頭孢烯化合物的制作方法

專利名稱：頭孢烯化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的頭孢烯(cephem)化合物及其可藥用鹽。更具體來說，本發明涉及具有抗微生物活性的新的頭孢烯化合物及其可藥用鹽，其制備方法，包含它們的藥物組合物，以及在人和動物中治療感染性疾病的方法。
發明公開本發明的一個目的是提供具有抗多種病原性微生物的高度活性的新的頭孢烯化合物及其可藥用鹽。
本發明的另一個目的是提供制備所述頭孢烯化合物及其鹽的方法。
本發明的另一個目的是提供藥物組合物，所述藥物組合物包含所述頭孢烯化合物或其可藥用鹽作為活性組分。
本發明的另一個目的是提供由病原性微生物引起的感染性疾病的方法，所述方法包括給感染的人或動物施用所述頭孢烯化合物。
本發明的頭孢烯化合物是新的，并且可由下面的通式[I]代表 其中R1是低級烷基、羥基(低級)烷基或鹵代(低級)烷基，且R2是氫或氨基保護基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基或低級亞烯基；R3是氫或低級烷基；R4是
其中A是 或 其中X是O或NH，R7是氫、低級烷基或氨基保護基，R8是氫或羥基，R9是氨基、一或二(低級)烷基氨基、保護的氨基、胍基、保護的胍基或飽和3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或保護的氨基取代，k、m、n和q獨立地為0或1，并且p是0、1、2或3；R5是羧基或保護的羧基；且R6是氨基或保護的氨基。
對于本發明化合物[I]，指出以下幾點。
也就是說，本發明化合物[I]包括順式異構體(Z形式)、反式異構體(E形式)及其混合物。順式異構體(Z形式)是指一種幾何異構體，其具有下式所代表的特定結構 其中R5和R6分別如上所定義，并且反式異構體(E形式)是指另一種幾何異構體，其具有下式所代表的特定結構
其中R5和R6分別如上所定義，并且所有這樣的幾何異構體及其混合物包括在本發明范圍內。
方便起見，在本申請說明書和權利要求書中，這些幾何異構體及其混合物的特定結構由下式代表 其中R5和R6分別如上所定義。
需要指出的另一點是，化合物[I]的吡唑子基部分還以互變異構形式存在，并且這樣的互變異構平衡可由下式代表 其中R1、R2、R3和R4分別如上所定義。
上面兩種互變異構體都包括在本發明范圍內，然而，在本申請說明書和權利要求中，為了方便起見，本發明化合物[I]用式(A)的吡唑子基來表示。
本發明頭孢烯化合物[I]可通過如下所示的方法制得。
方法1 或其在氨基上的反應性 或其在羧基上的反應性衍生物，或其鹽 衍生物，或其鹽
方法2
方法3
方法4 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、A、k、m、n、p和q分別如上所定義，R10是保護的羧基，Y是離去基團，Z是陰離子，R1a是保護的羥基(低級)烷基，R1b是羥基(低級)烷基，R9a是保護的氨基、保護的胍基或含有1-4個氮原子的被保護的氨基取代的飽和3-8元雜環基，并且R9b是氨基、胍基或含有1-4個氮原子的被氨基取代的飽和3-8元雜環基。
起始化合物[II]和[VI]可通過下列方法制得。
方法A
方法B 或其在氨基上的反應性 或其在羧基上的反應性衍生物，或其鹽 衍生物，或其鹽 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R10、Y和Z分別如上所定義，R11是保護的氨基，R12是保護的羧基，且R13是氨基保護基或低級烷基。
起始化合物[VII]和[XI]或其鹽可通過在后面描述的制備例3-6、8-47和49-102中公開的方法或類似方法制得。
在本申請的上下文中，各種定義的合適實例的詳細解釋如下。
除非另有說明，所用術語“低級”是指具有1-6，優選1-4個碳原子的基團。
在“羥基(低級)烷基”、“保護的羥基(低級)烷基”、“芳基(低級)烷基”、“鹵代(低級)烷基”和“一或二(低級)烷基氨基”中的合適的“低級烷基”和“低級烷基”部分包括具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基和己基，其中C1-C4烷基是更優選的。
合適的“羥基(低級)烷基”包括羥基(C1-C6)烷基例如羥基甲基、1-羥基乙基、2-羥基乙基、1-羥基丙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、4-羥基丁基、5-羥基戊基和6-羥基己基，其中羥基(C1-C4)烷基是更優選的。
合適的“鹵代(低級)烷基”包括被1-5個鹵素原子例如氯、溴、碘和氟取代的具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基。“鹵代(低級)烷基”的優選實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、溴甲基、2-氟乙基、2，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、2-氯乙基、2，2-二氯乙基、2，2，2-三氯乙基、3-氟丙基和2，2，3，3，3-五氟丙基，其中鹵代(C1-C4)烷基是更優選的。
合適的“一或二(低級)烷基氨基”包括一或二(C1-C6)烷基氨基例如甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、丙基氨基、丁基氨基和N-乙基-N-丙基氨基，其中一或二(C1-C4)烷基氨基是更優選的。
由R1和R2形成的合適的“低級亞烷基”包括具有1-6個，優選2-4個碳原子的直鏈亞烷基，例如亞甲基、亞乙基、三亞甲基和四亞甲基，其中具有2或3個碳原子的直鏈亞烷基是更優選的。
由R1和R2形成的合適的“低級亞烯基”包括具有2-6個，優選2-4個碳原子的直鏈亞烯基，例如亞乙烯基和亞丙烯基，其中具有2或3個碳原子的直鏈亞烯基是更優選的。
合適的“含有1-4個氮原子的飽和3-8元雜環基”包括氮雜環丁烷基(例如1-氮雜環丁烷基和3-氮雜環丁烷基)、吡咯烷基(例如1-吡咯烷基和3-吡咯烷基)、咪唑烷基(例如1-咪唑烷基和4-咪唑烷基)、哌啶基(例如1-哌啶基和4-哌啶基)和哌嗪基(例如1-哌嗪基)，其中含有1-4個氮原子的飽和4-6元雜環基是更優選的。
含有1-4個氮原子的飽和3-8元雜環基可任選被氨基或保護的氨基取代。任選被氨基或保護的氨基取代的含有1-4個氮原子的飽和3-8元雜環基包括1-氮雜環丁烷基、3-氨基-1-氮雜環丁烷基、3-叔丁氧基羰基氨基-1-氮雜環丁烷基、3-氮雜環丁烷基、1-吡咯烷基、3-氨基-1-吡咯烷基、3-叔丁氧基羰基氨基-1-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌啶基、4-哌啶基和1-哌嗪基。
在“芳基(低級)烷基”中的合適的“芳基”部分包括C6-C12芳基例如苯基和萘基，其中苯基是更優選的。
合適的“芳基(低級)烷基”包括一、二或三苯基(低級)烷基例如芐基、苯乙基、二苯甲基和三苯甲基。
合適的“低級鏈烷酰基”和“低級鏈烷酰基氨基”中的“低級鏈烷酰基”部分包括具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈鏈烷酰基，例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、異丁酰基、戊酰基、異戊酰基、新戊酰基和己酰基，其中C1-C4鏈烷酰基是更優選的。
“低級烷氧基羰基”和“低級烷氧基羰基氨基”中的合適的“低級烷氧基”部分包括具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、叔戊氧基和己氧基，其中C1-C4烷氧基是更優選的。
“保護的氨基”中的合適的“氨基保護基”包括如下所述的酰基、取代或未取代的芳基(低級)亞烷基[例如亞芐基、羥基亞芐基等]、芳基(低級)烷基例如一、二或三苯基(低級)烷基[例如芐基、苯乙基、二苯甲基、三苯甲基等]等。
合適的“酰基”包括低級鏈烷酰基[例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、己酰基、新戊酰基等]、一(或二或三)鹵代(低級)鏈烷酰基[例如氯乙酰基、三氟乙酰基等]、低級烷氧基羰基[例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基、己氧基羰基等]、氨基甲酰基、芳酰基[例如苯甲酰基、甲苯甲酰基、萘甲酰基等]、芳基(低級)鏈烷酰基[例如苯基乙酰基、苯基丙酰基等]、芳氧基羰基[例如苯氧基羰基、萘氧基羰基等1、芳氧基(低級)鏈烷酰基[例如苯氧基乙酰基、苯氧基丙酰基等]、芳基乙醛酰基[例如苯基乙醛酰基、萘基乙醛酰基等]、任選被合適的取代基取代的芳基(低級)烷氧基羰基[例如芐氧基羰基、苯乙基氧基羰基、對硝基芐氧基羰基等]等。
“氨基保護基”的優選實例包括芳基(低級)烷基和酰基，更優選的是芳基(低級)烷基、低級鏈烷酰基和低級烷氧基羰基，特別優選的是一、二或三苯基(C1-C6)烷基、C1-C6鏈烷酰基和(C1-C6)烷氧基羰基.。
“保護的氨基”的優選實例包括芳基(低級)烷基氨基和酰基氨基，更優選的是芳基(低級)烷基氨基、低級鏈烷酰基氨基和低級烷氧基羰基氨基，特別優選的是一、二或三苯基(C1-C6)烷基氨基、C1-C6鏈烷酰基氨基和(C1-C6)烷氧基羰基氨基。
“保護的胍基”的優選實例包括酰基胍基(一酰基胍基和二酰基胍基)例如2，3-二[(低級)烷氧基羰基]胍基[例如2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]，其中2，3-二[(C1-C6)烷氧基羰基]胍基是更優選的。
“保護的羥基(低級)烷基”中的合適的“保護的羥基”包括酰氧基、芳基(低級)烷氧基等。“酰基氧基”中的合適的“酰基”部分包括低級鏈烷酰基[例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、己酰基、新戊酰基等]、一(或二或三)鹵代(低級)鏈烷酰基[例如氯乙酰基、三氟乙酰基等]、低級烷氧基羰基[例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基、己氧基羰基等]、氨基甲酰基等。“芳基(低級)烷基氧基”中的合適的“芳基(低級)烷基”部分包括一、二或三苯基(低級)烷基[例如芐基、苯乙基、二苯甲基、三苯甲基等]等。
合適的“保護的羧基”包括酯化羧基等，酯化羧基的具體實例包括低級烷氧基羰基[例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、戊氧基羰基、己氧基羰基、1-環丙基乙氧基羰基等]，其可以被合適的取代基取代，例如低級鏈烷酰氧基(低級)烷氧基羰基[例如乙酰氧基甲氧基羰基、丙酰氧基甲氧基羰基、丁酰氧基甲氧基羰基、戊酰氧基甲氧基羰基、新戊酰氧基甲氧基羰基、1-乙酰氧基乙氧基羰基、1-丙酰氧基乙氧基羰基、2-丙酰氧基乙氧基羰基、己酰氧基甲氧基羰基等]、低級烷磺酰基(低級)烷氧基羰基[例如2-甲磺酰基乙氧基羰基等]或一(或二或三)鹵代(低級)烷氧基羰基[例如2-碘乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基等]；低級鏈烯氧基羰基[例如乙烯基氧基羰基、烯丙基氧基羰基等]；低級炔基氧基羰基[例如乙炔基氧基羰基、丙炔基氧基羰基等]；可具有合適的取代基的芳基(低級)烷氧基羰基[例如芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、4-硝基芐氧基羰基、苯乙基氧基羰基、三苯甲基氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、二(甲氧基苯基)甲氧基羰基、3，4-二甲氧基芐氧基羰基、4-羥基-3，5-二-叔丁基芐氧基羰基等]；可具有合適的取代基的芳氧基羰基[例如苯氧基羰基、4-氯苯氧基羰基、甲苯氧基羰基、4-叔丁基苯氧基羰基、二甲苯氧基羰基、均三甲苯氧基羰基、枯烯基氧基羰基等]等。
“保護的羧基”的優選實例包括可具有合適的取代基的低級烷氧基羰基和芳基(低級)烷氧基羰基，其中(C1-C6)烷氧基羰基是更優選的。
合適的“離去基團”包括鹵素[例如氯、溴、碘等]或酰氧基例如芳基磺酰氧基[例如苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基等]、低級烷基磺酰氧基[例如甲磺酰氧基等]、低級鏈烷酰氧基[例如乙酰氧基、丙酰氧基等]等。
合適的“陰離子”包括甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、馬來酸根、酒石酸根、甲磺酸根、苯磺酸根、甲苯磺酸根、氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、硫酸氫根、磷酸根等。
本發明化合物[I]的合適的可藥用鹽是常規無毒鹽，并且包括例如與堿形成的鹽或酸加成鹽，例如與無機堿形成的鹽例如堿金屬鹽[例如鈉鹽、鉀鹽等]、堿土金屬鹽[例如鈣鹽、鎂鹽等]、銨鹽；與有機堿形成的鹽，例如有機胺鹽[例如三甲基胺鹽、三乙基胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇鹽鹽、三乙醇胺鹽、二環己基胺鹽、N，N′-二芐基乙二胺鹽等]；無機酸加成鹽[例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽等]；有機羧酸或磺酸加成鹽[例如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽等]；乙基與堿性或酸性氨基酸[例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等]形成的鹽。
本發明頭孢烯化合物的優選實施方案由如下所述的通式[I]代表。
(1)式[I]化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫或氨基保護基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R3是氫；A是 其中X是O或NH；
R7是氫或氨基保護基；R9是氨基或保護的氨基；且p是0、1或2。
(2)上面(1)的化合物或其可藥用鹽，其中R8是氫。
(3)式[I]化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基、羥基(低級)烷基或鹵代(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基或酰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基或低級亞烯基；R5是羧基或酯化的羧基；R6是氨基或酰基氨基；R7是氫、低級烷基或酰基；且R9是氨基、一或二(低級)烷基氨基、酰基氨基、胍基、酰基胍基或飽和3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或酰基氨基取代。
(4)上面(3)的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基或酰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基或酯化的羧基；R6是氨基或酰基氨基；R7是氫或酰基；且R9是氨基或酰基氨基。
(5)上面(4)的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基或低級烷氧基羰基；R6是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基；R7是氫、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基；且R9是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基。
(6)上面(5)的化合物或其可藥用鹽，其中
R1是C1-C6烷基或羥基(C1-C6)烷基，且R2是氫、一、二或三苯基(C1-C6)烷基、C1-C6鏈烷酰基或(C1-C6)烷氧基羰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成C1-C6亞烷基；R5是羧基或(C1-C6)烷氧基羰基；R6是氨基、C1-C6鏈烷酰基氨基或(C1-C6)烷氧基羰基氨基；且R7是氫、C1-C6鏈烷酰基或(C1-C6)烷氧基羰基；且R9是氨基、C1-C6鏈烷酰基氨基或(C1-C6)烷氧基羰基氨基。
(7)上面(5)的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基；R6是氨基；R7是氫或低級鏈烷酰基；且R9是氨基。
(8)上面(7)的化合物或其可藥用鹽，其中R1是C1-C6烷基或羥基(C1-C6)烷基，且R2是氫，或者R1與R2鍵合在一起并且形成C1-C6亞烷基；R5是羧基；R6是氨基；R7是氫或C1-C6鏈烷酰基；且R9是氨基。
(9)式[I]化合物或其可藥用鹽，其中其中R4選自
-NH-A-(NH)m-(CH2)q-(CH2)p-R14， 和 其中R7、A、m、p和q分別如上文式[I]中所定義，R14是氨基、一或二(低級)烷基氨基或保護的氨基，R15是胍基或保護的胍基，且R16是3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或保護的氨基取代。
(10)式[I]化合物或其可藥用鹽，其中其中R4選自
和 其中p是0、1或2，q是0或1，R7是氫或氨基保護基，且R9是氨基或保護的氨基。
(11)上面(10)的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基；且R9是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基。
(12)上面(11)的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫、C1-C6鏈烷酰基或(C1-C6)烷氧基羰基；且R9是氨基、C1-C6鏈烷酰基氨基或(C1-C6)烷氧基羰基氨基。
(13)上面(11)的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫或低級鏈烷酰基；且R9是氨基。
(14)上面(13)的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫或C1-C6鏈烷酰基；且R9是氨基。
下面詳細解釋制備本發明化合物的方法。
方法1化合物[I]或其鹽可通過將化合物[II]或其在氨基上的反應性衍生物或其鹽與化合物[III]或其在羧基上的反應性衍生物或其鹽反應來制得。
合適的化合物[II]的在氨基上的反應性衍生物包括席夫堿型亞氨基或其互變異構烯胺型異構體，其是通過將化合物[II]與羰基化合物例如醛、酮等反應而形成的；甲硅烷基衍生物，其是通過將化合物[II]與甲硅烷基化合物例如二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、一(三甲基甲硅烷基)乙酰胺[例如N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺]、二(三甲基甲硅烷基)脲等反應而形成的；通過將化合物[II]與三氯化磷或光氣反應而形成的。
化合物[II]及其反應性衍生物的合適的鹽可參見對于化合物[I]所例舉的那些。
合適的化合物[III]的在羧基上的反應性衍生物包括酰鹵、酸酐、活化的酰胺和活化的酯。反應性衍生物的合適的實例可以是酰氯；酰疊氮；與例如以下酸的混合酸酐取代的磷酸[例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二芐基磷酸、鹵代磷酸等]、二烷基磷酸、亞硫酸、硫代硫酸、硫酸、烷磺酸[例如甲磺酸等]、脂族羧酸[例如乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、新戊酸、戊酸、異戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等]和芳族羧酸[例如苯甲酸等]；對稱酸酐；用咪唑、4-取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑活化的酰胺；活化的酯[例如氰基甲基酯、甲氧基甲基酯、二甲基亞氨基甲基[(CH3)2N+＝CH-]酯、乙烯基酯、炔丙基酯、對硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯基偶氮苯基酯、苯基硫代酸酯、對硝基苯基硫代酸酯、對甲苯基硫代酸酯、羧基甲基硫代酸酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫代酸酯等]；或與N-羥基化合物[例如N，N-二甲基羥基胺、1-羥基-2-(1H)-吡啶酮、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-1H-苯并三唑等]形成的酯。可根據所用化合物[III]的類型來任選地從它們中選擇這些反應性衍生物。
化合物[III]及其反應性衍生物的合適的鹽可參見對于化合物[I]所例舉的那些。
該反應通常在常用溶劑中進行，所述溶劑是例如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、丙酮、二氧雜環己烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或不給反應帶來不利影響的任何其它有機溶劑。這些常規溶劑還可以以與水的混合物形式使用。
在該反應中，當化合物[III]以游離酸形式或其鹽形式使用時，該反應優選在常規縮合劑存在下進行，所述縮合劑是例如例如N，N′-二環己基碳二亞胺；N-環己基-N′-嗎啉代乙基碳二亞胺；N-環己基-N′-(4-二乙基氨基環己基)碳二亞胺；N，N′-二乙基碳二亞胺；N，N′-二異丙基碳二亞胺；N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺；N，N′-羰基-二-(2-甲基咪唑)；五亞甲基乙烯酮-N-環己基亞胺；二苯基乙烯酮-N-環己基亞胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亞磷酸三烷基酯；多磷酸乙酯；多磷酸異丙基酯；三氯氧化磷(磷酰氯)；三氯化磷；亞硫酰氯；草酰氯；鹵代甲酸低級烷基酯[例如氯甲酸乙酯、氯甲酸異丙酯等]、三苯基膦；2-乙基-7-羥基苯并異噁唑鎓鹽；2-乙基-5-(間磺基苯基)異噁唑鎓氫氧化物分子內鹽；1-(對氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；通過將N，N-二甲基甲酰胺與亞硫酰氯、光氣、氯甲酸三氯甲酯、三氯氧化磷等反應而制備的所謂的Vilsmeier試劑；等等。
該反應也可以在無機堿或有機堿存在下進行，所述堿是例如堿金屬碳酸氫鹽、三(低級)烷基胺、吡啶、N-(低級)烷基嗎啉、N，N-二(低級)烷基芐基胺等。
反應溫度不是關鍵的，并且該反應通常在冷卻至溫熱的情況下進行。
方法2化合物[Ib]或其鹽可通過將化合物[Ia]或其鹽進行氨基保護基的消除反應來制得。
消除反應依據常規方法例如水解等進行。
該水解優選在堿或酸，包括路易斯酸存在下進行。
合適的堿包括無機堿和有機堿例如堿金屬[例如鈉、鉀等]、堿土金屬[例如鎂、鈣等]、其氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽、三烷基胺[例如三甲基胺、三乙胺等]、甲基吡啶、1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷、1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯等。
合適的酸包括有機酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等]和無機酸[例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氯化氫、溴化氫等]。
使用路易斯酸例如三鹵代乙酸[例如三氯乙酸、三氟乙酸等]等的消除反應優選在陽離子捕獲劑[例如苯甲醚、苯酚等]存在下進行。
該反應通常在溶劑例如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、四氫呋喃、其混合物或不給反應帶來不利影響的任何其它溶劑存在下進行。液體堿或酸也可用作溶劑。
反應溫度不是關鍵的，并且該反應通常在冷卻至溫熱的情況下進行。
方法3-(i)化合物[VIII]或其鹽可通過將化合物[VI]或其鹽與化合物[VII]或其鹽反應來制得。
化合物[VI]、[VII]和[VIII]的合適的鹽可參見對于化合物[I]所例舉的那些。
該反應可在溶劑例如水、磷酸鹽緩沖液、丙酮、氯仿、乙腈、硝基苯、二氯甲烷、二氯乙烷、甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇、乙醚、四氫呋喃、二甲亞砜或不給反應帶來不利影響的任何其它溶劑中進行，優選在具有強極性的溶劑中進行。在溶劑當中，親水性溶劑可以以與水的混合物形式使用。當化合物[VII]是液體時，其也可以用作溶劑。
該反應優選在堿例如無機堿如堿金屬氫氧化物、堿金屬碳酸鹽、堿土金屬碳酸氫鹽和有機堿例如三烷基胺等存在下進行。
反應溫度不是關鍵的，并且該反應通常在室溫、溫熱或加熱條件下進行。該反應優選在堿金屬鹵化物[例如碘化鈉、碘化鉀等]、堿金屬硫氰酸鹽[例如硫氰酸鈉、硫氰酸鉀等]等存在下進行。
陰離子Z可以是衍生自離去基團Y的陰離子，并且可以通過常規方法將其轉化成其它陰離子。
方法3-(ii)
化合物[I]或其鹽可通過將化合物[VIII]或其鹽進行羧基保護基的消除反應來制得。
消除反應可以按照類似于上述方法2中的反應的方式進行，因此，所使用的試劑和反應條件(例如溶劑、反應溫度等)可參見方法2中的那些。
方法4化合物[Id]或其鹽可通過將化合物[Ic]或其鹽進行羥基保護基的消除反應來制得。
進行該消除反應的合適的方法包括常規方法例如水解、還原等。
(i)對于水解水解優選在堿或酸，包括路易斯酸存在下進行。
合適的堿包括無機堿和有機堿例如堿金屬[例如鈉、鉀等]、堿土金屬[例如鎂、鈣等]、其氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽、三烷基胺[例如三甲基胺、三乙胺等]、甲基吡啶、1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷、1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯等。
合適的酸包括有機酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等]和無機酸[例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氯化氫、溴化氫等]。
使用路易斯酸例如三鹵代乙酸[例如三氯乙酸、三氟乙酸等]等的消除反應優選在陽離子捕獲劑[例如苯甲醚、苯酚等]存在下進行。
該反應通常在溶劑例如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、四氫呋喃、其混合物或不給反應帶來不利影響的任何其它溶劑存在下進行。液體堿或酸也可用作溶劑。
反應溫度不是關鍵的，并且該反應通常在冷卻至溫熱的情況下進行。
(ii)對于還原還原以常規方式來進行，包括化學還原和催化還原。
用于進行化學還原的合適的還原試劑是金屬[例如錫、鋅、鐵等]或金屬化合物[例如氯化鉻、乙酸鉻等]與有機酸或無機酸[例如甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、對甲苯磺酸、鹽酸、氫溴酸等]的組合。
用于催化還原的合適的催化劑是常規催化劑例如鉑催化劑[例如鉑片、海綿鉑、鉑黑、膠態鉑、氧化鉑、鉑絲等]、鈀催化劑[例如海綿鈀、鈀黑、氧化鈀、披鈀炭、膠態鈀、以硫酸鋇為載體的鈀、以碳酸鋇為載體的鈀等]、鎳催化劑[例如還原鎳、氧化鎳、阮內鎳等]、鈷催化劑[例如還原鈷、阮內鈷等]、鐵催化劑[例如還原鐵、阮內鐵等]、銅催化劑[例如還原銅、阮內銅、Ullman銅等]等。
還原通常在不給反應帶來不利影響的常規溶劑例如水、甲醇、乙醇、丙醇、N，N-二甲基甲酰胺或其混合物中進行。
此外，當在化學還原中使用的上述酸是液體時，它們也可用作溶劑。
此外，在催化還原中使用的合適的溶劑可以是上述溶劑以及其它常規溶劑例如乙醚、二氧雜環己烷、四氫呋喃等或其混合物。
反應溫度不是關鍵的，并且該反應通常在冷卻至溫熱的情況下進行。
當R6是保護的氨基時，R6中的氨基保護基可以通過常規方法例如水解來消除。
下面詳細解釋用于制備起始化合物的方法A和B。
方法A-(i)化合物[XII]或其鹽可通過將化合物[X]或其鹽與化合物[XI]或其鹽反應來制得。
該反應可以按照類似于上述方法3-(i)中的反應的方式進行，因此，所使用的試劑和反應條件(例如溶劑、反應溫度等)可參見方法3-(i)中的那些。
方法A-(ii)化合物[II]或其鹽可通過將化合物[XII]或其鹽進行R11和R13中的氨基保護基以及R12中的羧基保護基的消除反應來制得。
該反應可以按照類似于上述方法2中的反應的方式進行，因此，所使用的試劑和反應條件(例如溶劑、反應溫度等)可參見方法2中的那些。
方法B化合物[VI]或其鹽可通過將化合物[XIII]或其在氨基上的反應性衍生物或其鹽與化合物[XIV]或其在羧基上的反應性衍生物或其鹽反應來制得。
消除反應可以按照類似于上述方法1中的反應的方式進行，因此，所使用的試劑和反應條件(例如溶劑、反應溫度等)可參見方法1中的那些。
通過上述方法獲得的化合物可通過常規方法例如研磨、重結晶、柱色譜發、再沉淀等來分離和純化。
應當注意，化合物[I]以及其它化合物可包括由于不對稱碳原子和雙鍵而存在的一種或多種立體異構體例如旋光異構體和幾何異構體，所有這樣的異構體及其混合物都包括在本發明范圍內。
本發明化合物[I]及其可藥用鹽包括溶劑化物[例如包涵化合物(例如水合物等)]。
本發明化合物[I]及其可藥用鹽是新的，并且表現出高的抗微生物活性，抑制多種病原性微生物，包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物的生長，并且可用作抗微生物劑。
為了證明本發明化合物[I]的用途，下面描述關于代表性本發明化合物的MIC(最小抑制濃度)的測試數據。
測試方法通過如下所述的兩倍瓊脂板稀釋方法來測定抗菌活性。
將一環每一測試微生物株在胰酶解酪蛋白-大豆肉湯中的過夜培養物(106活細胞/ml)在含有梯度濃度的代表性測試化合物的心臟輸注瓊脂(HI-瓊脂)上劃線，在37℃培養20小時后測定以μg/ml表示的最小抑制濃度(MIC)。
測試化合物化合物(a)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[7-(3-氨基丙酰氨基)-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(實施例3)化合物(b)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(3-氨基丙酰氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(實施例4)化合物(c)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(氨基乙酰基)氨基-2-甲基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(實施例6)化合物(d)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(實施例7)化合物(e)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-胍基-2-甲基-1-吡唑子基)甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(實施例11)頭孢他啶測試結果
對于治療給藥，本發明化合物[I]及其可藥用鹽可以以常規藥物制劑的形式使用，所述制劑含有作為活性組分的所述化合物以及與其混合的可藥用載體，例如適于口服、胃腸外或外部給藥的有機或無機固體或液體賦形劑。本發明藥物制劑可以呈固體形式，例如片劑、粒劑、粉劑、膠囊劑，或液體形式例如溶液、懸浮液、糖漿劑、乳劑、lemonade等。
如果需要的話，在上述制劑中可以包含輔助物質、穩定劑、潤濕劑以及其它常用添加劑例如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸鎂、terra alba、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、膠質、花生油、橄欖油、可可油脂、乙二醇等。
化合物[I]的劑量可以改變，并且也取決于患者年齡、身體狀況、疾病類型、所施用的化合物[I]的種類等。可施用給患者的劑量一般為每天1mg-4,000mg或甚至更多。可使用平均單一劑量為約50mg、100mg、250mg、500mg、1000mg或2000mg本發明化合物[I]來治療被病原性微生物感染的疾病。
給出下列制備例和實施例來更詳細地舉例說明本發明。
制備例1向(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)[(2-叔丁氧基-1，1-二甲基-2-氧代乙氧基)亞氨基]乙酸(5g)在四氫呋喃(80ml)和N，N-二甲基甲酰胺(20ml)的混合物內的溶液中加入二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉(8.33g)在四氫呋喃(12ml)中的溶液，將該混合物攪拌15分鐘。在冰冷卻下向該反應混合物中加入二碳酸叔丁酯(3.3g)在四氫呋喃(20ml)中的溶液，將該混合物在冰冷卻下攪拌3小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯，將該混合物用10％硫酸氫鉀水溶液洗滌，然后用磷酸鹽緩沖液(pH 6.86)洗滌。分離出有機層，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用二異丙基醚研制，并真空干燥，獲得了(Z)-2-{5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1，2，4-噻二唑-3-基}[(2-叔丁氧基-1，1-二甲基-2-氧代乙氧基)亞氨基]乙酸(3.10g)。
IR(KBr)3191.6，2981.4，1714.4，1550.5，1153.2，1000.9cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.45(6H，s)，1.50(9H，s)，12.7(1H，s)ESI-MSm/z＝429(M-H)制備例2將N，N-二甲基甲酰胺(0.648ml)和磷酰氯(0.781ml)的混合物在室溫攪拌30分鐘。在4℃向該混合物中加入四氫呋喃(4ml)和(Z)-2-{5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1，2，4-噻二唑-3-基}[(2-叔丁氧基-1，1-二甲基-2-氧代乙氧基)亞氨基]乙酸(3g)，將該反應混合物在室溫攪拌1小時。期間，將7β-氨基-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯鹽酸鹽(3g)和N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(8.72g)在四氫呋喃(15ml)中的混合物溫熱以獲得澄清溶液。然后將該溶液冷卻至-20℃，加到上面獲得的活化的酸溶液中。將該反應混合物在-10℃-0℃攪拌1小時，倒入乙酸乙酯與水的混合物內。分離出水層，將有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮，通過硅膠柱色譜純化，用己烷/乙酸乙酯(3∶2)洗脫，獲得了7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(4.79g)。
IR(KBr)2981.4，1793.5，1720.2，1524.8，1371.1，1247.7，1151.3cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(6H，s)，1.48(3H，s)，1.50(6H，s)，3.58(1H，d，J＝18.3Hz)，3.76(1H，d，J＝18.3Hz)，4.44(2H，s)，5.29(1H，d，J＝5.0Hz)，6.01(1H，dd，J＝8.6，5.0Hz)，6.97(1H，s)，7.2-7.6(10H，m)，9.65(1H，d，J＝5.0Hz)，12.7(1H，s)ESI-MSm/z＝849(M+Na)制備例3在4℃向5-氨基-1-甲基吡唑(5g)在乙醇(50ml)內的溶液中加入亞硝酸異戊酯(6.92ml)，然后加入20％鹽酸(5滴)。將該反應混合物回流2小時，并冷卻至室溫。向該反應混合物中加入二異丙基醚(50ml)，將該混合物攪拌0.5小時。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(3.53g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.51(3H，s)，8.07(2H，brs)，8.51(1H，s)APCI-Msm/z＝127(M+H)制備例4在氫氣氛下向5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(1g)在水(40ml)內的溶液中加入濃硫酸(0.423ml)和披鈀炭(0.3g)。將該混合物攪拌過夜。將該反應混合物過濾，并將濾液真空濃縮。向殘余物中加入異丙醇，并通過過濾收集所形成的沉淀，獲得了4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(1.71g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.54(3H，s)，7.19(1H，s)ESI-MSm/z＝113(M+H)制備例5在冰冷卻下向1，1′-羰基二咪唑(9.73g)在脫水氯仿(72ml)內的懸浮液中加入N-(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(9.61g)，將該混合物在室溫攪拌1小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(14.22g)和4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(10.51g)，將該混合物在50℃攪拌15小時。通過過濾除去不溶物。向濾液中加入氯仿(200ml)和5％碳酸氫鈉水溶液(100ml)。分離出有機層，將水層用氯仿與甲醇(4∶1)的混合溶劑萃取。將有機層合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙酸乙酯研制并真空干燥，獲得了5-氨基-4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-1-甲基吡唑(14.0g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.96-2.98(2H，m)，3.03-3.07(2H，m)，3.50(3H，s)，4.81(2H，br)，5.92(1H，br)，6.80(1H，br)，6.96(1H，s)，7.18(1H，br)實施例1向7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(500mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.0ml)內的溶液中加入碘化鈉(100mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入5-氨基-4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-1-甲基吡唑(216mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.0ml)中的溶液。將整個混合物在32℃攪拌4小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(75ml)中，并通過過濾收集所形成的沉淀，真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(1.8ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.6ml)和三氟乙酸(1.2ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(80ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(380mg)，通過使用ODS柱的制備高效液相色譜(HPLC)純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(21mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，3.12(2H，t，J＝5.7Hz)，3.22(1H，d，J＝17.9Hz)，3.49(1H，d，J＝17.9Hz)，3.46(2H，t，J＝5.7Hz)，3.71(3H，s)，4.95(1H，d，J＝15.6Hz)，5.15(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝4.6Hz)，5.84(1H，d，J＝4.6Hz)，7.89(1H，s)
制備例6向5-氨基-4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-1-甲基吡唑(597mg)和三乙胺(243mg)在二氯甲烷(10ml)內的溶液中加入三苯基甲基氯(669mg)，將該混合物在室溫攪拌19小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙酸乙酯研制，獲得了4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑(640mg)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.70(3H，s)，2.94-2.96(2H，m)，2.99-3.01(2H，m)，5.68(1H，brs)，5.96(1H，br)，6.78(1H，br)，6.85(1H，br)，7.00(1H，s)，7.13-7.15(6H，m)，7.24-7.28(9H，m)制備例7向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(60g)在甲苯(600ml)內的溶液中加入碘化鈉(61.8g)在0.05mol磷酸鹽緩沖液(pH 7，500ml)中的溶液和三辛酰基甲基氯化銨(6.67g)。將該混合物在室溫攪拌15小時。將該反應混合物加到乙酸乙酯與水的混合物中。將有機層用水和鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥。過濾出硫酸鎂，將濾液減壓蒸發至255g。將濃縮液倒入二異丙基醚(2L)中。通過過濾收集所形成的沉淀，并干燥，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(59.4g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.46(6H，s)，3.57和3.87(2H，ABq，J＝18.0Hz)，3.76(3H，s)，4.30(2H，bs)，5.25(1H，d，J＝4.9Hz)，5.94(1H，dd，J＝4.9，8.7Hz)，6.95(1H，bs)，7.15-7.60(10H，m)，8.17(2H，bs)，9.53(1H，d，J＝8.7Hz)實施例2向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(810mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑(640mg)在二氯甲烷(10ml)中的溶液。將整個混合物在室溫攪拌26小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)內，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(2.38ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.79ml)和三氟乙酸(1.58ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(80ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(635mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(54mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，3.12(2H，t，J＝5.7Hz)，3.22(1H，d，J＝17.9Hz)，3.49(1H，d，J＝17.9Hz)，3.46(2H，t，J＝5.7Hz)，3.71(3H，s)，4.95(1H，d，J＝15.6Hz)，5.15(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝4.6Hz)，5.84(1H，d，J＝4.6Hz)，7.89(1H，s)制備例8在冰冷卻下向2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(120g)在硫酸(500ml)內的溶液中加入硝酸鉀(111g)。將該混合物在室溫攪拌48小時。將該反應混合物加到冰(2.0kg)中。通過過濾來收集該結晶殘余物，并真空干燥，獲得了7-硝基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(132g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ4.05-4.09(2H，m)，4.17-4.20(2H，m)，7.82(1H，s)，7.97(1H，br)
制備例9在室溫將7-硝基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(97g)在硫酸(34ml)與水(2000ml)的混合溶劑內的懸浮液用10％披鈀炭(10g)于氫氣氛下處理4天。將催化劑過濾后，將濾液真空濃縮。用甲醇研制殘余物，并真空干燥，獲得了7-氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑硫酸鹽(90.2g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.87-3.90(2H，m)，4.07-4.10(2H，m)，7.28(1H，s)制備例10向7-氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑硫酸鹽(2.22g)和N-乙基二異丙基胺(2.84g)在二氯甲烷(70ml)內的溶液中加入N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)-丙酰氧基]琥珀酰亞胺(3.15g)。將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將該油狀殘余物硅膠柱色譜純化，用5％甲醇/氯仿洗脫，獲得了7-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(2.2g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.44(9H，s)，2.52(2H，t，J＝6.0Hz)，3.36-3.47(2H，m)，3.96(2H，t，J＝8.2Hz)，4.18(2H，t，J＝8.2Hz)，5.16(1H，br)，7.16(1H，s)，7.90(1H，br)實施例37β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[7-(3-氨基丙酰氨基)-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和7-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑以與實施例1相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(3H，s)，1.52(3H，s)，2.83(2H，t，J＝6.4Hz)，3.26(1H，d，J＝17.9Hz)，3.53(1H，d，J＝17.9Hz)，3.31(2H，t，J＝6.4Hz)，4.15(2H，t，J＝8.7Hz)，4.33(1H，q，J＝8.7Hz)，4.42(1H，q，J＝8.7Hz)，4.95(1H，d，J＝15.1Hz)，5.03(1H，d，J＝15.1Hz)，5.25(1H，d，J＝5.0Hz)，5.84(1H，d，J＝5.0Hz)，8.06(1H，s)制備例11[2-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽和N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰氧基]琥珀酰亞胺以與制備例10相同的方式獲得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.35(2H，t，J＝7.1Hz)，3.18(2H，q，J＝7.1Hz)，3.50(3H，s)，4.90(2H，s)，6.83(1H，t，J＝7.1Hz)，7.14(1H，s)，9.06(1H，s)AP-MSm/z＝283制備例12(2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基]乙基}氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由[2-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)乙基]-氨基甲酸叔丁酯以與制備例6相同的方式獲得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，2.08(2H，t，J＝7.1Hz)，2.71(3H，s)，3.04(2H，q，J＝7.1Hz)，5.57(1H，s)，6.72(1H，t，J＝7.1Hz)，7.1-7.4(16H，m)，8.25(1H，s)實施例47β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(3-氨基丙酰氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和{2-([1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基]乙基}氨基甲酸叔丁酯以與實施例1相同的方式獲得的。
1H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，2.89(2H，t，J＝6.5Hz)，3.20and 3.47(2H，ABq，J＝18Hz)，3.34(2H，t，J＝6.5Hz)，3.75(3H，s)，4.99 and 5.21(2H，ABq，J＝16Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.02(1H，s)ESI-MSm/z＝674(M+Na)制備例13在4℃向1，3-二(叔丁氧基羰基)-2-(三氟甲基磺酰基)胍(22.3g)在二氯甲烷(100ml)內的溶液中加入4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(10g)和三乙胺(33.2ml)，將該混合物在室溫攪拌過夜。將該反應混合物倒入乙酸乙酯與水的混合物內。分離出水層，將有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮。將濃縮液倒入乙腈內，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了5-氨基-4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-甲基吡唑(11.62g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.50(9H，s)，3.52(3H，s)，5.14(2H，s)，7.11(1H，s)，9.14(1H，s)，11.5(1H，s)制備例144-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑本標題化合物是由5-氨基-4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-甲基吡唑以與制備例6相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.50(9H，s)，2.85(3H，s)，5.88(1H，s)，7.17(1H，s)，7.21(15H，m)，8.85(1H，s)，11.2(1H，s)ESI-MSm/z＝597(M+H)實施例57β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-胍基-2-甲基-1-吡唑子基)甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑以與實施例1相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.53(6H，s)，3.25和3.57(2H，ABq，J＝18Hz)，3.75(3H，s)，5.00和5.18(2H，ABq，J＝15Hz)，5.27(1H，d，J＝4.9Hz)，5.85(1H，d，J＝4.9Hz)，8.05(1H，s)制備例15在冰冷卻下向4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(305g)在四氫呋喃(3.05L)內的懸浮液中加入2-[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(415g)。在低于10℃的溫度下向該混合物中滴加二異丙基乙基胺(556ml)。將該混合物在室溫攪拌過夜。向所得溶液中加入鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯(3.0L)萃取該混合物。將水層用四氫呋喃/乙酸乙酯＝1/1(3.0L)萃取2次。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用二異丙基醚(1.0L)研制，并真空干燥，獲得了2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(307g)。
IR(KBr)3440，3349，1670，1631，1525，1276，1163，1074，1014，860，791cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，3.44(3H，s)，3.64(2H，d，J＝5.9Hz)，4.91(2H，brs)，6.97(1H，t，J＝5.9Hz)，7.15(1H，s)，9.09(1H，brs)制備例16向2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(307g)在N，N-二甲基甲酰胺(1.5L)內的溶液中加入三苯基甲基氯(334g)。向該混合物中滴加三乙胺(318ml)。將該混合物在室溫攪拌1小時。將該反應混合物溶解在乙酸乙酯中。將該溶液依次用水、10％檸檬酸水溶液、水和鹽水洗滌。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙腈(1.5L)研制，并真空干燥，獲得了2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(468g)。
IR(KBr)3336，3280，1724，1683，1599，1234，939，704cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.73(3H，s)，3.38(2H，d，J＝5.8Hz)，5.58(1H，s)，6.94(1H，t，J＝5.8Hz)，7.11-7.35(15H，m)，7.21(1H，s)，8.31(1H，s)ESI-MSm/z＝512.3(M+H+)實施例6向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(489g)在N，N-二甲基甲酰胺(1.4L)內的溶液中加入碘化鈉(102g)。在室溫攪拌1小時后，將2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(383g)加到該混合物中。繼續在37℃攪拌24小時。將所得混合物倒入水內，并用乙酸乙酯萃取。將有機層依次用水、10％硫代硫酸鈉水溶液、鹽水和10％三氟乙酸鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發。將殘余物溶解在乙酸乙酯(3.5L)中，將該溶液滴加到二異丙基醚(36L)中。通過過濾收集沉淀。將濾餅用二異丙基醚洗滌，并真空干燥。
將所得固體(700g)溶解在二氯甲烷(1.4L)中，向該溶液中依次加入苯甲醚(700ml)和三氟乙酸(2.1L)。在室溫攪拌4小時后，將該反應混合物倒入二異丙基醚(30L)中。通過過濾收集沉淀。將所得固體用二異丙基醚洗滌，并真空干燥。將粗產物溶解在水(3.5L)中，用28％氨水溶液將該溶液的pH調節至7.0。過濾出不溶物，用濃鹽酸將濾液的pH調節至1。再次過濾出不溶物。將濾液在DiaionHP-20上進行色譜純化，用20％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約3.0L，將2.0M硫酸(102ml)內的溶液中加到該濃縮液中。將該混合物凍干，獲得了粗產物。
通過制備HPLC純化粗產物(pH 7.0磷酸鹽緩沖液和乙腈)，并且將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約6L。用濃鹽酸將濃縮液調節至約pH 1，在DiaionHP-20上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約550ml，并將2.0M硫酸(54.5ml)加到該濃縮液中。向該混合物中滴加乙腈(880ml)，將該混合物在室溫攪拌過夜。向該混合物中加入乙腈(200ml)，將該混合物在室溫攪拌2小時。通過過濾收集所得白色晶體，用25％乙腈水溶液洗滌，并減壓干燥，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(氨基乙酰基)氨基-2-甲基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(72.5g)。
IR(KBr)1778，1700，1653，1525，1149，1111，617cm-11H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.22 and 3.45(2H，ABq，J＝17.8Hz)，3.73(3H，s)，4.03(2H，s)，5.05和5.27(2H，ABq，J＝15.8Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.87(1H，d，J＝4.8Hz)，8.09(1H，s)ESI-MSm/z＝638.2(M+H+)實施例7將7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(36g)在水中的溶液通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約1.5L。用濃鹽酸將濃縮液調節至約pH 1，在DiaionHP-20(6L)上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約800ml，加入2M硫酸(17ml)。將所得溶液凍干，獲得了硫酸鹽，為非晶粉末(23.6g)。
將該粉末溶解在水(71ml)和乙醇(57ml)中。加入晶種(310mg)后，形成白色固體沉淀，將該混合物攪拌1小時。用30分鐘加入乙醇(47ml)與水(37ml)的混合物，用20分鐘加入乙醇(33ml)。然后將該漿液再攪拌1.5小時。通過過濾收集沉淀，用乙醇/水(60ml/20ml)和乙醇(60ml)洗滌，干燥，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽，為晶體(17.3g)。
IR(KBr)3353，3183，1778，1652，1558，1403，1321，1143，1118，997，619cm-11H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.10-3.55(6H，m)，3.71(3H，s)，5.02 and 5.23(2H，ABq，J＝16.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.9Hz)，5.87(1H，d，J＝4.9Hz)，7.91(1H，s)ESI-MSm/z＝667(M+H+)X-射線粉末衍射分析(通過Rigaku X-ray射線衍射系統 MultiFlex)2θ強度8.0 128612.7 58613.8 42316.1 61818.9 52020.4 74821.5 66722.4 105823.3 94424.0 61825.5 81326.7 47227.9 53728.5 45531.3 390X-射線Cu/40kV/30mA制備例175-氨基-1-乙基-4-亞硝基吡唑本標題化合物是由5-氨基-1-乙基吡唑以與制備例3相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(3H，t，J＝7.1Hz)，3.93(2H，q，J＝7.1Hz)，7.04 and 8.53(1H，s)，8.10 and 8.15(1H，brs)APCI-MSm/z＝141(M+H)+制備例184，5-二氨基-1-乙基吡唑硫酸鹽本標題化合物是由5-氨基-1-乙基-4-亞硝基吡唑以與制備例4相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.36(3H，t，J＝7.3Hz)，4.10(2H，q，J＝7.3Hz)，7.77(1H，s)ESI-MSm/z＝127(M+H)+制備例195-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基氨基]-1-乙基吡唑本標題化合物是由4，5-二氨基-1-乙基吡唑硫酸鹽以與制備例15相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.24(3H，t，J＝7.2Hz)，1.37(9H，s)，2.35(2H，t，J＝7.1Hz)，3.18(2H，dt，J＝7.1，7.1Hz)，3.85(q，J＝7.2Hz)，4.88(2H，brs)，6.75-6.90(1H，m)，7.17(1H，s)，9.05(1H，brs)APCI-MSm/z＝298(M+H)+制備例204-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基氨基]-1-乙基-5-三苯基甲基氨基吡唑本標題化合物是由5-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基氨基]-1-乙基吡唑以與制備例16相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.88(3H，t，J＝7.2Hz)，1.39(9H，s)，2.02(2H，t，J＝7.1Hz)，2.95-3.20(4H，m)，5.59(1H，brs)，6.60-6.75(1H，m)，7.10-7.35(16H，m)，8.04(1H，brs)ESI-MSm/z＝540(M+H)+，562(M+Na)+實施例87β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(3-氨基丙酰基氨基)-2-乙基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和4-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基氨基]-1-乙基-5-三苯基甲基氨基吡唑以與實施例1相同的方式獲得的。
IR(KBr)3415，1763，1658，1598，1529，1402，1361cm-11H-NMR(D2O)δ1.33(3H，t，J＝7.2Hz)，1.53(6H，s)，2.89(2H，t，J＝6.5Hz)，3.17 and 3.49(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.34(2H，t，J＝6.5Hz)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz)，5.05和5.16(2H，ABq，J＝15.4Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.03(1H，s)制備例212-[(5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由4，5-二氨基-1-乙基吡唑硫酸鹽以與制備例15相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(3H，t，J＝7.2Hz)，1.39(9H，s)，3.64(2H，d，J＝6.0Hz)，3.86(2H，d，J＝7.2Hz)，4.88(2H，brs)，6.90-7.00(1H，m)，7.17(1H，s)，9.06(1H，brs)ESI-MSm/z＝284(M+H)+，306(M+Na)+制備例222-{[1-乙基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由2-[(5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯以與制備例16相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.88(3H，t，J＝7.2Hz)，1.38(9H，s)，3.16(2H，q，J＝7.2Hz)，3.31(2H，d)，5.59(1H，brs)，6.80-6.95(1H，m)，7.10-7.40(16H，m)，8.03(1H，brs)ESI-MSm/z＝526(M+H)+，548(M+Na)+實施例97β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(氨基乙酰基)氨基-2-乙基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和2-{[1-乙基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯以與實施例1相同的方式獲得的。
1H-NMR(D2O)δ1.33(3H，t，J＝7.2Hz)，1.53(6H，s)，2.89(2H，t，J＝6.5Hz)，3.17 and 3.49(2H，ABq，J＝17.7Hz)，4.00(2H，s)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz)，5.06和5.17(2H，ABq，J＝15.4Hz)，5.27(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.07(1H，s)制備例235-氨基-4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)-胍基]-1-乙基吡唑本標題化合物是由1，3-二(叔丁氧基羰基)-2-(三氟甲基磺酰基)胍和4，5-二氨基-1-乙基吡唑硫酸鹽以與制備例13相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.22(3H，t，J＝7.1Hz)，1.37(9H，s)，1.50(9H，s)，3.88(2H，d，J＝7.1Hz)，5.12(2H，brs)，7.14(1H，s)，9.16(1H，brs)，11.51(1H，brs)ESI-MSm/z＝369(M+H)+制備例244-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-乙基-5-三苯基甲基氨基吡唑本標題化合物是由5-氨基-4-[2′，3，-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-乙基吡唑以與制備例16相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.86(3H，t，J＝7.1Hz)，1.38(9H，s)，1.49(9H，s)，5.85(1H，brs)，7.10-7.30(16H，m)，8.80(1H，brs)，11.14(1H，brs)ESI-MSm/z＝611(M+H)+，633(M+Na)+實施例107β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-2-乙基-4-胍基-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-乙基-5-三苯基甲基氨基吡唑以與實施例1相同的方式制得的。
IR(KBr)3437，1760，1658，1625，1406，1065cm-11H-NMR(D2O)δ1.35(3H，t，J＝7.3Hz)，1.53(6H，s)，3.26and 3.61(2H，ABq，J＝17.8Hz)，4.29(2H，q，J＝7.3Hz)，5.06 and 5.17(2H，ABq，J＝15.7Hz)，5.29(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.06(1H，s)實施例11向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(500g)在N，N-二甲基甲酰胺(2.5L)內的懸浮液中加入4-[2′，3′-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑(419g)和將該混合物在室溫攪拌16小時。將該反應混合物加到乙酸乙酯與水的混合物中。將有機層用水、鹽水和10％三氟乙酸鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鎂干燥。過濾出硫酸鎂，將濾液減壓蒸發至3.3kg。將濃縮液倒入二異丙基醚(33L)中，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。
向所得固體在二氯甲烷(1500ml)內的溶液中加入苯甲醚(500ml)和三氟乙酸(1500ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚中。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。粗產物溶解在水(3.5L)中，用28％氨水溶液將該溶液的pH調節至7.0。過濾出不溶物，用濃鹽酸將濾液的pH調節至1。再次過濾出不溶物。將濾液在DiaionHP-20上進行色譜純化，用20％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約3.0L。向濃縮液中加入2.0M硫酸(150ml)，并且將該混合物凍干，獲得了粗產物。通過使用ODS柱的制備HPLC純化粗產物(pH7.0磷酸鹽緩沖液和乙腈)。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約6L。用濃鹽酸將濃縮液調節至約pH 1，在DiaionHP-20上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約1.5L。向濃縮液中加入2.0M硫酸(60ml)，并且將該混合物凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-胍基-2-甲基-1-吡唑子基)甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(48.5g)。
IR(KBr)1776，1714，1677，1651，1402，1112cm-11H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.28和3.58(2H，ABq，J＝17.8Hz)，3.74(3H，s)，5.15和5.23(2H，ABq，J＝15.7Hz)，5.27(1H，d，J＝4.8Hz)，5.88(1H，d，J＝4.8Hz)，8.07(1H，s)ESI-MSm/z＝623.2(M+H+)制備例25在冰冷卻下向4，5-二氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑硫酸鹽(2.4g)在二氯甲烷(40ml)內的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(2.1ml)和N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰氧基]琥珀酰亞胺(2.3g)，將該混合物在室溫攪拌6小時。向該反應混合物中加入鹽水(40ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)，將該混合物用乙酸乙酯與2-丙醇的混合物(3∶1，60ml)萃取。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。用乙醚研制殘余物，獲得了5-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]-氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑(1.65g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.35(2H，t，J＝7.3Hz)，3.16-3.20(2H，m)，3.62-3.65(2H，m)，3.90(2H，t，J＝6.0Hz)，4.85(2H，brs)，4.92(1H，t，J＝5.0Hz)，6.84(1H，t，J＝5.5Hz)，7.20(1H，s)，9.09(1H，brs)實施例127β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(3-氨基丙酰氨基)-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和5-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑以與實施例1相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(6H，s)，2.88(2H，t，J＝6.4H z)，3.15(1H，d，J＝17.9Hz)，3.48(1H，d，J＝17.9Hz)，3.32(2H，t，J＝6.4Hz)，3.88(2H，t，J＝4.8Hz)，4.39(1H，dt，J＝16.5Hz，4.8Hz)，4.42(1H，dt，J＝16.5，4.8Hz)，5.06(1H，d，J＝15.1Hz)，5.11(1H，d，J＝15.1Hz)，5.25(1H，d，J＝5.0Hz)，5.83(1H，d，J＝5.0Hz)，8.05(1H，s)制備例26在冰冷卻下向4-甲酰基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(1.51g)在硫酸(7.5ml)內的溶液中加入硝酸鉀(111g)。將該混合物在室溫攪拌17小時。將該反應混合物加到冰(100g)中。通過過濾來收集該結晶殘余物，并真空干燥，獲得了3-硝基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(0.63g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.00-2.05(2H，m)，3.30-3.36(2H，m)，3.99(2H，t，J＝6.0Hz)，7.85(1H，s)，7.89(1H，s)制備例27將3-硝基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(1.68g)在硫酸(0.6ml)、乙酸(100ml)和水(10ml)的混合物中的溶液用10％披鈀炭(0.5g)在氫氣氛下于室溫處理6天。將催化劑過濾后，將濾液真空濃縮。用乙醇研制殘余物，并真空干燥，獲得了3-氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶硫酸鹽(2.3g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.97-2.01(2H，m)，3.22(2H，t，J＝5.0Hz)，3.98(2H，t，J＝6.0Hz)，7.22(1H，s)制備例28向3-氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶硫酸鹽(2.96g)和N-乙基二異丙基胺(3.88g)在二氯甲烷(70ml)內的溶液中加入1，3-二(叔丁氧基羰基)-2-(三氟甲磺酰基)胍(3.91g)。將該混合物在室溫攪拌150分鐘。將該反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用2％甲醇/氯仿洗脫，獲得了3-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(3.4g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.48(9H，s)，1.52(9H，s)，2.12-2.14(2H，m)，3.33-3.37(2H，m)，4.08(2H，t，J＝6.0Hz)，6.17(1H，brs)，7.16(1H，s)，9.87(1H，brs)，11.39(1H，brs)實施例13向7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(1.0g)在N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)內的溶液中加入碘化鈉(181mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入3-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(571mg)和二氯甲烷(2.0ml)。將整個混合物在室溫攪拌7小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(150ml)，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。
向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)，將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(150ml)中，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(570mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-胍基-4，5，6，7-四氫-1-吡唑并[1，5-a]嘧啶子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(51mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，2.05-2.25(2H，m)，3.26(1H，d，J＝17.4Hz)，3.56(1H，d，J＝17.4Hz)，3.30-3.45(2H，m)，4.15(2H，t，J＝6.0Hz)，4.93(1H，d，J＝15.6Hz)，5.15(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，7.99(1H，s)制備例29向7-氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑硫酸鹽(4.4g)、4-(二甲基氨基)吡啶(244mg)和三乙胺(8.10g)在氯仿(45ml)內的溶液中加入1，3-二(叔丁氧基羰基)-2-(三氟甲磺酰基)胍(10.18g)。將該混合物在室溫攪拌2小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水與飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用二異丙基醚研制，獲得了7-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(4.6g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.49(9H，s)，1.52(9H，s)，3.97-4.01(2H，m)，4.21(2H，t，J＝7.8Hz)，5.30(1H，brs)，7.19(1H，s)，9.86(1H，brs)，11.32(1H，brs)實施例147β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[7-胍基-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和7-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑以與實施例13的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(3H，s)，1.52(3H，s)，3.35(1H，d，J＝17.9Hz)，3.61(1H，d，J＝17.9Hz)，4.19(2H，t，J＝8.7Hz)，4.37(1H，q，J＝8.7Hz)，4.47(1H，q，J＝8.7Hz)，5.00(1H，d，J＝15.1Hz)，5.04(1H，d，J＝15.1Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，8.13(1H，s)制備例30向5-氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑(6.35g)在乙醇(25ml)和濃鹽酸(0.035ml)的混合溶劑內的溶液中滴加亞硝酸異戊酯(7.03g)。將該混合物在室溫攪拌17小時。通過過濾來收集該結晶殘余物，并真空干燥，獲得了5-氨基-1-(2-羥基乙基)-4-亞硝基吡唑(4.0g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.68(2H，t，J＝5.5Hz)，3.94(2H，t，J＝5.5Hz)，4.89(1H，br)，8.06(2H，br)，8.53(1H，s)
制備例31將5-氨基-1-(2-羥基乙基)-4-亞硝基吡唑(97g)在硫酸(34ml)與水(2000ml)的混合溶劑中的溶液用10％披鈀炭(10g)在氫氣氛下于室溫處理4天。將催化劑過濾后，將濾液真空濃縮。用甲醇研制殘余物，并真空干燥，獲得了4，5-二氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑硫酸鹽(90.2g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.66(2H，t，J＝5.5Hz)，3.95(2H，t，J＝5.5Hz)，7.25(1H，s)制備例32向4，5-二氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑硫酸鹽(50.0g)在氯仿(500ml)內的懸浮液中加入4-(二甲基氨基)吡啶(2.54g)、三乙胺(116ml)和1，3-二(叔丁氧基羰基)-2-(三氟甲磺酰基)胍(106g)。將該混合物在回流狀態下攪拌2小時。在冰浴上冷卻后，將該反應混合物依次用水、4％檸檬酸水溶液、水和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙酸乙酯(50ml)和乙醚(200ml)的混合溶劑研制，獲得了5-氨基-4-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-(2-羥基乙基)吡唑(50g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(9H，s)，1.53(9H，s)，3.28(1H，br)，4.02-4.05(4H，m)，4.65(2H，br)，7.22(1H，s)，9.85(1H，br)，11.55(1H，br)實施例157β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-胍基-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和5-氨基-4-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-(2-羥基乙基)吡唑以與實施例13的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，3.21(1H，d，J＝17.9Hz)，3.59(1H，d，J＝17.9Hz)，3.90(2H，t，J＝4.8Hz)，4.35-4.50(2H，m)，5.07(1H，d，J＝14.9Hz)，5.11(1H，d，J＝14.9Hz)，5.28(1H，d，J＝5.0Hz)，5.84(1H，d，J＝5.0Hz)，8.09(1H，s)制備例33向7-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(1.83g)在吡啶(10ml)內的溶液中加入三苯基甲基氯(1.67g)。將該混合物在50℃攪拌5小時。冷卻后，將氯仿(50ml)加到該反應混合物中，將該混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用2％甲醇/氯仿洗脫，獲得了7-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-三苯基甲基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(1.57g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(9H，s)，1.48(9H，s)，3.50(2H，t，J＝7.8Hz)，3.92(2H，t，J＝7.8Hz)，7.07-7.26(10H，m)，7.53-7.54(6H，m)，8.34(1H，brs)，11.12(1H，brs)實施例16向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(819mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入7-[2，3-二(叔丁氧基羰基)胍基]-1-三苯基甲基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(730mg)。將整個混合物在室溫攪拌6小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。
向所得固體在二氯甲烷(2.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.67ml)和三氟乙酸(1.34ml)，將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(120ml)。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(430mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[7-胍基-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(20.4mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(3H，s)，1.52(3H，s)，3.35(1H，d，J＝17.9Hz)，3.61(1H，d，J＝17.9Hz)，4.19(2H，t，J＝8.7Hz)，4.37(1H，q，J＝8.7Hz)，4.47(1H，q，J＝8.7Hz)，5.00(1H，d，J＝15.1Hz)，5.04(1H，d，J＝15.1Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，8.13(1H，s)制備例34向1，1′-羰基二咪唑(1.94g)在二氯甲烷(20ml)內的懸浮液中加入N-(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.30g)，將該混合物在室溫攪拌1小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(2.56g)和4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(2.10g)，將該混合物在30℃攪拌3天。將該反應混合物真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用6％甲醇/氯仿洗脫，獲得了5-氨基-4-(3-{3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}脲基)-1-甲基吡唑(1.75g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.43-1.49(2H，m)，2.89-2.93(2H，m)，2.98-3.01(2H，m)，3.50(3H，s)，4.79(2H，br)，5.85(1H，br)，6.77(1H，br)，6.96(1H，s)，7.12(1H，br)實施例17向7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(1.0g)在N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)內的溶液中加入碘化鈉(199mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入5-氨基-4-(3-{3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}脲基)-1-甲基吡唑(415mg)，將整個混合物在32℃攪拌24小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(100ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.6ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.2ml)和三氟乙酸(2.4ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(100ml)。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(939mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(3-氨基丙基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(53mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，1.85-1.88(2H，m)，3.03(2H，t，J＝8Hz)，3.22(2H，t，J＝18Hz)，3.26(2H，t，J＝7Hz)，3.49(1H，d，J＝18Hz)，3.72(3H，s)，4.96(1H，d，J＝15Hz)，5.16(1H，d，J＝15Hz)，5.25(1H，d，J＝5Hz)，5.84(1H，d，J＝5Hz)，7.88(1H，s)制備例35在冰冷卻下向1，1′-羰基二咪唑(973mg)在二氯甲烷(10ml)內的懸浮液中加入N-(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.11g)，將該混合物在室溫攪拌2小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(1.28g)和3-氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶硫酸鹽(1.18g)，將該混合物在50℃攪拌6小時。將該反應混合物用鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用5％甲醇/氯仿洗脫，獲得了3-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(150mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，2.11-2.16(2H，m)，3.22-3.35(6H，m)，4.09(2H，t，J＝7Hz)，4.69(1H，br)，5.14(2H，br)，5.69(1H，br)，7.17(1H，s)實施例187β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-[3-(2-氨基乙基)脲基]-4，5，6，7-四氫-1-吡唑并[1，5-a]嘧啶子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和3-(3-{22-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶以與實施例17相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，2.09-2.21(2H，m)，3.13(2H，t，J＝6Hz)，3.24(1H，d，J＝18Hz)，3.35-3.52(5H，m)，4.12-4.15(2H，m)，4.88(1H，d，J＝16Hz)，5.13(1H，d，J＝16Hz)，5.25(1H，d，J＝5Hz)，5.85(1H，d，J＝5Hz)，7.83(1H，s)制備例36在冰冷卻下向1，1′-羰基二咪唑(973mg)在二氯甲烷(10ml)內的懸浮液中加入O-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]羥基胺(1.11g)，將該混合物在室溫攪拌2小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(1.28g)和4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(1.05g)，將該混合物在回流狀態下攪拌4小時。將該反應混合物用鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用10％甲醇/氯仿洗脫，獲得了5-氨基-4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙氧基}脲基)-1-甲基吡唑(255mg)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，3.19-3.20(2H，m)，3.51(3H，s)，3.72(2H，t，J＝6Hz)，4.86(2H，br)，6.95(1H，br)，7.06(1H，s)，8.02(1H，brs)，9.15(1H，brs)實施例197β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[3-(2-氨基乙氧基)脲基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和5-氨基-4-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙氧基}-脲基)-1-甲基吡唑以與實施例17相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，3.21(1H，d，J＝18Hz)，3.33(2H，t，J＝5Hz)，3.47(1H，d，J＝18Hz)，3.74(3H，s)，4.17(2H，t，J＝5Hz)，4.99(1H，d，J＝15Hz)，5.17(1H，d，J＝15Hz)，5.26(1H，d，J＝5Hz)，5.86(1H，d，J＝5Hz)，7.93(1H，s)制備例37在冰冷卻下向1，1′-羰基二咪唑(1.95g)在二氯甲烷(20ml)內的懸浮液中加入N-(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.92g)，將該混合物在室溫攪拌2小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(2.59g)和7-氨基-2，3-二氫-1H-吡唑并[1，2-b]嘧啶硫酸鹽(2.22g)，將該混合物在室溫攪拌16小時。向該反應混合物中加入三苯甲基氯(9.0g)和三乙胺(3.0g)。將該混合物在室溫攪拌24小時。將該反應混合物用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，獲得了7-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-2，3-二氫-1-三苯甲基嘧啶并[1，5-a]吡唑(150mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，3.19(4H，br)，3.69(1H，brs)，3.78-3.85(4H，m)，4.51(1H，br)，5.07(1H，br)，7.20(1H，s)，7.26-7.34(9H，m)，7.46-7.47(6H，m)實施例20向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(820mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入7-(3-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}脲基)-2，3-二氫-1-三苯甲基嘧啶并[1，5-a]吡唑(700mg)，將整個混合物在室溫攪拌6小時，向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(120ml)。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(830mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{7-[3-(2-氨基乙基)脲基]-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(28.5mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.53(3H，s)，1.54(3H，s)，3.14(2H，t，J＝6Hz)，3.29(1H，d，J＝18Hz)，3.49(2H，t，J＝6Hz)，3.57(1H，d，J＝18Hz)，4.16(2H，t，J＝9Hz)，4.31-4.45(2H，m)，4.94(1H，d，J＝15Hz)，5.02(1H，d，J＝15Hz)，5.27(1H，d，J＝5Hz)，5.85(1H，d，J＝5Hz)，7.95(1H，s)制備例38在冰冷卻下向1，1′-羰基二咪唑(2.0g)在脫水氯仿(30ml)內的懸浮液中加入N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.92g)在脫水氯仿(10ml)中的溶液。將該混合物在室溫攪拌1小時。向該反應混合物中加入N-乙基二異丙基胺(2.2ml)和4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(2.58g)，將該混合物在室溫攪拌17.5小時。向該反應混合物中加入三苯甲基氯(3.42g)和三乙胺(1.25g)。將該混合物在室溫攪拌2小時。將該反應混合物用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用5％甲醇/氯仿洗脫，獲得了4-([2-(叔丁氧基羰基氨基)乙氧基羰基]氨基}-5-(三苯甲基氨基)-1-甲基吡唑(1.91g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，2.89(3H，s)，3.30-3.36(2H，m)，4.03-4.07(2H，m)，4.37(1H，brs)，4.75(1H，br)，5.42(1H，br)，7.17-7.30(16H，m)實施例217β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(2-氨基乙氧基羰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和4-{[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙氧基羰基]氨基}-5-(三苯甲基氨基)-1-甲基吡唑以與實施例20相同的方式獲得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.53(3H，s)，1.54(3H，s)，3.18(1H，d，J＝18Hz)，3.30-3.38(2H，m)，3.43(1H，d，J＝18Hz)，3.71(3H，s)，4.37-4.40(2H，m)，4.97(1H，d，J＝15Hz)，5.18(1H，d，J＝15Hz)，5.24(1H，d，J＝5Hz)，5.83(1H，d，J＝5Hz)，7.95(1H，s)制備例39向7-氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑硫酸鹽(1.42g)和N-乙基二異丙基胺(2.73g)在二氯甲烷(50ml)內的溶液中加入N-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰氧基]琥珀酰亞胺(1.90g)。將該混合物在室溫攪拌22小時。將該反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂將有機層干燥，過濾并真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化油狀殘余物，用5％甲醇/氯仿洗脫，獲得了7-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(1.07g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(9H，s)，3.89(2H，d，J＝5.5Hz)，3.97(2H，dt，J＝2.7，7.3Hz)，4.18(2H，t，J＝7.3Hz)，4.55(1H，br)，5.22(1H，br)，7.16(1H，s)，7.95(1H，br)實施例22向7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(1.0g)在N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)內的溶液中加入碘化鈉(181mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入7-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑(421mg)。將整個混合物在30℃攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)分離出水層，將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水，用無水硫酸鈉干燥，并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(150ml)內，通過過濾收集所得沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(150ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(830mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[7-(2-氨基乙酰氨基)-2，3-二氫-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(20.8mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(3H，s)，1.52(3H，s)，3.26(2H，d，J＝18Hz)，3.54(2H，d，J＝18Hz)，3.97(2H，s)，4.16(2H，t，J＝9Hz)，4.35(1H，q，J＝9Hz)，4.44(1H，q，J＝9Hz)，4.97(2H，d，J＝15Hz)，5.04(2H，d，J＝15Hz)，5.25(1H，d，J＝4Hz)，5.84(1H，d，J＝4Hz)，8.10(1H，s)制備例40在冰冷卻下向4，5-二氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑硫酸鹽(1.20g)和N-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰氧基]琥珀酰亞胺(1.35g)在二氯甲烷(20ml)內的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(2.1ml)，將該混合物在室溫攪拌17小時。將該反應混合物用水(40ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(40ml)和鹽水(40ml)洗滌。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將該油狀殘余物硅膠柱色譜純化，用10％甲醇/氯仿洗脫，獲得了5-氨基-4-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑(1.20g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，3.89-3.90(4H，m)，4.00-4.04(2H，m)，4.26(2H，br)，5.51(1H，br)，7.17(1H，s)，8.06(1H，br)實施例237β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(2-氨基乙酰氨基)-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和5-氨基-4-[2-(叔丁氧基氨基)乙酰基]氨基-1-(2-羥基乙基)吡唑以與實施例22相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，3.15(2H，d，J＝18Hz)，3.48(2H，d，J＝18Hz)，3.88(1H，dt，J＝16Hz)，4.02(2H，s)，4.42(1H，dt，J＝16.5Hz)，5.07(2H，d，J＝15Hz)，5.13(2H，d，J＝15Hz)，5.27(1H，d，J＝5Hz)，5.84(1H，d，J＝5Hz)，8.09(1H，s)制備例41向3-氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶硫酸鹽(2.96g)和N-乙基二異丙基胺(2.59g)在二氯甲烷(70ml)內的溶液中加入N-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰氧基]琥珀酰亞胺(2.72g)。將該混合物在室溫攪拌14小時。將該反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物通過硅膠柱色譜純化，用6％甲醇/氯仿洗脫，獲得了3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(2.4g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，2.08-2.12(2H，m)，3.29-3.32(2H，m)，3.90(2H，br)，4.07(2H，t，J＝6.0Hz)，5.00(1H，br)，5.38(1H，br)，7.12(1H，s)，8.11(1H，br)實施例247β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-(2-氨基乙酰氨基)-4，5，6，7-四氫-1-吡唑并[1，5-a]嘧啶子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶以與實施例22相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，2.05-2.25(2H，m)，3.21(2H，d，J＝18Hz)，3.45(2H，d，J＝18Hz)，3.30-3.45(2H，m)，4.00(2H，s)，4.10-4.25(2H，m)，4.92(2H，d，J＝15Hz)，5.17(2H，d，J＝15Hz)，5.24(1H，d，J＝5Hz)，5.84(1H，d，J＝5Hz)，7.97(1H，s)制備例42向3-氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶硫酸鹽(4.44g)和N-乙基二異丙基胺(3.88g)在二氯甲烷(100ml)內的溶液中加入N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰氧基]琥珀酰亞胺(4.29g)。將該混合物在室溫攪拌6小時。將該反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物通過硅膠柱色譜純化，用5％甲醇/氯仿洗脫，獲得了3-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶(2.4g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，2.08-2.13(2H，m)，2.52(2H，t，J＝6.0Hz)，3.32(2H，t，J＝5.0Hz)，3.43-3.46(2H，m)，4.07(2H，t，J＝6.0Hz)，5.12(1H，br)，5.23(1H，br)，7.13(1H，s)，7.97(1H，br)實施例257β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-(3-氨基丙酰氨基)-4，5，6，7-四氫-1-吡唑并[1，5-a]嘧啶子基]甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-叔丁氧基羰基氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和3-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶以與實施例22相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.51(3H，s)，1.52(3H，s)，2.05-2.25(2H，m)，2.85(2H，t，J＝7Hz)，3.20(2H，d，J＝18Hz)，3.44(2H，d，J＝18Hz)，3.30-3.45(2H，m)，3.31(2H，t，J＝7Hz)，4.05-4.20(2H，m)，4.91(2H，d，J＝16Hz)，5.16(2H，d，J＝16Hz)，5.23(1H，d，J＝5Hz)，5.84(1H，d，J＝5Hz)，7.92(1H，s)
制備例43在低于10℃的溫度下，向5-氨基-1-甲基吡唑(100g)在水(700ml)內的溶液中加入濃鹽酸(86ml)和亞硝酸鈉(63.9g)在水(200ml)中的溶液。將該反應混合物在5℃攪拌30分鐘。通過過濾收集沉淀的固體，干燥，獲得了5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(117g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.52and 3.59(3H，s)，7.22 and 8.51(1H，s)，8.17 and 8.51(1H，brs)制備例44向5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(117g)的懸浮液中加入硫酸(91g)和10％披鈀炭(58g)。將該混合物在氣囊壓力下氫化10小時。將該反應混合物過濾，將濾液真空濃縮。向濃縮液中加入異丙醇(2.3L)將該混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀出的固體，干燥，獲得了4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(158g)1H-NMR(D2O)δ3.74(3H，s)，7.80(1H，s)制備例45向4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(158g)在水(1.1L)中的溶液用4N氫氧化鈉水溶液中和至pH 6.9，向該溶液中加入二氧雜環己烷(474ml)。在低于10℃的溫度下，向所得混合物中滴加氯甲酸苯酯(124g)，同時用4N氫氧化鈉水溶液將該混合物的pH保持在6.9。將該反應混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀出的固體，干燥，獲得了5-氨基-1-甲基-4-苯氧基羰基氨基吡唑(155g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.52(3H，s)，5.00(2H，brs)，7.10-7.50(6H，m)，8.93(1H，brs)制備例46在室溫向5-氨基-1-甲基-4-苯氧基羰基氨基吡唑(153.8g)在四氫呋喃(1L)中的懸浮液加入三乙胺(67g)和三苯基甲基氯(185g)。將該混合物攪拌6.5小時。向該混合物中加入庚烷(2.6L)，將該混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀出的固體，用庚烷-二異丙基醚(1∶1)洗脫。將粗產物懸浮在水(3L)中，將懸浮液攪拌1小時。通過過濾收集固體，干燥，獲得了1-甲基-4-苯氧基羰基氨基-5-三苯基甲基氨基吡唑(253.6g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.74(3H，s)，5.57(1H，brs)，7.00-7.50(21H，m)，8.12(1H，brs)制備例47向1-甲基-4-苯氧基羰基氨基-5-三苯基甲基氨基吡唑(253.6g)在N，N-二甲基甲酰胺(1.5L)內的懸浮液中加入在N，N-二甲基甲酰胺(254ml)中的三乙胺(59.5g)和N-(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(94.2g)。將該混合物攪拌5小時，倒入水(10.6L)內。將該漿液攪拌1小時。通過過濾收集沉淀出的固體，并干燥，獲得了粗產物。將粗產物懸浮在N，N-二甲基甲酰胺中，將該懸浮液在回流狀態下加熱20分鐘。用4小時將該懸浮液冷卻至室溫。通過過濾收集固體，用乙腈洗滌并干燥，獲得了4-[N-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)氨基甲酰基氨基]-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑(261.2g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.69(3H，s)，2.90-3.05(4H，m)，5.69(1H，brs)，5.91-6.01(1H，m)，6.74-6.81(1H，m)，6.87(1H，brs)，7.00(1H，s)，7.10-7.30(15H，m)制備例48在冰冷卻下向(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酸(319g)在N，N-二甲基乙酰胺(1.5L)內的溶液中加入碳酸鉀(113g)和甲磺酰氯(126ml)。將該混合物在10℃攪拌2小時。將該反應混合物加到乙酸乙酯與水的混合物中。將有機層用水和鹽水洗滌，獲得了活化的酸溶液。另一方面，在冰冷卻下將7β-氨基-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯鹽酸鹽(300g)在水(1L)和乙酸乙酯(1L)的混合物中的懸浮液用三乙胺調節至pH 6。在10℃，于攪拌下向所得混合物中滴加上面獲得的活化的酸溶液。繼續在5-10℃攪拌1.5小時，同時用三乙胺將該反應混合物的pH保持在6。將分離出的有機層用水和鹽水洗滌，并真空蒸發。將濃縮液倒入二異丙基醚(15L)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并干燥，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(495.7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.44(6H，s)，3.45-3.70(2H，m)，3.76(3H，s)，4.46 and 4.54(1H，ABq，J＝16Hz)，5.10-5.28(2H+1H，m)，5.90(1H，dd，J＝4.9，8.5Hz)，6.94(2H，d，J＝8.7Hz)，7.36(2H，d，J＝8.7Hz)，8.18(2H，brs)，9.52(1H，d，J＝8.5Hz)實施例26向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(150g)在N，N-二甲基甲酰胺(400ml)內的溶液中加入1，3-二(三甲基甲硅烷基)脲(225g)，將該混合物攪拌30分鐘。將碘化鉀(51.2g)加到該溶液中，將該混合物攪拌30分鐘。
在78℃將4-[N-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)-氨基甲酰基氨基]-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑(147g)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(650ml)中，將該溶液冷卻至45℃。將該溶液加到在上面獲得的7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽。將該反應混合物在35℃攪拌18.5小時，倒入乙酸乙酯(2L)、水(1.8L)和20％氯化鈉水溶液(150ml)的混合物內。將有機層用10％硫代硫酸鈉水溶液(375ml)和20％氯化鈉水溶液(375ml)的混合物洗滌。將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液洗滌3次(750ml×3)，用20％氯化鈉水溶液(750ml)洗滌。將有機層真空濃縮，過濾出沉淀的4-[N-(2-叔丁氧基羰基氨基乙基)氨基甲酰基氨基]-1-甲基-5-三苯基甲基氨基吡唑。將濾液進一步真空濃縮至約600ml的體積。將該溶液加到二異丙基醚中，將該懸浮液攪拌1小時。通過過濾收集所得固體，并干燥。將該固體溶解在二氯甲烷(669ml)中。向該溶液中加入苯甲醚(223ml)和三氟乙酸(669ml)。將該反應混合物攪拌4小時，并倒入二異丙基醚內。通過過濾收集所得固體并干燥。將該固體懸浮在水中，在低于10℃的溫度下用氨水溶液將該懸浮液的pH調節至7。過濾出所形成的沉淀。在低于10℃的溫度下用濃鹽酸將濾液酸化至pH 1，并過濾出所形成的沉淀。在DiaionHP-20(11L)上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約3.5L，加入2M硫酸(51ml)。將該混合物凍干，獲得了粗產物(72.2g)。
將粗產物(3g)通過使用0DS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮。用濃鹽酸將濃縮液調節至約pH 1，在DiaionHP-20(400mL)上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約73ml，加入2M硫酸(1.5ml)。將該混合物進-步蒸發至體積大約為12.5ml，加入水(6ml)。加入晶種(10mg)后，形成了白色固體沉淀，將該混合物在室溫攪拌1小時。將該混合物在5℃攪拌13小時。在5℃用20分鐘加入2-丙醇(20ml)，將該漿液在室溫攪拌4小時。用30分鐘加入2-丙醇(20ml)，將漿液在室溫攪拌3小時。通過過濾收集固體沉淀，并干燥，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[N-(2-氨基乙基)氨基甲酰基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(1.51g)，為晶體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.10-3.55(6H，m)，3.71(3H，s)，5.02 and 5.23(2H，ABq，J＝16.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.9Hz)，5.87(1H，d，J＝4.9Hz)，7.91(1H，s)制備例49將4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(20g)在三乙胺(29.2ml)中的懸浮液于0℃攪拌10分鐘。將乙酸酐(9.87ml)和甲酸(7.96ml)的混合物在40℃攪拌30分鐘，冷卻至0℃，在0℃滴加到上述溶液中。將整個混合物在0℃攪拌2小時。向該混合物中加入鹽水，用四氫呋喃萃取整個混合物。將有機層用硫酸鎂干燥，并減壓蒸發，獲得了N-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲酰胺粗產物，其不用進一步純化直接用于下一步驟。
制備例50將N-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲酰胺粗產物(13.33g)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(130ml)中。向該溶液中加入三苯甲基氯(29.2g)、三乙胺(66.3ml)和4-二甲基氨基吡啶(465mg)，將該混合物在60℃攪拌5小時。向該反應混合物中加入水，將整個混合物用乙酸乙酯萃取。將有機層用水和鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸發，獲得了白色固體。將該固體用乙酸乙酯/二異丙基醚(1∶1)研制，獲得了N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺(19.18g)。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.76 and 2.92(3H，s)，5.56和5.84(1H，s)，7.0-7.4(16H，m)，7.66(1H，d，J＝1.7Hz)，8.3-8.4(1H，m)ESI-MSm/z＝405.2(M+Na)+制備例51在0℃于攪拌下，向N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺(3.825g)在N，N-二甲基甲酰胺(66ml)內的溶液中加入氫化鈉(264mg，60％油懸浮液)。將該混合物在0℃攪拌15分鐘。向該混合物中加入在N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的N-(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.62g)和碘化鈉(1.65g)。將該混合物溫熱至室溫，并攪拌2小時。加入10％硫酸氫鉀水溶液(5ml)，將該混合物用乙酸乙酯萃取。將有機層用水和鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸發，通過硅膠色譜純化殘余物，用二氯甲烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫，獲得了3-{N-甲酰基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}丙基氨基甲酸叔丁酯(2.714g)。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37 and 1.39(9H，s)，2.6-2.9(6H，m)，2.89(3H，s)，5.34 and 6.01(1H，s)，6.6-6.9(1H，m)，7.0-7.4(15H，m)，7.5-7.6(1H，m)，7.95(1H，s)ESI-MSm/z＝562.3(M+Na)+實施例277β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[N-(3-氨基丙基)-N-甲酰基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和3-{N-甲酰基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}丙基氨基甲酸叔丁酯以與實施例1相同的方式獲得的，該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
1H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，1.7-2.1(2H，m)，2.9-3.9(9H，m)，4.97 and 5.20(2H，ABq，J＝15.2Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，8.0-8.3(2H，m)
實施例28在室溫向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[N-(3-氨基丙基)-N-甲酰基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(140mg)在甲醇(2.6ml)內的懸浮液中加入濃鹽酸(0.176ml)，將該混合物攪拌6.5小時。向該反應混合物中加入碳酸氫鈉(177mg)，通過制備HPLC純化該混合物(ODS柱，乙腈/磷酸鹽緩沖液(pH 7)＝5∶95)。將含有所需產物的洗脫液蒸發以除去乙腈，用稀鹽酸酸化，在DiaionHP-20上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液減壓濃縮，并凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(3-氨基丙基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(39mg)。
1H-NMR(D2O)δ1.52-1.54(6H，m)，1.95(2H，tt，J＝7.3Hz，7.3Hz)，3.0-3.2(4H，m)，3.16 and 3.38(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.68(3H，s)，4.89 and 5.11(2H，ABq，J＝15.6Hz)，5.22(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.59(1H，s)ESI-MSm/z＝636.3(M-H)-制備例522-{N-甲酰基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺和N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯以與制備例51相同的方式制得的。
IR(KBr)1709，1670，1170，704cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.35 and 1.36(9H，s)，2.65和2.75(3H，s)，2.73-2.90(4H，m)，5.45and 6.02(1H，s)，6.78和6.88(1H，t-like)，7.05-7.30(15H，m)，7.31和7.57(1H，s)ESI-MSm/z＝426.3(M+H+)，548.3(M+Na+)實施例297β-[(Z)-2-(5-氨基-1-2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[N-(2-氨基乙基)-N-甲酰基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯和2-{N-甲酰基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯以與實施例1相同的方式獲得的。
IR(KBr)1770，1675，1653，1597cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.53(6H，s)，3.12-3.78(4H，m)，3.77and 3.78(3H，s)，3.86-3.96(2H，m)，5.00和5.19(2H，ABq，J＝15.2Hz)，5.28(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，8.15和8.18(1H，s)，8.19和8.33(1H，s)ESI-MSm/z＝652.2(M+H+)實施例307β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[N-(2-氨基乙基)-N-甲酰基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸鹽以與實施例28相同的方式制得的。
IR(KBr)1770，1651，1593cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.53(3H，s)，1.59(3H，s)，3.13-3.26(4H，m)，3.26and 3.39(2H，ABq，J＝17.8Hz)，3.68(3H，s)，4.87 and 5.11(2H，ABq，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，7.63(1H，s)ESI-MSm/z＝622.2(M-H-)制備例53向1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(86g)在四氫呋喃(1.3L)內的懸浮液中加入三乙胺(117ml)，然后將(2S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羥基丁酸(82.5g)加到該混合物中。在冰冷卻下向該混合物中加入1-羥基苯并三唑(58.3g)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(82.7g)。將該反應混合物在室溫攪拌8小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯(1.3L)、飽和碳酸氫鈉水溶液和氯化鈉，將該混合物攪拌30分鐘。分離出有機層，將水層用乙酸乙酯(1.0L)萃取6次。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化殘余物，用乙酸乙酯/四氫呋喃(1/1)洗脫，獲得了{(3S)-4-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-羥基-4-氧代丁基}氨基甲酸叔丁酯(69.5g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.6-1.9(1H，m)，1.9-2.2(1H，m)，3.1-3.3(1H，m)，3.3-3.5(1H，m)，3.65(3H，s)，4.20(1H，dd，J＝3.6，6.6Hz)，4.7-5.3(4H，m)，7.24(1H，s)，8.58(1H，s)[α]20D(c＝1.05，CHCl3)＝-27.06°制備例54向{(3S)-4-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-羥基-4-氧代丁基}氨基甲酸叔丁酯(68.51g)在N，N-二甲基甲酰胺(350ml)內的溶液中加入氯三苯基甲烷(67g)。向該混合物中滴加三乙胺(67ml)。將該混合物在室溫攪拌12小時。將該反應混合物溶解在二氯甲烷(2L)中。將該溶液依次用水和鹽水洗滌。將萃取液用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。用乙腈研制殘余物，并真空干燥，獲得了((3S)-3-羥基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(64g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，1.3-1.6(1H，m)，1.8-2.1(1H，m)，2.95(3H，s)，2.9-3.2(1H，m)，3.3-3.6(1H，m)，3.95(1H，m)，4.53(1H，d，J＝4.5Hz)，4.74(1H，s)，4.92(1H，brs)，7.1-7.3(15H，m)，7.39(1H，s)，7.73(1H，s)ESI-MSm/z＝638.2(M+H+Na+)[α]20D(c＝1.025，CHCl3)＝-36.5°實施例31向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(130g)在N，N-二甲基甲酰胺(400ml)內的溶液中加入1，3-二(三甲基甲硅烷基)脲(195g)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該溶液中加入碘化鉀(44.4g)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入((3S)-3-羥基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(106g)，將整個混合物在35℃攪拌22小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯(1.7L)，將該混合物用水(1.6L)、10％三氟乙酸鈉水溶液(650ml×3)和鹽水(650ml)洗滌，用硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約1L。將濃縮液倒入二異丙基醚(3L)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向該固體在二氯甲烷(660ml)內的溶液中加入苯甲醚(220ml)和三氟乙酸(660ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(7L)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(156.2g)。將粗產物溶解在水(3.5L)中。將該溶液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用20％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約1.5L，加入2M硫酸水溶液(33.18ml)。將該混合物凍干。將凍干的產物(40g)溶解在磷酸鹽緩沖液(pH 7)中，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用10％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約1L，加入2M硫酸水溶液(13.59ml)。將所得溶液凍干，獲得了7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[((2S)-4-氨基-2-羥基丁酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(20.82g)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，1.9-2.4(2H，m)，3.20(1H，d，J＝17.6Hz)，3.0-3.3(2H，m)，3.45(1H，d，J＝17.6Hz)，3.74(3H，s)，4.47(1H，dd，J＝4，6.3Hz)，5.06(1H，d，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.28(1H，d，J＝15.7Hz)，5.87(1H，d，J＝4.8Hz)，8.07(1H，s)制備例55向1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(1.60g)在乙醇(50ml)內的溶液中加入三乙胺(0.627ml)和diethyl squarate(0.858ml)，將該混合物在室溫攪拌22小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯(200ml)和己烷(100ml)將該溶液依次用水、5％檸檬酸水溶液和鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將該結晶殘余物用乙醚洗滌，并真空干燥，獲得了3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環丁烯-1，2-二酮(1.45g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.42(3H，br)，2.99(3H，s)，4.41(1H，brs)，4.69(2H，q，J＝7.2Hz)，6.40(1H，br)，7.13-7.35(16H，m)制備例56向2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(288mg)和3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環丁烯-1，2-二酮(718mg)在乙醇(20ml)內的溶液中加入三乙胺(0.209ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌4小時。向該反應混合物中加入乙醚和己烷。通過過濾收集該結晶沉淀，并真空干燥，獲得了2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環丁-1-烯-1-基)氨基]乙基氨基甲酸叔丁酯(830mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.40(9H，s)，3.07-3.28(5H，m)，3.38-3.67(2H，m)，4.53-4.84(1H，br)，4.84(1H，br)，7.15-7.22(6H，m)，7.23(1H，s)，7.22-7.34(9H，m)實施例32向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(901mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.8ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(720mg)，將該混合物在室溫攪拌1小時。向該反應混合物中加入2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環丁-1-烯-1-基)氨基]乙基氨基甲酸叔丁酯(682mg)在N，N-二甲基甲酰胺(6.3ml)內的溶液，將整個混合物在35-40℃攪拌7小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯，將沉淀過濾出來。將濾液依次用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(2.6ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.88ml)和三氟乙酸(2.6ml)。將所得溶液在室溫攪拌3小時，并倒入二異丙基醚(80ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(580mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約10ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({2-[(2-氨基乙基)氨基]-3，4-二氧代-1-環丁烯-1-基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(22mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.53(3H，s)，1.54(3H，s)，3.26-3.36(1H，m)，3.27(2H，t，J＝5.7Hz)，3.58-3.69(1H，m)，3.74(3H，s)，3.86-4.03(2H，m)，4.93(1H，d，J＝14.5Hz)，5.10(1H，d，J＝14.5Hz)，5.29(1H，d，J＝4.3Hz)，5.83(1H，d，J＝4.3Hz)，7.99(1H，s)制備例57向3-氨基丙基氨基甲酸叔丁酯(366mg)和3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環丁烯-1，2-二酮(670mg)在乙醇(30ml)內的溶液中加入三乙胺(0.195ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌3小時。向該反應混合物中加入乙醚(40ml)和己烷(10ml)。通過過濾收集該結晶沉淀，并真空干燥，獲得了{3-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代-1-環丁烯-1-基)氨基]丙基}氨基甲酸叔丁酯(788mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.67(2H，五重峰，J＝5.5Hz)，3.15(2H，q，J＝5.5Hz)，3.17(3H，s)，3.60(2H，q，J＝5.5Hz)，4.82(1H，brs)，4.86(1H，t，J＝5.5Hz)，5.44(1H，br)，5.86(1H，br)，7.13-7.33(15H，m)，7.17(1H，s)實施例33向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(819mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.6ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌40分鐘。向該反應混合物中加入{3-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代-1-環丁烯-1-基)氨基]丙基}氨基甲酸叔丁酯(637mg)在N，N-二甲基甲酰胺(3.2ml)中的溶液，將整個混合物在35-40℃攪拌3.5小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(60ml)，過濾出沉淀。將該濾液依次用水(50ml×2)和鹽水(50ml)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約8ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(2.4ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.80ml)和三氟乙酸(1.6ml)。將所得溶液在室溫攪拌3小時，并倒入二異丙基醚(80ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(565mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用乙腈與磷酸鹽緩沖液(pH 5.5)的混合物洗脫。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約20ml。通過使用ODS柱的制備HPLC純化，將用8％乙腈/0.01M鹽酸洗脫的級分真空濃縮至約10ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({2-[(3-氨基丙基)氨基]-3，4-二氧代-1-環丁烯-1-基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽三鹽酸鹽(34mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，2.02(2H，五重峰，J＝7.3Hz)，3.09(2H，t，J＝7.3Hz)，3.32(1H，d，J＝17.5Hz)，3.54-3.65(1H，m)，3.67-3.78(2H，m)，3.75(3H，s)，4.93-5.23(2H，m)，5.30(1H，d，J＝4.5Hz)，5.86(1H，d，J＝4.5Hz)，7.99(1H，s)制備例58在冰冷卻下向1，1′-(1，2-二氧代-1，2-乙烷二基)二-1H-咪唑(761mg)在N，N-二甲基甲酰胺(8ml)內的溶液中加入1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(709mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(1.28g)在N，N-二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液，將該混合物在室溫攪拌27小時。向該反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)。過濾出沉淀后，將濾液依次用水、5％檸檬酸水溶液和鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將結晶殘余物用乙醚與乙酸乙酯的混合溶劑洗滌，并真空干燥，獲得了{2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙酰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(823mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，2.97(3H，s)，3.31(2H，q，J＝5.5Hz)，3.43(2H，q，J＝5.5Hz)，4.53(1H，s)，4.84(1H，brs)，7.10-7.30(15H，m)，7.47(1H，s)，7.67(1H，brs)，8.20(1H，brs)實施例34向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(618mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.5ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌40分鐘。向該溶液中加入碘化鉀(232mg)，將該混合物在室溫攪拌35分鐘。向該反應混合物中加入{2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙酰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(626mg)在N，N-二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液，將整個混合物在35-40℃攪拌24小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)，將該溶液依次用水(50ml×2)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml×2)和鹽水(50ml)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約10ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(60ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向該固體在二氯甲烷(2.9ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.95ml)和三氟乙酸(2.9ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚(60ml)。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(770mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約10ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙酰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(31mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，3.20(1H，d，J＝18.0Hz)，3.24(2H，t，J＝6.0Hz)，3.45(1H，d，J＝18.0Hz)，3.66(2H，t，J＝6.0Hz)，3.75(3H，s)，5.02(1H，d，J＝15.5Hz)，5.21(1H，d，J＝15.5Hz)，5.25(1H，d，J＝5.0Hz)，5.85(1H，d，J＝5.0Hz)，8.14(1H，s)
制備例59向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(711mg)和3-氮雜環丁烷基氨基甲酸叔丁酯乙酸鹽(418mg)在二氯甲烷(8ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(0.62ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌16小時。向該反應混合物中加入二氯甲烷，將該溶液依次用10％檸檬酸水溶液、10％氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。用乙酸乙酯與己烷的混合溶劑研制殘余物，獲得了[1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-氮雜環丁烷基]氨基甲酸叔丁酯(735mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(9H，s)，2.92(3H，s)，3.56(2H，dd，J＝7.5，5.0Hz)，4.02(2H，dd，J＝7.5，7.5Hz)，4.42(1H，brs)，4.71(1H，s)，4.74(1H，s)，4.94(1H，brs)，7.18-7.21(7H，m)，7.25-7.32(9H，m)實施例35向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(819mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(655mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入[1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-氮雜環丁烷基]氨基甲酸叔丁酯(553mg)在N，N-二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液，并且將整個混合物在室溫攪拌3小時，然后在50℃攪拌1小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(2.1ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.7ml)和三氟乙酸(2.1ml)。將所得溶液在室溫攪拌4.5小時，并倒入二異丙基醚(80ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(521mg)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用乙腈與磷酸鹽緩沖液(pH 5.5)的混合物洗脫。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約20ml。將濃縮液通過使用ODS柱的制備HPLC純化，將用7％乙腈/0.01M鹽酸洗脫的級分真空濃縮至約10ml，并凍干，獲得了3-[(3-氨基-4-{[(3-氨基-1-氮雜環丁烷基)羰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽三鹽酸鹽(22mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(3H，s)，1.63(3H，s)，3.25(1H，d，J＝17.9Hz)，3.50(1H，d，J＝17.9Hz)，3.72(3H，s)，4.14(2H，dd，J＝9.6，4.4Hz)，4.25(1H，tt，J＝7.8，4.6Hz)，4.46(2H，dd，J＝9.6，7.8Hz)，5.08(1H，d，J＝15.6Hz)，5.24(1H，d，J＝15.6Hz)，5.27(1H，d，J＝4.6Hz)，5.88(1H，d，J＝4.6Hz)，7.91(1H，s)制備例60向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(2.18g)和3-氨基-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯(793mg)在二氯甲烷(20ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(1.07ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌40小時。向該反應混合物中加入二氯甲烷，將該溶液依次用10％檸檬酸水溶液、10％氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫，獲得了3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯(1.52g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.44(9H，s)，3.03(3H，s)，3.59(2H，dd，J＝9.2，5.0Hz)，4.17(2H，dd，J＝9.2，7.8Hz)，4.39-4.43(3H，m)，4.64(1H，brs)，7.18-7.21(6H，m)，7.27(1H，s)，7.29-7.32(9H，m)實施例36向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(1.48g)在N，N-二甲基甲酰胺(3.0ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.42g)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該溶液中加入碘化鉀(504mg)和將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯(1.20g)在N，N-二甲基甲酰胺(2.2ml)中的溶液，將整個混合物在50℃攪拌16小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(200ml)，將該溶液依次用水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml×2)和鹽水(50ml)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，并過濾。將濾液真空濃縮至約10ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(160ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向該固體在二氯甲烷(8.64ml)內的溶液中加入苯甲醚(2.88ml)和三氟乙酸(8.64ml)。將所得溶液在室溫攪拌3小時，并倒入二異丙基醚(160ml)內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(2.22g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用乙腈與磷酸鹽緩沖液(pH5.5)的混合物洗脫。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約20ml。將濃縮液通過使用ODS柱的制備HPLC純化，將用8％乙腈水溶液洗脫的級分真空濃縮至約20ml，并凍干，獲得了3-[(3-氨基-4-{[(3-氮雜環丁烷基氨基)羰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(220mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.50(3H，s)，1.51(3H，s)，3.20(1H，d，J＝17.6Hz)，3.47(1H，d，J＝17.6Hz)，3.70(3H，s)，4.18(2H，dd，J＝11.2，7.6Hz)，4.31(2H，dd，J＝11.2，8.3Hz)，4.68(1H，tt，J＝8.3，7.6Hz)，4.94(1H，d，J＝15.6Hz)，5.15(1H，d，J＝15.6Hz)，5.23(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.87(1H，s)制備例61向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(786mg)和3-吡咯烷基氨基甲酸叔丁酯(373mg)在二氯甲烷(6ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(0.43ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌10小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，獲得了[1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(730mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.48(9H，s)，1.82-1.88(1H，m)，2.12-2.18(1H，m)，2.89(3H，s)，2.89-3.03(1H，m)，3.20-3.30(2H，m)，3.38-3.43(1H，m)，4.22(1H，br)，4.69(1H，br)，4.88(1H，brs)，4.96(1H，brs)，7.18-7.27(16H，m)實施例37向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(819mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(655mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入[1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(567mg)在N，N-二甲基甲酰胺(3.0ml)中的溶液。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約2.5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(2.55ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.85ml)和三氟乙酸(2.55ml)，將該混合物在室溫攪拌3小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(80ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(608mg)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化，使用乙腈與磷酸鹽緩沖液(pH 5.5)的混合物洗脫。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約20ml。通過使用ODS柱的制備HPLC將該濃縮液脫鹽，將用7％乙腈/0.01M鹽酸洗脫下來的級分真空濃縮至約10ml，并凍干，獲得了3-[(3-氨基-4-{[(3-氨基-1-吡咯烷基)羰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽三鹽酸鹽(31mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(3H，s)，1.61(3H，s)，2.13-2.27(1H，m)，2.39-2.54(1H，m)，3.29(1H，d，J＝18.1Hz)，3.51(1H，d，J＝18.1Hz)，3.55-3.68(3H，m)，3.73(3H，s)，3.80(1H，dd，J＝11.5，6.0Hz)，4.01-4.11(1H，m)，5.20(1H，d，J＝16.0Hz)，5.24(1H，d，J＝16.0Hz)，5.28(1H，d，J＝4.8Hz)，5.89(1H，d，J＝4.8Hz)，7.91(1H，s)制備例62向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(711mg)和3-氨基-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(372mg)在二氯甲烷(15ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(0.51ml)，將該混合物在回流狀態下攪拌17小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫，獲得了3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(511mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，1.66-1.74(1H，m)，2.04-2.11(1H，m)，2.97(3H，s)，3.05-3.11(1H，m)，3.30-3.43(2H，m)，3.53-3.58(1H，m)，4.16-4.23(2H，m)，4.45(1H，brs)，4.74(1H，br)，7.18-7.20(6H，m)，7.28-7.30(10H，m)實施例38向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(707mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.1ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(566mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(490mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)中的溶液。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約3ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(80ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(1.83ml)內的溶液中加入苯甲醚(0.61ml)和三氟乙酸(1.83ml)，將該混合物在室溫攪拌5小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(80ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(440mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH3，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了3-[(3-氨基-2-甲基-4-{[(3-吡咯烷基氨基)羰基]氨基}-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(18mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.54(3H，s)，1.55(3H，s)，2.00-2.10(1H，m)，2.30-2.40(1H，m)，3.23(0.5H，d，J＝17.9Hz)，3.24(0.5H，d，J＝17.9Hz)，3.27-3.34(1H，m)，3.34-3.43(1H，m)，3.45-3.57(3H，m)，3.72(3H，s)，4.36-4.46(1H，m)，4.95(0.5H，d，J＝15.1Hz)，4.96(0.5H，d，J＝15.6Hz)，5.17(1H，d，J＝15.6Hz)，5.26(1H，d，J＝5.0Hz)，5.85(1H，d，J＝5.0Hz)，7.88(1H，s)制備例63向{2-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-乙基}氨基甲酸叔丁酯(10.8g)在甲醇(50ml)內的溶液中加入4M氯化氫在二氧雜環己烷(50ml)中的溶液。將該混合物在室溫攪拌3小時。將溶劑真空濃縮，并且將殘余物用乙酸乙酯研制并真空干燥，獲得了N-(2-氨基乙基)-N′-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)脲三鹽酸鹽(5.6g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.84-2.87(2H，m)，3.30(2H，brs)，3.71(3H，s)，6.57(1H，br)，7.91(1H，s)，8.05(4H，br)，8.55(1H，br)制備例64向N-(2-氨基乙基)-N′-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)脲三鹽酸鹽(3.1g)和三乙胺(4.6g)在氯仿(100ml)內的溶液中加入({[(三氟甲基)磺酰基]亞氨基}-亞甲基)雙氨基甲酸雙叔丁酯(5.9g)。將該混合物在室溫攪拌90分鐘。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙酸乙酯研制，獲得了((Z)-{[2-({[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}氨基)-乙基]氨基}亞甲基)雙氨基甲酸雙叔丁酯(4.3g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.48(9H，s)，3.18(2H，q，J＝6.0Hz)，3.35(2H，br)，3.49(3H，s)，4.77(1H，brs)，6.05(1H，br)，6.97(1H，s)，7.19(1H，brs)，8.36(1H，t，J＝5.5Hz)，11.49(1H，brs)制備例65向((Z)-{[2-({[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}氨基)-乙基]氨基}亞甲基)雙氨基甲酸雙叔丁酯(2.2g)和三乙胺(0.6g)在氯仿(30ml)內的溶液中加入三苯甲基氯(1.7g)，將該混合物在室溫攪拌14小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水與飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙酸乙酯研制，獲得了[(Z)-({2-[({[I-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-乙基}氨基)亞甲基]雙氨基甲酸雙叔丁酯(1.9g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.47(9H，s)，2.72(3H，s)，3.09-3.10(2H，m)，3.31-3.34(2H，m)，5.69(1H，s)，6.10(1H，br)，6.77(1H，brs)，7.02(1H，s)，7.14-7.16(6H，m)，7.22-7.27(9H，m)，8.36(1H，t，J＝5.5Hz)，11.51(1H，brs)實施例39向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(820mg)在N，N-二甲基甲酰胺(1.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入[(Z)-({2-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]乙基}氨基)亞甲基]-雙氨基甲酸雙叔丁酯(820mg)和N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)，將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(100ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(740mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({[(2-胍基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(70mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.55(3H，s)，1.56(3H，s)，3.24(1H，d，J＝17.6Hz)，3.28-3.40(4H，m)，3.52(1H，d，J＝17.6Hz)，3.73(3H，s)，4.97(1H，d，J＝15.4Hz)，5.16(1H，d，J＝15.4Hz)，5.27(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，7.87(1H，s)制備例66向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(950mg)和(3S)-3-吡咯烷基氨基甲酸叔丁酯(560mg)在二氯甲烷(20ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(390mg)，將該混合物在回流狀態下攪拌23小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用4％甲醇/氯仿洗脫，獲得了[(3S)-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(680mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.48(9H，s)，1.82-1.88(1H，m)，2.12-2.18(1H，m)，2.89(3H，s)，2.89-3.03(1H，m)，3.20-3.30(2H，m)，3.38-3.43(1H，m)，4.22(1H，br)，4.69(1H，br)，4.88(1H，brs)，4.96(1H，brs)，7.18-7.27(16H，m)實施例40向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(820mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入[(3S)-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(680mg)。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(80ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)，將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(100ml)，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(690mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(MitsubishiChemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({[(3S)-3-氨基-1-吡咯烷基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(60mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，2.13-2.27(1H，m)，2.38-2.53(1H，m)，3.20(1H，d，J＝17.4H z)，3.46(1H，d，J＝17.4Hz)，3.54-3.67(3H，m)，3.73(3H，s)，3.79(1H，dd，J＝11.5，6.0Hz)，4.00-4.10(1H，m)，4.97(1H，d，J＝15.4Hz)，5.16(1H，d，J＝15.4Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.85(1H，s)制備例67向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(950mg)和(3R)-3-吡咯烷基氨基甲酸叔丁酯(560mg)在二氯甲烷(20ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(390mg)，將該混合物在回流狀態下攪拌23小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用4％甲醇/氯仿洗脫，獲得了[(3R)-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(700mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.48(9H，s)，1.82-1.88(1H，m)，2.12-2.18(1H，m)，2.89(3H，s)，2.89-3.03(1H，m)，3.20-3.30(2H，m)，3.38-3.43(1H，m)，4.22(1H，br)，4.69(1H，br)，4.88(1H，brs)，4.96(1H，brs)，7.18-7.27(16H，m)實施例41向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(820mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入[(3R)-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-吡咯烷基]氨基甲酸叔丁酯(680mg)。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(80ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)內，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)，將該混合物在室溫攪拌4小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(100ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(760mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(MitsubishiChemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-4-({[(3R)-3-氨基-1-吡咯烷基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(68mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，2.13-2.27(1H，m)，2.38-2.53(1H，m)，3.20(1H，d，J＝17.6Hz)，3.47(1H，d，J＝17.6Hz)，3.56-3.66(3H，m)，3.73(3H，s)，3.79(1H，dd，J＝11.0，6.0Hz)，4.00-4.10(1H，m)，4.96(1H，d，J＝15.1Hz)，5.15(1H，d，J＝15.1Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.84(1H，s)制備例68向(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苯酯(1.86g)和(3S)-1-芐基-3-吡咯烷胺(2.0g)在氯仿(50ml)內的溶液中加入N-乙基二異丙基胺(3.1g)，將該混合物在回流狀態下攪拌19小時。將該反應混合物真空濃縮，獲得了(S)-5-氨基-4-[3-(1-芐基-3-吡咯烷基)脲基]-1-甲基-1H-吡唑粗產物，為固體。在氫氣氛下于室溫將粗產物在乙酸中的溶液用鈀黑(3ml)處理24小時。將催化劑過濾后，將濾液真空濃縮，并且將殘余物溶解在飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)中。向該溶液中加入二碳酸叔丁酯(5.0g)在四氫呋喃(40ml)中的溶液，將該混合物在室溫攪拌5小時。用氯仿萃取該反應混合物。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。用乙醚研制殘余物，獲得了(3S)-3-({[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}氨基)-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(1.9g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40(9H，s)，1.70-1.76(1H，m)，1.95-2.02(1H，m)，3.01-3.05(1H，m)，3.24-3.34(2H，m)，3.38-3.45(1H，m)3.50(3H，s)，4.06-4.11(1H，m)，4.78(2H，br s)，6.19(1H，brs)，6.97(1H，s)，7.09(1H，brs)制備例69向(3S)-3-({[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}氨基)-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(1.8g)和N-乙基二異丙基胺(720mg)在氯仿(50ml)內的溶液中加入三苯甲基氯(1.6g)，將該混合物在室溫攪拌28小時。將該反應混合物依次用10％檸檬酸水溶液、鹽水與飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，獲得了(3S)-3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(1.7g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，1.66-1.74(1H，m)，2.04-2.11(1H，m)，2.97(3H，s)，3.05-3.11(1H，m)，3.30-3.43(2H，m)，3.53-3.58(1H，m)，4.16-4.23(2H，m)，4.45(1H，brs)，4.74(1H，br)，7.18-7.20(6H，m)，7.28-7.30(10H，m)實施例42向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(820mg)在N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入(3S)-3-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(680mg)。將整個混合物在室溫攪拌3小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯(80ml)和水(50ml)。分離出水層，將有機層依次用10％三氟乙酸鈉水溶液、10％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約5ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(120ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向所得固體在二氯甲烷(3.0ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(2.0ml)，將該混合物在室溫攪拌5小時。將該反應混合物倒入二異丙基醚(100ml)內，并通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(870mg)，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約30ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(MitsubishiChemical Corporation)上進行色譜純化，用30％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，并凍干，獲得了3-{[3-氨基-2-甲基-4-({[(3S)-3-吡咯烷基氨基]羰基}-氨基)-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)-乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(68mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(3H，s)，1.53(3H，s)，2.00-2.09(1H，m)，2.28-2.38(1H，m)，3.22(1H，d，J＝17.4Hz)，3.29(1H，dd，J＝12.4，4.6Hz)，3.34-3.42(1H，m)，3.44-3.54(3H，m)，3.71(3H，s)，4.36-4.43(1H，m)，4.95(1H，d，J＝15.6Hz)，5.15(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝4.6Hz)，5.84(1H，d，J＝4.6Hz)，7.87(1H，s)制備例70向4-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁酸(2.13g)在二氯甲烷(40ml)內的懸浮液中加入1-羥基苯并三唑(HOBT)(1.41g)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(WSCD HCl)(3.65g)，將該混合物攪拌1小時。向該溶液中加入1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(2g)和N，N-二異丙基乙基胺(3.32ml)。將該反應混合物攪拌18小時。向所得溶液中加入鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液，將該混合物用乙酸乙酯萃取。將水層用四氫呋喃/乙酸乙酯＝1/1萃取2次。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。向殘余物中加入吡啶(40ml)，然后加入氯三苯基甲烷(5.3g)。將該混合物在65℃攪拌6小時。將該混合物溶解在乙酸乙酯中。將該溶液依次用水、10％檸檬酸水溶液、水和鹽水洗滌。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，用60％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫，獲得了(4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.01g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.44(9H，s)，1.67(2H，tt，J＝6.7，6.7Hz)，1.92(2H，t，J＝6.7Hz)，2.90(3H，s)，3.09(2H，dt，J＝6.7，6.7Hz)，4.50(1H，s)，4.71(1H，t，J＝6.7Hz)，6.53(1H，s)，7.0-7.35(16H，m)，7.56(1H，s)實施例43向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-碘甲基-3-頭孢烯-4-甲酸二苯甲基酯(2g)在N，N-二甲基甲酰胺(6ml)內的溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.77g)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。向該反應混合物中加入(4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.98g)，將整個混合物在35℃攪拌30小時。向所得反應混合物中加入乙酸乙酯，將該溶液依次用水、10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮至約25ml。將濃縮液倒入二異丙基醚(150ml)內，通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥。向該固體在二氯甲烷(5ml)內的溶液中加入苯甲醚(1.5ml)和三氟乙酸(5ml)。將所得溶液在室溫攪拌4小時，并倒入二異丙基醚內。通過過濾收集所形成的沉淀，并真空干燥，獲得了粗產物(1.2g)。粗產物溶解在磷酸鹽緩沖液(pH 6.86，10ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液的混合物中，通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮至約20ml。將濃縮液用濃鹽酸調節至約pH 3，在DiaionHP-20(Mitsubishi ChemicalCorporation)上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮至約30ml，加入2M硫酸水溶液(72ml)。將該混合物凍干，獲得了3-({3-氨基-4-[(4-氨基丁酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(113mg)，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，2.01(2H，tt，J＝7.6，7.6Hz)，2.58(2H，t，J＝7.6Hz)，3.07(2H，t，J＝7.6Hz)，3.23(1H，d，J＝18Hz)，3.45(1H，d，J＝18Hz)，3.72(3H，s)，5.06(1H，d，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.28(1H，d，J＝15.7Hz)，5.87(1H，d，J＝4.8Hz)，8.03(1H，s)
制備例71(5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由5-[(叔丁氧基羰基)氨基]戊酸以以與制備例70相同的方式制得的。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.2-1.6(4H，m)，1.90(2H，t，J＝7.0Hz)，2.90(3H，s)，3.09(2H，dt，J＝7.0，7.0Hz)，4.52(1H，s)，4.61(1H，t，J＝7.0Hz)，6.28(1H，s)，7.0-7.35(16H，m)，7.59(1H，s)實施例443-({3-氨基-4-[(5-氨基戊酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽本標題化合物是由(5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例43相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，1.65-1.8(4H，m)，2.50(2H，m)，3.02(2H，m)，3.23(1H，d，J＝18Hz)，3.45(1H，d，J＝18Hz)，3.72(3H，s)，5.06(1H，d，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.28(1H，d，J＝15.7Hz)，5.87(1H，d，J＝4.8Hz)，8.02(1H，s)制備例72向1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(4g)在二氯甲烷(100ml)內的溶液中加入4-{[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基}-1-哌啶甲酸叔丁酯(4.05g)，將該混合物回流72小時。將該反應混合物依次用水、10％檸檬酸水溶液、水和鹽水洗滌。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，獲得了4-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-哌啶甲酸叔丁酯(1.806g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.3-1.9(14H，m)，1.5-1.8(2H，m)，2.95(3H，s)，4.10(2H，m)，4.36(1H，s)，6.53(1H，s)，7.0-7.35(16H，m)，7.68(1H，s)實施例45
3-({3-氨基-2-甲基-4-[(4-哌啶基羰基)氨基]-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由4-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-哌啶甲酸叔丁酯以與實施例36相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.57(6H，s)，1.8-2.3(4H，m)，2.7-3.6(7H，m)，3.72(3H，s)，5.06(1H，d，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.28(1H，d，J＝15.7Hz)，5.87(1H，d，J＝4.8Hz)，8.01(1H，s)制備例73向3-[N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基]丙酸(3.33g)在二氯甲烷(33ml)和四氫呋喃(33ml)內的懸浮液中加入HOBT(3.33g)和WSCHCl(6.29g)，將該混合物攪拌1小時。向該溶液中加入1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(3.45g)和N，N-二異丙基乙基胺(11.4ml)。將該反應混合物在室溫攪拌過夜。向所得溶液中加入鹽水，用四氫呋喃/乙酸乙酯＝1/1萃取。將萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，獲得了N-{3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，為油狀物(2.4g)。該產物不用進一步純化直接用于下一步驟中。
制備例74向N-(3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(4.88g)在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)內的溶液中依次加入三苯甲基氯(6.86g)、三乙胺(6.86ml)和4-二甲基氨基吡啶(80mg)。將該混合物在室溫攪拌過夜。向所得混合物中加入乙酸乙酯，用水(3次)和鹽水洗滌。將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化，獲得了N-甲基-N-(3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(4.20g)，為非晶固體。
IR(KBr)1659，1587，1491，1446，1173，1151，762，739，708cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.40(9H，s)，2.12(2H，t，J＝7.4Hz)，2.74(3H，s)，2.74(3H，s)，3.24(2H，t，J＝7.4Hz)，5.58(1H，s)，7.13-7.40(16H，m)，8.30(1H，s)實施例463-[(3-氨基-2-甲基-4-{[3-(甲基氨基)丙酰基]氨基}-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由N-甲基-N-(3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的，為非晶固體。
IR(KBr)1770，1664，1599，1531，1400，1360cm-11H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，2.77(3H，s)，2.92(2H，t，J＝6.5Hz)，3.19and 3.45(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.74(3H，s)，5.00 and 5.21(2H，ABq，J＝15.4Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.02(1H，s)ESI-MS 666.3(M+H+)制備例753-{[5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯本標題化合物是由1-(叔丁氧基羰基)-3-氮雜環丁烷甲酸以與制備例73相同的方式制得的，為油狀物。該產物不用進一步純化直接用于下一步驟中。
制備例763-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯本標題化合物是3-{[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]羰基}-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯以與制備例74相同的方式制得的，為非晶固體。
IR(KBr)3367，3321，1701，1662，1489，1414，1144，766，704cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，2.75(3H，s)，2.97-3.05(1H，m)，3.63-3.70(2H，m)，3.82-3.90(2H，m)，5.57(1H，s)，7.10-7.33(16H，m)，8.41(1H，s)ESI-MS 560.3(M+Na+)實施例473-({3-氨基-4-[(3-氮雜環丁烷基羰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由3-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的，為非晶固體。
IR(KBr)1768，1663，1624，1605，1406，1362cm-11H-NMR(D2O)δ1.53(3H，s)，1.53(3H，s)，3.19和3.50(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.82-3.98(1H，m)，4.31-4.35(4H，m)，4.49和5.20(2H，ABq，J＝15.3Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.04(1H，s)ESI-MS 664.2(M+H+)制備例77N-{2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲基)氨基]乙酸以與制備例73相同的方式制得的，為油狀物。該產物不用進一步純化直接用于下一步驟中。
制備例78N-甲基-N-(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由N-{2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-氧代乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯以與制備例74相同的方式制得的，為白色固體。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.32和1.39(9H，s)，2.72和2.77(3H，s)，3.52和3.61(2H，brs)，5.61(1H，s)，7.13-7.33(16H，m)，8.20和8.30(1H，brs)ESI-MS 548.3(M+Na+)實施例483-[(3-氨基-2-甲基-4-{[(甲基氨基)乙酰基]氨基}-1-吡唑子基)甲基]-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由N-甲基-N-(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的，為非晶固體。
IR(KBr)1770，1657，1601，1400，1362cm-11H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，2.82(3H，s)，3.18和3.45(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.74(3H，s)，4.08(2H，s)，5.00和5.20(2H，ABq，J＝15.3Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.8Hz)，8.05(1H，s)ESI-MS 652.2(M+H+)制備例79N-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)乙酰胺本標題化合物是由(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)乙酸以與制備例73相同的方式制得的，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.55(3H，s)，4.36(2H，8)，4.91(2H，brs)，7.14(1H，s)，7.85-8.02(4H，m)，9.48(1H，s)ESI-MS 322.2(M+Na+)制備例802-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]乙酰胺本標題化合物是由N-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)乙酰胺以與制備例74相同的方式制得的，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.70(3H，s)，4.12(2H，s)，5.41(1H，s)，7.12-7.33(16H，m)，7.85-7.95(4H，m)，8.93(1H，s)ESI-MS 564.3(M+Na+)制備例81在室溫將肼一水合物(1.46ml)加到2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]乙酰胺(5.42g)在乙醇(108ml)和四氫呋喃(54ml)內的溶液中，將該混合物在70℃攪拌2小時。將該反應混合物冷卻至0℃，并通過過濾除去不溶物。將濾液真空濃縮。將殘余物用二異丙基醚研制，通過過濾收集，并真空干燥，獲得了2-氨基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]乙酰胺(3.37g)，為固體。該產物不用進一步純化直接用于下一步驟中。
制備例82向2-氨基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]乙酰胺(2.47g)在四氫呋喃(50ml)內的溶液中加入({[(三氟甲基)磺酰基]亞氨基}亞甲基)-雙氨基甲酸雙叔丁酯(2.35g)和三乙胺(2.5ml)，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。將該反應混合物倒入乙酸乙酯與水的混合物內。分離出水層，將有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化濃縮液，獲得了{(E)-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基}-雙氨基甲酸雙叔丁酯(3.25g)，為非晶固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，1.49(9H，s)，2.75(3H，s)，3.79(2H，d，J＝4.7Hz)，5.47(1H，s)，7.12-7.33(16H，m)，8.55(1H，t，J＝4.7Hz)，8.61(1H，s)，11.43(1H，s)ESI-MS 676.3(M+Na+)實施例493-({3-氨基-4-[(胍基乙酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由{(E)-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸雙叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的，為非晶固體。
1H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，3.20和3.48(2H，ABq，J＝17.6Hz)，3.75(3H，s)，4.21(2H，s)，5.00和5.20(2H，ABq，J＝15.3Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.02(1H，s)ESI-MS 678.2(M-H+)(負)實施例50在冰冷卻下，向3-({3-氨基-4-[(3-氨基丙酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(652mg)在水(30ml)和乙腈(3ml)內的溶液中加入甲亞胺酸乙酯鹽酸鹽(658mg)和碳酸鉀(1.106g)。在5℃攪拌3小時后，加入1N HCl以中和該反應混合物。將所得溶液通過制備HPLC純化，用磷酸鹽緩沖液(pH 5.5)和乙腈的混合物洗脫，將洗脫液在Diaion(HP-20(MitsubishiChemical Corporation)上進行色譜純化，凍干，獲得了3-({3-氨基-4-[(3-胍基丙酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(23mg)，為非晶物。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。只描述一種主要的異構體。
IR(KBr)1770，1714，1668，1653，1456，1400，1360cm-11H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，2.85(2H，t，J＝6.4Hz)，3.19and 3.46(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.65(2H，t，J＝6.4Hz)，5.00 and 5.21(2H，ABq，J＝15.2Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，7.80(1H，s)，8.01(1H，s)ESI-MS 677.2(M-H+)(負)制備例83向1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(2.1g)和3-乙氧基-3-氧代丙酸(1.32g)在二氯甲烷(10ml)和四氫呋喃(10ml)內的攪拌著的溶液中加入WSCD HCl(3.83g)和N，N-二異丙基乙基胺(6.96ml)，并且將該混合物攪拌過夜。減壓除去溶劑，該包含3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙酸乙酯的粗殘余物不用進一步純化直接用于下一步驟中。
制備例84將包含3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙酸乙酯的粗殘余物溶解在N，N-二甲基甲酰胺(20ml)中，在攪拌下加入三苯甲基氯(5.52g)和三乙胺(4.14ml)。將該混合物攪拌過夜，用水(10ml)中止反應。將整個混合物用乙酸乙酯萃取，將萃取液用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并減壓濃縮，獲得了油狀殘余物，通過硅膠色譜純化，用二氯甲烷-乙酸乙酯(2∶3)洗脫，獲得了3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸乙酯(1.23g)。
ESI-MS 491.2[M+Na]+(正)，467.3[M-H]-(負)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(3H，t，J＝7.1Hz)，2.75(3H，s)，3.04(2H，s)，4.07(2H，q，J＝7.1Hz)，5.55(1H，s)，7.1-7.4(16H，m)，8.54(1H，s)制備例85向3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸乙酯(1.3g)在四氫呋喃(30ml)內的溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(3.1ml)，將該混合物在室溫攪拌3小時。真空除去四氫呋喃，用稀檸檬酸將該殘余物酸化。通過過濾收集所形成的沉淀，并減壓干燥，獲得了3-{{1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸(1.22g)。
ESI-MS 463.2[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ2.74(3H，s)，2.95(2H，s)，5.56(1H，s)，7.0-7.4(16H，m)，8.54(1H，s)，12.0-13.0(1H，brs)制備例86向3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸(600mg)和(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(240mg)在四氫呋喃(12ml)和二氯甲烷(6ml)內的懸浮液中加入WSCD HCl(522mg)，將整個混合物在室溫攪拌過夜。向該反應混合物中加入水(3ml)，將整個混合物用乙酸乙酯萃取。將萃取液用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。將溶劑蒸發，獲得了粗殘余物，將其用二異丙基醚-乙酸乙酯(2∶1)研制，獲得了{2-[(3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(537mg)。
ESI-MS 604.9[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.74(3H，s)，2.85(2H，s)，2.9-3.2(4H，m)，5.61(1H，s)，6.7-6.9(1H，m)，7.0-7.4(16H，m)，8.0-8.1(1H，m)，8.63(1H，s)
實施例513-{[3-氨基-4-({3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙酰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑子基]甲基}-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由{2-[(3-{[I-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯以與實施例34相同的方式制得的。
ESI-MS 731.2[M+Na]+(正)，1H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，3.1-3.3(2H，m)，3.19和3.44(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.54(2H，s)，3.5-3.7(2H，m)，3.74(3H，s)，5.00和5.22(2H，ABq，J＝15.5Hz)，5.25(1H，d，J＝4.7Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，8.05(1H，s)制備例87向3-氨基-2-羥基丙酸(2.1g)在四氫呋喃(30ml)和水(30ml)內的攪拌著的溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液以將該溶液堿化(pH＝9)。向該混合物中加入二碳酸叔丁酯(4.36g)，將該混合物在室溫攪拌4小時，把混合物的pH保持在8.5與9.0之間。將整個混合物用乙醚洗滌。用10％硫酸氫鉀水溶液將水層酸化(pH＝2)，用氯化鈉飽和，用乙酸乙酯萃取。用硫酸鎂將萃取液干燥。將溶劑減壓蒸發，獲得了3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羥基丙酸(3.96g)。
ESI-MS 228.2[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，3.0-3.8(3H，m)，3.9-4.1(1H，m)，6.5-6.8(1H，m)制備例88向3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羥基丙酸(1.61g)在二氯甲烷(8ml)和四氫呋喃(8ml)內的溶液中加入HOBT(1.59g)和WSCD HCl(3.01g)，將該混合物在室溫攪拌1小時。將該溶液冷卻至0℃，加入1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽和N，N-二異丙基乙基胺(4.1ml)。將該混合物在室溫攪拌8小時。減壓除去溶劑，獲得了{3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-羥基-3-氧代丙基}氨基甲酸叔丁酯粗產物，其不用進一步純化直接用于下一反應中。
制備例89
(2-羥基-3-{[1-甲基-5一(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由{3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-2-羥基-3-氧代丙基}氨基甲酸叔丁酯以與制備例84相同的方式制得的。
ESI-MS 564.3[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，2.7-2.9(1H，m)，2.83(3H，s)，3.1-3.4(1H，m)，3.7-3.9(1H，m)，5.79(1H，d，J＝5.3Hz)，5.98(1H，s)，6.5-6.7(1H，m)，7.1-7.4(16H，m)，8.36(1H，s)實施例523-({3-氨基-4-[(3-氨基-2-羥基丙酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由(2-羥基-3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.49(6H，s)，3.1-3.6(4H，m)，3.76(3H，s)，4.6-4.7(1H，m)，5.02和5.21(2H，ABq，J＝15.4Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，8.05(1H，s)制備例90在0℃向2-(4，5-二氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇硫酸鹽(5g)在二氯甲烷(50ml)內的懸浮液中加入三乙胺(6.38ml)，將該混合物在0℃攪拌10分鐘。將乙酸酐(2.16ml)和甲酸(1.74ml)的混合物在40℃攪拌30分鐘，冷卻至0℃，在0℃滴加到上述溶液中。將整個混合物在0℃攪拌2小時。向該混合物中加入鹽水，用四氫呋喃萃取整個混合物。用硫酸鎂將萃取液干燥，并減壓蒸發，獲得了[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺粗產物，其不用進一步純化直接用于下一反應中。
制備例91[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺本標題化合物是由[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺以與制備例84相同的方式制備的。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.10(2H，t，J＝6.2Hz)，3.3-3.5和3.4-3.6(2H，m)，4.89和5.06(1H，t，J＝5.1Hz)，5.77和6.07(1H，s)，7.1-7.4(16H，m)，7.58和8.07(1H，s)，7.58(1H，s)制備例92在氮氣流下于室溫向[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲酰胺(2g)在N，N-二甲基甲酰胺(30ml)內的攪拌著的溶液中加入氫化鈉(213mg，60％油懸浮液)，將整個混合物在0℃攪拌20分鐘。向上述溶液中加入(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯(1.27g)在N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液和碘化鈉(799mg)，并且將該混合物攪拌過夜。加入10％硫酸氫鉀水溶液(5ml)，將整個混合物用乙酸乙酯萃取。將萃取液用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸發，獲得了油狀物，通過硅膠色譜純化，用二氯甲烷-乙酸乙酯(2∶1)洗脫，獲得了(3-{N-甲酰基-N-[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}丙基)氨基甲酸叔丁酯(1g)。該化合物的NMR數據表明存在旋轉異構體。
ESI-MS 592.3[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37和1.38(9H，s)，2.7-3.5(10H，m)，4.80和4.88(1H，t，J＝5.0Hz)，5.52&6.06(1H，s)，6.5-6.9(1H，m)，7.0-7.4(16H，m)，7.52(1H，s)實施例533-({3-氨基-4-[N-(3-氨基丙基)-N-甲酰基氨基]-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由(3-{N-甲酰基-N-[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}丙基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例32相同的方式制得的。
ESI-MS 694.2[M-H]-(負)1H-NMR(D2O)δ1.53(6H，s)，1.7-2.1(2H，m)，2.9-3.1(2H，m)，3.1-3.8(4H，m)，3.8-4.0(2H，m)，4.3-4.6(2H，m)，4.8-5.2(2H，m)，5.29(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.7Hz)，8.0-8.3(2H，m)實施例54在室溫向3-({3-氨基-4-[N-(3-氨基丙基)-N-甲酰基氨基]-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(100mg)在甲醇(1.4ml)內的攪拌著的懸浮液中加入濃鹽酸(0.125ml)，將該混合物攪拌6.5小時。向上述溶液中加入碳酸氫鈉(109mg)，通過制備HPLC純化該混合物(ODS柱；乙腈∶磷酸鹽緩沖液(pH7)＝5∶95)。將含有所需產物的洗脫液蒸發以除去乙腈，用稀鹽酸將其酸化，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用20％2-丙醇的水溶液洗脫。將洗脫液減壓濃縮，并凍干，獲得了3-({3-氨基-4-[(3-氨基丙基)氨基]-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽(18mg)。
ESI-MS 666.2[M-H]-(負)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.53(6H，s)，1.96(2H，tt，J＝7.5Hz)，3.0-3.2(4H，m)，3.13 and 3.43(2H，ABq，J＝17.6Hz)，3.87(2H，t，J＝4.8Hz)，4.2-4.4(2H，m)，4.87和5.03(2H，ABq，J＝15.2Hz)，5.24(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.64(1H，s)制備例93在0℃，向N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-(三苯甲基氨基)乙酰胺(2g)在N，N-二甲基甲酰胺(20ml)內的攪拌著溶液中加入氫化鈉(245mg，60％油懸浮液)，將該混合物攪拌30分鐘，同時溫熱至室溫。將該混合物冷卻至0℃，加入甲基碘(1.3g)。將整個混合物在室溫攪拌過夜。加入水(5ml)，將整個混合物用乙酸乙酯萃取。將有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸發，獲得了N-甲基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-(三苯甲基氨基)乙酰胺(2.05g)。
ESI-MS 690.3[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.99(3H，s)，2.3-2.8(3H，m)，2.52(3H，s)，5.44(1H，s)，6.85(1H，s)，6.9-7.5(30H，m)制備例94在0℃將氫化鋰鋁(455mg)緩慢地加到四氫呋喃(40ml)中，將該混合物攪拌20分鐘。在0℃向該混合物中加入N-甲基-N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-(三苯甲基氨基)乙酰胺(2g)，將整個混合物攪拌2小時，同時溫熱至室溫，然后回流2小時。向該混合物中加入氟化鈉(2.51g)和水(862mg)，并且將整個混合物在室溫攪拌30分鐘。過濾出沉淀，將濾液減壓濃縮，獲得了粗殘余物，通過色譜法純化(硅膠；乙酸乙酯∶二氯甲烷＝1∶10)，獲得了N4，1-二甲基-N5-三苯甲基-N4-[2-(三苯甲基氨基)乙基]-1H-吡唑-4，5-二胺(740mg)。
ESI-MS 676.2[M+Na]+(正)，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.7-2.0(2H，m)，1.98(3H，s)，2.2-2.4(1H，m)，2.6-2.8(2H，m)，2.81(3H，s)，5.24(1H，s)，7.00(1H，s)，7.0-7.5(30H，m)實施例553-({3-氨基-4-[N-(2-氨基乙基)-N-甲基氨基]-2-甲基-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由N4，1-二甲基-N5-三苯甲基-N4-[2-(三苯甲基氨基)乙基]-1H-吡唑-4，5-二胺以與實施例32相同的方式制得的。
ESI-MS 636.2[M-H]-(negative)1H-NMR(D2O)δ1.60(6H，s)，2.60(3H，s)，3.0-3.2(4H，m)，3.19和3.39(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.67(3H，s)，4.87和5.20(2H，ABq，J＝15.8Hz)，5.22(1H，d，J＝4.9Hz)，5.85(1H，d，J＝4.7Hz)，7.90(1H，s)制備例95在室溫向[1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-5-基]甲酰胺(15.7g)在甲醇(78ml)內的溶液中加入濃鹽酸(21ml)。將該反應混合物攪拌3.5小時，并真空蒸發。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，用碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機層用硫酸鎂干燥，真空濃縮，獲得了1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-5-胺(12g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ4.15(2H，dt，J＝25.2，5.1Hz)，4.66(2H，dt，J＝47.2，5.1Hz)，5.1(2H，brs)，5.27(1H，d，J＝1.7Hz)，7.06(1H，d，J＝1.7Hz)制備例96向1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-5-胺(12g)在乙醇(30ml)內的溶液中加入濃鹽酸(70mg)和亞硝酸異戊酯(10.9g)。將該反應混合物在25-38℃攪拌2小時。將二異丙基醚和己烷加到該反應混合物中，將所得油狀物通過硅膠柱色譜純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶2→1∶1→2∶1→1∶0)，獲得了1-(2-氟乙基)-4-亞硝基-1H-吡唑-5-胺(4.8g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ4.10-4.90(4H，m)，7.09和8.59(1H，s)，8.20和8.26(1H，brs)制備例97向1-(2-氟乙基)-4-亞硝基-1H-吡唑-5-胺(4.8g)在水(30ml)和甲醇(30ml)內的溶液中加入硫酸(2.98g)和10％披鈀炭(2.5g)，將該混合物在氣囊壓力下氫化7.5小時。將該反應混合物經由硅藻土床過濾，并且將濾液真空濃縮。向殘余物中加入2-丙醇，通過過濾收集沉淀，獲得了1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(7g)。
1H-NMR(D2O)δ4.25-4.95(4H，m)，7.66(1H，s)制備例98在冰冷卻下向1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(3g)在四氫呋喃(30ml)內的溶液中加入{3-[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-3-氧代丙基}氨基甲酸叔丁酯(3.9g)和N，N-二異丙基乙基胺(3.5g)。將該反應混合物在室溫攪拌2小時。加入碳酸氫鈉水溶液和氯化鈉，將該混合物用乙酸乙酯-四氫呋喃萃取(3次)。將有機層用硫酸鎂干燥，并真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化(乙酸乙酯→乙酸乙酯∶乙醇＝8∶1)，獲得了(3-{[5-氨基-1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.3g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，2.36(2H，t，J＝7.1Hz)，3.10-3.27(2H，m)，4.16(2H，dt，J＝25.5，5.0Hz)，4.67(2H，dt，J＝47.2，5.0Hz)，5.27(2H，brs)，6.75-6.90(1H，m)，7.23(1H，s)，9.08(1H，brs)制備例99在室溫向(3-{[5-氨基-1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.3g)在N，N-二甲基甲酰胺(12ml)內的溶液中加入三乙胺(1.48g)、4-二甲基氨基吡啶(35.6mg)和三苯甲基氯(2.2g)。將該反應混合物攪拌2小時，加入水。將該混合物用乙酸乙酯萃取，將有機層用水和氯化鈉水溶液洗滌。將有機層用硫酸鎂干燥，并真空濃縮。加入乙腈，通過過濾收集沉淀，獲得了(3-{[1-(2-氟乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(2g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，2.05(2H，t，J＝7.2Hz)，3.00-3.08(2H，m)，3.23(2H，dt，J＝25.3，5.1Hz)，4.41(2H，dt，J＝47.1，5.1Hz)實施例563-({3-氨基-4-[(3-氨基丙酰基)氨基]-2-(2-氟乙基)-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由(3-{[1-(2-氟乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯以與實施例38相同的方式制備的。
1H-NMR(D2O)δ2.89(2H，t，J＝6.5Hz)，3.22(1H，d，J＝9.2Hz)，3.34(1H，t，J＝6.5Hz)，3.50(1H，d，J＝9.2Hz)，4.55-4.95(4H，m)，5.08(2H，brs)，5.26(1H，d，J＝4.9Hz)，5.84(1H，d，J＝4.9Hz)，8.09(1H，s)制備例1001-甲基-7-亞硝基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑本標題化合物是由1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑以與制備例96相同的方式制備的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.93(1H，s)，7.48(1H，m)，7.92(1H，m)，9.03(1H，s)
制備例1011-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-胺硫酸鹽本標題化合物是由1-甲基-7-亞硝基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑以與制備例97相同的方式制備的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.73(3H，s)，7.24(1H，m)，7.62(2H，m)制備例102{(Z)-[(1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸雙叔丁酯本標題化合物是由1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-胺硫酸鹽以與制備例64相同的方式制備的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.34(9H，s)，1.52(9H，s)，3.61(3H，s)，7.14(1H，m)，7.42(1H，m)，7.52(1H，m)實施例577β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{[7-胍基-1-甲基-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)]甲基}-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由{(Z)-[(1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸雙叔丁酯以與實施例43相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.51(6H，s)，3.40(2H，m)，3.85(3H，s)，5.15-5.30(3H，m)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.49(1H，d，J＝2.2Hz)，8.02(1H，d，J＝2.2Hz)，8.27(1H，d，J＝1.0Hz)IR(KBr)3400，3392，1770，1672，1606，1531cm-1制備例103{3-[(1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-基)氨基]-3-氧代丙基}氨基甲酸叔丁酯本標題化合物是由1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-胺硫酸鹽和3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙酸以與制備例70相同的方式制得的。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.43(9H，s)，2.61(2H，m)，3.49(2H，m)，3.65(3H，s)，7.22(1H，m)，7.26(1H，m)，7.44(1H，m)
實施例583-({7-[(3-氨基丙酰基)氨基]-1-甲基-5-(1H-咪唑并[1，2-b]吡唑子基)}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸鹽本標題化合物是由{3-[(1-甲基-1H-咪唑并[1，2-b]吡唑-7-基)氨基]-3-氧代丙基}氨基甲酸叔丁酯以與實施例43相同的方式制得的。
1H-NMR(D2O)δ1.50(6H，s)，2.97(2H，d，J＝6.5Hz)，3.36(2H，d，J＝6.5Hz)，3.4(2H，m)，3.81(3H，s)，5.15-5.30(3H，m)，5.82(1H，d，J＝4.8Hz)，7.44(1H，d，J＝2.2Hz)，7.98(1H，d，J＝2.2Hz)，8.11(1H，d，J＝1.0Hz)IR(KBr)3401，1770，1666，1606，1525cm-1制備例104向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(4.6g)在N，N-二甲基甲酰胺(32ml)內的懸浮液中加入三乙胺(1.08g)和1-哌嗪甲酸叔丁酯(1.99g)。將該反應混合物攪拌3小時，并倒入水內。用乙酸乙酯萃取該混合物，將有機層真空濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜純化(乙酸乙酯→乙酸乙酯∶乙醇＝20∶1)，獲得了4-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-IH-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-哌嗪甲酸叔丁酯(4.7g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，2.90(3H，s)，3.05-3.25(4H，m)，3.30-3.45(4H，m)，4.76(1H，brs)，5.34(1H，brs)，7.10-7.30(16H，m)實施例59向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢烯-4-甲酸4-甲氧基芐基酯(2g)在N，N-二甲基甲酰胺(6ml)內的溶液中加入1，3-二(三甲基甲硅烷基)脲(3g)，并且將該反應混合物攪拌30分鐘。將碘化鉀(680mg)加到該溶液中，將該混合物攪拌30分鐘。把4-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1-哌嗪甲酸叔丁酯(2g)加到該溶液中。將該反應混合物在25℃攪拌23小時，并倒入乙酸乙酯-水-20％氯化鈉水溶液的混合物中。將有機層用10％硫代硫酸鈉水溶液與20％氯化鈉水溶液的混合物洗滌。將有機層用10％三氟乙酸鈉水溶液洗滌2次，然后用20％氯化鈉水溶液洗滌。將有機層真空濃縮至體積約為10ml。將濃縮液加到二異丙基醚中，將該懸浮液攪拌1小時。通過過濾收集所得固體并干燥。將固體溶解在二氯甲烷(6ml)中。向該溶液中加入苯甲醚(2ml)和三氟乙酸(6ml)。將該反應混合物攪拌4小時，并倒入二異丙基醚內。通過過濾收集所得固體并干燥。將該固體通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將含有所需產物的洗脫液真空濃縮。用濃鹽酸將濃縮液調節至約pH 1，在DiaionHP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上進行色譜純化，用20％2-丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮，加入2M硫酸。將該混合物凍干，獲得了3-({3-氨基-2-甲基-4-[(1-哌嗪基羰基)氨基]-1-吡唑子基}甲基)-7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-頭孢烯-4-甲酸硫酸氫鹽(679mg)。
1H-NMR(D2O)δ1.60(6H，s)，3.20(2H，d，J＝17.7Hz)，3.25-3.45(4H，m)，3.45(1H，d，J＝17.7Hz)3.72(3H，m)，3.75-3.85(4H，m)，5.00(1H，d，J＝15.7Hz)，5.24(1H，d，J＝15.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，7.89(1H，s)本申請是基于2002年10月30日在澳大利亞提交的第No.2002952355號申請以及在2003年9月4日提交的第No.2003904813號申請，將其內容引入本文以供參考。
權利要求
1.式[I]化合物或其可藥用鹽 其中R1是低級烷基、羥基(低級)烷基或鹵代(低級)烷基，且R2是氫或氨基保護基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基或低級亞烯基；R3是氫或低級烷基；R4是 其中A是 或 其中X是O或NH，R7是氫、低級烷基或氨基保護基，R8是氫或羥基，R9是氨基、一或二(低級)烷基氨基、保護的氨基、胍基、保護的胍基或飽和3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或保護的氨基取代，k、m、n和q獨立地為0或1，并且p是0、1、2或3；R5是羧基或保護的羧基；且R6是氨基或保護的氨基。
2.權利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫或氨基保護基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R3是氫；A是 其中X是O或NH；R7是氫或氨基保護基；R9是氨基或保護的氨基；且p是0、1或2。
3.權利要求2的化合物或其可藥用鹽，其中R8是氫。
4.權利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基、羥基(低級)烷基或鹵代(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基或酰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基或低級亞烯基；R5是羧基或酯化的羧基；R6是氨基或酰基氨基；R7是氫、低級烷基或酰基；且R9是氨基、一或二(低級)烷基氨基、酰基氨基、胍基、酰基胍基或飽和3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或酰基氨基取代。
5.權利要求4的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基或酰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基或酯化的羧基；R6是氨基或酰基氨基；R7是氫或酰基；且R9是氨基或酰基氨基。
6.權利要求5的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫、芳基(低級)烷基、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基或低級烷氧基羰基；R6是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基；R7是氫、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基；且R9是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基。
7.權利要求6的化合物或其可藥用鹽，其中R1是低級烷基或羥基(低級)烷基，且R2是氫，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基；R5是羧基；R6是氨基；R7是氫或低級鏈烷酰基；且R9是氨基。
8.權利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中其中R4選自 和 其中R7、A、m、p和q分別如權利要求1中所定義，R14是氨基、一或二(低級)烷基氨基或保護的氨基，R15是胍基或保護的胍基，且R16是3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或保護的氨基取代。
9.權利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中其中R4選自 和 其中p是0、1或2，q是0或1，R7是氫或氨基保護基，且R9是氨基或保護的氨基。
10.權利要求9的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫、低級鏈烷酰基或低級烷氧基羰基；且R9是氨基、低級鏈烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基。
11.權利要求10的化合物或其可藥用鹽，其中R7是氫或低級鏈烷酰基；且R9是氨基。
12.制備式[I]化合物或其鹽的方法 其中R1是低級烷基、羥基(低級)烷基或鹵代(低級)烷基，且R2是氫或氨基保護基，或者R1與R2鍵合在一起并且形成低級亞烷基或低級亞烯基；R3是氫或低級烷基；R4是 其中A是 或 其中X是O或NH，R7是氫、低級烷基或氨基保護基，R8是氫或羥基，R9是氨基、一或二(低級)烷基氨基、保護的氨基、胍基、保護的胍基或飽和3-8元雜環基，所述雜環基含有1-4個氮原子，并且任選被氨基或保護的氨基取代，k、m、n和q獨立地為0或1，并且p是0、1、2或3；R5是羧基或保護的羧基；且R6是氨基或保護的氨基，所述方法包括(1)將[II]化合物或其在氨基上的反應性衍生物或其鹽 其中R1、R2、R3和R4分別如上所定義，與式[III]化合物或其在羧基上的反應性衍生物或其鹽反應 其中R5和R6分別如上所定義，以獲得式[I]化合物或其鹽 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6分別如上所定義，或者(2)將式[Ia]化合物或其鹽進行氨基保護基的消除反應 其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、A、k、m、n、p和q分別如上所定義，并且R9a是保護的氨基、保護的胍基或含有1-4個氮原子的被保護的氨基取代的飽和3-8元雜環基，獲得式[Ib]化合物或其鹽 其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、A、k、m、n、p和q分別如上所定義，并且R9b是氨基、胍基或含有1-4個氮原子的被氨基取代的飽和3-8元雜環基，或者(3)將式[VI]化合物或其鹽 其中R5和R6分別如上所定義，R10是保護的羧基，且Y是離去基團，與式[VII]化合物或其鹽反應 其中R1、R2、R3和R4分別如上所定義，獲得式[VIII]化合物或其鹽 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R10分別如上所定義，Z是陰離子，將式[VIII]化合物或其鹽進行羧基保護基的消除反應，獲得式[I]化合物或其鹽 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6分別如上所定義。
13.藥物組合物，所述組合物包含權利要求1的化合物或其可藥用鹽以及與其混合的可藥用載體。
14.用作藥物的權利要求1的化合物或其可藥用鹽。
15.用作抗微生物劑的權利要求1的化合物或其可藥用鹽。
16.權利要求1的化合物或其可藥用鹽在制備用于治療感染性疾病的藥物中的應用。
17.治療感染性疾病的方法，所述方法包括給人或動物施用權利要求1的化合物或其可藥用鹽。
全文摘要
本發明涉及式[I]化合物或其可藥用鹽其中R
文檔編號C07D501/46GK1708502SQ20038010264
公開日2005年12月14日 申請日期2003年10月27日 優先權日2002年10月30日
發明者大木秀德, 奧田真也, 山中敏夫, 大垣勝, 戶田彩子, 川端浩二, 井上敏, 三隅啟司, 伊藤健治, 佐藤賢治 申請人:安斯泰來制藥有限公司, 湧永制藥株式會社