一種甘氨酰胺長效注射劑的制作方法
【專利摘要】一種甘氨酰胺長效注射劑，提供一種甘氨酰胺長效制劑及其制備方法，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78.4％，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81.2％，所述甘氨酰胺長效注射劑前15天內含物溶出率為75％，30天內，仍有15％藥物未釋放。
【專利說明】
一種甘氨酰胺長效注射劑
技術領域
[0001] 本發明屬于藥物制劑領域，特別的涉及一種甘氨酰胺長效注射劑。
【背景技術】
[0002] 甘氨酰胺及其衍生物一直被廣泛應用于生物、醫藥、化工領域，最早合成甘氨酰胺 化合物的是德國的Ernest Koenigs等。后來，人們為了尋找一些具有類似可卡因的具有 局部麻醉作用但不會使人上癮的麻醉藥物合成了數百種該類化合物，其中利度卡因、丙胺 卡因、美匹卡因等表現出很好的麻醉作用（董庭威，谷珉珉，吳世暈等.現代有機化學實 驗.上海翻譯出版社.1987. 312)，從而促進了這類化合物的廣泛研究，如被用作抗糖尿病 劑的取代N-(吲哚-2-羰基）甘氨酰胺（CN1142492)，具有抗血栓形成和XA因子抑制作 用的雙環取代的甘氨酰胺（CN101213195A)，作為CCK受體興奮劑的芳基取代的甘氨酰胺 (CN1131144A)，抑制HIV復制的a-羥基甘氨酰胺（CV1777414A)等。同時，甘氨酰胺衍生 物也被應用于化工領域，如N-烷基-鹵代氨基乙酰胺可用作潤滑油的無灰、無磷且無硫抗 磨和摩擦調節添加劑（CN200580030478. 8)。
[0003] 與其它心血管病產品一樣，如何提高甘氨酰胺的生物利用度，一直是人們期望解 決的問題。本
【發明人】通過對甘氨酰胺殼聚糖微球進行深入細致的研究，確立了甘氨酰胺的 微球包埋率、體外釋放率，優化制備工藝，提高注射劑整體特征性物質基礎的一致性，使產 品質量穩定一致，從而生產出高品質長效甘氨酰胺注射劑，于是完成了本發明。
【發明內容】
[0004] 本發明實施例的目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種甘氨酰胺長效注射 劑。
[0005] 為了實現上述發明目的，本發明的技術方案如下：
[0006] -種甘氨酰胺長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將甘氨酰胺制成殼聚糖微球， 靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為：
[0007] (1)將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰 醋酸溶液，其中，攪拌溫度為45_55°C，加熱方式為蒸汽加熱；
[0008] (2)將甘氨酰胺溶于步驟（1)殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1:3_3:1，得混合溶 液B ;
[0009] (3)將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45， 溫度控制在50-55°C，用pH調節劑將pH調至7. 8-9. 2,其中，乳化設備是帶有隔層的乳化 鍋，轉速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30， 中速攪拌至室溫得穩定的乳化液D ;
[0010] (4)連續攪拌乳化液D，將交聯劑戊二醛加入乳化液D中，交聯反應2. 5-3. 5小時， V/V 比為 1:10-2:9 ;
[0011] (5)交聯反應完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E ;
[0012] (6)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心；
[0013] (7)將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有甘氨酰胺的殼聚糖微球；
[0014] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。
[0015] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。
[0016] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑前15天內含物溶出率為75%，30天內，仍有 15 %藥物未釋放。
[0017] 本發明的有意效果是
[0018] 1、選擇殼寡糖作為微丸載體，是因為：其本身具有一定的免疫原性，能夠刺激機體 免疫應答；殼寡糖分子與存在于腸內皮細胞上的有害微生物的受體結構相似，能與一定的 毒素、病毒和真菌細胞的表面結合，可作為外源抗原的佐劑減緩抗原的吸收，增加抗原的效 價，從而增強機體的細胞和體液免疫反應；殼寡糖可促進有益菌如雙歧桿菌等的大量增殖， 而雙歧桿菌可以提高機體的抗體水平，激活巨噬細胞的吞噬活性，從而影響機體的免疫功 能。
[0019] 2、由于本發明的制劑在貯存過程中始終為油性溶液，因此避免了脂肪乳長期儲存 中存在的乳滴聚集、局部破乳飄油等問題，進一步提高了制劑的穩定性。
[0020] 3、本發明提供的制劑的制備工藝簡單，更易工業化，由于不需要高強度、高壓力的 均質設備，比如高速剪切裝置，所以產品不會出現設備脫落的雜質（不銹鋼粒等）及外界引 入的雜質，同時溫和的制備條件可以避免制備過程中甘氨酰胺的降解，進一步提高了產品 的安全性。
【具體實施方式】：
[0021] 實施例1-4
[0022] -種甘氨酰胺長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將甘氨酰胺制成殼聚糖微球， 靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為：
