本發明涉及藥物生產
技術領域：
，具體涉及一種墨旱蓮草有效成分的制備方法和應用。
背景技術：
：墨旱蓮草屬于一年生草本，高10～60cm，全株被白色粗毛，折斷后流出的汁液數分鐘后即呈藍黑色，莖直立或傾狀，呈綠色或紅褐色，葉互生，橢圓狀披針形或線狀披針形，長3～10cm，寬0.5～2.5cm，全緣或有細齒，基部漸狹，無柄或有短柄。墨旱蓮草具有滋補肝腎，涼血止血的功能，可用于治療牙齒松動、須發早白、眩暈耳鳴、腰膝酸、陰虛血熱、吐血和外傷出血，具有很高的藥用價值。目前，對墨旱蓮草有效成分的提取方法較為簡單，大多經乙醇提取一次后，洗脫得到有效成分，提取率比較低，浪費了很多有效成分，且墨旱蓮草經提取后剩下的莖葉剩余物大多都會直接扔掉，而造成浪累，鑒于此，有必要研究一種墨旱蓮草有效成分的制備方法。技術實現要素：為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種可快速提取墨旱蓮草中的有效成分，提高提取率，且提取的有效成分制備的防脫發劑具有很好的防脫發作用的墨旱蓮草有效成分的制備方法。為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：墨旱蓮草有效成分的制備方法，包括以下制備步驟：s1、清洗：選擇植株高度為50~60cm的墨旱蓮草，放入清水中洗清三遍，洗凈后取出浸泡于加有營養液的純凈水中，浸泡2~3h，取出后搗碎，得到原料莖葉；s2、粗提：將質量分數為60~75%的乙醇和丙酮分別加入至提取鍋中，再加入浸泡過的原料莖葉，加熱回流3~4h，得到提取液ⅰ和原料莖葉剩余物ⅰ，冷卻后，將提取液ⅰ保存至冷卻罐中，待用；s3、第二次提取：將質量分數為80~85%乙醇和乙酸乙酯加入至提取鍋中，再加入原料莖葉剩余物ⅰ，緩慢升溫加熱，回流3~4h，提取1~2次，得到提取液ⅱ和原料莖葉剩余物ⅱ，將提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，減壓濃縮得到濃縮液；s4、萃取：先用乙醚萃取濃縮液2~3次，萃取時間為15~25min，再用四氯化碳萃取濃縮液2~3次，萃取時間為10~15min，得到萃取液；s5、洗脫：將萃取液加于大孔吸附樹脂色譜柱上，按質量分數35~50%乙醇、甲醇和水的順序作為洗脫劑進行第一次洗脫，洗脫劑的流速為15~25ml/min，得到洗脫液ⅰ；然后按質量分數60~80%乙醇、乙腈和水的順序作為洗脫劑對洗脫液ⅰ進行第二次洗脫，洗脫劑的流速為20~30ml/min，得到洗脫液ⅱ，洗脫液ⅱ經減壓濃縮后即為墨旱蓮草的有效成分。優選地，前述步驟s1中，營養液、純凈水和墨旱蓮草的質量比為（5～10）：（35～45）：（10～15），其中，營養液由以下組分按質量份組成：硝酸鉀25～30份、尿素15～20份、葉酸22～25份、硫酸鎂12～18份、硫酸銅5～9份、磷酸二氫鉀6～15份、檸檬酸鐵1～3份和硼酸5～7份。再優選地，前述步驟s2中，乙醇、丙酮和原料莖葉的質量比為（45~50）：（21~34）：（12~16）。更優選地，前述步驟s3中，乙醇、乙酸乙酯和原料莖葉剩余物ⅰ的質量比為（20~30）：（15~25）：（10~12）。進一步優選地，前述步驟s4中，乙醚與濃縮液的體積比為（2～6）：(1～3)。具體地，前述步驟s5中，萃取液、質量分數35~50%乙醇、甲醇和水的體積比為（6~9）：（22～36）：(14～23)：(11～13)，洗脫液ⅰ、質量分數60~80%乙醇、乙腈和水的體積比為（3~6）：（20～35）：(16～20)：(8～10)。前述的墨旱蓮草有效成分的應用，其用于制備防脫發劑。