阿比朵爾在抗絲狀病毒感染中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明是關于阿比朵爾在抗絲狀病毒感染方面的應用，屬于醫藥技術領域。本發 明包含阿比朵爾在抗絲狀病毒預防或治療中的單獨或聯合應用。
【背景技術】
[0002] 絲狀病毒科（Filoviridae)又稱纖絲病毒，該科病毒只有一個屬，即絲狀病毒 屬（Filovirus)。絲狀病毒是外形如絲狀的包膜病毒，其基因組為單鏈負鏈RNA，該屬是 包括兩種病毒，即埃博拉病毒（Ebola virus, E1B0V)和馬爾堡病毒（Marburg virus, MBV), 這兩種病毒均為管制病毒，需要在生物安全4級（P-4)實驗室操作完成[Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories.4th ed. Washington, DC:U. S. Department of Health and Human Services, U. S. Government Printing Office ；1999. DHHS Publication CDC 93-8395·]。埃博拉出血熱（Ebola hemorrhagic fever，EHF)由埃 博拉病毒引起，是嚴重危害公共安全和人類健康的重大烈性傳染病，致死率高達50 % -90 % [Sanchez,A. ；Geisbert, Tff. ；Feldmann, H. Filoviridae:Marburg and Ebola viruses. In :Knipe, DM. ；Howley, PM. , editors. Fields virology.Philadelphia:Lippincott Williams&Wilkins ;2006. 1409-1448.]。馬爾堡病毒也會引起出血熱，死亡率達到 50-80% [Nonfatal cases were underreported due to an uncooperative community ； thus, the mortality value seems overestimated(WHO update, August 24,2005]〇 絲 狀病毒是單鏈負鏈RNA病毒，有囊膜，表面有包膜糖蛋白GP，是唯一負責病毒進入宿主的 病毒蛋白，中心為螺旋狀核衣殼，包括基因組RNA及其他6種病毒蛋白[Feldmann，H.; Geisbert, Tff. ；Jahr 1 ing, PB. , et al. Filoviridae. In:Fauquet, C. ；Mayo, MA.； Maniloff, J. ；Desselberger, U. ；Ball,LA., editors. Virus taxonomy:VIIIth report of the international committee ontaxonomy of viruses. 2004. 645-653. ] 〇 絲狀病毒基因 進化樹如圖 5 所不[Sanchez A, Trappier SG,Mahy BW,et al. The virion glycoproteins of Ebola viruses are encoded in two reading frames and are expressed through transcriptional editing. Proc Natl Acad Sci USA 1996;93:3602-3607],其 中埃博拉病毒的基因目前已確定5個亞型，分別為扎伊爾型（Zaire-EBOV)、蘇丹型 (Sudan-EBOV)、萊斯頓型（Reston-EBOV)、科特迪瓦型（Cote d'lvoire-EBOV)和本迪布焦 型（Bundibugyo-EBOV)，其中扎伊爾型惡性程度最強，死亡率90%以上。
[0003] 埃博拉出血熱和馬爾堡出血熱是人畜共患病，人類和靈長類動物普遍易感，主要 爆發于非洲地區，美國、英國、瑞士和中東曾報道有輸入病例。臨床癥狀是突然高燒、頭痛、 肌痛、惡心嘔吐、腹瀉等，最終病人死于多器官出血衰竭、組織壞死[streether LA. Ebola virus. Br J Biomed Sci. 1999. 56 (4) : 280-284. ] 〇
[0004] 目前尚無針對絲狀病毒有效疫苗和治療藥物，主要是通過防范措施控制病毒擴 散，密切監控疫情，對有出血癥狀的可疑病人進行隔離觀察。治療方法主要是輔助性的，包 括平衡電解質、修復血小板以防止出血，由于埃博拉康復者的血清在治療疾病中無顯著作 用，常用的抗病毒方法，如干擾素、利巴韋林均無效[Heinz Feldmann，Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862.]，目前尚無特效治療方 法。
[0005] 在針對絲狀病毒藥物研發方面[Heinz Feldmann, Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862. ] : (1)常規抗病毒治療方法，如利 巴韋林和干擾素均無效；（2)血清療法，應用恢復期病人的血清用于病人的被動免疫治療， 結果沒有定論；（3)反義RNA或干擾RNA療法，在鼠類和非人靈長類中顯示有療效。但RNA 干擾療法受限于明確EB0V亞型序列的前提，無法應對疫情爆發早期的快速診斷；（4)針對 EB0V凝血異常的癥狀，有報道來源于線蟲的抗凝蛋白rNAPc2在治療非人靈長類感染中有 33 %的療效。
[0006] 現有數據表明病人的生存率與病毒量密切相關，當病毒量低于l〇45pfu/ml血液的 病人存活率大大提高[Geisbert TW, Hensley LE, Larsen T，et al. Pathogenesis of Ebola haemorrhagic fever incynomolgus macaques: evidence that dendritic cells are early and sustained targets of infection. Am J Pathol. 2003;163:2347 - 2370·]。因 此，盡量降低病毒的復制速度，讓宿主的先天和后天免疫應答來克服感染是抗絲狀病毒藥 物研發的重要策略，阻斷絲狀病毒進入的抑制劑研發有重大意義。
