫下攪拌24h后靜置，當溶液呈粘稠狀溶液時，即制得生物玻璃溶液；
步驟五：將蠶絲蛋白溶液、海蜇蛋白、生物玻璃溶液按質量比50:5:9混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫用針管中，通過靜電紡絲制得修復材料，高壓裝置電壓為20kv，將制得的材料在40℃下真空干燥。
步驟五中所述的醫用針管的容量為20ml，步驟五中所述的醫用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。