一種梔子西紅花苷類成分提取工藝技術的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種桅子西紅花苷類成分提取方法，即用脈沖超聲波進行醇提，以大孔樹脂串聯技術進行吸附分離，屬于生物與新醫藥領域。
【背景技術】
[0002]桅子來源于茜草科植物桅子的成熟果實，是我國盛產的一種中藥材，有瀉火除煩、涼血解毒、清熱利濕、消腫止痛的功效，其所含的環烯醚萜苷類成分之一西紅花苷是其有效成分。西紅花苷最早是從國家名貴藥材藏紅花中提取而來，其突出的祛瘀降脂療效已得到了醫學界的廣泛認可，但由于藏紅花價格昂貴、提取成本高，并不適宜擴大生產，現今用桅子果實代替藏紅花提取西紅花苷類成分已成為國內中藥提取史上一大突破。
[0003]桅子化學成分復雜，有效成分主要為環烯醚萜苷類化合物，結構較相似，一般方法難以從中分離出西紅花苷類成分，桅子西紅花苷類成分中桅子西紅花總苷約占50%，其中，西紅花苷-1占25%，還包括苷-2、苷-3、苷-4等成分。研究顯示，在桅子提取物提取工藝中，主要有以下影響因素:提取次數，提取時間、所用乙醇濃度、乙醇用量，其影響程度依次遞減，除此之外西紅花苷含量低，主要原因是在提取過程中并沒有采用最佳的提取方案。目前從桅子干果或提取桅子黃色素后的廢液中提取西紅花苷，一般采用氯仿、無水乙醇等有機溶劑在索氏提取瓶中提取，得到桅子中總的活性成分桅子提取物，再用活性炭脫色，乙酸乙酯等有機溶劑脫脂，濃縮，然后再上硅膠柱分離，用一定比例的甲醇、氯仿混合液洗脫，洗脫液在丙酮中進行重結晶，過濾，得到西紅花苷晶體，一般10g桅子果中可分離得到0.6g左右西紅花苷。采用有機溶劑萃取、分離的方法提取天然產物中有效成分具有一定的局限性，其分離所得到的化合物產率較低，純度不高，活性成分容易失效，且大量有機溶劑的使用易造成環境污染，增大了安全生產的投入，從而導致成本的提高。另外一些新技術被廣泛用于天然產物的提取純化中，主要包括超臨界液體萃取技術、膜分離技術、分子印跡技術、大孔吸附樹脂技術等，其中較適宜于工業化生產的是大孔吸附樹脂技術。
[0004]利用了大孔吸附樹脂技術進行吸附分離在許多文獻中都報道過，但單獨采用DlOl大孔樹脂吸附分離使得西紅花苷類成分產率較低。而本發明利用脈沖超聲波技術進行醇提，節省提取時間，可提聞提取率，以大孔樹脂串聯技術進行吸附分尚，有效提聞了廣物純度。
【發明內容】
[0005]本發明在傳統桅子西紅花苷類成分提取工藝基礎上進行改進創新，原工藝提取時間長，提取率低，產物純度不理想，而采用脈沖超聲波進行超聲提取可大大節省提取時間，采用DlOl與AB-8型大孔樹脂串聯吸附分離技術有效提高了產物中西紅花苷類成分含量，西紅花總苷含量可提高至55%，西紅花苷-1含量可提高至28%，生產工藝由原來五天縮短至二天完成。
[0006]本發明的解決方案是: 1.提取工藝流程為:
(1)粉碎:將桅子果實粉碎成粗粉；
(2)脈沖超聲波式醇提:將粉碎后的桅子粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入8倍量桅子粗粉的75%乙醇溶液一定溫度下超聲醇提Ih ；
(3)二次醇提:濾出提取液，于脈沖超聲波清洗槽中加入6倍量桅子粗粉的75%乙醇一定溫度下超聲醇提lh，濾出提取液；
(4)濃縮:合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中60-7(TC下進行減壓濃縮，至溶液相對密度為1.15-1.20，得到濃縮液；
(5)醇沉、濃縮:濃縮液中加入4倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.15-1.20 ；
(6)二次醇沉、濃縮:濃縮液中加入8倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物；
(7)吸附分離:將上述沉淀物溶于適量水中，保持10-15ml/min流速打入DlOl與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近無色，然后用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，即得。
[0007]2.一種如權利I所述桅子西紅花苷類成分提取方法，其特征在于:
所述步驟(2)、(3)中超聲波醇提溫度為70-80°C ；
所述步驟(4)中溶液濃縮至相對于水的密度為1.15-1.20 ；
所述步驟(5)、(6)中濃縮液中分別加入4倍量和8倍量80%乙醇，冷藏溫度為0-4°C，時間為1h ；
所述步驟(7)中采用DlOl與AB-8型大孔樹脂柱串聯進行吸附，控制溶液流速為10_15ml/mino
[0008]3.本發明的積極效果在于:
(I)采用脈沖超聲波提取法縮短了提取時間，原工藝由5天縮短至3天。
[0009](2)工藝中只涉及乙醇一種有機試劑，可有效減少環境污染。
[0010](3)有效成分含量明顯提高，西紅花苷類物質提取率達1.3%，其中，西紅花總苷含量達到55%，西紅花苷-1含量可達28%。
[0011](4)本工藝相對傳統工藝簡單易行，且提取介質乙醇可有效回收利用。
[0012]【具體實施方式】:
實施例1
(1)粉碎:稱取300g桅子果實粉碎成粗粉；
(2)脈沖超聲波式醇提:將粉碎后的桅子粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入2400g75%乙醇溶液于75°C下超聲醇提Ih ；
(3)二次醇提:濾出提取液，于脈沖超聲波清洗槽中加入1800g75%乙醇于75°C下超聲醇提lh，濾出提取液；
(4)濃縮:合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中65°C下進行減壓濃縮，至溶液相對密度為1.15，得到濃縮液稱重216g ；
(5)醇沉、濃縮:濃縮液中加入864g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.15，得到濃縮液62g ；
(6)二次醇沉、濃縮:濃縮液中加入496g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物稱重8.4g ；
