一種提高沉香葉中揮發油抗氧化活性的亞臨界萃取方法
【專利摘要】本發明提供一種以亞臨界萃取高抗氧化活性沉香葉揮發油的方法，將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再烘至接近絕干，然后烘至恒重，粉碎得到沉香葉粉末，再置于萃取釜中加入去離子水進行亞臨界萃取，靜置冷卻后進行抽濾，然后將殘渣重復提取一次，合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液，然后加入NaCl進行破乳，以乙醚萃取后收集乙醚層，再將收集到的乙醚層用Na2SO4進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。所得沉香葉揮發油具有抗氧化、增強機體免疫功能及抗腫瘤等活性，相比傳統方法具有顯著提高的抗氧化效果。該方法提取時間短，并以無毒、無害的水作為提取溶劑，溶劑量少，得率高、成本低；而且原料處理簡單。
【專利說明】一種提高沉香葉中揮發油抗氧化活性的亞臨界萃取方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種提高沉香葉中揮發油抗氧化活性的亞臨界萃取方法，屬于天然物 提取【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 作為中醫常用藥的沉香，在《中華人民共和國藥典》的各個版本中均有對其來源、 功能等的記載，其主要來源于瑞香科植物白木香[Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg]含 有樹脂的木材。沉香氣味芳香，味道苦澀，性微溫，具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功 用效果，歷來中醫用其治療胸腹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆、腎虛氣逆喘急等疾病。萃取揮發油 所用沉香葉為瑞香科植物白木香的葉子，現代研究分析已經證實，沉香葉中含有揮發油、黃 酮及其苷類、酚類、三萜類、多糖、氨基酸等成分；沉香葉作為沉香的非藥用部位，一般而言， 每年可大批量進行采摘2次，故而產量較大。作為沉香葉中提取的揮發油，不僅具有抗炎鎮 痛、抗氧化及延緩衰老等作用，同時，也可作為香料，用來制作高級香水、香皂、香精和化妝 品及添加到煙草中增香等，具有較高的應用和經濟價值。
[0003] 揮發油是植物中一類具有芳香氣味，在常溫下可揮發，并能隨水蒸汽蒸餾與水不 相混溶的油狀液體的總稱。具有揮發油的植物分布廣泛，僅我國就有56科，136屬，約300 種植物中含有揮發油。沉香葉揮發油是一類重要的活性成分，具有多種藥理活性及在醫學 方面的應用越來越普遍。目前國內沉香葉揮發油的提取方法主要有傳統的水蒸汽蒸餾法、 有機溶劑萃取法及新興的超臨界、亞臨界萃取技術等。傳統方法普遍存在著各自的缺點，如 回收率低、雜質多、高溫引起熱敏性成分的破壞、溶劑殘留等等。
[0004] 近十幾年國內外迅速發展起來的亞臨界水萃取技術，是一種較新的不使用或少使 用有機溶劑的綠色萃取技術，應用于沉香葉揮發油的提取，對沉香葉揮發油生產現代化具 有重要意義。
【發明內容】
[0005] 為克服常規水蒸汽蒸餾法、有機溶劑萃取法存在的回收率低、雜質多、高溫引起熱 敏性成分的破壞、溶劑殘留、對活性物質帶來不利影響等問題，本發明提供一種提高沉香葉 中揮發油抗氧化活性的亞臨界萃取方法。
[0006] 本發明利用亞臨界能加熱與樣品相接觸的溶劑，將所需化合物從樣品基體中分 離，進入溶劑中。具體經過下列各步驟： (1) 將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于45±1°C烘至含水率為5?10%，然后 于105±1°C烘至恒重，粉碎得到沉香葉粉末； (2) 取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，按照料液比為1:40?1:80加入去離子 水，在提取功率為2. 0?4. OMPa下進行亞臨界萃取10?18min，靜置冷卻后進行抽濾，然后 將殘渣重復提取一次，合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3) 待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙醚 層，再將收集到的乙醚層用Na2S04進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
[0007] 所述步驟（1)的沉香葉粉末粒度為60?100目。
[0008] 所述步驟（2)中沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉 球，防止吹出的沉香葉粉末堵塞管道。
[0009] 本發明是以提高沉香葉揮發油抗氧化活性為目的的亞臨界輔助提取法，能夠克服 常規水蒸汽蒸餾法、有機溶劑萃取對活性物質帶來的不利影響；利用亞臨界能加熱與樣品 相接觸的溶劑，將所需化合物從樣品基體中分離，進入溶劑中。
[0010] 本發明具有如下的優點和有益效果：本發明制備得到的沉香葉揮發油具有抗氧 化、增強機體免疫功能及抗腫瘤等活性，并在食品、化妝品、煙草及醫藥領域中應用，所得抗 氧化效果比傳統乙醚索氏提取法提高1. 53?2. 22倍，比水蒸氣蒸餾提取法提高2. 14? 3.09倍，具有顯著提高的抗氧化效果。如圖1所示，在DPPH自由基體系中，沉香葉揮發油 的IC50為40. 07?58. 03 μ g/mL，相比于傳統方法，本發明所得沉香葉揮發油的DPPH自由 基清除活性低，功能活性高。該提取方法對目標成分的回收率高、提取時間短，并以無毒、無 害的水作為提取溶劑，溶劑量少，得率高、成本低；而且原料處理簡單，簡化了樣品預處理步 驟。本方法具有無環境污染、工藝簡單、高效、省時、成本低及易于規模化工業生產等優點， 是綠色環保、前景廣闊的植物葉中揮發油提取技術。與利用有機溶劑進行提取相比，本發明 的工藝流程科學、合理，不需使用有機化學溶劑進行提取，無殘留、無污染，而且能充分利用 和提取多種有效成分并保持其原有的活性，且各種有效成分的提取率高、穩定性好，使沉香 葉揮發油產品多樣化、系列化等特點。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0011] 圖1為測定所得沉香葉中揮發油的得率、DPPH自由基清除活性。
