專利名稱：一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種非還原端帶有雙鍵的甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖及其制備方法。
背景技術：
褐藻膠是一種以β-甘露糖醛酸和α-古羅糖醛酸為單體通過1-4糖苷鍵連接而成的直鏈多糖。從整個分子來看褐藻膠可分為三種片段聚甘露糖醛酸片斷(M block)、聚古羅糖醛酸片斷(G block)和甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段(MG block)。在褐藻膠中甘露糖醛酸與古羅糖醛酸的比值根據藻類不同、地域不同、季節不同及在藻類中分布部位不同而呈現差異，大致為2∶1至1∶2。近年來褐藻膠寡糖及其衍生物的生物活性不斷被發現，從抗凝、抗菌、抗炎、抗病毒、提高免疫力抗腫瘤到雙歧因子、促植物生長劑，褐藻膠寡糖及其衍生物表現出了廣泛的生物活性。目前對甘露糖醛酸片斷(M block)寡糖和古羅糖醛酸片斷(G block)寡糖的結構和生物活性有了廣泛深入的研究。甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段(MG block)寡糖有其獨特的結構，可能會產生更廣泛和突出的生物活性。但因甘露糖醛酸與古羅糖醛酸之間糖苷鍵較弱，所以較難得到這種物質，自然也影響到對它作進一步的研究。
發明內容
本發明的目的是提供一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖及其制備方法，它能滿足現有技術的上述需求。
一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖，其特征是它的非還原端有雙鍵，結構如下 或 式中n＝1-19，m＝1-19，n+m＜20；R均為H或SO3Na或CH3或PO3Na2
一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段寡糖的制備方法，其特征是將褐藻膠配成水溶液，加入褐藻膠裂合酶進行反應，用沸水浴加熱使酶失活，離心后除去沉淀雜質，將所得上清夜用凝膠滲透層析和強陰離子交換層析分離純化，并進行衍生化。
本發明提供了一系列新的化合物甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段寡糖及其衍生物，并為其生物活性的應用和開發打下了基礎。
具體實施例方式
將褐藻膠配成5％(重量百分濃度，下同)的水溶液，加入褐藻膠裂合酶(Vibro Sp.510)進行反應，用沸水浴加熱使酶失活，離心后除去沉淀雜質，將所得上清夜用凝膠滲透層析，填料為生物膠(Bio-Gel)P6和強陰離子交換層析填料為Spherisorb SAX進行分離純化，得到非還原端帶有一個雙鍵的甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段寡糖；并且在糖環的2位和3位引入SO3Na或CH3或PO3Na2。其結構式為 或 式中n＝1-19，m＝1-19，n+m＜20；R均為H或SO3Na或CH3或PO3Na2本發明中褐藻膠水溶液濃度可以是1-10％。所用的褐藻膠裂合酶是專一性褐藻膠裂合酶。所述凝膠滲透層析的填料除上述Bio-Gel P6，還可以應用生物膠P4(Bio-Gel P4)、生物膠P10(Bio-Gel P10)以及葡聚糖-瓊脂糖鉸鏈填料(Superdex-30)均能達到相同的分離效果。所述強陰離子交換層析的填料除上述Spherisorb SAX，還可以應用SB Nucleosil同樣能達到良好的分離效果。所述的甘露糖醛酸古羅糖醛酸鑲嵌片斷及其衍生物為多聚或寡聚甘露糖醛酸古羅糖醛酸、多聚或寡聚甘露糖醛酸古羅糖醛酸硫酸酯、磷酸酯和甲基化衍生物。
權利要求
1.一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖，其特征是它的非還原端有雙鍵，結構如下 或 式中n＝1-19，m＝1-19，n+m＜20；R均為H或SO3Na或CH3或PO3Na2
2.一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段寡糖的制備方法，其特征是將褐藻膠配成水溶液，加入褐藻膠裂合酶進行反應，用沸水浴加熱使酶失活，離心后除去沉淀雜質，將所得上清夜用凝膠滲透層析和強陰離子交換層析分離純化，并進行衍生化。
3.如權利要求2所述的方法，其特征是所述的褐藻膠水溶液濃度為1-10％。
4.如權利要求2所述的方法，其特征是所述的凝膠滲透層析的填料為Bio-Gel P6、生物膠P4(Bio-Gel P4)、生物膠P10(Bio-Gel P10)或葡聚糖-瓊脂糖鉸鏈填料(Superdex-30)。
5.如權利要求2所述的方法，其特征是所述的強陰離子交換層析的填料為Spherisorb SAX或SB Nucleosil。
全文摘要
一種甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片斷寡糖，其特征是它的非還原端有雙鍵。制備時將褐藻膠配成水溶液，加入褐藻膠裂合酶進行反應，用沸水浴加熱使酶失活，離心后除去沉淀雜質，將所得上清夜用凝膠滲透層析和強陰離子交換層析分離純化，并進行衍生化。所述的褐藻膠水溶液濃度為1－10％；所述的凝膠滲透層析的填料為Bio－Gel P6、生物膠P4(Bio－Gel P4)、生物膠P10(Bio－Gel P10)或葡聚糖－瓊脂糖鉸鏈填料(Superdex－30)；所述的強陰離子交換層析的填料為Spherisorb SAX或SB Nucleosil。本發明提供了一系列新的化合物甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段寡糖及其衍生物，并為其生物活性的應用和開發打下了基礎。
文檔編號C07H3/00GK1546501SQ200310114498
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月16日 優先權日2003年12月16日
發明者管華詩, 張真慶, 于廣利, 江曉路 申請人:中國海洋大學