專利名稱:新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物的制備方法
在此以前，4′-去甲基-表鬼臼酯素-β-D-亞乙基苷[通常稱為足葉乙甙(etoposide)]作為一種具有抗腫瘤活性的化合物，已為人們所知(例如美國專利3，524，844)。
上述足葉乙甙顯示出較好的抗腫瘤活性，但是，因為其溶解度極低，不論是用注射還是用口服途徑向人們給藥，通常都相當困難。
以解決這一問題而進行的種種研究的結果，本發明人已發現如下所指的式(Ⅰ)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物及其鹽類顯示出極好的抗腫瘤活性，而且在水中還有高度溶解性，基于這個發現才完成了本發明。
在本發明中，“低級烷基”這個詞是指具有1-5個最好是1-3個碳原子的烷基，此烷基也可是支鏈的。
本發明涉及新的式(Ⅰ)4′-去甲基-表鬼臼酯素衍生物以及這些衍生物的鹽。
(其中，R1是低級烷基，X1和X2分別是羥基和被1個或2個低級烷基所取代的氨基中的一個，倘若X1和X2中的一個是被1個或2個低級烷基所取代的氨基，那么另一個就是羥基)。
式(Ⅰ)4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物能從式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物容易地取得。
(其中，R1是低級烷基;Xa和Xb分別是羥基和氨基中的一個，倘若Xa和Xb中的一個是羥基，則另一個是氨基。)(見未實審已公布的日本專利申請，卷號32799/1985)這些未取代氨基糖衍生物與式(Ⅲ)R2CHO的醛(其中R2是氫或低級烷基)在惰性溶劑中反應，所得的席夫堿用一種金屬-氫配位化合物，如氫硼化鈉，進行還原以提供出式(Ⅰ)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物。
式(Ⅰ)R1的例子包括甲基、乙基、丙基和丁基，特別好的是甲基。式(Ⅲ)R2的例子包括氫、甲基、乙基和丙基。
式(Ⅰ)中X1或X2為低級烷基取代的氨基的例子包括二-低級烷基-取代氨基(如二甲氨基和二乙氨基)和單一低級烷基-取代氨基(如單乙氨基)。
適合于本發明使用的金屬-氫配位化合物包括堿金屬氫硼化物(如氫硼化鈉、氫硼化鋰和氫硼化鉀)、堿金屬氫硼化物的氰化物和硫化物(如氰基氫硼化鈉，氫硼化鈉-硫)，以及堿金屬氫鋁化物(如氫鋁化鋰)。
式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物和式(Ⅲ)醛的反應，在溫度為-40℃至所用溶劑的沸點之間進行，最好的溫度大約為0℃-100℃，通常反應在室溫進行。
式(Ⅲ)醛用量通常的范圍約為0.5-5摩爾/每摩爾式(Ⅱ)未取代氨基糖衍生物。如果醛的使用量約在0.5-1.5摩爾/每摩爾式(Ⅱ)衍生物，則具有Xa或Xb為單一低級烷基氨基的化合物為優勢反應產物，如果醛的用量大于約1.5摩爾，則具有Xa或Xb為二-低級烷基氨基的化合物為優勢產物。
所得席夫堿的還原反應可在從-40℃最好是從-20℃至溶劑中的沸點之間進行，通常反應是在5℃-30℃范圍內進行的。
任何惰性溶劑均可在反應中使用，一般則使用乙腈或二氯甲烷。
通式(Ⅰ)的化合物與酸反應生成鹽，最好是生成適合藥用的鹽。適合于成鹽的酸可以是無機酸，也可以是有機酸，只要鹽是無毒性的均可用。對這些無機酸和有機酸未提出特殊限制，但最好的無機酸是鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸;最好的有機酸是乙酸、丙酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸和酒石酸，戊二酸、檸檬酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、夫冬氨酸和谷氨酸。
依照本發明將化合物的典型例子列舉如下
(ⅰ)4-O-(2-去氧-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物Ⅰ);
(ⅱ)4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物2);
(ⅲ)4-O-(3-去氧-3-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物3)。
從下列實驗數據可清楚地看到本發明化合物與足葉乙甙相比顯示了極好的抗腫瘤活性和增大了的水溶性。
1)抗腫瘤試驗
給小鼠腹腔內植入105小鼠白血病L1210細胞。24小時后，將溶于5%葡萄糖溶液中的本發明化合物Ⅰ的鹽酸鹽腹腔注射給小鼠，每天給藥一次，連續5天，隨后觀察30天，小鼠生命延長的百分率由下式確定
生命延長百分率＝ (治療組生存的平均天數)/(對照組生存的平均天數) ×100
對照組僅注射5%葡萄糖水溶液，生存的平均天數為7.8天。
以2.5毫克/公斤/日劑量接受化合物1的小鼠其延命率在385%以上，并且所有的小鼠均在實驗中存活下來。
以10毫克/公斤/日劑量接受足葉乙甙的小鼠，其延命率在321%以上，并且，五只動物中有三只在實驗中存活下來，當足葉乙甙給藥劑量為5毫克/公斤/日時，小鼠延命率為208%。
(2)水中溶解度
足葉乙甙的水中溶解度是0.1毫克/毫升，與此相比，4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物1)鹽酸鹽的溶解度值為15毫克/毫升以上。
