一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其以相對分子質量在1萬以上的明膠和相對分子質量在10萬以上，脫乙酰度≥80％的殼聚糖為主要基材，以京尼平為交聯劑，在專用成型模具中，通過形成垂直方向的溫度梯度冷凍成型，即得內部成蜂窩狀多孔結構；且從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，上表面的孔徑為5?70μm，下表面的孔徑為50?200μm，每相鄰兩孔彼此貫通的、具有皮膚仿生結構的多孔材料。本發明制備工藝簡單、易控，制造成本低，所制得的產品質量好、品質穩定，具有皮膚仿真結構、具有良好的吸水性、生物可降解性、生物相容性以及抗菌、抗病毒和抗凝血功能性。
【專利說明】
一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法
技術領域
[0001]本發明涉及一種醫用多孔材料的制備方法，尤其涉及一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法。
【背景技術】
[0002]生物移植材料是生物醫用材料的一種，通常是指由手術植入到人體內，用于組織器官的替換、修復、重建，并和人體組織、器官和血液保持長期接觸的材料。生物醫用植入材料按其在活性組織中的行為，可分為生物穩定的、生物可降解吸收的和生物可部分降解吸收的。其中生物可降解吸收的移植材料由于其既能為機體提供暫時的支架或屏障，又能在作用完成后，通過降解成為人體可吸收的物質而去除，避免體內因長期存在外來異物而產生的排異反應、非感染性炎癥及其它一些不良影響，同時也避免了二次手術，故對于組織和器官的修復和重建有重要意義。
[0003]可降解吸收移植材料由于其使用環境的特殊性，臨床上對其有著很嚴格的評價標準。除應滿足基本的醫療功能外，可降解吸收移植材料還應具備優良的生物相容性、可降解性、降解產物的安全性和可吸收性等。明膠和殼聚糖是美國食品藥品管理局(FDA)批準用于組織工程等醫學領域的天然生物材料。明膠是膠原水解而成的水溶性蛋白質混合物，明膠保持了膠原的三螺旋結構，含有類似精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列，具有優良的親水性和生物相容性，能夠促進細胞的粘附與生長，可吸收相當于重量5-10倍的水；同時，明膠去除了膠原的免疫原性，減少了可能存在的病原體感染。作為優良的天然生物材料，明膠已經廣泛應用于組織工程領域。殼聚糖(chitosan，CS)，由甲殼素經N-脫乙酰化處理后得到，是迄今為止發現的惟一一種天然堿性多糖，不僅生物相容性良好，可生物降解，降解產物安全無毒，具有廣泛的抗菌、止血、止痛作用，而且還具有促進細胞生長的獨特的生物活性。同時殼聚糖材料對溫度相對穩定，不會因長期處于體內較溫和的環境下而發生變形、縮水現象，從而在組織工程中的應用顯示出巨大的優勢。
[0004]京尼平來源于梔子苷，是一種天然的交聯劑，毒性遠遠低于合成類交聯劑，如戊二醛、甲醛、EDC/NHS以及二異氰酸鹽等。作為水溶性的雙功能交聯劑，京尼平可以和明膠、殼聚糖反應，制備得到力學性能優良的可降解吸收移植材料，在組織工程中應用廣泛。另外，京尼平還可以通過交聯反應，固定生長因子于支架內部，應用于組織再生修復。
[0005]組織工程皮膚支架能夠為皮膚細胞的體外培養提供合適環境，以解決糖尿病足潰瘍、燒傷等問題造成的皮膚缺損問題。臨床常用或研究的皮膚組織工程支架多以均一孔徑的支架為主，雖然材料制備簡單，但是由于孔徑單一，不適合全層皮膚的培養，使用于臨床時容易造成瘢痕。有研究表明，具有皮膚仿生結構的梯度漸變組織工程支架更利于皮膚的再生，針對皮膚仿生結構的皮膚組織工程支架，研究報道多為采用雙層或多層復合的方法或其他方法制備，該方法較為耗時如Harley及Oh等人研究使用旋轉/離心技術結合冷凍干燥技術構建徑向具有梯度孔結構的多孔支架，支架的孔徑大小可以通過旋轉速度來調節，但此技術一般只適用于制備血管用管狀支架材料，對于構建其他支架材料不適用(Harley，B.A.,Hastings,A.Z.,Yannasj 1.V.&Sannino,A.Fabrieating tubular scaffolds with aradial pore size gradient by a spinning technique.B1materials 27,866-874,do1:10.1016/j.b1materials.2005.07.012(2006);0h，S.H.,Park,1.K.，Kim，J.M.&Lee，J.H.1n vitro and in vivo characteristics of PCL scaffolds with pore sizegradient fabricated by a centrifugat1n method.B1materials28，1664—1671，do1:10.1016/j.b1materials.2006.11.024(2007) )，Wu、Zhang 和 Mao 等人使用不同致孔劑結合冷凍干燥技術形成梯度孔或雙層支架結構，通過調節致孔劑大小來控制孔徑分布，但是致孔劑較難完全去除干凈，殘留致孔劑對材料后期使用不利(Wu，H.et al.Fabricat1n ofchitosan-g-polycaprolactone copolymer scaffolds with gradient porousmicrostructures.Materials Letters62，2733-2736，do1:1 0.10 16/j.matlet.2008.01.029(2008);Zhang，Q.，Lu，H.,Kawazoe,N.&Chen,G.Preparat1n ofcollagen porous scaffolds with a gradient pore size structure using iceparticulates.Materials Letters107，280-283，do1:10.1016/j.matlet.2013.05.070(2013)；Mao,J.S.，Zhao ,L.G., Yin ,Y.J.&Yao,K.D.Structure and properties ofbilayer chitosan-gelatin scaffolds.B1materials 24,1067-1074,do1:Pii S0142-9612(02)00442-8)，Mao等人將試樣置于單向導熱的環境中，制備了雙層支架材料，由于預凍溫度單一，形成的支架孔徑不可調控，且未形成梯度孔結構，Tanya J.Levingstone等使用層層自組裝的方法構建三層梯度仿生軟骨支架，每層支架均通過冷凍干燥制備，制備一次軟骨支架需要三次冷凍干燥過程，費時費力(Levingstone，T.J.,Matsiko ,A.,Dickson,G.R.，O’Brien，F.J.&Gleeson，J.P.A b1mimetic mult1-layered collagen-basedscaffold for osteochondral repair.Acta B1materialia 10，1996—2004，do1:10.1016/j.actb1.2014.01.005(2014))。
[0006]完整皮膚具有表皮和真皮結構，而真、表皮細胞生長所需要的孔徑大小不同。有研究表明，20μπι更適合表皮細胞的生長，80μπι更適合真皮成纖細胞的生長。并且，表皮細胞和真皮成纖細胞聯合培養時細胞間的相互作用可更快促進傷口愈合，促進新皮的再生，并能避免瘢痕的形成。具有梯度孔結構的皮膚工程支架可同時容納表皮細胞和真皮成纖細胞，比單層皮膚組織工程支架更具優越性。
【發明內容】
[0007]本發明的目的是，提供一種上述的具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其工藝簡單、易控、制造成本低，產品質量穩定。
[0008]本發明為實現上述目的所采用的技術方案是，一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0009]第一步，原料制備
[0010]按溶質與溶劑的質量比為1-10:100，將明膠置于去離子水、蒸餾水、生理鹽水、注射用水或林格氏液中，加熱攪拌至完全溶解，得到明膠溶液；
[0011]按溶質與溶劑的質量比為1-10:100，將殼聚糖加入到濃度為I%-10%的鹽酸、醋酸、乳酸、苯甲酸或甲酸溶液中，攪拌至完全溶解，得到殼聚糖溶液；
[0012]按殼聚糖與明膠的質量比為0.5-1:1，向上述殼聚糖溶液中加入明膠溶液，混合均勻后，滴加京尼平溶液，使京尼平在混合體系中的濃度保持在0.15-0.5mmol/L，并采用磷酸氫二鈉調節其pH值至中性；
[0013]上述明膠的相對分子質量多I萬；殼聚糖的相對分子質量多10萬，脫乙酰度多80% ；
[0014]第二步，在專用模具內冷凍成型
[0015]將京尼平-明膠-殼聚糖溶液傾倒入專用模具中，控制液深為0.5-5mm，在溫度20-50°C的環境中，靜置12-24h，以使其充分交聯;然后，置于真空脫泡機內在真空度100Pa下脫泡 0.5-lh;
[0016]上述專用模具為一帶上蓋的平底容器，其周邊壁面材質為絕熱材料，底板材質為銀或銅；
[0017]在專用模具內部底面上，均勻設置有若干數量、豎直朝上的導熱針;導熱針的長度多5_，導熱針布置的疏密程度與仿生皮膚內毛孔分布的疏密程度一致；
[0018]上述平板式換熱器的冷卻媒質為液氮；
[0019]然后，扣緊上蓋并將專用模具置于平板式換熱器換熱表面上冷凍，直至凍結成型，得到固態多孔結構形式的京尼平-明膠-殼聚糖；
[0020]上述冷凍過程是按如下方法控制的:平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯升溫方式，以一 75°C為起始溫度、一 15°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每升溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30_45min ；
[0021]或者，平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯降溫方式，以一15°C為起始溫度、一 75°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每降溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min；
[0022]第三步，真空干燥
[0023]將所得固態多孔材料從專用模具中取出，放入真空干燥機中，真空干燥至絕干，SP得成品。
[0024]上述技術方案直接帶來的技術效果是，制備工藝簡單、易控，既有利于產品質量的穩定，有利于制造成本的降低。
[0025]所制得的明膠-殼聚糖三維梯度人體皮膚仿真結構多孔材料具有皮膚仿生結構，其內部成蜂窩狀，包括若干數量的孔，每相鄰兩孔彼此貫通;并且，從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，上表面的孔徑為5-70μπι，下表面的孔徑為50-200μπι。這種梯度孔結構的明膠-殼聚糖多孔材料，其適于用作皮膚工程支架，可同時容納表皮細胞和真皮成纖細胞，比單層皮膚組織工程支架更具優越性。
[0026]并且，由于多孔材料的主要化學成分為明膠、殼聚糖和京尼平。因而具有良好的生物相容性、可降解性和良好的吸水性能。
[0027]更為重要的是，明膠不僅生物相容性良好，可生物降解，降解產物安全無毒，具有與皮膚類似的結構，優良的親水性，可吸收相當于重量5-10倍的水，而且還具有促進細胞粘附和生長的功能。同時，明膠去除了膠原的免疫原性，減少了可能存在的病原體感染，已經廣泛應用于組織工程領域。殼聚糖不僅生物相容性良好，可生物降解，降解產物安全無毒，具有廣泛的抗菌、止血、止痛作用，而且還具有促進細胞生長的獨特的生物活性。同時殼聚糖材料對溫度相對穩定，不會因長期處于體內較溫和的環境下而發生變形、縮水現象，從而在組織工程中的應用顯示出巨大的優勢，特別適于用作人體皮膚工程支架。
[0028]上述技術方案中，在明膠-殼聚糖中混入京尼平，其中的京尼平有兩方面的用途。其一是，京尼平是梔子苷經葡萄糖苷酶水解后的產物，是一種優良的天然生物交聯劑，其毒性遠低于戊二醛和其他常用化學交聯劑，具有良好的生物相容性，以京尼平作為明膠和殼聚糖的化學交聯劑，以使明膠和殼聚糖多個線型分子相互鍵合交聯成網狀結構，可使材料的降解性能得到明顯改善，并提升其力學性能;其二是，京尼平對于治療肝臟疾病、降壓、通便以及緩解II型糖尿病的癥狀具有顯著作用。京尼平成分的加入，使得最終制備出的多孔材料具有良好的肝臟疾病、高血壓、便秘以及11型糖尿病等疾病輔助治療功能。
[0029]上述技術方案中，盛裝有京尼平-明膠-殼聚糖溶液的專用模具疊放在平板式換熱器換熱表面上，進行熱交換(制冷)。此時，在豎直方向上的不同標高位置處，在京尼平-明膠-殼聚糖溶液內部必然存在一定的溫差或被凍結過程的先后順序，且這種溫差或被凍結過程的先后順序必然導致最終凍結成型的京尼平-明膠-殼聚糖多孔材料從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變。