[0007] 以宿主為靶點進行抗病毒藥物篩選是當前病毒學研究領域的熱點。病毒的進入 需要宿主蛋白的參與。針對絲狀病毒進入宿主的過程，2005年和2011年分別發現細胞 內含體/溶酶體中的組織蛋白酶B(Cathepsin B)和NPC1蛋白（Niemann Pick C1)是宿 主應答絲狀病毒侵入的關鍵因子。另外，2014年最新報道發現細胞膜表面的磷脂酰絲氨 酸受體AXL也是重要的EB0V進入相關的宿主因子[Kartik Chandran et al.Endosomal Proteolysis of theEbola Virus Glycoprotein IsNecessary for Infection. Science.2005. 308:1643-1645.]。
[0008] 阿比朵爾（結構式I)是1993年首先由Trofimov等合成并報道[Trofimov，F. A. et al. , Synthesis of a new antiviral agent, arbidole. Pharm. Chem. J. 1993. 27, 75 - 76.], 由前蘇聯Moscow-based Masterlek?藥廠研發的抗流感藥物。該藥物在前蘇聯（現俄羅斯） 已應用超過20年，主要用于甲型和乙型流感病毒引起的呼吸道疾病[Boriskin，Y. S.，et al.,Arbidol:a broad-spectrum antiviral compound that blocksviral fusion. 2008. Cum Med. Chem. 15, 997 - 1005.]。在我國阿比朵爾也作為人用藥和獸藥用于流感的預防 和治療[Berendsen，B. J.，et al. , Quantitative trace analysis of a broad range of antiviral drugs in poultry muscle using column-switch liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Anal. Bioanal. Chem. 2012. 402, 1611 - 1623. ]〇
[0009] 除抗流感病毒外，研究還發現阿比朵爾對多種RNA病毒感染都有阻斷作用，如副 粘病毒科的呼吸道合胞病毒[Shi，L.，et al.，Antiviral activity of arbidol against influenza A virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackie virus and adenovirus in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2007. 152, 1447 - 1455.]、小核糖 核酸病毒科的脊髓灰質炎病毒、鼻病毒和柯薩奇病毒[Brooks，M.J.，et al.，Antiviral activity of arbidol，a broad-spectrum drug for use against respiratory viruses, varies according to test conditions. J. Med. Virol. 2012. 84, 170 - 181.； Zhong, Q. , et al. , Antiviral activity of Arbido1 against Coxsackie virus B5in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2009. 154, 601 - 607.]、本揚病毒科的漢坦病毒[Deng, H. Y. , et al. , Efficacy of arbidol on lethal hantaan virus infections in suckling mice and in vitro. Acta Pharmacol. Sin. 2009. 30, 1015 - 1024·]、披蓋病毒科的基孔 肯亞病毒[Delogu, I.,et al. , In vitro antiviral activity of arb idol against Chikungunya virus and characteristics of a selected resistant mutant.2011. Antiviral Res. 90, 99 - 107.]、肝DNA病毒科的乙型肝炎病毒[Zhao, C. , et al· , Synthesis and in vitro anti-hepatitis B virus activities of some ethyl5-hydroxy-lH-indole-3-carboxylates. Bioorg. Med. Chem. 2006. 14, 2552 - 2558]、黃病毒科的丙型 月干炎病毒[Blaising, J. , et al. , Arbidol inhibits viral entry by interfering with clathrin-dependent trafficking. Antiviral Res. 2013. 100,215 - 219.]和 本 揚病毒科的克里米亞-剛果出血熱病毒[Lisa Oestereich,et al., Evaluation of Antiviral Efficacy of Ribavirin, Arbidol, and T-705 (Favipiravir)in a Mouse Model for Crimean-Congo