[0023] (1)將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為a:32,攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸 溶液，其中，攪拌溫度為45_55°C，加熱方式為蒸汽加熱；
[0024] (2)將甘氨酰胺溶于步驟（1)殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為b: c，得混合溶液B ;
[0025] (3)將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1: d，溫度 控制在50-55°C，用pH調節劑將pH調至7. 8-9. 2,其中，乳化設備是帶有隔層的乳化鍋，轉 速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1: e，中速攪拌至 室溫得穩定的乳化液D;
[0026] (4)連續攪拌乳化液D，將交聯劑戊二醛加入乳化液D中，交聯反應2. 5-3. 5小時， V/V 比為 f:g;
[0027] (5)交聯反應完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E ;
[0028] (6)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心；
[0029] (7)將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有甘氨酰胺的殼聚糖微球；
[0030] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。
[0031] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。
[0032] 優選的，所述甘氨酰胺長效注射劑前15天內含物溶出率為75%，30天內，仍有 15 %藥物未釋放。
[0033]
[0034] 實施例5
[0035] 藥物包埋率的測定
[0036] 稱取lOOmg干燥微囊，加入5mL 10%的EDTA溶液，超聲至微囊完全破碎，于 4000r/min離心30min，取上清液，沉淀加5mL蒸餾水，合并上清液，定容至50mL，于280nm下 測藥物含量。
[0037] 實施例6
[0038] 體外釋放實驗
[0039] 稱取100mg干燥微囊置于10mL生理鹽水（含0? 01 %疊氮化鈉），12小時、15天后 取5mL溶液，用紫外分光光度計法測定藥物的含量，同時加入等量新鮮釋放液保持恒定體 積。
[0040] 實施例7
[0041] 微囊中甘氨酰胺的完整性分析
[0042] 將未經包埋的甘氨酰胺和從微囊中抽提的甘氨酰胺，同時用12%的聚丙烯酰胺凝 膠進行SDS-PAGE電泳；電泳儀為Bio-Rad公司的Mini-protein系統.比較電泳后的蛋白 質譜帶以判斷包埋前、后甘氨酰胺結構的完整性。
[0043]
[0044] 上述參照實施例是對該防治水產動物細菌性腸炎的中藥組合物的制備方法的詳 細描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個實施例，因此在不脫 離本發明總體構思下的變化和修改，應屬本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種甘氨酰胺長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將甘氨酰胺制成殼聚糖微球， 靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為： (1) 將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸 溶液，其中，攪拌溫度為45-55°C，加熱方式為蒸汽加熱； (2) 將甘氨酰胺溶于步驟（1)殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1-3:3-1，得混合溶液B ; (3) 將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45,溫度 控制在50-55°C，用pH調節劑將pH調至7. 8-9. 2,其中，乳化設備是帶有隔層的乳化鍋，轉 速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30,中速攪 拌至室溫得穩定的乳化液D ; (4) 連續攪拌乳化液D，將交聯劑戊二醛加入乳化液D中，交聯反應2. 5-3. 5小時，V/V 比為 1-10:2-9 ; (5) 交聯反應完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得固體 混合物E ; (6) 用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心； (7) 將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有甘氨酰胺的殼聚糖微球。2. 根據權利要求1所述的一種甘氨酰胺長效注射劑，其特征在于，所述甘氨酰胺長效 注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。3. 根據權利要求1所述的一種甘氨酰胺長效注射劑，其特征在于，所述甘氨酰胺長效 注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。4. 根據權利要求1所述的一種甘氨酰胺長效注射劑，其特征在于，所述甘氨酰胺長效 注射劑前15天內含物溶出率為75%，30天內，仍有15%藥物未釋放。
【文檔編號】A61K31/16GK105853346SQ201510031088
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2015年1月21日
【發明人】田東奎, 何磊
【申請人】天津法莫西醫藥科技有限公司