二芳基環烷基衍生物、它們的產生方法以及它們作為藥物的用途的制作方法

專利名稱：二芳基環烷基衍生物、它們的產生方法以及它們作為藥物的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及二芳基環烷基衍生物，并涉及它們的生理可接受鹽及其生理機能性衍生物(physiologically functional derivative)。
類似結構的化合物已經在現有技術中描述為用于高脂血癥和糖尿病的治療(WO 2000/64876和WO 03/020269)。
本發明的目的是提供允許治療上可利用于脂類和/或碳水化合物代謝調節，因而適合用于疾病如2型糖尿病和動脈硬化癥以及它們的多種后遺癥的預防和/或治療的化合物。
令人吃驚的是，發現了一系列調節PPAR受體活性的的化合物。特別是，這些化合物適合于PPARα和PPARγ的激活，并且其相對激活程度可以根據這些化合物的不同而不同。
因此，本發明涉及式I化合物及它們的生理可接受鹽 其中環A是(C3-C8)-環烷二基、或(C3-C8)-環烯二基，其中環烷二基環或環烯二基環中一個或多個碳原子可以被O原子替換；環B是a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下
R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對R4 a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換；優選的式I化合物為其中環A是(C3-C8)-環烷二基或(C3-C8)-環烯二基，其中環烷二基環或環烯二基環中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換。
環B是a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對R1 a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-
烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對R4 a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換；更優選的式I化合物為其中環A是 (C3-C8)-環烷二基，其中一個碳原子可以被氧原子替換。
環B是 a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對R1 a)在環B＝a)的情況下
R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是 H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是 H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是CH2-O；特別優選式Ia化合物， 其中環A、環B、R1、R2、R3、R4、R5、X和Y如上定義。
更特別優選這樣的式Ia化合物，其中
R3是 H且R5是甲基或其中環A是 (C5-C7)-環烷二基。
環B是 a)苯基，或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1/R2＝a)情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是甲基；R3是 H；X是CH2-O；Y是CH2-O；
十分特別優選其中中心的環烷二基環為1，3順式連接的式I和Ia化合物。
本發明也包含在此描述的本發明的“優選實施方案”的所有組合；取代基R1、R2、R3、R4和R5中的烷基可以是直鏈或支鏈。
芳基可以理解為芳香的、碳環的單-或雙環體系，其中環中含有6到10個原子。
雜芳基是單-或雙環芳環體系，其具有4到11個環成員，其中環體系中的至少一個原子是來自N、O和S的雜原子。
式I化合物含有至少兩個不對稱中心并且可以含有多個不對稱中心。式I化合物因此可以它們的外消旋物、外消旋混合物、純對映體、非對映體和非對映體混合物形式存在。本發明包括式I化合物的所有這些同分異構體形式。這些同分異構體形式可通過已知方法獲得，即使其中一些沒有被明文描述。
因為與起始或基礎化合物相比可藥用鹽具有較大的溶解性，可藥用鹽特別適于醫學應用。這些鹽必須具有可藥用陰離子或陽離子。本發明化合物的合適的可藥用酸加成鹽是無機酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸的鹽以及有機酸如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡糖酸、乙醇酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、順丁烯二酸、蘋果酸、甲磺酸、丁二酸、對甲苯磺酸和酒石酸的鹽。合適的可藥用堿性鹽為銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)和堿土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)以及氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1.3-丙二醇)、二乙醇胺、賴氨酸或乙二胺的鹽。
具有不可藥用陰離子例如三氟醋酸根的鹽同樣也屬于本發明的范圍，作為用于可藥用鹽的制備和純化和/或用于非治療性如在體外應用使用的有用中間體。
在此使用的術語“生理機能性衍生物”指任何生理容許的本發明式I化合物的衍生物，如酯，其在施用到哺乳動物如人后能夠形成(直接或間接)式I化合物或它的活性代謝物。
生理機能性衍生物也包括本發明化合物的前體藥物，例如H.Okada等，Chem.Pharm.Bull.1994，42，57-61中所描述。這些前體藥物可以在體內代謝為本發明化合物。這些前體藥物本身可以具有活性或沒有活性。
本發明化合物也可以多種多晶型形式存在，如非晶態多晶型形式和晶態多晶型形式。所有本發明化合物的多晶型形式屬于本發明的范圍并且是本發明的另一方面。
在下文中所有提及的“式I化合物”指如上描述的式I化合物，并且指如在此描述的它們的鹽、溶劑合物和生理機能性衍生物。
用途本發明還涉及作為PPAR受體配體的式I化合物和它們的藥物組合物的用途。本發明的PPAR受體配體適合作為PPAR受體活性的調節劑。
過氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome proliferator-ativatedreceptor；PPAR)是轉錄因子，它們可以通過配體激活，并且屬于核激素受體類。有三種PPAR同種型，PPARα、PPARγ和PPARδ，它們由不同基因編碼(Peroxisome proliferator-ativatedreceptor(PPAR)structure，mechanisms of activation and diverse fuctionsMotojima K，Cell Struct Funct.，1993年10月，18(5)，267-77)。
存在兩種PPARγ變體，PPARγ1和PPARγ2，它們是啟動子的選擇性使用以及不同的mRNA剪接的結果(Vidal-Puig等，J.Clin.Invest.，972553-2561，1996)。不同的PPAR受體具有不同的組織分布并且調節不同的生理功能。PPAR受體在大量基因的調節的不同方面起著關鍵的作用，這些基因的基因產物至關重要地直接或間接地參與脂類和碳水化合物代謝。因此，例如，PPARα受體在肝臟中的脂肪酸分解代謝或脂蛋白新陳代謝的調節中起著重要的作用，而PPARγ至關重要地參與例如脂肪細胞分化的調節。
而且，PPAR受體也參與許多其它生理過程的調節，包括那些不直接和碳水化合物或脂類代謝相關聯的生理過程。不同PPAR受體的活性可以通過多種脂肪酸、脂肪酸衍生物和合成化合物不同程度的調節。對于涉及功能、生理學效果以及病理生理學的相關綜述，見Joel Berger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；Timothy Wilson等，J.Med.Chem.，2000，43卷，No.4，527-550；Steven Kliewer等，Recent Prog HormRes.，2001，56，239-63.