(7)吸附分離:將上述沉淀物溶于20ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近無色，然后用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，得干膏3.9g。
[0013]實施例2
(1)粉碎:稱取400g桅子果實粉碎成粗粉；
(2)脈沖超聲波式醇提:將粉碎后的桅子粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入3200g75%乙醇溶液于75°C下超聲醇提Ih ；
(3)二次醇提:濾出提取液，于脈沖超聲波清洗槽中加入2400g75%乙醇于75°C下超聲醇提lh，濾出提取液；
(4)濃縮:合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中65°C下進行減壓濃縮，至溶液相對密度為1.16，得到濃縮液稱重288g ；
(5)醇沉、濃縮:濃縮液中加入1152g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.17，得到濃縮液86g ；
(6)二次醇沉、濃縮:濃縮液中加入688g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物稱重11.5g ；
(7)吸附分離:將上述沉淀物溶于24ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近無色，然后用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，得干膏5.5g。
[0014]實施例3
(1)粉碎:稱取450g桅子果實粉碎成粗粉；
(2)脈沖超聲波式醇提:將粉碎后的桅子粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入3600g75%乙醇溶液于75°C下超聲醇提Ih ；
(3)二次醇提:濾出提取液，于脈沖超聲波清洗槽中加入2700g75%乙醇于75°C下超聲醇提lh，濾出提取液；
(4)濃縮:合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中65°C下進行減壓濃縮，至溶液相對密度為
1.16，得到濃縮液稱重324g ；
(5)醇沉、濃縮:濃縮液中加入1296g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.16，得到濃縮液98g ；
(6)二次醇沉、濃縮:濃縮液中加入784g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物稱重13.4g ；
(7)吸附分離:將上述沉淀物溶于25ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近無色，然后用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，得干膏6.lg。
【主權項】
1.一種桅子西紅花苷類成分提取方法，具體工藝步驟如下: (1)粉碎:將桅子果實粉碎成粗粉； (2)脈沖超聲波式醇提:將粉碎后的桅子粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入8倍量桅子粗粉的75%乙醇溶液一定溫度下超聲醇提Ih ； (3)二次醇提:濾出提取液，于脈沖超聲波清洗槽中加入6倍量桅子粗粉的75%乙醇一定溫度下超聲醇提lh，濾出提取液； (4)濃縮:合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中60-7(TC下進行減壓濃縮，至溶液相對密度為1.15-1.20，得到濃縮液； (5)醇沉、濃縮:濃縮液中加入4倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.15-1.20 ； (6)二次醇沉、濃縮:濃縮液中加入8倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物； (7)吸附分離:將上述沉淀物溶于適量水中，保持10-15ml/min流速打入DlOl與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近無色，然后用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，即得。
2.一種如權利要求1所述桅子西紅花苷類成分提取方法，其特征在于: 所述步驟(2)、(3)中超聲波醇提溫度為70-80°C ； 所述步驟(4)中溶液濃縮至相對于水的密度為1.15-1.20 ； 所述步驟(5)、(6)中濃縮液中分別加入4倍量和8倍量80%乙醇，冷藏溫度為0-4°C，時間為1h ； 所述步驟(7)中采用DlOl與AB-8型大孔樹脂柱串聯進行吸附，控制溶液流速為10_15ml/mino
【專利摘要】本發明公開了一種梔子西紅花苷類成分提取工藝技術，工藝流程為：將梔子果實粉碎成粗粉放入脈沖超聲波清洗槽中，加入8倍量75%乙醇一定溫度下超聲醇提1h，濾出提取液，繼續加入6倍量75%乙醇一定溫度下超聲醇提1h，濾出提取液，合并兩次提取液，于旋轉蒸發儀中減壓濃縮至相對密度1.15-1.20，得到濃縮液，濃縮液中加入4倍量80%乙醇冷藏10h，過濾，濾去沉淀物，上清液減壓濃縮至相對密度為1.15-1.20，加入8倍量80%乙醇冷藏10h，取沉淀物，將上述沉淀物溶于適量水中，保持一定流速打入D101與AB-8型串聯大孔樹脂柱中，用15%乙醇洗至近無色，用85%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓干燥，即得。
【IPC分類】A61P25-20, A61P29-00, A61K131-00, A61K36-744
【公開號】CN104644808
【申請號】CN201310584903
【發明人】王河東, 張鴻飛
【申請人】威海東寶制藥有限公司
【公開日】2015年5月27日
【申請日】2013年11月20日