一種蛋黃卵磷脂的提取方法
【專利摘要】本發明屬于有機化學領域，提供一種蛋黃卵磷脂的提取方法，其是向煮熟的蛋黃中加入乙醇進行提取。具體包括步驟：1）新鮮的雞蛋用水煮熟，取煮熟的蛋黃；2）向蛋黃中加入乙醇，攪拌10-40min；3）固液分離，分離后取上清液，在-4℃至18℃下靜置2-20h；4）靜置后過濾，獲得凝固產物和濾液；用乙醇沖洗所述凝固產物，獲得中性蛋黃油；5）步驟4）獲得的濾液蒸發，獲得蛋黃卵磷脂。本發明的方法，對蛋黃提取液中卵磷脂的提取率可達8%-15%，回收率可達90%-95%，純度可達90%-95%。
【專利說明】一種蛋黃卵磷脂的提取方法【技術領域】
[0001]本發明屬于有機化學領域，具體涉及一種從雞蛋中提取磷酸酯的方法。
【背景技術】
[0002]卵磷脂有狹義和廣義之分，狹義的卵磷脂是指磷脂酰膽堿(Phosphatidylcholine, PC);廣義的卵磷脂是商業上的“卵磷脂(Lecithin)”,是各種磷脂的混合物。卵磷脂具有多種生理功能:①延緩機體衰老，清除自由基改善脂類代謝，參與組成細胞膜，防治粥樣動脈硬化；③保護細胞膜，防止脂肪肝；④促進神經傳導，提高大腦活力；⑤增強免疫等功能。卵磷脂被應用于醫藥、食品、化妝品以及飼料等行業。但現有卵磷脂提取技術水平比較落后，無法進行大規模的工業化生產，醫藥用高純卵磷脂需要大量進口。
[0003]天然卵磷脂廣泛存在于動、植物體內，以蛋黃、大豆內含量較多，其它如動物腦組織、肝臟、骨髓、植物種子(菜籽、棉籽、葵花籽、花生、玉米、紅花籽等)也可用于提取卵磷月旨。按照原料的不同，目前商業上習慣將卵磷脂分為蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂和菜籽卵磷月旨，生產上提取磷脂多為大豆磷脂，菜籽磷脂相對營養價值較低，而蛋黃卵磷脂開發還較少。蛋黃磷脂和大豆磷脂，因其來源不同而有不同的組成。蛋黃含卵磷脂較多，達干物質總重的9.4%。磷脂酰膽堿(卵磷脂)是蛋黃磷脂的主要組成成分，其在大豆磷脂中的含量比較低。大豆磷脂與蛋黃磷脂相比，最明顯的特點是蛋黃磷脂中磷脂酰膽堿PC含量高，后者的含量約為前者的3倍多。
[0004]通常所說的蛋黃卵磷脂，是指通過萃取技術從蛋黃中提取出來的含磷脂酰膽堿為主，磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸等成份為輔的混合物。磷酯酰膽堿的含量，是衡量卵磷脂產品質量高低的主要指標。高純度卵磷脂產品通常是指含磷脂酰膽堿95%左右的磷脂產品。
[0005]作為農產品的深加工，卵磷脂的生產是當前國家重點支持的技術開發領域之一。研究高回收率和高純度蛋黃卵磷脂的提取方法對進一步探索蛋黃卵磷脂的應用有很大的價值。專利CN 102690283A公開了一種從雞蛋蛋黃中提取卵磷脂的方法，向蛋黃液中加入乙醚+乙醇+丙酮進行提取；專利CN 103224514A提供一種高純度蛋黃卵磷脂的生產工藝，以無水乙醇和石油醚為提取的溶液。有的研究者以蛋黃粉為原料，添加丙酮提取(黃金枝等，《食品科學》2008年第29卷，第10期:257-259)。其提取工藝復雜，溶劑包括二種以上，導致產物的純度和產率不高。
【發明內容】
[0006]針對現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種蛋黃卵磷脂的提取方法。
[0007]實現本發明目的的技術方案為:
[0008]一種蛋黃卵磷脂的提取方法，其是向煮熟的蛋黃中加入乙醇進行提取。
[0009]所述的提取方法，包括步驟:[0010]I)新鮮的雞蛋用水煮熟，將雞蛋取出后，剝取煮熟的蛋黃備用；
[0011]2)向煮熟的蛋黃中加入其1-4倍體積的乙醇，攪拌10-40min ；
[0012]3)固液分離，分離后取上清液，在-4°C至18°C下靜置2_20h ；
[0013]4)靜置后過濾，獲得凝固產物和濾液；用乙醇沖洗所述凝固產物，取固體，獲得中性蛋黃油；
[0014]5)步驟4)獲得的濾液蒸發，獲得蛋黃卵磷脂。
[0015]優選地，所述煮熟的蛋黃是一周內的新鮮雞蛋水煮2-10min后得到的蛋黃。
[0016]更優選地，所述煮熟的蛋黃是新鮮雞蛋水煮7_9min后得到的蛋黃。
[0017]其中，所述步驟2)中的乙醇為質量濃度90-99%的乙醇，所述攪拌時的溫度為50-70。。。
[0018]其中，所述步驟3)中，上清液在2°C至10°C下靜置9_14h。
[0019]其中，所述步驟3)中固液分離的方法為過濾或離心分離。
[0020]優選地，所述過濾為壓濾，以有機濾膜為過濾介質、壓力差0.5-2.0MPa條件下壓濾；所述離心分離的離心力為1200-6000g (即離心加速度為1200-6000倍重力加速度)，時間為 5_15min。
[0021]其中，所述步驟4)中用溫度為`2_5°C、質量濃度92-99%的乙醇沖洗所述凝固產物，乙醇質量為凝固產物質量的3-5倍。
`[0022]其中，所述步驟5)中，所述蒸發為真空蒸發、旋轉蒸發、熱風干燥、自然蒸發方法中的一種，蒸發的溫度為25-60°C。
[0023]本發明的有益效果在于:
[0024]本發明的方法，通過對蛋黃經不同條件處理后進行提取的條件的摸索，確定了提取工藝，使蛋黃提取液中卵磷脂的提取率可達8%-15%，回收率可達90%-95%，純度可達90%-95%。經對比發現該工藝得到的磷脂酰膽堿含量均在88%以上，而且從經煮制過的熟蛋黃中提取的磷脂酰膽堿含量達90%-95%，高于鮮蛋黃和蛋黃粉。該產品在生物技術、醫療衛生及食品工業等領域都有廣泛的應用，具有重要的科學價值和經濟效益。
[0025]本發明提出的方法，得到蛋黃卵磷脂的同時還可以獲得中性蛋黃油，實施本發明方法可獲得更大的經濟效益；
[0026]本發明提出的方法，不使用醚類和酮類溶劑，操作簡單、揮發性氣體逸出少，對生產者和環境更有益。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0027]圖1標準品及樣品的薄層掃描圖；
[0028]圖2標準曲線。
【具體實施方式】
[0029]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
[0030]實施例1
[0031]取新鮮的雞蛋，用電磁爐煮熟，在水煮沸8min后將雞蛋取出，將蛋清與蛋黃分開，剩下完整的蛋黃備用。量取一定量的煮蛋黃置于燒杯中，加入3倍蛋黃體積的95% (質量濃度)乙醇，在60°C水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪拌，轉速為500rpm/min，15min之后，設置離心機的離心力為3000g，離心lOmin。將離心后得到的上清液在5°C條件下凝固12h，之后在4°C下用定量濾紙過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量比)進行沖洗獲得中性蛋黃油，提取率為10.1%。將獲得的濾液經48°C旋轉蒸發獲得蛋黃卵磷脂。
[0032]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為12.03%,回收率為92.93% (測定回收率見附1:蛋黃中卵磷脂提取率和回收率計算方法)。采用薄層層析方法分析測定了提取的卵磷脂的純度(分析方法詳見附2)測得實施例1的蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿含量為91%。
[0033]實施例2
[0034]取新鮮的雞蛋，用電磁爐煮熟，在水煮沸8min后將雞蛋取出，將蛋清與蛋黃分開，剩下完整的蛋黃備用。量取一定量的煮蛋黃置于燒杯中，加入5倍體積的95%乙醇,在55°C水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪動轉速為500rpm/min，15min，之后3000g，離心lOmin。將離心后的上清液在5°C條件下凝固12h，之后在4°C下過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量t匕)進行沖洗獲得中性蛋黃油，將獲得的濾液經48°C旋轉蒸發獲得雞蛋卵磷脂。
[0035]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為13.10%,回收率為94.56%。薄層層析法測得實施例1蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿的含量為94%。
[0036]實施例3
[0037]取新鮮的雞蛋，用電磁爐煮熟，在水煮沸8min后將雞蛋取出，將蛋清與蛋黃分開，剩下完整的蛋黃備用。量取一定量的煮蛋黃置于燒杯中，加入5倍體積的95%乙醇,在65°C水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪動轉速為500rpm/min，15min，之后3000g，離心lOmin。將離心后的上清液在2°C條件下凝固12h，之后在4°C下過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇進行沖洗(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量比)獲得中性蛋黃油，將獲得的濾液經48°C旋轉蒸發獲得雞蛋卵磷脂。
[0038]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為10.96%，回收率為94.21%。薄層層析法測得實施例1的蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿含量為93% (重量百分比)。
[0039]實施例4
[0040]取新鮮的雞蛋，用電磁爐煮熟，在水煮沸5min后將雞蛋取出，將蛋清與蛋黃分開，剩下完整的蛋黃備用。量取一定量的煮蛋黃置于燒杯中，加入4倍體積的95%乙醇,在55°C水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪動，轉速為500rpm/minl5min,之后6000g離心力下離心lOmin。將離心后的上清液在2°C條件下凝固16h，之后在4°C下過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量比)進行沖洗獲得中性蛋黃油，將獲得的濾液經42°C旋轉蒸發獲得雞蛋卵磷脂。
[0041]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為8.99%，回收率為93.63%。薄層層析法測得實施例1的蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿含量為90% (重量百分比)。
[0042]對比例1:用生蛋黃進行提取
[0043]取新鮮的雞蛋，打破后將蛋清與蛋黃分開，取蛋黃備用。量取一定量的煮蛋黃置于燒杯中，加入3倍蛋黃體積的95% (質量濃度)乙醇，在水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪拌，轉速為500rpm/min, 15min之后,設置離心機的離心力為3000g,離心lOmin。將離心后得到的上清液在5°C條件下凝固12h，之后在4°C下用定量濾紙過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量比)進行沖洗獲得中性蛋黃油，提取率13%。產率大于從熟蛋黃中的提取率，將獲得的濾液經48°C旋轉蒸發獲得蛋黃卵磷脂。
[0044]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為8.54%，回收率為88.94%。薄層層析法測純度，測得制得的蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿含量為85% (重量百分比)。
[0045]對比例2:用蛋黃粉進行提取
[0046]取蛋黃粉(北京金健力蛋粉廠)置于燒杯中，加入3倍蛋黃粉體積的95% (質量濃度)乙醇以及15倍體積的水，在水浴的條件下用JJ-1精密增力電動攪拌器攪拌，轉速為500rpm/min, 15min之后,設置離心機的離心力為3000g,離心lOmin。將離心后得到的上清液在5°C條件下凝固12h，之后在4°C下用定量濾紙過濾，獲得凝固產品和濾液。將獲得的凝固產品用低溫乙醇(4°C，95%乙醇沖洗1-2次，原料(蛋黃):乙醇=1:4重量比)進行沖洗獲得中性蛋黃油，提取率為29.5%。將獲得的濾液經48°C旋轉蒸發獲得蛋黃卵磷脂。
[0047]所得蛋黃卵磷脂相對于全蛋的提取率為12.42%，回收率為65.36%。薄層層析法測純度，測得制得的蛋黃卵磷脂純度為88% (重量百分比)。
[0048]附1:蛋黃中卵磷脂提取率和回收率計算方法
[0049]
【權利要求】
1.一種蛋黃卵磷脂的提取方法，其特征在于，是向煮熟的蛋黃中加入乙醇進行提取。
2.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，包括步驟: O新鮮的雞蛋用水煮熟，將雞蛋取出后，剝取煮熟的蛋黃備用； 2)向煮熟的蛋黃中加入其1-4倍體積的乙醇，攪拌10-40min； 3)固液分離，分離后取上清液，在-4°C至18°C下靜置2-20h； 4)靜置后過濾，獲得凝固產物和濾液；用乙醇沖洗所述凝固產物，獲得中性蛋黃油； 5)步驟4)獲得的濾液蒸發，獲得蛋黃卵磷脂。
3.根據權利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，所述煮熟的蛋黃是新鮮雞蛋水煮2-10min后得到的蛋黃。
4.根據權利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述煮熟的蛋黃是新鮮雞蛋水煮7-9min后得到的蛋黃。
5.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步驟2)中的乙醇為質量濃度90-99%的乙醇，所述攪拌時的溫度為50-70°C。
6.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步驟3)中，上清液在2°C至10°C下靜置9-14h。
7.根據權利要求2或6所述的提取方法，其特征在于，所述步驟3)中固液分離的方法為過濾或離心分離。
8.根據權利要求7所述的提取方法，其特征在于，所述過濾為壓濾；所述離心分離的離心力為 1200-6000g，時間為 5-15min。
9.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步驟4)中用溫度為2-5°C、質量濃度92-99%的乙醇沖洗所述凝固產物，乙醇質量為蛋黃質量的3-5倍。
10.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步驟5)中，所述蒸發為真空蒸發、旋轉蒸發、熱風 干燥、自然蒸發方法中的一種，蒸發的溫度為25-60°C。
【文檔編號】C11B1/02GK103554174SQ201310574910
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月15日 優先權日:2013年11月15日
【發明者】盧曉明, 黃麗燕, 韓兆鵬, 劉旭明 申請人:北京德青源農業科技股份有限公司