本發明涉及適合于調節PPAR受體的活性，特別是PPARα和PPARγ的活性的式I化合物。基于調節的特性，式I化合物適用于下文描述的適應癥的治療、控制和預防，以及適用于一系列其它相關的醫藥應用(見，如Joel Berger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；Timothy Wilson等，.Med.Chem.，2000，43(4)，527-550；Steven Kliewer等，Recent ProgHorm Res.，2001，56，239-63；Jean-Charles Fruchart，Bart Staels和Patric DuriezPPARS，Metabolic Disease and Arteriosclerosis，Pharmacological Research，44卷，No.5，345-52，2001；Sander Kersten，Beatrice Desvergne & Walter WahliRoles of PPARs in health and disease，NATURE，VOL.405，2000年5月25日，421-424；Ines Pineda Torra，Giulia Chinetti，Caroline Duval，Jean-Charles Fruchart和Bart StaelsPeroxisome proliferators-activated receptorsfrom transcriptional controlto clinical practice，Curr Opin Lipidol 122001，245-254)。
這類化合物特別適合于治療和/或預防1.-脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病-胰島素抗性在其中起作用的疾病2.-糖尿病，特別是2型糖尿病，包括相關聯的后遺癥的預防。
其中的具體方面是-高血糖癥，-胰島素抗性的提高，-葡萄糖耐性的提高，-胰腺β-細胞的保護-大-和微血管疾病的預防
3.異常脂蛋白血癥和它們的后遺癥，例如，動脈硬化癥，冠心病，腦血管病等，特別是那些(但不局限于那些)以一個或多個下列因素表征的疾病-高血漿甘油三酯濃度，高餐后血漿甘油三酯濃度-低HDL膽固醇濃度-低ApoA脂蛋白濃度-高LDL膽固醇濃度-低密度的LDL膽固醇顆粒-高ApoB脂蛋白濃度4.可能與代謝綜合征相關聯的多種其它病癥是如-肥胖癥(超重)，包括腹部肥胖-形成血栓，高凝狀態和血栓形成前(動脈的和靜脈的)狀態-高血壓-心臟衰竭，例如(但不限于那些)在心肌梗死、高血壓心臟病或心肌病之后的狀態5.其它疾病，如炎性過程或細胞分化在其中起作用的疾病是-動脈硬化癥，例如(但不限于)冠狀動脈硬化癥，包括心絞痛或心肌梗死、中風。
-血管再狹窄或再阻塞-慢性炎性腸病，例如，節段性回腸炎和潰瘍性結腸炎-胰腺炎-其它炎癥狀態-視網膜病-脂肪細胞瘤-脂肪瘤，例如，脂肪肉瘤-實體瘤和贅生物，例如(但不限于)胃腸道癌、肝癌、膽道癌、胰腺癌、內分泌腫瘤、肺癌、腎癌和泌尿道癌、生殖道癌、前列腺癌等-急性和慢性骨髓增生性疾病和淋巴瘤
-血管新生-神經退化性疾病-阿爾茨海默癥-多發性硬化癥-帕金森癥-紅斑鱗狀皮膚病，例如，銀屑病-痤瘡-其它由PPAR調節的皮膚病和皮膚病學病癥-濕疹和神經性皮炎-皮炎，例如，脂溢性皮炎或光照性皮炎-角膜炎和角化癥，例如，脂溢性角化病、老年性角化癥、光化性角化病、光誘導性角化病或毛囊角化病-瘢痕瘤和瘢痕瘤預防-疣，包括濕疣或尖銳濕疣-人乳頭瘤病毒(HPV)感染，例如，性乳頭瘤、病毒性疣，例如，傳染性軟疣、黏膜白斑病-丘疹皮膚病，例如，扁平苔蘚-皮膚癌，例如，基底細胞癌、黑素瘤或皮膚T-細胞淋巴瘤-局限性良性表皮瘤，例如，角皮病、表皮痣-凍瘡-高血壓-X綜合征-多囊卵巢綜合征(PCOS)-哮喘-骨關節炎-紅斑狼瘡(LE)或炎性風濕病，例如，類風濕性關節炎-血管炎-消瘦(惡病質)
-痛風癥-缺血/再灌注綜合征-急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)(“肺休克”)劑型要獲得需要的生物學效果所必需的式I化合物的量取決于許多因素，如所選擇的特定化合物、目標用途、施用方式和患者的臨床癥狀。每天的劑量一般是0.001mg到100mg(一般為0.01mg到50mg)每天每千克體重，例如0.1-10mg/kg/天。靜脈內劑量可以是，如0.001mg到1.0mg/kg，此劑量可適合以10ng到100ng每千克每分鐘灌輸施用。用于此目的的合適灌注溶液可以包含如0.1ng到10mg，一般1ng到10mg每毫升。單一劑量可以包含，如1mg到10g活性化合物。因此，用于注射的安瓿劑可以包含，如1mg到100mg，并且，可口服施用的單劑量制劑，例如膠囊或片劑，可以包含，如0.05到1000mg，一般為03到600mg。對于上面提到的病癥的治療，式I化合物可以以化合物自身使用，但它們優選以具有可接受載體的藥物組合物的形式使用。當然，載體必須是可接受的，意思是它和組合物其它組分兼容并且對患者健康無害。載體可以是固體或液體或兩者皆可，并且優選與化合物配制成單劑量，如作為片劑，它可以包含重量為0.05％到95％的活性化合物。其它藥物活性物質也同樣可以存在，包括其它式I化合物。本發明的藥物組合物可以通過已知的制藥方法之一生產，它基本由混合成分與可藥用載體和/或賦形劑組成。
本發明的藥物組合物是那些適合于經口的、直腸的、局部的、經口(例如舌下的)、腸胃外的(例如皮下的、肌肉內的、皮內的或靜脈內的)施用的組合物，雖然最適合的施用方式在每個單獨的病例中取決于需要治療的病癥的特性及其嚴重性以及取決于用于每個病例中的式I化合物的特性。包衣制劑和包衣緩釋制劑也屬于本發明的范圍。優選酸-和胃液-抗性制劑。合適的抵抗胃液的包衣材料包括乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素和甲基丙烯酸與甲基丙烯酸甲酯的陰離子聚合物。
用于經口施用的合適的藥物組合物可以是獨立單位的形式，如膠囊劑、糯米紙囊劑(wafer)、可吸片劑或片劑，它們每種包含規定量的式I化合物；如粉劑或顆粒劑；如水或非水液體中的溶液或懸液；或如水包油或油包水乳液；如已經提到的那樣，這些組合物可以通過合適的藥學方法制備，包括將活性化合物和載體(它可以由一種或多種額外組分組成)接觸在一起的步驟。組合物一般通過將活性化合物與液體和/或細磨的固體載體均一和勻質混合，如果需要的話，隨后將產物成形，而得以生產。因此，如片劑可以通過將化合物的粉末或顆粒根據需要與一種或多種額外成分一起壓縮或模壓得以生產。壓縮的片劑可以通過在合適的機器中將易流動形式的化合物，如粉末或顆粒，根據需要，與粘合劑、助流劑、惰性稀釋劑和/或一種或多種表面活性劑/分散劑混合壓片得以生產。模壓的片劑可以在合適的機器中通過模壓粉末形式的并用惰性液體稀釋劑濕潤的化合物得以生產。
適合經口(舌下的)施用的藥物組合物包括含有具有調味劑通常是蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠的式I化合物的可吸片劑，以及含有在惰性基質如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中的化合物的錠劑。
適合腸胃外施用的藥物組合物優選包含式I化合物的無菌液制劑，它優選地是和目的受試者血液等滲。盡管施用也可以通過皮下的、肌肉內的或皮內的注射進行施用，但這些制劑優選靜脈內施用。這些制劑可以優選地通過混合化合物和水并且將得到的溶液滅菌并使它和血液等滲而得以制備。可注射的本發明的組合物一般包含重量0.1到5％的活性化合物。
適合直腸施用的藥物組合物優選地是以單劑量栓劑形式。這些藥物組合物可以通過混合式I化合物和一種或多種常規的固體載體如可可油，并且使得到的混合物成形而得以制備。
適合皮膚上局部施用的藥物組合物優選地是以軟膏劑、霜劑、洗劑、糊劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑的形式。可用的載體是凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類以及兩種或多種這些物質的組合。活性化合物一般以組合物重量的0.1到15％濃度存在，例如從0.5到2％。
也可經皮施用。適合經皮使用的藥物組合物可以是單硬膏劑形式，它適合長期與患者表皮緊密接觸。這種硬膏劑適當地包含液體溶液中的活性化合物，它可以在粘合劑中或在聚合物中根據需要進行緩沖、溶解和/或擴散。合適的活性化合物濃度約為1％到35％，優選約3％到15％。特別可能的是，對于活性化合物，通過按照，如Pharmaceutical Research，2(6)318(1986)中所描述的電轉運或離子電滲療法進行釋放。
式I化合物有利地作用于代謝疾病。它們對于脂類和糖代謝具有積極的效果并且，特別地，降低甘油三酯的濃度，并且它們適用于預防和治療II型糖尿病和動脈硬化癥及它們的多種后遺癥。
與其它藥物的組合本發明化合物能夠單獨施用或與一種或多種其它藥學活性物質例如能有利地作用于代謝疾病或常常與之相關聯的疾病的藥學活性物質聯合施用。這些藥物例如是，1.能降低血糖、抗糖尿病的藥物，2.用于治療血脂異常的活性成分，3.抗動脈粥樣硬化藥，4.抗肥胖藥，5.抗炎活性化合物，6.用于治療惡性腫瘤的活性化合物，7.抗血栓形成的活性化合物，8.用于治療高血壓的活性化合物，9.用于治療心臟衰竭的活性化合物以及10.用于由糖尿病引起或和糖尿病相關的并發癥的治療和/或預防的活性化合物。
特別是為了效果的協同提高，它們可以和本發明的式I化合物聯合。通過分別施用活性化合物給患者，或以其中多種活性化合物存在于一種藥物制劑中的組合產物的形式，進行活性化合物的聯合施用。
可提及的例子是抗糖尿病藥合適的抗糖尿病藥是例如那些在Rote Liste 2001的第12章中或在USAN的USP藥名詞典(USP Dictionary)和國際藥物名稱(InternationalDrug Names)、美國藥典(US Pharmacopeia)，Rockville 2003中公開的。抗糖尿病藥包括所有胰島素和胰島素衍生物，例如，Lantus(見www.Lantus.com)或Apidra，以及其它速效胰島素(見US 6,221，633)、GLP-1受體調節劑，如在WO01/04146中描述的，或如那些在NovoNordiskA/S的WO98/08871中公開的。
經口的活性低血糖活性化合物優選地包括磺酰脲類、縮二胍、美各里替尼類(Meglitinides)、噁二唑烷二酮(oxadiazolidinedione)、噻唑烷二酮(thiazolidinedione)、葡糖苷酶抑制劑、胰增血糖素拮抗劑、經口的GLP-1激動劑、DPP-IV抑制劑、鉀通道開啟劑(如那些在WO 97/26265和WO 99/03861中公開的內容)、胰島素增敏劑、涉及糖異生和/或糖原分解的肝酶抑制劑、葡萄糖吸收調節劑、改變脂類代謝和導致血液脂類組成改變的化合物、降低食物攝取或食物吸收的化合物、PPAR和PXR調節劑和作用于β細胞的ATP-依賴的鉀通道的活性化合物。
在本發明的一個實施方案中，式I化合物與胰島素聯合施用。
在本發明的一個實施方案中，式I化合物與影響肝葡萄糖生成的物質如糖原磷酸化酶抑制劑聯合施用(參見WO 01/94300，WO 02/096864，WO03/084923，WO 03/084922，WO 03/104188)。
在一個實施方案中，式I化合物與磺酰脲類如甲磺丁脲、優降糖(glibenclamide)、格列吡嗪(glipizide)或格列美脲(glimepiride)聯合施用。
在另一實施方案中，式I化合物與美各里替尼類如瑞格列奈(repaglinide)聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與噻唑烷二酮類，如環格列酮(ciglitazone)、吡格列酮(Pioglitazone)、羅格列酮(Rosiglitazone)或在Reddy博士研究基金(Dr.Reddy’s Reasearch Foundation)的WO97/41097中公開的化合物，特別是5-[[4-[(3，4-二氫-3-甲基-4-氧代-2-喹唑啉基甲氧基)]苯基]甲基]-2，4-噻唑烷二酮聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與DPPIV抑制劑，例如在WO98/19998、WO 99/61431、WO 99/67278、WO 99/67279、WO 01/72290、WO 02/38541、WO 03/040174中所描述的化合物聯合施用，所述DPPIV抑制劑特別是P93/01(氯化1-環戊基-3-甲基-1-氧代-2-戊氨)、P-31/98、LAF237(1-[2-(3-羥基金剛烷-1-基氨基)乙酰基]吡咯烷-2-(S)-腈])、TS021((2S，4S)-4-氟-1-[[(2-羥基-1，1-二甲基乙基)氨基]乙酰基]吡咯烷-2-腈單基取代苯磺酸鹽)。
在本發明的一個實施方案中，式I化合物與PPARγ激動劑如羅格列酮、吡格列酮聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與對SGLT-1和/或2有抑制活性的化合物，例如直接或間接在PCT/EP03/06841、PCT/EP03/13454和PCT/EP03/13455中公開的化合物聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與α-葡糖苷酶抑制劑，例如米格列醇(miglitol)或阿卡波(acarbose)聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與多于一種的上述化合物，例如，與磺酰脲和二甲雙胍、磺酰脲和阿卡波、瑞格列奈和二甲雙胍、胰島素和磺酰脲、胰島素和二甲雙胍、胰島素和曲格列酮(troglitazone)、胰島素和洛伐他汀(Lovastatin)等聯合施用。
脂類調節劑在本發明的一個實施方案中，式I化合物與HMGCoA還原酶抑制劑如洛伐他汀、氟伐他汀(Fluvastatin)、普伐他汀(Pravastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、伊伐他汀(ivastatin)、伊他伐他汀(itavastatin)、阿托伐他汀(atoravastatin)、羅素他汀(Rosuvastatin)聯合施用。
在本發明的一個實施方案中，式I化合物與膽汁酸吸收抑制劑(見，例如，US 6,245,744、US 6,221,897、US 6,227,831、EP0683773、EP0683774)聯合施用。
在本發明的一個實施方案中，式I化合物與聚合膽汁酸吸收劑如消膽胺、colesevelam聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與膽固醇吸收抑制劑，如在WO 0250027中描述的化合物或ezetimibe、替奎安(tiqueside)、帕馬苷(pamaqueside)聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與LDL受體誘導劑(見，例如，US 6,342,512)聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與填充劑(bulking agent)，優選不可溶填充劑(見例如，carob/Caromax(zunft H J等，Carob pulppreparation for treatment of hypercholesterolemia，ADVANCES INTHERAPY(2001年9月-10月)，18(5)，230-6)。Caromax是一種產自Nutrinova，Nutrition Specialties & Food Ingredient GmbH，IndustrieparkHochst，65926 Frankfurt/Main的含有長豆角的產品))聯合施用。在一種制劑中或通過式I化合物和Caromax的分別施用，與Caromax的聯用是可能的。此外，Caromax能夠以食品的形式，例如，在面點產品或牛奶什錦早餐棒中得以施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與PPARα激動劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與混合的PPARα/γ激動劑，如AZ 242(Tesaglitazar，(S)-3-(4-[2-(4-甲磺酰氧基苯基)乙氧基]苯基)-2-乙氧基丙酸)、BMS 298585(N-[(4-甲氧基苯氧基)羰基]-N[[4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-噁唑基)乙氧基]苯基]甲基]甘氨酸)，或如在WO 99/62872、WO 99/62871、WO 01/40171、WO 01/40169、WO 96/38428、WO 01/81327、WO 01/21602、WO 03/020269、WO 00/64888或WO 00/64876中描述的化合物聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與貝特類(fibrate)藥物如非諾貝特(fenofibrate)、吉非貝齊(gemfibrozil)、氯苯丁酯(Clofibrate)、苯扎貝特(Benzafibrate)聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與尼克酸或煙酸聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與CETP抑制劑如CP-529,414(torcetrapib)聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與ACAT抑制劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與MTP抑制劑如implitapide聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與抗氧化劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與脂蛋白脂肪酶抑制劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與ATP檸檬酸裂解酶抑制劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與鯊烯合酶抑制劑聯合施用。
本發明的一個實施方案中，式I化合物與脂蛋白拮抗劑聯合施用。
抗肥胖劑本發明的一個實施方案中，式I化合物與脂肪酶抑制劑例如奧列司他(orlistat)聯合施用。
在一個實施方案中，其它活性化合物是氟苯丙胺或右旋氟苯丙胺。在另一實施方案中，其它活性化合物是西布曲明(sibutramine)。
在另外的實施方案中，式I化合物與CART調節劑(見“Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energymetabolism，anxiety and gastric emptying in mice”Asakawa，A等，M.Hormone and Metabolic Reasearch(2001)，33(9)，554-558)、NPY拮抗劑如N-{4-[(4-氨基喹唑啉-2-基氨基)甲基]環己基甲基}-萘-1-磺酰胺鹽酸鹽(CGP71683A))、MC4激動劑(如N-[2-(3a-芐基-2-甲基-3-氧代-2，3，3a，4，6，7-六氫吡唑并[4，3-c]吡啶-5-基)-1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基]-1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-甲酰胺(WO01/91752))、阿立新(Orexin)拮抗劑(如1-(2-甲基苯并噁唑-6-基)-3-[1，5]萘啶-4-基脲鹽酸鹽(SB-334867-A))、H3激動劑(如3-環己基-1-(4，4-二甲基-1，4，6，7-四氫咪唑并[4，5-c]吡啶-5-基)丙烷-1-酮草酸鹽(WO 00/63208))；TNF激動劑、CRF拮抗劑(如[2-甲基-9-(2，4，6-三甲基苯基)-9H-1，3，9-三氮雜芴-4-基]二丙基胺(WO00/66585))、CRF BP拮抗劑(如優洛可定(Urocortin))、優洛可定激動劑、β3激動劑(如1-(4-氯-3-甲磺酰甲基苯基)-2-[2-(2，3-二甲基-1H-吲哚-6-基氧基)乙基氨基]-乙醇鹽酸鹽(WO 01/83451))、MSH(促黑素細胞激素)激動劑、CCK-A激動劑(如{2-[4-(4-氯-2，5-二甲氧基苯基)-5-(2-環己基乙基)噻唑-2-基氨甲酰基]-5，7-二甲基吲哚-1-基}乙酸三氟乙酸鹽(WO99/15525))；血清素再吸收抑制劑(如右芬氟拉明(Dexfenfluramine))、混合的血清素能化合物和去甲腎上腺素能化合物(如WO 00/71549)、5HT激動劑(如1-(3-乙基苯并呋喃-7-基)哌嗪草酸鹽(WO 01/09111))、鈴蟾肽(bombesin)激動劑、galanin拮抗劑、生長激素(如人生長激素)、生長激素釋放化合物(叔丁基6-芐氧基-1-(2-二異丙基氨基乙基氨甲酰基)-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸鹽(WO 01/85695))、TRH激動劑(見，如EP0 462 884)、解偶聯蛋白2或3調節劑、瘦素(Leptin)激動劑(見，如Lee，Daniel W.；Leinung，MatthewC.；Pozhavskaya-Arena，Marina；Grasso，Patricia.Leptinagonists as a potential approach to the treatment of obesity，Drugs of theFuture(2001)，26(9)，837-881)、DA激動劑(溴隱停(bromocriptin)、Doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑(如WO 00/40569)、PPAR調節劑(如WO00/78312)、RXR調節劑或TRβ激動劑聯合施用。
在本發明的一個實施方案中，另外的活性化合物是瘦素。
在一個實施方案中，另外的活性化合物是右旋安菲他明(dexamphetamine)、安非他明(amphetamine)、嗎吲哚(mazindole)或苯丁胺(phentermine)。
在一個實施方案中，式I化合物與作用于冠狀循環和血管系統的藥物如ACE抑制劑(如雷米普利(Ramipril))、作用于腎素-血管緊張素系統的藥物、鈣拮抗劑、β-阻斷劑等聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與具有抗炎效果的藥物聯合施用。
在一個實施方案中，式I化合物與用于癌癥治療和癌癥預防的藥物聯合施用。
可以理解，本發明化合物和一種或多種上述化合物以及任選地一種或多種其它藥學活性物質的任何合適的聯合認為是屬于本發明授予保護的范圍內。
化合物的活性按如下進行測試在PPARα細胞試驗中PPAR激動劑的EC50值的測定原理使用了穩定轉染的HEK(HEK＝人胚胎腎)細胞系，在這里將其稱“PPARα報告細胞系”，分析結合到人PPARα并以激動劑的方式激活它的物質的功效。所述細胞包含兩個基因元件，即螢光素酶報告元件(pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo)和PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)，PPARα融合蛋白依賴PPARα配體介導螢光素酶報告元件的表達。穩定和組成型表達的融合蛋白GR-GAL4-人PPARα-LBD在PPARα報告細胞系的細胞核中通過GAL4蛋白部分結合到整合進此細胞系基因組中的螢光素酶報告元件的5’-上游GAL4DNA結合基序。如果在試驗中使用脂肪酸耗竭的胎牛血清(cs-FCS)，沒有PPARα配體加入時，只有極少量螢光素酶報告基因表達。PPARα配體結合并激活了PPARα融合蛋白，因而導致螢光素酶報告基因的表達。形成的螢光素酶可以通過借助合適底物的化學發光法檢測。
細胞系的構建PPARα報告細胞系在兩個步驟中制備。首先，構建螢光素酶報告元件并且將其穩定地轉染進HEK細胞。為此目的，將酵母轉錄因子GAL4的五個結合位點(每種情況下為5’-GGAGTACTGTCCTCCGAG-3’)克隆進68bp長的最小MMTV啟動子(Genbank登錄號V01175)的5’-上游。最小MMTV啟動子部分包含CCAAT盒和TATA元件以便使通過RNA聚合酶II的有效轉錄成為可能。GAL4-MMTV構建體的克隆和測序可類似于Sambrook J.等的描述(Molecular cloning，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989)進行。然后將完整的螢火蟲螢光素酶基因(登錄號M15077)克隆進GAL4-MMTV元件的3’-下游。測序后，將由五個GAL4結合位點、MMTV啟動子和螢光素酶基因組成的螢光素酶報告元件再克隆進提供zeozin抗性的質粒中以便獲得質粒pdeltaM-GAL4-Luc-zeo。根據Ausubel，F.M.等的描述(Current protocols in molecular biology，1-3卷，John Wiley & Sons，Inc.，1995)將載體轉染進HEK細胞中。然后用含有zeozin的培養基(0.5mg/ml)來選擇合適的穩定的細胞克隆，它表現出十分低的螢光素酶基因的基本表達量。
第二步，將PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)導入所述穩定細胞克隆中。為此目的，最初，將編碼糖皮質激素受體N端76個氨基酸的cDNA(登錄號P04150)連接到編碼酵母轉錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA部分(登錄號P04386)上。將人PPARα受體的配體結合結構域(氨基酸S167-Y486；登錄號S74349)的cDNA克隆進此GR-GAL4構建體的3’端。將用此方法制備的融合構建體(GR-GAL4-人PPARα-LBD)再克隆進質粒pcDNA3(購自Invitrogen)以便使通過巨細胞病毒啟動子進行的組成型表達成為可能。將這個質粒用限制性核酸內切酶線性化并穩定地轉染進前述含有螢光素酶報告元件的細胞克隆中。所得到的包含螢光素酶報告元件并組成型表達PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)的PPARα報告細胞系可以通過zeozin(0.5mg/ml)和G418(0.5mg/ml)選擇分離。
試驗方法PPARα激動劑活性在3天的試驗中得以測定，描述如下
第一天將PPARα報告細胞系在具有如下添加物10％cs-FCS(胎牛血清，#SH-30068.03，Hyclone)、0.5mg/ml的zeocin(#R250-01 Invitrogen)、0.5mg/ml的G418(#10131-027，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM培養基(#41965-039，Invirogen)中培養至80％匯合。培養在存在5％CO2時于37℃細胞培養箱中的標準細胞培養瓶(#353112，BectonDickinson)里進行。80％匯合的細胞用15mlPBS(#14190-094，Invitrogen)洗滌一次，用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘，將其置于5ml上述DMEM培養基中并且在細胞計數器中計數。稀釋到500000個細胞/ml后，每種情況下，將35000個細胞置于具有透明塑料底的96孔微量滴定板(#3610，Corning Costar)的每個孔中。將板在37℃和5％CO2下的細胞培養箱中孵育24小時。
第二天將待檢測的PPARα激動劑溶解于DMSO中，濃度為10mM。將此儲備溶液在DMEM培養基(#41965-039，Invitrogen)中稀釋，在此培養基中加入了5％的cs-FCS(#SH-30068.03，Hyclone)、2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)以及上述抗生素(zeozin、G418、青霉素和鏈霉素)。
測試物質在10μM到100pM范圍的11種不同濃度進行檢測。較有效的化合物以1μM到10pM或100nM到1pM之間的濃度進行檢測。
通過抽吸將在第一天接種的PPARα報告細胞系的培養基完全除去，并且立刻將在培養基中稀釋了的試驗物質加入細胞中。使用機器手(Beckman FX)進行此類物質的稀釋和添加。在培養基中稀釋的試驗物質的終體積是每96-孔微量滴定板孔100μl。在檢測中DMSO濃度低于0.1％v/v以防止溶劑的細胞毒效應。
為了證明本測試在各個單獨板中起作用，將也稀釋成11種不同濃度的標準PPARα激動劑加入到各個板中。將檢測板于37℃和5％CO2的培養箱中孵育24小時。
第三天將用試驗物質處理過的PPARα受體細胞從培養箱中移出，并且將培養基抽吸掉。通過吸移50μlBright Glo試劑(來自Promega)進入每個96-孔微量滴定板孔，將細胞裂解。在暗處室溫下孵育10分鐘后，在光度計中(來自Wallac的Trilux)測定微量滴定板。對每個微量滴定板孔的測定時間為1秒。
計算將用于測定發光的儀器的原始數據導入Microsoft Excel文件中。根據生產商(IDBS)的用法說明用程序XL.Fit計算PPAR激動劑的劑量-活性曲線和EC50值。
在此測定法中，實施例1到13的化合物的PPARα EC50值范圍是0.05nM到＞10μM.
本發明的一些式I化合物的活性結果在下面表I中列出表I
從表I來看，顯然，根據本發明的式I化合物活化了PPARα受體，因而例如和臨床上使用的貝特類藥物相似，實現了對生物體中甘油三酯濃度的降低(見，例如，J.-Ch.Fruchard等PPARS，Metabolic Disease andAtherosclerosis，Pharmacological Research，44卷，5期，345-52，2001；S.Kersten等，Roles of PPARs in health and disease，Nature，405卷，2000年5月25日，421-4；I.Pineda等Peroxisome proliferator-activatedreceptorsfrom transcriptional control to clinical practice，Curr OpinLipidol 122001，245-254)。
在細胞PPARγ試驗中PPAR激動劑的EC50值的測定原理采用瞬時轉染體系來測定PPAR激動劑的細胞PPARγ活性。這基于螢光素酶報告質粒(pGL3basic-5xGAL4-TK)和PPARγ表達質粒(pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD)的使用。將兩種質粒瞬時轉染進入人胚腎細胞(HEK細胞)。接著在這些細胞中融合蛋白GAL4-人PPARγLBD表達，所述融合蛋白結合到報告質粒的GAL4結合位點。在存在PPARγ-活化配體時，活化的融合蛋白GAL4-人PPARγLBD誘導螢光素酶報告基因的表達，這可以以加入螢光素酶底物后化學發光的形式得以檢測。和穩定轉染的PPARα報告細胞系不同，在細胞PPARγ檢測中兩種組分(螢光素酶報告質粒和PPARγ表達質粒)被瞬時轉染進HEK細胞中，這是因為PPARγ融合蛋白的穩定和持久表達是有細胞毒作用的。
質粒的構建螢光素酶報告質粒pGL3basic-5xGAL4-TK是基于購自Promega的載體pGL3basic。報告質粒通過將酵母轉錄因子GAL4的五個結合位點(每個結合位點具有序列5’-CTCGGAGGACAGTACTCCG-3，)，和160bp-長的胸苷激酶啟動子部分(登錄號AF027128)5’-上游一起克隆進pGL3basic得以制備。胸苷激酶啟動子3’-下游是來自螢火蟲(Photinuspyralis)的全長螢光素酶基因(登錄號M15077)，此螢光素酶基因已經是所用質粒pGL3basic的一個組分。報告質粒GL3basic-5xGAL4-TK的克隆和測序可類似于Sambrook J.等(Molecular cloning，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989)的描述進行。
通過首先將編碼酵母轉錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA(登錄號P04386)克隆進質粒pcDNA3(購自Invitrogen)巨細胞病毒啟動子的3’-下游，PPARγ表達質粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ LBD得以制備。接著，將人PPARγ受體的配體-結合結構域(LBD)(氨基酸I152-Y475；登錄號#g1480099)克隆進GAL4DNA結合域的3’-下游中。PPARγ表達質粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD的克隆和測序同樣可類似于Sambrook J.等(Molecular cloning，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)的描述進行。除了螢光素酶報告質粒pGL3basic-5xGAL4-TK和PPARγ表達質粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD外，也用于細胞PPARγ測試的是參考質粒pRL-CMV(購自Promega)和購自Stratagene的質粒pBluescriptSK(+)。所有四種質粒可以使用購自Qiagen的質粒制備試劑盒制備，它可以確保質粒在轉染進入HEK細胞之前具有最小內毒素含量的質量。
試驗方法PPARγ激動劑的活性在如下描述的4天的試驗中得以測定在轉染之前，HEK細胞在混合了以下添加物10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中培養。
第一天首先制備溶液A，它是一種包含所有四種上述質粒加上DMEM的轉染混合液。下列的數量用于制備每次試驗中每96孔微量滴定板孔的3ml溶液A2622μl的無抗生素和無血清的DMEM(#41965-039，Invitrogen)、100μl參考質粒pRL-CMV(1ng/μl)、100μl螢光素酶報告質粒pGL3basic-5xGAL4-TK(10ng/μl)、100μl PPARγ表達質粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD(100ng/μl)以及78μl的質粒pBluescript SK(+)(500ng/μl)。然后通過混合1.9ml的DMEM(#41965-039，Invitrogen)與100μl的PolyFect轉染試劑(購自Qiagen)為每個96孔微量滴定板制備2ml的溶液B。接著，將3ml的溶液A和2ml的溶液B混合產生5ml的溶液C，通過多次抽吸充分混合C并在室溫下孵育10分鐘。
將175cm2容量的細胞培養瓶中80％匯合的HEK細胞用15ml的PBS(#14190-094，Invitogen)洗滌一次并用3ml的胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘。然后將細胞置于15ml混合了10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中。當將細胞懸液在細胞計數器中計數后，將懸液稀釋到250000個細胞/ml。將15ml的這種細胞懸液和5ml的溶液C混合以用于一塊微量滴定板。200μl的此懸液接種到具有透明塑料底部的96孔微量滴定板(#3610，Corning Costar)的每孔中。將此板于37℃和5％CO2的細胞培養箱中孵育24小時。
第二天將待檢測的PPAR激動劑以10mM濃度溶解于DMSO中。將該儲備溶液在混合有2％Ultroser(#12039-012，Biosepra)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中稀釋。試驗物質在總共11種從10μM到100pM范圍的不同濃度中得以檢測。較有效力的化合物在范圍為1μM到10pM范圍的濃度中得以檢測。
將在第一天轉染和接種的HEK細胞的培養基通過抽吸完全除去，并將稀釋于培養基的試驗物質立刻加入細胞中。這些物質的稀釋和添加通過機器手(Beckman FX)進行。稀釋于培養基的試驗物質的最終體積是每96孔微量滴定板孔100μl。將每板裝載同樣被稀釋成11種不同濃度的標準PPARγ激動劑，以便證明每個單獨板中檢測的功能。將測試板在37℃和5％CO2下的培養箱中孵育48小時。
第四天通過抽吸將培養基除去后，將50μl的Dual-GloTM試劑(Dual-GloTM螢光素酶測試體系；Promega)按照生產商的使用說明加入每個孔中以便裂解細胞并且向細胞中形成的螢火蟲(Photinus pyralis)螢光素酶提供底物。在室溫下暗處孵育10分鐘后，在測量儀器中測量螢火蟲螢光素酶介導的化學發光(測量時間/每孔1秒；Trilux購自Wallac)。然后將50μl的Dual-GloTMStop & Glo試劑(Dual-GloTM螢光素酶測試體系；Promega)加入至每孔中以便終止螢火蟲螢光素酶的活性并向通過參考質粒pRL-CMV表達的海腎(Renilla)螢光素酶提供底物。在室溫下暗處孵育另外10分鐘后，再次在測量儀器中以1秒/孔測量通過海腎螢光素酶介導的化學發光。
計算將得自光度計的原始數據導入Microsoft Excel文件中。對于源自微量滴定板每個孔的每次檢測值確定螢火蟲/海腎螢光素酶活性率。通過XL.Fit程序按照由生產商(IDBS)詳細說明的方法從這個比率計算出PPAR激動劑的劑量-效果曲線和EC50值。
對于在此申請中的所述PPAR激動劑，測定的PPARγEC50值的范圍為0.5nM到＞10μM。
下面給出的實施例用來闡述本發明，而不用于限制本發明。
順式1，3Cy是指順式取代的環己烷-1，3-二基-----表示連接點根據下列反應方案可以合成式I和Ia化合物
將式A化合物，其中R3、R5和Y具有上面給出的意義，在惰性溶劑(如CCl4)中與NBS反應，生成式B化合物。
將式B化合物與式C化合物，式C中n和m各自是0-5，反應生成式D化合物，式D中R1、R2、R4、m、n和Y具有上面描述的意義，同時最初將組分C在水分離器上于甲苯中的二丁基氧化錫加熱多個小時并隨后，隨著加入二甲基甲酰胺、氟化銫和溴化物B，通過在室溫下攪拌數小時轉化為D。
將式E化合物與式W的醛(如苯甲醛、噻吩-或呋喃甲醛)反應生成式F化合物，式F中R1、R2、R4和X是如上面定義的；為此目的，最初將組分E和F溶解于乙酸中并導入HCl直到反應進行完全，生成式F化合物。
將式F化合物，其中R1、R2、R4和X是如上定義，在氯仿中與POCl3加熱回流數小時，生成式G化合物。
將式G化合物，其中R1、R2、R4和X是如上定義，在加熱回流下與丙酮中的NaI反應數小時，生成式H化合物。
將式D化合物與式H化合物反應，式H中Y是如上定義，生成式J化合物，式J中R1、R2、R4、R5、X和Y是如上定義。為了建立醚鍵，將D例如在室溫下，于二甲基甲酰胺和四氫呋喃的混合物中，使用強堿如氫化鈉脫質子化，并隨后用組分H烷基化。
通過水解酯官能團如通過與氫氧化鉀加熱并隨后與醇(乙醇、叔丁醇)加熱，并通過酸化釋放式I的羧酸基團，將化合物J轉化成式M化合物。此羧酸基團可以通過常規方法衍生為式-(C＝O)-OR3基團，其中R3是如上定義。其它化合物可按照所述或通過已知方法獲得。
實施例14，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物 將18.4g二乙酰一肟和31.2g 2-萘甲醛加至50ml冰醋酸中，并導入HCl氣體冰冷30分鐘。通過加入甲基叔丁基醚將產物沉淀為鹽酸鹽并用抽吸濾盡，并且用甲基叔丁基醚洗滌沉淀。將沉淀在二氯甲烷和水的混合物中懸浮，并用氨確立堿性pH。每種情況下用500ml二氯甲烷和乙酸乙酯萃取混合物三次，將合并的有機相在MgSO4上干燥并隨后在減壓下除去溶劑。這生成40.3g 4，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物的黃色固體。
CF15H13NO2(239.28)，MS(ESI)＝240(M+H+)4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑 將40g 4，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物溶解于200ml氯仿中，加入16.7ml磷酰氯并將混合物加熱回流30分鐘。將混合物冷卻至0℃，用氨確立稍微堿性的pH并每種情況下用500ml乙酸乙酯萃取混合物三次。將合并的有機相用水洗滌并在MgSO4上干燥并隨后在減壓下除去溶劑。將殘余物在硅膠上用流動相正庚烷∶乙酸乙酯＝80∶1＝＞5∶1純化。這生成10.6g4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑的無色固體。C15H12ClNO(257.72)，MS(ESI)258(M+H+)。
4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑 將150ml丙酮中的1.8g 4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑和3g碘化鈉加熱回流2小時。當將反應混合物冷卻后，加入300ml甲基叔丁基醚，將混合物用飽和Na2S2O3溶液洗滌三次并在MgSO4上干燥并且在減壓下將溶劑除去。這生成2.7g 4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑的淡黃色固體。C15H12INO(349.17)，MS(ESI)350(M+H+)2-(順式-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將8.7g 1，3-環己烷二醇和12g二丁基氧化錫溶解于600ml甲苯中并在脫水器上加熱回流。反應期間，反應體積減為初始體積的一半。4小時后，將反應混合物冷卻至室溫，并加入300ml DMF、9.0g 2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯和9.4g氟化銫。室溫下攪拌混合物12小時。通過加入乙酸乙酯將反應混合物稀釋并用飽和NaCl溶液洗滌。將有機相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過硅膠(正庚烷/乙酸乙酯＝50∶1＝＞1∶2)上的快速制備色譜純化殘余物。這生成6g 2-(順式-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的油狀物。C16H22O4(278.35)，MS(ESI)279(M+H+)
2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將8g 2-(順式-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶解于100ml醋酸乙烯酯中，并加入1g Candida antartika脂肪酶B。將混合物室溫下攪拌七小時并隨后將酶濾盡并且在減壓下除去溶劑。通過硅膠(正庚烷/乙酸乙酯＝10∶1)上的快速制備色譜純化殘余物。這生成3.9g 2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的無色油狀物。C16H22O4(278.35)，MS(ESI)279(M+H+)ee＝98％(Chiralpak AD/2 250∶4.6；正庚烷∶乙醇∶甲醇＝25∶1∶0.5+0.1％三氟乙酸，Rt＝8.9分鐘；對映異構體的保留時間Rt＝9.9分鐘。)。
2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環己基氧甲基]苯甲酸甲酯 室溫下，將50mg氫化鈉的60％強度懸液加至200mg 2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯在5ml二甲基甲酰胺中的溶液中，并隨后加入380mg 4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑。一小時后，加入甲基叔丁基醚并用水萃取混合物。將有機相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成94mg 2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環己基氧甲基]苯甲酸甲酯的淡黃色油狀物。
C31H33NO5(499.61)，MS(ESI)500(M+H+)
2-甲基-6[(1R，3S)3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]苯甲酸 將94mg 2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環己基氧甲基]苯甲酸甲酯在10ml叔丁醇和1ml 10N氫氧化鉀溶液的混合物中90℃下攪拌。兩天后，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取混合物。將合并的有機相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成72mg 2-甲基-6-[(1R，3S)3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]苯甲酸的非晶形固體。C30H31NO5(485.59)，MS(ESI)486(M+H+)。
實施例2與實施例1相似，二乙酰一肟、苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2-苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸 C27H29NO7(479.53)，MS(ESI)480(M+H+)。
實施例3和實施例1相似，二乙酰一肟、2，3-二氫苯并[1，4]二噁烯-6-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸。
C28H31NO7(493.56)，MS(ESI)494(M+H+)。
實施例4和實施例1相似，二乙酰一肟、呋喃-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(5-甲基呋喃-2-基)噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}苯甲酸。
C25H29NO6(493.51)，MS(ESI)440(M+H+)。
實施例5和實施例1相似，二乙酰一肟、5-甲基噻吩-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(5-甲基噻吩-2-基)噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}苯甲酸。
C25H29NO5S(455.58)，MS(ESI)456(M+H+)。
實施例6和實施例1相似，二乙酰一肟、4-三氟甲基硫基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-三氟甲基硫基苯基)噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}苯甲酸。
C27H28F3NO5S(535.58)，MS(ESI)536(M+H+)。
實施例7和實施例1相似，二乙酰一肟、3-五氟乙氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-(3-{5-甲基-2-[3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]噁唑-4-基甲氧基}環己基氧甲基)}苯甲酸。
C28H29F4NO6(551.54)，MS(ESI)552(M+H+)。
實施例8和實施例1相似，二乙酰一肟、4-苯氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}苯甲酸。
C32H33NO6(527.62)，MS(ESI)528(M+H+)。
實施例9和實施例1相似，二乙酰一肟、噻吩-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-[3-(5-甲基-2-噻吩-2-基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]苯甲酸。

C24H27NO5S(441.55)，MS(ESI)442(M+H+)。
實施例10和實施例1相似，二乙酰一肟、3-氟-5-三氟甲基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-{3-[2-(3-氟-5-三氟甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯 C28H29F4NO5(535.54)，MS(ESI)536(M+H+)。
將128mg 2-{(1R，3S)-{3-[2-(3-氟-5-三氟甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯、5ml乙二醇單甲醚和0.6ml 10NKOH的混合物加熱回流24小時。冷卻后，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取混合物。將合并的有機相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成56mg 2-{(1R，3S)-(3-{2-[3-(2-甲氧基乙氧基)-5-三氟甲基苯基]-5-甲基噁唑-4-基甲氧基}環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸的無色油狀物，分子量為C29H32F3NO7(563.58)，MS(ESI)564(M+H+)。
實施例11和實施例1相似，1-苯基-1，2-丙二酮2-肟、對甲苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-苯基-2-對甲苯基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]苯甲酸。
C32H33NO5(511.62)，MS(ESI)512(M+H+)。
實施例12和實施例1相似，1-苯基-1，2-丙二酮2-肟、間甲氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-苯基噁唑-4-基甲氧基]環己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸。
C32H33NO6(527.62)，MS(ESI)528(M+H+)。
實施例13和實施例1相似，2-環己基-4-碘甲基噁唑和2-((1R，3S)-3-羥基環己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2-環己基噁唑-4-基甲氧基)環己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸 C25H27NO5(412.50)，MS(ESI)422(M+H+)。
權利要求
1.式I化合物及其生理可接受鹽 其中環A是(C3-C8)-環烷二基、或(C3-C8)-環烯二基，其中環烷二基環或環烯二基環中一個或多個碳原子可以被O原子替換；環B是a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對于R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對于R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換。
2.如權利要求1所述的式I化合物，其中環A是(C3-C8)-環烷二基或(C3-C8)-環烯二基，其中環烷二基環或環烯二基環中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換；環B是a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對于R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對于R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個或多個碳原子可以被氧原子替換。
3.如權利要求1或2所述的式I化合物，其中環A是(C3-C8)-環烷二基，其中一個碳原子可以被氧原子替換；環B是a)苯基；或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對于R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對于R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是CH2-O。
4.式Ia的化合物 其中環A、環B、R1、R2、R3、R4、R5、X和Y是如權利要求1到3所述的定義。
5.如權利要求4所述的式Ia化合物，其中R3是H且R5是甲基。
6.如權利要求4或5所述的式Ia化合物，其中環A是(C5-C7)-環烷二基；環B是a)苯基，或b)可以含有一到四個選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環、8-14元芳環或(C3-C8)-環烷基；對于R1a)在環B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對于R4a)在環B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環B＝a)并且R1/R2＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是甲基；R3是H；X是CH2-O；Y是CH2-O。
7.如權利要求1到6中任意一項所述的式I或Ia化合物，其中中心的環烷二基環為1，3順式連接。
8.一種藥物，其包含如權利要求1到7中一項或多項所述的一種或多種化合物。
9.一種藥物，其包含如權利要求1到7中一項或多項所述的一種或多種化合物I以及一種或多種對于代謝性疾病或相關疾病具有有利作用的活性化合物。
10.一種藥物，其包含如權利要求1到7中一項或多項所述的一種或多種化合物I以及一種或多種抗糖尿病藥。
11.一種藥物，其包含如權利要求1到7中一項或多項所述的一種或多種化合物以及一種或多種脂類調節劑。
12.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于治療和/或預防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病。
13.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于治療和/或預防胰島素抗性在其中起作用的疾病。
14.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于治療和/或預防糖尿病和相關后遺癥。
15.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于治療和/或預防血脂異常及其后遺癥。
16.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于治療和/或預防與代謝綜合征相關的病癥。
17.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于與至少一種其它活性化合物聯合而治療和/或預防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病。
18.如權利要求1到7中一項或多項所述的化合物的用途，用于與至少一種其它活性化合物聯合而治療和/或預防胰島素抗性在其中起作用的疾病。
19.用于制備包含如權利要求1到7中一項或多項所述的一種或多種化合物的藥物的方法，其包括將活性化合物與藥學上合適的載體混合以及將該混合物制成適于施用的形式。
全文摘要
本發明涉及二芳基環烷基衍生物，并涉及它們的生理可接受鹽、外消旋物及生理機能性衍生物。本發明涉及式(I)的化合物，其中的基團如說明書中所述定義，并涉及它們的生理可接受鹽及它們的制備方法。這些化合物適用于治療和/或預防脂肪酸代謝疾病、葡萄糖利用疾病和胰島素抗性在其中起作用的疾病。
文檔編號C07D263/02GK1753880SQ200480005447
公開日2006年3月29日 申請日期2004年2月19日 優先權日2003年2月27日
發明者J·格利策, H·格隆比克, E·法爾克, D·格雷茨克, S·凱爾, H-L·舍費爾, C·斯塔普爾, W·文德勒 申請人:塞諾菲-安萬特德國有限公司