通過下面的實例對本發明化合物的合成方法做更為詳細的描述。
實施例1
4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物1)的合成。
將500毫克的4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素懸浮在5毫升乙腈中，向懸浮液中加入0.2毫升37%的甲醛水溶液，用五分鐘時間，分成三次向混合物中加氰基氫硼化鈉(總共150毫克)。
反應30分鐘后，100毫升的二氯甲烷加入反應混合物中，然后用30毫升水洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并濃縮，濃縮物用硅膠色譜法分離并提純，得430毫克4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素。
熔點196-198℃(從丙酮中結晶)
比旋度〔α〕23D-114°(CHCl3)
質譜 次級離子 質譜 616(M+H)+
核磁共振(CDCl3)
δ 1.41(3Hd，CH3)
δ 2.26(6Hs，N(CH3)2)
δ 3.76(6Hs，-OCH3)
δ 6.01(2Hs，-O-CH2-O-)
δ 6.23(2Hs，H-2′，6′)
δ 6.58(1Hs，H-8)
δ 6.75(1Hs，H-5)
實施例2
4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素的合成。
將60毫克的4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素溶解在1毫升乙腈中。將6微升的乙醛加到溶液中，在混合物冷卻到-20℃以后，加入15毫克的氰基氫硼化鈉，反應進行15分鐘。使反應混合物溫熱到室溫，與20毫升二氯甲烷混合，再用10毫升水洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥并進行濃縮，用硅膠薄層色譜板進行分離和純化，由此得出40毫克4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素。
熔點208℃-210℃(鹽酸鹽)
比旋度〔α〕24D-90°(三氯甲烷)
質譜 次級離子質譜 616(M+H)+
化合物3，即4-O-(3-去氧-3-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素，除了用4-O-(3-去氧-3-氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素代替4-O-(2-去氧-2-氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素以外，可用重復上述步驟的方法而獲得。
權利要求
1、一種制備新的式(I)4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物及其鹽的方法，
(其中，R1是低級烷基；X1和X2分別是羥基和被1個或2個低級烷基所取代的氨基中的1個，倘若X1和X2當中的一個是被1個或2個低級烷基所取代的氨基，則另一個是羥基)其制備方法包括用式(Ⅲ)R2CHO的醛(其中，R2是氫或低級烷基)在惰性溶劑中與式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物反應并且還原所生成的席夫堿。
(其中R1是低級烷基；Xa和Xb分別是羥基或氨基中的一個，倘若Xa和Xb當中的一個是羥基，則另一個是氨基)。
2、根據權利要求
1所述的方法，其中，R1和R2是具有1-3個碳原子的低級烷基。
3、根據權利要求
1所述的方法，其中，R1是甲基。
4、根據權利要求
1所述的方法，其中式(Ⅲ)醛的使用量約為0.5-5摩爾/每摩爾式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物。
5、根據權利要求
1所述的方法，其中，式(Ⅱ)未取代氨基糖衍生物與(Ⅲ)醛的反應溫度在-40℃至溶劑的沸點之間，而席夫堿還原的溫度在-20℃至溶劑的沸點之間。
6、根據權利要求
1所述的方法，其中，席夫堿用金屬-氫配位化合物來還原。
7、根據權利要求
5所述的方法，其中，金屬-氫配位化合物是堿金屬氫硼化合物或堿金屬氫鋁化合物。
8、制備4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素及其鹽的方法，其中包括用甲醛與4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素反應，然后用堿金屬氫硼化合物或堿金屬氫鋁化合物還原所生成的席夫堿。
專利摘要
本發明涉及到式(I)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素及其鹽。(其中，R1是低級烷基；X1和X2分別是羥基或被1個或2個低級烷基所取代的氨基中的一個，倘若X1和X2中的一個是被1個或2個低級烷基所取代的氨基，則另一個是羥基)。
文檔編號A61P35/00GK86101960SQ86101960
公開日1986年11月12日 申請日期1986年3月27日
發明者梅澤浜夫, 竹內富雄, 近藤信一, 田中亙, 瀧田智久, 西村吉男, 好川博 申請人:財團法人微生物化學研究會導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan