韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用
【專利摘要】本發明涉及韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用，可有效解決圍絕經期抑郁癥的治療用藥問題，方法是，將韭菜籽粉碎成粗粉，加石油醚回流提取，脫脂，棄去石油醚；韭菜籽藥渣揮干石油醚，加乙醇浸泡，回流提取，提取液減壓回收乙醇至無醇味，加蒸餾水分散，得樣品液；樣品液上AB?8型大孔吸附樹脂，依次用蒸餾水、質量濃度10%乙醇、質量濃度80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，加等體積石油醚萃取，棄去石油醚；揮去有機溶劑，水層冷凍干燥，粉碎，得韭菜籽總黃酮，該韭菜籽總黃酮有效用于制備治療圍絕經期抑郁癥的藥物，實現韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用。
【專利說明】
韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用
技術領域
[0001] 本發明涉及醫藥，特別是一種韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的 應用。
【背景技術】
[0002] 韭菜籽最早出自《名醫別錄》，為百合科植物韭菜Allium tuberosum Rottler的干 燥成熟種子，河南為其主產區；適當食用可調節人體肝腎缺乏，韭菜籽用于肝腎缺乏，腎陽 虛衰所致的陽痿，腰膝酸軟痛苦。韭子有補肝腎，暖腰膝，壯腎陽的功用。可單味用，或與菟 絲子，補骨脂，淫羊藿等補腎壯陽之品共同運用，用于腎氣不固所致的遺精，尿頻，遺尿，帶 下清稀。韭子有補腎溫陽，固精縮尿的成效，如《令媛要方》單用本品研末或作蜜丸服，腎虛 遺精帶下。治遺精，亦常與龍骨，菟絲子配伍，如《丹臺玉案》四妙丸。《魏氏家藏方》則以韭子 配伍補骨脂，益智仁等補腎縮尿藥，治腎與膀胱虛冷，小便頻數。
[0003] 圍絕經期抑郁癥是一種情緒障礙，不少婦女在絕經前數年就已經出現輕微的情緒 障礙。多半周期性地出現在月經來潮前數天，而在月經來潮后自然緩解，Sr經前綜合征"。 這些患者圍絕經期抑郁癥的發病危險可能增加，嚴重影響著患者的身體健康。
[0004] 現雖有治療圍絕經期抑郁癥的多種藥物，但由于種種原因，其使用和療效并不盡 人意，因此，治療圍絕經期抑郁癥藥物上的改進和創新是本領域技術人員一直研究解決的 技術問題，那么能否將韭菜籽總黃酮制備治療圍絕經期抑郁癥藥物至今未見有公開報導。
【發明內容】
[0005] 針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種韭菜籽總黃 酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用，可有效解決圍絕經期抑郁癥的治療用藥問 題。
[0006] 本發明解決技術方案是，一種韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的 應用，所述的韭菜籽總黃酮是，將韭菜籽粉碎成粗粉，加石油醚回流提取，脫脂，棄去石油 醚;韭菜籽藥渣揮干石油醚，加乙醇浸泡，回流提取，提取液減壓回收乙醇至無醇味，加蒸餾 水分散，得樣品液;樣品液上AB-8型大孔吸附樹脂，依次用蒸餾水、質量濃度10%乙醇、質量 濃度80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，加等體積石油醚萃取， 棄去石油醚;揮去有機溶劑，水層冷凍干燥，粉碎，得韭菜籽總黃酮。
[0007] 該韭菜籽總黃酮有效用于制備治療圍絕經期抑郁癥的藥物，實現韭菜籽總黃酮在 制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用。
【具體實施方式】
[0008] 以下結合具體情況對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0009] 本發明在具體實施中，是由以下方法實現的。
[0010] -種韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用，所述的韭菜籽總黃 酮是，將韭菜籽粉碎成過20-30目的粗粉，加粗粉10倍重量的石油醚(沸程60-90°C )回流提 取lh，脫脂，棄去石油醚;粗粉再加同量石油醚回流提取lh，脫脂，棄去石油醚;韭菜籽藥渣 揮干石油醚，加粗粉10倍重量質量濃度80 %的乙醇浸泡0.5h，回流提取2次，每次Ih，濾過， 合并濾液，減壓回收乙醇至無醇味，加蒸餾水分散至相當于含生藥量〇.3g/ml，得樣品液;樣 品液上AB-8型大孔吸附樹脂，先用2倍柱體積蒸餾水洗脫，棄去水液;繼用4倍柱體積、質量 濃度10%乙醇洗脫，棄去洗脫液;再用6倍柱體積、質量濃度80 %乙醇洗脫，收集80%乙醇洗 脫液，減壓回收乙醇至無醇味，加等體積石油醚萃取1次，棄去石油醚;揮去有機溶劑，水層 冷凍干燥，粉碎，得韭菜籽總黃酮。
[0011] 本發明韭菜籽總黃酮經實地試驗，可有效用于制備治療圍絕經期抑郁癥的藥物， 實現韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用，有關試驗資料如下：
[0012] 1.材料與方法
[0013] 1.1實驗材料
[0014] 1.1.1實驗動物
[0015] KM小鼠，SPF級，雌性，22~25g，山東魯抗醫藥股份有限公司；動物合格證號： 37005400000048;實驗倫理編號：DWLL16020050;河南中醫學院動物實驗中心許可證號： SYXK(豫）2015-0005。
[0016] 1.1.2實驗藥物
[0017]韭菜籽總黃酮；
[0018]更年安膠囊，山西黃河中藥有限公司生產，批號150102;大豆異黃酮維E軟膠囊，威 海紫光生物科技開發有限公司生產，批號14100301。
[0019] 1.1.3實驗試劑
[0020] 水合氯醛，天津市科密歐化學制劑開發中心，批號20140807 ;羧甲基纖維素鈉，天 津市恒興化學試劑制造有限公司，批號20140728;注射用青霉素鈉，華北制藥股份有限公司 生產，批號F4046509;0.9%氯化鈉注射液，河南科倫藥業有限分司，批號C2015041601-1;甲 醛溶液(分析純），煙臺市雙雙化工有限公司，批號20150401;酒精:新鄉市三偉消毒制劑有 限公司；生產批號20140905;小鼠 E2ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號20151 IOlAdHtT ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號20151101A;小鼠5-HT ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號 2015110IA;小鼠 DA ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號2015110IA;小鼠 NE ELISA檢測試劑 盒，R&D公司，批號20151101A。
[0021] 1.1.4實驗儀器
[0022]電子稱，上海民橋醫療器械有限公司生產，型號JY601;電子分析天平，奧豪斯(上 海)公司生產，型號ARl 140/C;高速臺式離心機，上海安亭科學儀器廠生產，型號TGL-168;小 鼠自主活動測試儀，成都泰盟科技有限公司生產，型號ZZ-6;小鼠避暗儀，成都泰盟科技有 限公司生產，型號BA-200;懸尾測試儀，成都泰盟科技有限公司，型號TS-200;電熱恒溫水浴 鍋，上海一恒科學儀器有限公司生產，型號HWS12;可調式移液器，上海雷勃分析儀器有限公 司；酶標儀，美國BIO-RAD公司生產，型號680;電動顯微鏡，日本OLYMPUS公司，型號:BX61。 [0023] 1.2實驗方法
[0024] 1.2.1造模與給藥
[0025]造模方法：取體重22~25g雌性昆明小鼠84只，隨機取10只作為空白組，做假手術 處理，其余小鼠造圍絕經期模型。小鼠稱重后腹腔注射10%水合氯醛(0.03ml/10g)麻醉后 腹位固定，然后從小鼠背部最末肋骨下，在腋中線和距脊柱外側約Icm交叉處去毛（用動物 專用推子去毛），碘酒消毒后切開皮膚和背肌約0.5~lcm，切口視野中可見一乳白色發亮的 脂肪團，卵巢即包埋其中。用小鑷子輕輕夾住脂肪團拉出切口外，分離脂肪團，即可見到一 團細線狀不規則呈黃紅色的卵巢。剪取時先將卵巢下輸卵管(包括脂肪）用細線結扎，再摘 除卵巢，術后用生理鹽水棉球擦拭后，順勢將子宮角放回腹腔中，縫合肌肉及皮膚，同法摘 除雙側卵巢。術后精心飼養，肌肉注射青霉素25萬u/kg(每只0.02mL)以防感染，連續3d，每 天1次。手術5d后開始逐只進行小鼠陰道涂片檢查，每天1次，連續5d，以確定卵巢是否完全 切除。涂片呈現動情反應的小鼠棄去不用，選擇60只去勢完全的小鼠隨機均勻分為6組供實 驗用，分別為模型組，更年安膠囊組，大豆異黃酮軟膠囊組，大、中、小劑量韭菜籽總黃酮組。
[0026] 給藥5d后，空白組小鼠5只/籠飼養，正常飲食飲水，不給任何刺激，造模型6組均為 每籠飼養1只小鼠，每天隨機給予不同刺激。6種應激因子按隨機方法在18d內應用:①潮濕 墊料（Ig墊料，Iml水），②冰水游泳(4 °C，5min)，③熱應激(45 °C，5min)，④通宵照明（24h)， ⑤禁食(24h)，⑥禁水(24h)，。每天隨機給予一種刺激，每種刺激不能連續出現，連續18d。
[0027] 配藥:0.5 % CMC配制方法:稱取羧甲基纖維素鈉4g，用蒸餾水配成800ml。
[0028] (1)大、中、小劑量韭菜籽總黃酮組給藥劑量分別為300mg · kg-1USOmg · kg一\ 75mg · kg<(相當于臨床用量的30、15、7.5倍，給藥體積0.11111/1(^)。配置方法:分別取韭菜 籽總黃酮4粒、2粒、1粒，先混懸于少量的0.5 % CMC溶液，然后再定容到40ml，混勻，即為所需 韭菜籽總黃酮大、中、小劑量混懸液。
[0029] (2)更年安膠囊(675mg · kg'濃度67.5mg iL'相當于臨床用量的15倍）；配置 方法:取更年安膠囊9粒，先混懸于少量的0.5%CMC溶液，然后再定容到40ml，混勻，即為所 需更年安膠囊混懸液。
[0030] (3)大豆異黃酮維E軟膠囊（250mg · kg'濃度25mg · ml/1，相當于臨床用量的15 倍）；配置方法:取大豆異黃酮膠囊2粒，先混懸于少量的0.5 % CMC溶液，然后再定容到40ml， 混勻，即為所需大豆異黃酮混懸液。
[0031] 儲存方法:冷藏，用時隔水溫熱
[0032] 給藥方法:各組動物于手術后第10天給予相應藥物。更年安膠囊組灌服更年安膠 囊混懸液675mg · kg^1，大豆異黃酮軟膠囊組灌服大豆異黃酮軟膠囊混懸液250mg · kg^1， 大、中、小劑量韭菜籽總黃酮組分別組別灌服大、中、小劑量韭菜籽總黃酮300mg · kg' 150mg · kgijSmg · kg+1。空白組和模型組分別灌服同體積蒸餾水，每日灌胃給藥1次，連續 給藥30d。
[0033] 1.2.2觀察項目及檢測方法
[0034] 于末次給藥后2h，小鼠取血，測定血清中E2、T、DA、5-HA、NE的含量;然后處死小鼠， 摘除胸腺、脾臟、子宮組織，稱量其濕重并計算臟器指數，然后取腦，切去一半，制備腦組織 勻漿，用酶免法測定腦組織勻漿中單胺類神經遞質5_HT、DA的含量。將胸腺、脾臟、子宮、腦 組織固定于10%福爾馬林溶液中，HE染色，觀察各組的組織形態學變化。用免疫組化法測下 丘腦、垂體、子宮中ER表達，下丘腦、垂體中AR表達；
[0035] 1 · 2 · 2 · 1強迫游泳實驗測試
[0036]慢性應激刺激結束后的第1天測定各組小鼠6分鐘內2-6分鐘不動時間。（將各組小 鼠放入2000mL的燒杯，水溫25°C動物除了保持漂浮所需的必要的最小運動外，肢體停止運 動記為不動，記錄6min內的第2~6min的不動時間總和。）
[0037] 1.2.2.2自主活動測試
[0038]慢性應激刺激結束后的第2天測定各組小鼠5min內自主活動次數。
[0039] 1.2.2.3避暗法
[0040] 慢性應激刺激結束后的第3天，將小鼠尾部對著進入暗室的小口放入測定盒中，進 行訓練，24h后重新測定小鼠首次進入暗室的潛伏期及5min內進入暗室遭電擊的次數。
[0041 ] 1.2.2.4懸尾實驗
[0042]慢性應激刺激結束后的第5天測定各組小鼠6分鐘內2-6分鐘不動時間。
[0043] 1.2.3試劑盒測定方法
[0044] 血清標本的獲取:使用不含熱原和內毒素的試管，取血過程中避免任何刺激，防止 溶血;收集血液后，3000轉離心10分鐘后，將血清和紅細胞迅速小心的分離。
[0045] 小鼠雌二醇(E2)、睪酮(T)、5_羥色胺(5-HT)、多巴胺(DA)ELISA檢測試劑盒測定方 法，詳見說明書。
[0046] 1 · 2 · 4統計學處理方法
[0047]數據分析用SPSS17.0醫用統計包進行數據資料的統計學處理，計量資料用平均數 土標準差（X土s)表示，各組間比較采用單因素方差分析，方差檢驗齊者用LSD法，方差不齊者 用Games-Howell法檢驗，等級資料采用Ridit檢驗。
[0048] 2 結果
[0049] 2.1對圍絕經期抑郁模型小鼠自主活動的影響
[0050] 實驗各組小鼠自主活動測試結果，見表1。
[0051] 表1韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠自主活動的影響
LUUOJj 壯：―-F^U.U丄，衣不勺;fiiHSEPL權；氺尸氺氺F^U.U丄，衣不勺恢坐SEPL權
[0054]由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠的活動、站立次數顯著減少(P〈0.01)，反 映了圍絕經期抑郁癥模型小鼠對新鮮環境的好奇程度降低。與模型組比，大、中、小劑量韭 菜籽總黃酮、大豆異黃酮軟膠囊、更年安膠囊可顯著提高小鼠的活動次數和站立次數(P〈 0·01)〇
[0055] 2.2對圍絕經期抑郁模型小鼠避暗法中潛伏期和受電擊次數的影響
[0056] 實驗各組小鼠避暗法測試結果，見表2。
[0057] 表2韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠避暗潛伏期和電擊次數的影響(X土S)
[0059] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0060]由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠的潛伏期顯著減少、受電擊次數顯著增加 (P〈0.01)，反映了圍絕經期抑郁模型小鼠記憶力降低。與模型組比，各給藥組均可顯著延長 小鼠的潛伏期(P〈〇.01)，大豆異黃酮軟膠囊組、更年安組、大劑量韭菜籽總黃酮組可以顯著 減少小鼠的受電擊次數(P〈〇. 01)。
[0061 ] 2.3對圍絕經期抑郁模型小鼠強迫游泳和懸尾不動時間的影響
[0062] 實驗各組小鼠強迫游泳和懸尾不動時間測試結果，見表3。
[0063] 表3韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠強迫游泳和懸尾不動時間的影響 (x±s)
[
[0065] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0066]由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠的強迫游泳和懸尾不動時間均顯著增加 (P〈0.01)，反映了圍絕經期抑郁癥模型小鼠對不利環境的絕望程度升高。與模型組比，大、 中劑量韭菜籽總黃酮、大豆異黃酮軟膠囊、更年安膠囊可顯著顯著減少小鼠強迫游泳不動 時間和懸尾不動時間(P〈〇. 01)。
[0067] 2.4對圍絕經期抑郁癥模型小鼠腦內單胺類神經遞質水平的影響
[0068] 各組小鼠腦內5-HT、DA水平，結果見表4。
[0069] 表4韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠腦內5_HT、DA水平的影響(x±s )
[0071] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較 [0072]由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠腦勻漿中的5_HT、DA水平均顯著降低(P〈 0.01)，說明造小鼠慢性應激抑郁模型成功。與模型組比，大劑量韭菜籽總黃酮、大豆異黃酮 軟膠囊、更年安膠囊可顯著提高腦勻漿中的5-HT和DA水平(P〈0.01);中劑量韭菜籽總黃酮 可顯著提高腦勻漿中的5-HT(P〈0.01)，明顯提高腦勻漿中DA水平(P〈0.05)。
[0073] 2.5對圍絕經期抑郁模型小鼠臟器指數的影響
[0074] 各組小鼠胸腺、脾臟、子宮指數，結果見5。
[0075] 表5韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠胸腺、脾臟、子宮指數的影響(x±s)
[0077] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0078]由上表可看出，與空白組比，模型組胸腺指數、脾臟指數、子宮指數均顯著降低(P〈 0.01)，說明圍絕經期抑郁癥小鼠模型出現胸腺、脾臟及子宮組織的萎縮。與模型組比，大、 中劑量韭菜籽總黃酮、更年安膠囊、大豆異黃酮軟膠囊可顯著提高模型動物的胸腺、脾臟、 子宮指數(p〈0.01)。
[0079] 2.6對圍絕經期抑郁模型小鼠血清性激素的影響
[0080] 各組小鼠血清中E2、T含量，結果見表6。
[0081 ] 表6韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠血清中E2、T含量的影響(x±s )
[0083] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較 [0084] 從上表可以看出，與空白組比，模型組小鼠血清中E2、T水平顯著下降(P〈0.01 )，說 明小鼠血清中的性激素水平紊亂，圍絕經期抑郁小鼠模型復制成功。與模型組比，大、中劑 量韭菜籽總黃酮組、更年安膠囊、大豆異黃酮軟膠囊組均可顯著升高血清E 2、T水平（P〈 0·01)〇
[0085] 2.7對免疫組化指標的影響
[0086]對圍絕經期合并抑郁模型小鼠子宮、垂體、下丘腦中ER的表達，垂體和下丘腦中AR 表達的影響，見表7、表8。
[0087]表7韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠垂體、子宮、下丘腦ER表達的影響（平 均光密度)(x±s)
[0089] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0090] 表8韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠垂體、下丘腦AR表達的影響（平均光密 度）（X土S )
[0092] 注:aaP〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較 [0093]由上表可看出，與空白組比較，模型小鼠各組織ER、AR的表達均顯著降低（P〈 0.01)，說明完全摘除卵巢合并慢性刺激所致圍絕經期合并抑郁小鼠模型機體相關組織分 布的性激素受體有所降低，從而降低了雌雄激素的生物效應。與模型組比較，大劑量韭菜籽 總黃酮、更年安膠囊和大豆異黃酮軟膠囊能夠顯著升高ER在子宮、垂體、下丘腦的表達(P〈 0.01)，顯著升高AR在垂體、下丘腦的表達(P〈0.01)。
[0094] 2.8對圍絕經期抑郁模型小鼠器官組織形態的影響
[0095] 實驗各組小鼠子宮、下丘腦、胸腺、脾臟的病理組織學觀察結果如下，病理照片 [0096] 2.8.1對圍絕經期合并抑郁模型小鼠子宮內膜厚度的影響 Γ00971 丟9韭莖耔總昔釃對_雒怒柚
郁摁型小鼠子営Λ臘直麼的戢晌G+d
[0099] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0100] 由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠子宮內膜厚度顯著下降(P〈〇.01)，說明完 全摘除卵巢所致圍絕經期小鼠模型顯著子宮萎縮。與模型組比，大劑量韭菜籽總黃酮、大豆 異黃酮軟膠囊組、更年安膠囊組均可顯著升高子宮內膜的厚度(p〈0.01)。
[0101] 2.8.2對圍絕經期合并抑郁模型小鼠胸腺、脾臟組織形態的影響
[0102] 采用測微尺，對實驗各組每只小鼠胸腺皮質最厚處和最窄處測定其厚度求得均 數;然后用測微尺的基線測得壓在基線上的胸腺皮質最厚處和最窄處的淋巴細胞數求得均 數；
[0103] 采用測微尺的基線落在脾小結上，以中央動脈為中心分別測定兩側的脾小結厚度 大小，求均數;同時計算落在基線上兩側的淋巴細胞數的個數，求均數；
[0104] 表10韭菜籽總黃酮對圍絕經期抑郁模型小鼠胸腺、脾臟病理變化的影響(X ± s )
[0106] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示與空白組比較;*P〈0.05，#P〈0.01，表示與模型組比較
[0107] 從上表可看出，與空白組比，模型組小鼠胸腺皮質厚度、脾小結體積顯著減少(P〈 0.01)，說明小鼠造圍絕經期抑郁模型后胸腺、脾臟體積萎縮。與模型組比，大、中劑量韭菜 籽總黃酮、大豆異黃酮軟膠囊組、更年安膠囊組可顯著增厚胸腺皮質和脾小結體積（P〈 0·01)〇
[0108] 3.結論
[0109]韭菜籽總黃酮對小鼠圍絕經期合并抑郁模型有很好改善作用，韭菜籽總黃酮可顯 著提高小鼠的活動次數和站立次數;可顯著延長小鼠的潛伏期，可以顯著減少小鼠的受電 擊次數。韭菜籽總黃酮可顯著顯著減少小鼠強迫游泳不動時間和懸尾不動時間。韭菜籽總 黃酮可顯著提高腦勻漿中的5-HT和DA水平。韭菜籽總黃酮可顯著提高模型動物的胸腺、脾 臟、子宮指數。韭菜籽總黃酮可顯著升高血清E2、T水平。韭菜籽總黃酮顯著升高ER在子宮、 垂體、下丘腦的表達，顯著升高AR在垂體、下丘腦的表達。韭菜籽總黃酮可顯著升高子宮內 膜的厚度，可顯著增厚胸腺皮質和脾小結體積，有效用于制備治療圍絕經期抑郁癥的藥物， 開拓了治療圍絕經期抑郁癥藥物上的新途徑，是藥物上的創新，具有實際的應用價值。
【主權項】
1. 一種韭菜籽總黃酮在制備治療圍絕經期抑郁癥藥物中的應用，所述的韭菜籽總黃酮 是，將韭菜籽粉碎成過20-30目的粗粉，加粗粉10倍重量的石油醚回流提取lh，脫脂，棄去石 油醚;粗粉再加同量石油醚回流提取lh，脫脂，棄去石油醚;韭菜籽藥渣揮干石油醚，加粗粉 10倍重量質量濃度80%的乙醇浸泡0.5h，回流提取2次，每次lh，濾過，合并濾液，減壓回收乙 醇至無醇味，加蒸餾水分散至相當于含生藥量0.3g/ml，得樣品液;樣品液上AB-8型大孔吸 附樹脂，先用2倍柱體積蒸餾水洗脫，棄去水液;繼用4倍柱體積、質量濃度10%乙醇洗脫，棄 去洗脫液;再用6倍柱體積、質量濃度80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無 醇味，加等體積石油醚萃取1次，棄去石油醚;揮去有機溶劑，水層冷凍干燥，粉碎，得韭菜籽 總黃酮。
【文檔編號】A61P15/00GK106075007SQ201610405434
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月8日
【發明人】苗明三, 白明, 田碩
【申請人】河南中醫學院