優選地，前述防脫發劑由以下組分按質量份組成：墨旱蓮草有效成分12~16份、三聚磷酸銨15~18份、丙二醇22~26份、原料花10~15份、原料莖葉剩余物ⅱ8~10份、甘油12~17份、山梨醇5~10份、側柏葉6~9份、何首烏4~7份、沉香醇3~8份、白蘭香精2~4份和去離子水20~26份。再優選地，前述原料花由以下方法制得：將采摘好的墨旱蓮草的花蕾曬干后，與金銀花的花蕾混合搗碎，得到原料花，其中，墨旱蓮草的花蕾和金銀花的花蕾的質量比為（22~35）：（8~16）。本發明的有益之處在于：本發明的墨旱蓮草有效成分的制備方法簡單、生產成本低、可操作性強，可快速提取墨旱蓮草中的有效成分，并提高了提取率，且提取的有效成分制備的防脫發劑具有很好的防脫發、生發和烏發作用；墨旱蓮草在搗碎之前先浸泡在營養液中，可有效鎖住其中的有效成分，避免有效成分在后續處理過程中的流失；在制備防脫發劑的過程中，使用了提取墨旱蓮草有效成分過程中產生的原料莖葉剩余物ⅱ，充分利用了其中剩余的有效組分，避免原料的浪費，降低了生產成本，也減去了對原料莖葉剩余物ⅱ的處理過程。具體實施方式以下結合具體實施例對本發明作具體的介紹。實施例1墨旱蓮草有效成分的制備方法，包括以下制備步驟：s1、清洗：選擇植株高度為50cm的墨旱蓮草，放入清水中洗清三遍，洗凈后取出浸泡于加有營養液的純凈水中，浸泡2h，取出后搗碎，得到原料莖葉；其中，營養液、純凈水和墨旱蓮草的質量比為5：35：10，營養液由以下組分按質量份組成：硝酸鉀25份、尿素15份、葉酸22份、硫酸鎂12份、硫酸銅5份、磷酸二氫鉀6份、檸檬酸鐵1份和硼酸5份。s2、粗提：將質量分數為60%的乙醇和丙酮分別加入至提取鍋中，再加入浸泡過的原料莖葉，加熱回流3h，得到提取液ⅰ和原料莖葉剩余物ⅰ，冷卻后，將提取液ⅰ保存至冷卻罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料莖葉的質量比為45：21：12；s3、第二次提取：將質量分數為80%乙醇和乙酸乙酯加入至提取鍋中，再加入原料莖葉剩余物ⅰ，緩慢升溫加熱，回流3h，提取1次，得到提取液ⅱ和原料莖葉剩余物ⅱ，將提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，減壓濃縮得到濃縮液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料莖葉剩余物ⅰ的質量比為20：15：10；s4、萃取：先用乙醚萃取濃縮液2次，萃取時間為15min，再用四氯化碳萃取濃縮液2次，萃取時間為10min，得到萃取液；其中，乙醚與濃縮液的體積比為2：1；s5、洗脫：將萃取液加于大孔吸附樹脂色譜柱上，按質量分數35%乙醇、甲醇和水的順序作為洗脫劑進行第一次洗脫，洗脫劑的流速為15ml/min，得到洗脫液ⅰ；然后按質量分數60%乙醇、乙腈和水的順序作為洗脫劑對洗脫液ⅰ進行第二次洗脫，洗脫劑的流速為20ml/min，得到洗脫液ⅱ，洗脫液ⅱ經減壓濃縮后即為墨旱蓮草的有效成分；其中，萃取液、質量分數35%乙醇、甲醇和水的體積比為6：22：14：11，洗脫液ⅰ、質量分數60%乙醇、乙腈和水的體積比為3：20：16：8。墨旱蓮草有效成分的應用，其用于制備防脫發劑。防脫發劑由以下組分按質量份組成：墨旱蓮草有效成分12份、三聚磷酸銨15份、丙二醇22份、原料花10份、原料莖葉剩余物ⅱ8份、甘油12份、山梨醇5份、側柏葉6份、何首烏4份、沉香醇3份、白蘭香精2份和去離子水20份。其中，原料花由以下方法制得：將采摘好的墨旱蓮草的花蕾曬干后，與金銀花的花蕾混合搗碎，得到原料花，墨旱蓮草的花蕾和金銀花的花蕾的質量比為22：8；原料莖葉剩余物ⅱ由墨旱蓮草有效成分的制備過程中的步驟s3中制得。