[0030]概括而言，上述技術方案的關鍵點就在于:采用定向冷凍干燥法，通過控制模具內水平溫度場的均勻性和縱向溫度的漸變，孔徑大小可由小孔5_70μπι至大孔50-200μπι梯度漸變，孔形態為蜂窩狀連通結構的明膠-殼聚糖多孔材料。
[0031]優選為，上述平板式換熱器換熱表面溫度由計算機控制，平板式換熱器的換熱表面的降溫速率為一 5°C/min?一 10°C/min、平板式換熱器的換熱表面的升溫速率為+5°C/min ?+lCTC/min。
[0032]該優選技術方案直接帶來的技術效果是，可以更好地保證三維梯度孔的成形質量。
[0033]進一步優選，上述導熱針為錐形針，按細端在上、粗端在下方式布置。
[0034]該優選技術方案直接帶來的技術效果是，“導熱針為錐形針，按細端在上、粗端在下布置”這一技術特征，與所需獲得的“從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變”這種結構形式的孔的形狀相對應，這將更進一步地，盡快產品制備過程的冷凍成型速度和冷凍成型質量，更便于最終產品質量控制與質量穩定。
[0035]進一步優選，上述專用模具為組合式結構，包括底座與管筒，底座與管筒承插連接，成過盈配合。
[0036]該優選技術方案直接帶來的技術效果是，便于冷凍成型后的多孔材料的簡單、快速脫模，并可降低脫模過程中可能因外力的施加，所造成的對多孔材料的沖擊和損傷。
[0037]綜上所述，本發明相對于現有技術，具有制備工藝簡單、易控，所制備出的多孔材料產品具有“從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變”這種具有三維梯度孔結構形式;并且所制得的產品質量穩定、制造成本較低等有益效果。
【具體實施方式】
[0038]下面結合實施例，對本發明進行詳細說明。
[0039]說明:
[0040]一、以下各實施例的原料來源如下:
[0041]明膠:相對分子質量多1萬，為市售產品；
[0042]京尼平:為市售產品；
[0043]殼聚糖:相對分子質量彡10萬，脫乙酰度彡80%;為市售產品。
[0044]二、產品質量和性能參數指標檢測與檢驗:
[0045]1、孔徑的測量方法:使用手術刀，沿縱向剖切，置于電鏡下，分別選擇放大倍數30倍、50倍進行觀測。
[0046]2、孔隙率的測量方法:液體位移法。
[0047]實施例1
[0048]按溶質與溶劑的質量比為2:100，將明膠置于去離子水中，加熱攪拌至完全溶解，得到質量百分比濃度為2%的明膠溶液；
[0049]按溶質與溶劑的質量比為2:100，將殼聚糖溶于濃度為2%的醋酸中，攪拌至完全溶解，得到殼聚糖溶液；
[0050]按殼聚糖與明膠的質量比為0.5:1，向上述殼聚糖溶液中加入明膠溶液，混合均勻后，滴加京尼平溶液，使京尼平在混合體系中的濃度保持在0.15mmol/L，并采用磷酸氫二鈉調節其PH值至中性，得到京尼平-明膠-殼聚糖溶液；
[0051]將京尼平-明膠-殼聚糖溶液倒入專用模具中，控制液深為3mm，在溫度20-50°C的環境中，靜置12_24h，以使其充分交聯；
[0052]然后，置于真空脫泡機內在真空度100Pa下脫泡0.5h;
[0053]之后，扣緊上蓋并將專用模具置于平板式換熱器換熱表面上冷凍，直至凍結成型，得到固態多孔結構形式的京尼平-明膠-殼聚糖；
[0054]上述冷凍過程是按如下方法控制的:平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯升溫方式，以一 75°C為起始溫度、一 15°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每升溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min;之后，將經過冷凍成型的樣品，入真空冷凍干燥機凍干，即得產品。
[0055]經檢驗:
[0056]所得產品的空隙率為85%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為18μπι，大孔孔徑為96μπι。
[0057]實施例2