【具體實施方式】
[0012] 以下給出實施例，對本發明作進一步說明。
[0013] 實施例1 (1) 將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于真空干燥箱中以45°C烘至含水率為 8%，然后將真空干燥箱溫度調至105°C烘至恒重，粉碎得到80目的沉香葉粉末； (2) 取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉球， 防止吹出的沉香葉粉末堵塞管道，按照料液比(單位為g/mL)為1:60加入去離子水，在提取 功率為3. OMPa下進行亞臨界萃取14min,靜置冷卻后進行抽濾，然后將殘漁重復提取一次， 合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3) 待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl靜置進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙 醚層，再將收集到的乙醚層用Na2S0 4進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
[0014] 所得沉香葉揮發油的得率為13. 25%，DPPH自由基清除活性見圖1。
[0015] 實施例2 (1)將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于真空干燥箱中以44°C烘至含水率為 5%，然后將真空干燥箱溫度調至106°C烘至恒重，粉碎得到60目的沉香葉粉末； (2 )取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉球， 防止吹出的沉香葉粉末堵塞管道，按照料液比(單位為g/mL)為1:40加入去離子水，在提取 功率為2. OMPa下進行亞臨界萃取lOmin,靜置冷卻后進行抽濾，然后將殘漁重復提取一次， 合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3)待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙醚 層，再將收集到的乙醚層用Na2S04進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
[0016] 所得沉香葉揮發油的得率為12. 60%，DPPH自由基清除活性見圖1。
[0017] 實施例3 (1) 將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于真空干燥箱中以46°C烘至含水率為 10%，然后將真空干燥箱溫度調至l〇4°C烘至恒重，粉碎得到100目的沉香葉粉末； (2) 取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉球， 防止吹出的沉香葉粉末堵塞管道，按照料液比(單位為g/mL)為1:80加入去離子水，在提取 功率為4. OMPa下進行亞臨界萃取18min,靜置冷卻后進行抽濾，然后將殘漁重復提取一次， 合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3) 待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙醚 層，再將收集到的乙醚層用Na2S0 4進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
[0018] 所得沉香葉揮發油的得率為12. 85%，DPPH自由基清除活性見圖1。
[0019] 實施例4 (1) 將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于真空干燥箱中以45°C烘至含水率為 6%，然后將真空干燥箱溫度調至105°C烘至恒重，粉碎得到60目的沉香葉粉末； (2) 取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉球， 防止吹出的沉香葉粉末堵塞管道，按照料液比(單位為g/mL)為1:40加入去離子水，在提取 功率為2. OMPa下進行亞臨界萃取lOmin,靜置冷卻后進行抽濾，然后將殘漁重復提取一次， 合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3) 待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl靜置進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙 醚層，再將收集到的乙醚層用Na2S0 4進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
[0020] 所得沉香葉揮發油的得率為11. 42%，DPPH自由基清除活性見圖1。
【權利要求】
1. 一種以亞臨界萃取高抗氧化活性沉香葉揮發油的方法，其特征在于經過下列各步 驟： (1) 將沉香葉進行清潔、干燥并去除枝條，再置于45±1°C烘至含水率為5?10%，然后 于105±1°C烘至恒重，粉碎得到沉香葉粉末； (2) 取步驟（1)的沉香葉粉末置于萃取釜中，按照料液比為1:40?1:80加入去離子 水，在提取功率為2. 0?4. OMPa下進行亞臨界萃取10?18min，靜置冷卻后進行抽濾，然后 將殘渣重復提取一次，合并兩次提取液，再經減壓濃縮得到濃縮液； (3) 待步驟（2)所得濃縮液冷卻后，加入NaCl進行破乳，然后以乙醚萃取后收集乙醚 層，再將收集到的乙醚層用Na2S0 4進行脫水，經減壓濃縮后即得到沉香葉揮發油。
2. 根據權利要求1所述的以亞臨界萃取高抗氧化活性沉香葉揮發油的方法，其特征在 于：所述步驟（1)的沉香葉粉末粒度為60?100目。
3. 根據權利要求1所述的以亞臨界萃取高抗氧化活性沉香葉揮發油的方法，其特征在 于：所述步驟（2)中沉香葉粉末置于萃取釜中，再壓緊后，于萃取釜的頂部放入玻璃棉球。
【文檔編號】C11B9/02GK104087420SQ201410338081
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月16日 優先權日:2014年7月16日
【發明者】歐世春, 石鋁懷 申請人:貴州省華爍生物科技有限公司