實施例2本實施例的制備方法與實施例1相同，具體區別在于具體工藝條件的不同，包括以下制備步驟：s1、清洗：選擇植株高度為60cm的墨旱蓮草，放入清水中洗清三遍，洗凈后取出浸泡于加有營養液的純凈水中，浸泡3h，取出后搗碎，得到原料莖葉；其中，營養液、純凈水和墨旱蓮草的質量比為10：45：15，營養液由以下組分按質量份組成：硝酸鉀30份、尿素20份、葉酸25份、硫酸鎂18份、硫酸銅9份、磷酸二氫鉀15份、檸檬酸鐵3份和硼酸7份。s2、粗提：將質量分數為75%的乙醇和丙酮分別加入至提取鍋中，再加入浸泡過的原料莖葉，加熱回流4h，得到提取液ⅰ和原料莖葉剩余物ⅰ，冷卻后，將提取液ⅰ保存至冷卻罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料莖葉的質量比為50：34：16；s3、第二次提取：將質量分數為85%乙醇和乙酸乙酯加入至提取鍋中，再加入原料莖葉剩余物ⅰ，緩慢升溫加熱，回流4h，提取2次，得到提取液ⅱ和原料莖葉剩余物ⅱ，將提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，減壓濃縮得到濃縮液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料莖葉剩余物ⅰ的質量比為30：25：12；s4、萃取：先用乙醚萃取濃縮液3次，萃取時間為25min，再用四氯化碳萃取濃縮液3次，萃取時間為15min，得到萃取液；其中，乙醚與濃縮液的體積比為6：3；s5、洗脫：將萃取液加于大孔吸附樹脂色譜柱上，按質量分數50%乙醇、甲醇和水的順序作為洗脫劑進行第一次洗脫，洗脫劑的流速為25ml/min，得到洗脫液ⅰ；然后按質量分數80%乙醇、乙腈和水的順序作為洗脫劑對洗脫液ⅰ進行第二次洗脫，洗脫劑的流速為30ml/min，得到洗脫液ⅱ，洗脫液ⅱ經減壓濃縮后即為墨旱蓮草的有效成分；其中，萃取液、質量分數50%乙醇、甲醇和水的體積比為9：36：23：13，洗脫液ⅰ、質量分數80%乙醇、乙腈和水的體積比為6：35：20：10。墨旱蓮草有效成分的應用，其用于制備防脫發劑。防脫發劑由以下組分按質量份組成：墨旱蓮草有效成分16份、三聚磷酸銨18份、丙二醇26份、原料花15份、原料莖葉剩余物ⅱ10份、甘油17份、山梨醇10份、側柏葉9份、何首烏7份、沉香醇8份、白蘭香精4份和去離子水26份。其中，原料花由以下方法制得：將采摘好的墨旱蓮草的花蕾曬干后，與金銀花的花蕾混合搗碎，得到原料花，墨旱蓮草的花蕾和金銀花的花蕾的質量比為（22~35）：（8~16）；原料莖葉剩余物ⅱ由墨旱蓮草有效成分的制備過程中的步驟s3中制得。實施例3本實施例的制備方法與實施例1相同，具體區別在于具體工藝條件的不同，包括以下制備步驟：s1、清洗：選擇植株高度為55cm的墨旱蓮草，放入清水中洗清三遍，洗凈后取出浸泡于加有營養液的純凈水中，浸泡2.5h，取出后搗碎，得到原料莖葉；其中，營養液、純凈水和墨旱蓮草的質量比為7：40：12，營養液由以下組分按質量份組成：硝酸鉀27份、尿素18份、葉酸23份、硫酸鎂15份、硫酸銅7份、磷酸二氫鉀10份、檸檬酸鐵2份和硼酸6份。s2、粗提：將質量分數為68%的乙醇和丙酮分別加入至提取鍋中，再加入浸泡過的原料莖葉，加熱回流3.5h，得到提取液ⅰ和原料莖葉剩余物ⅰ，冷卻后，將提取液ⅰ保存至冷卻罐中，待用；其中，乙醇、丙酮和原料莖葉的質量比為47：28：14；s3、第二次提取：將質量分數為83%乙醇和乙酸乙酯加入至提取鍋中，再加入原料莖葉剩余物ⅰ，緩慢升溫加熱，回流3.5h，提取1次，得到提取液ⅱ和原料莖葉剩余物ⅱ，將提取液ⅰ和提取液ⅱ混合，減壓濃縮得到濃縮液；其中，乙醇、乙酸乙酯和原料莖葉剩余物ⅰ的質量比為25