[0058]除京尼平-明膠-殼聚糖溶液液面至模具底板高度為0.5mm、真空脫泡時間為Ih、冷凍過程的控制方法為:平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯降溫方式，以一 15°C為起始溫度、一 75°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每降溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min之外；
[0059]其余，均同實施例1。
[0060]經檢驗:
[0061]所得產品的空隙率為80%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為8μπι，大孔孔徑為145μπι。
[0062]實施例3
[0063]除京尼平-明膠-殼聚糖溶液液面至模具底板高度為5_、在溫度20°C的環境中，靜置24h、冷凍過程的控制方法為:平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯降溫方式，以一 15°C為起始溫度、一 75°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每降溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min之外之外；
[0064]其余，均同實施例1。
[0065]經檢驗:
[0066]所得產品的空隙率為87%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為21μπι，大孔孔徑為137μπι。
[0067]實施例4
[0068]除明膠、殼聚糖分別與其溶劑的質量比為1:100、在溫度50°C的環境中，靜置18h之夕卜;其余，均同實施例1。
[0069]經檢驗:
[0070]所得產品的空隙率為85%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為15μπι，大孔孔徑為105μπι。
[0071]實施例5
[0072]除明膠、殼聚糖分別與其溶劑的質量比為5:100、真空脫泡時間為0.8之外；其余，均同實施例1。
[0073]經檢驗:
[0074]所得產品的空隙率為83%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為20μπι，大孔孔徑為120μπι。
[0075]實施例6
[0076]除明膠、殼聚糖分別與其溶劑的質量比為8:100之外;其余，均同實施例1。
[0077]經檢驗:
[0078]所得產品的空隙率為82%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為5μπι，大孔孔徑為145μπι。
[0079]實施例8
[0080]除京尼平在混合溶液中的濃度為0.25mmol/L之外;其余，均同實施例1。
[0081]經檢驗:
[0082]所得產品的空隙率為85%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為58μπι，大孔孔徑為182μπι。
[0083]實施例9
[0084]除京尼平在混合溶液中的濃度為0.35mmol/L之外;其余，均同實施例1。
[0085]經檢驗:
[0086]所得產品的空隙率為87%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為65μπι，大孔孔徑為185μπι。
[0087]實施例10
[0088]除京尼平在混合溶液中的濃度為0.5mmol/L之外;其余，均同實施例2。
[0089]經檢驗:
[0090]所得產品的空隙率為86%;從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，小孔孔徑為62μηι，大孔孔徑為190μηι。
[0091]說明:
[0092]1、我們的經驗表明:京尼平-明膠-殼聚糖溶液液面在專用模具內的深度，對最終產品的最大與最小孔的孔徑，以及孔隙率指標等有很大的影響；其次，降溫速率、冷媒的供送方式，對最大與最小孔的孔徑，以及孔隙率指標也有一定的影響。
[0093]2、平板式換熱器換熱表面溫度由計算機控制，平板式換熱器的換熱表面的降溫速率為一 5°C/min?一 10°C/min、平板式換熱器的換熱表面的升溫速率為+5°C/min?+10°C/min0
[0094]3、專用模具為一帶上蓋的平底容器，其周邊壁面材質為絕熱材料，底板材質為銀或銅；
[0095]在專用模具內部底面上，均勻設置有若干數量、豎直朝上的導熱針，所述導熱針的長度多5_;所述導熱針布置的疏密程度與仿生皮膚內毛孔分布的疏密程度一致。
[0096]4、平板式換熱器的冷卻媒質為液氮。
【主權項】
1.一種具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 第一步，原料制備 按溶質與溶劑的質量比為1-10:100，將明膠置于去離子水、蒸餾水、生理鹽水、注射用水或林格氏液中，加熱攪拌至完全溶解，得到明膠溶液； 按溶質與溶劑的質量比為1-10:100，將殼聚糖加入到濃度為1%-10%的鹽酸、醋酸、乳酸、苯甲酸或甲酸溶液中，攪拌至完全溶解，得到殼聚糖溶液； 按殼聚糖與明膠的質量比為0.5-1:1，向上述殼聚糖溶液中加入明膠溶液，混合均勻后，滴加京尼平溶液，使京尼平在混合體系中的濃度保持在0.15-0.5mmol/L，并采用磷酸氫二鈉調節其pH值至中性； 上述明膠的相對分子質量多I萬;殼聚糖的相對分子質量多10萬，脫乙酰度多80% ； 第二步，在專用模具內冷凍成型 將京尼平-明膠-殼聚糖溶液傾倒入專用模具中，控制液深為0.5-5mm，在溫度20-50°C的環境中，靜置12_24h，以使其充分交聯;然后，置于真空脫泡機內在真空度100Pa下脫泡0.5-lh； 上述專用模具為一帶上蓋的平底容器，其周邊壁面材質為絕熱材料，底板材質為銀或銅； 在專用模具內部底面上，均勻設置有若干數量、豎直朝上的導熱針；導熱針的長度多5_，導熱針布置的疏密程度與仿生皮膚內毛孔分布的疏密程度一致； 上述平板式換熱器的冷卻媒質為液氮； 然后，扣緊上蓋并將專用模具置于平板式換熱器換熱表面上冷凍，直至凍結成型，得到固態多孔結構形式的京尼平-明膠-殼聚糖； 上述冷凍過程是按如下方法控制的:平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯升溫方式，以一 75°C為起始溫度、一 15°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每升溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min; 或者，平板式換熱器換熱表面溫度采用階梯降溫方式，以一 15°C為起始溫度、一 75°C為終點溫度，在起始溫度下保溫45min，之后每降溫5°C保溫一次，每次保溫時間為30-45min;第三步，真空干燥 將所得固態多孔材料從專用模具中取出，放入真空干燥機中，真空干燥至絕干，即得成品O2.根據權利要求1所述的具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，所述平板式換熱器換熱表面溫度由計算機控制，平板式換熱器的換熱表面的降溫速率為一 5°C/min?一 10°C/min、平板式換熱器的換熱表面的升溫速率為+5°C/min?+10°C/min03.根據權利要求1所述的具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，所述導熱針為錐形針，按細端在上、粗端在下方式布置。4.根據權利要求1-3任一所述的具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，所述專用模具為組合式結構，包括底座與管筒，底座與管筒承插連接，成過盈配入口 ο5.根據權利要求1-3任一所述的具有三維梯度孔結構的皮膚支架材料的制備方法，其特征在于，所制得的明膠-殼聚糖三維梯度人體皮膚仿真結構多孔材料具有皮膚仿生結構，其內部成蜂窩狀，包括若干數量的孔，每相鄰兩孔彼此貫通;并且，從下表面至上表面，各孔孔徑分別從大到小成梯度漸變，其中，上表面的孔徑為5-70μπι，下表面的孔徑為50-200μπι。
【文檔編號】A61L27/54GK105920679SQ201610266249
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月26日
【發明人】張元明, 韓光亭, 左文倩, 李顯波, 于仁霞
【申請人】青島大學