：20：11；s4、萃取：先用乙醚萃取濃縮液2次，萃取時間為20min，再用四氯化碳萃取濃縮液2次，萃取時間為12min，得到萃取液；其中，乙醚與濃縮液的體積比為4：2；s5、洗脫：將萃取液加于大孔吸附樹脂色譜柱上，按質量分數42%乙醇、甲醇和水的順序作為洗脫劑進行第一次洗脫，洗脫劑的流速為20ml/min，得到洗脫液ⅰ；然后按質量分數70%乙醇、乙腈和水的順序作為洗脫劑對洗脫液ⅰ進行第二次洗脫，洗脫劑的流速為25ml/min，得到洗脫液ⅱ，洗脫液ⅱ經減壓濃縮后即為墨旱蓮草的有效成分；其中，萃取液、質量分數42%乙醇、甲醇和水的體積比為7：29：18：12，洗脫液ⅰ、質量分數70%乙醇、乙腈和水的體積比為5：28：18：9。墨旱蓮草有效成分的應用，其用于制備防脫發劑。防脫發劑由以下組分按質量份組成：墨旱蓮草有效成分14份、三聚磷酸銨16份、丙二醇24份、原料花13份、原料莖葉剩余物ⅱ9份、甘油15份、山梨醇7份、側柏葉8份、何首烏5份、沉香醇6份、白蘭香精3份和去離子水23份。其中，原料花由以下方法制得：將采摘好的墨旱蓮草的花蕾曬干后，與金銀花的花蕾混合搗碎，得到原料花，墨旱蓮草的花蕾和金銀花的花蕾的質量比為29：12；原料莖葉剩余物ⅱ由墨旱蓮草有效成分的制備過程中的步驟s3中制得。對比例1本對比例與實施例1中的制備步驟大致相同，具體區別在于步驟s1中，未將墨旱蓮草浸泡于營養液中。對比例2本對比例與實施例1中的制備步驟大致相同，具體區別在于步驟s1中，無步驟s3和s4，且防脫發劑的組分中無原料莖葉剩余物ⅱ。對比例3本對比例的防脫發劑由以下組分按質量份組成：三聚磷酸銨16份、丙二醇24份、甘油15份、山梨醇7份、側柏葉8份、何首烏5份、沉香醇6份、白蘭香精3份和去離子水23份。防脫發試驗分別取實施例1、實施例2、實施例3、對比例1、對比例2和對比例3中制得的防脫發劑，進行防脫發實驗。試驗組設定為男性受試者，每組30名（不同年齡段的受試者人數相同），試驗期8個月，前2個月設定為試樣無涂敷期，后6個月設定為試樣涂敷期，在試樣涂敷期，將防脫發劑每次5ml涂敷于頭皮，試驗期間每隔2日洗發并回收脫落的頭發，對10天內脫落的頭發根數進行統計，由該根數算出每次洗發脫落的頭發根數；經計算，前2個月最后一周的平均值為176根/次，后6個月最后一周平均值如下表：實施例1實施例2實施例3對比例1對比例2對比例3平均值（根/次）727968112128139根據實驗結果可知，受試者使用由實施例1、實施例2和實施例3中提取的墨旱蓮草有效成分制得的防脫發劑6個月以后，脫發現象得到了顯著的改善，脫發數量減少到了正常范圍，而使用對比例1、對比例2和對比例3的防脫發劑以后，雖然脫發數量有所降低，但是并未降到正常范圍，說明本發明的制備方法可有效提取墨旱蓮草中的有效成分，提高了提取率，且用本法提取的墨旱蓮草的有效成分制備的防脫發劑具有很好的防脫發效果。在本說明書的描述中，參考術語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結合該實施例或示例描述的具體特征、結構、材料或者特點包含于本發明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術語的示意性表述不一定指的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結構、材料或者特點可以在任何的一個或多個實施例或示例中以合適的方式結合。以上顯示和描述了本發明的基本原理、主要特征和優點。本行業的技術人員應該了解，上述實施例不以任何形式限制本發明，凡采用等同替換或等效變換的方式所獲得的技術方案，均落在本發明的保護范圍內。當前第1頁12